三叶青茎部不同溶剂提取物的功能成分、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性研究

目的 以三叶青茎部为原料,探究三叶青不同溶剂提取物的功能成分、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性。方法 采用乙醇超声法提取三叶青,获得醇提液及残渣。醇提液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对其进行分步萃取,残渣则采用蒸馏水多次提取,最终得到4种提取物。对该4种提取物分别测定其总酚、总黄酮、总皂苷、总多糖、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性,并进行相关性分析。结果 4种提取物中乙酸乙酯萃取物总酚、总黄酮、总皂苷含量最高,分别为40.22%±1.01%、38.56%±0.64%、6.15%±0.21%,正丁醇萃取物总多糖含量最高,为9.29%±0.25%。各萃取物均具有抗氧化和酪氨酸酶抑制活性,其中乙酸乙酯萃取物清除1,1-二苯基-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基、超氧阴离子、2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-3-氧代-1-氧(2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-3-oxide-1-oxyl, PTIO)自由基、羟自由基能力和铁离子还原能力(ferric reducing antioxidant power, FRAP)最强,其半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)分别为0.016、0.014、0.355、0.0.265、0.352 mg/mL。同时,在酪氨酸酶抑制活性上,乙酸乙酯萃取物明显强于各萃取物。相关性分析表明,三叶青提取物中总酚、总黄酮、总皂苷物质与抗氧化和酪氨酸酶抑制活性呈极显著正相关性(P<0.01)。结论 三叶青茎部乙酸乙酯萃取物具有较强的抗氧化性及抑制酪氨酸酶活性,主要作用成分为总酚、总黄酮和总皂苷。本研究为进一步开发利用三叶青茎部资源提供相关技术支持。     

藜麦麸皮不同极性部位的抑菌及酪氨酸酶抑制活性研究

以抑菌圈大小及对酪氨酸酶活性的抑制率为指标,筛选出藜麦麸皮中具有抑菌活性以及抑制酪氨酸酶活性的极性部位。采用75%的乙醇对藜麦麸皮进行超声提取,三种不同极性溶剂石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,获取四个极性部位。纸片法观察不同的极性部位对于四种致病菌的体外抑制效果,同时探究对酪氨酸酶活性的抑制效果,利用液质推断其有效成分并用高效液相对高活性成分进行定量分析。结果表明:正丁醇萃取层的活性最高,且对革兰阳性菌较为敏感但对革兰阴性菌无明显效果。对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为1.04、2.08 mg/mL,对表皮葡萄球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为0.52、1.04 mg/mL。比较可知藜麦麸皮极性部位的抑菌效果要优于某些常见的中药;在浓度为1 mg/mL时对酪氨酸酶活性的抑制率为55.86%,是同浓度V_C抑制效果的58.96%;液质推断出正丁醇层主要物质为藜麦皂苷,定量分析藜麦皂苷的纯度为62.6%。综上,藜麦麸皮不同极性部位中,正丁醇萃取层的抑菌活性以及对于酪氨酸酶活性的抑制效果较好,且主要活性物质为藜麦皂苷。     

三种菱壳不同极性部位提取物的生物活性

对三种菱壳进行乙醇提取并分级分离获得不同极性部位提取物,分析其多酚、黄酮和皂苷含量,并利用DPPH和Fe3+还原力体系评价抗氧化能力,MTF法考察体外抑癌活性 不同极性部位对比表明,乙酸乙酯相的多酚和黄酮含量最高,氯仿相的皂苷含量最高;乙酸乙酯相和正丁醇相具有较高的DPPH自由基清除能力和Fe3+还原力;乙酸乙酯相和氯仿相均对胃癌细胞SGC7901的生长有抑制作用,且前者优于后者.不同菱壳对比发现,四角菱壳的多酚含量最高,无角菱壳的黄酮和皂苷含量最高;四角菱壳的抗氧化活性最强;无角菱壳的抑癌活性最强.     

野木瓜总皂苷提取工艺优化及其美白活性组分筛选

目的:优化野木瓜中总皂苷的提取工艺,并为野木瓜总皂苷活性组分在美白化妆品中的后续开发应用奠定基础。方法:在单因素实验的基础上,以乙醇浓度、液料比、提取温度、提取时间为优化因素,总皂苷得率为评价指标,Box-Behnken法优化野木瓜总皂苷提取工艺;依次用不同极性溶剂对其提取物进行萃取,硅胶柱色谱层析进行分离,获得不同活性组分,MTT法检测B16细胞的增殖抑制能力,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性。结果:各因素对野木瓜总皂苷得率影响顺序为:乙醇浓度>提取温度>液料比>提取时间;最佳提取工艺为乙醇浓度79%,液料比25:1 mL/g,提取温度81℃,提取时间89 min,总皂苷平均得率为2.16%;各萃取部位中正丁醇部位对细胞增殖和酪氨酸酶活性抑制效果最好,效果优于对照品熊果苷（P<0.05）,其IC₅₀分别为86.61和69.09 μg/mL;正丁醇部位分离得8个活性组分,其中组分Fr.6对B16细胞增殖和酪氨酸酶活性抑制效果最好,IC₅₀分别为80.93和58.99 μg/mL,且抑制酪氨酸酶活性的效果较分离前的正丁醇部位更好（P<0.05）。结论:本文探讨了野木瓜总皂苷的最佳提取工艺,获得的活性组分Fr.6具有良好的美白活性,在美白化妆品产品开发中具有较好的应用前景。     

广金钱草不同极性萃取物体外降脂及降血糖活性的比较

该研究旨在比较广金钱草乙醇提取物及其各萃取相的体外降脂及降血糖活性。以φ=75%乙醇为溶剂，回流提取得到广金钱草醇提物，经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水依次萃取，利用比色法检测乙醇提取物及各萃取相中总黄酮、总酚含量，并根据胰脂肪酶和胆固醇酯酶的抑制率评价乙醇提取物及其各萃取相的体外降脂活性，对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率评价体外降血糖活性。研究结果显示乙酸乙酯萃取相中总黄酮和总酚含量最高，分别为154.57 mg/g和34.27 mg/g。乙醇提取物对胆固醇酯酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性最高，抑制率分别为53.24%和68.52%；正丁醇萃取相对胰脂肪酶表现出最高的抑制活性，抑制率达到77.39%。石油醚萃取相对α-淀粉酶的抑制作用最强，抑制率达到78.60%。研究表明，广金钱草乙醇提取物及其各萃取相具有显著的降脂和降血糖活性，可为其深入研究药理活性提供参考依据。     

‘鲁赫’刺蔷薇叶不同溶剂提取物的活性成分及抗氧化性比较

本研究以‘鲁赫’刺蔷薇叶为原料,采用超声波辅助提取法,用不同溶剂(蒸馏水、无水乙醇、20%乙醇,40%乙醇,60%乙醇,80%乙醇,正丁醇、丙酮和乙酸乙酯)对叶中总黄酮、总多酚和原花青素进行提取,测定提取液的抗氧化活性(DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力及总还原力),分析不同极性溶液对活性成分的提取效率,并评价抗氧化能力与活性成分的相关性。结果表明:不同极性溶剂提取效果不同,其中60%乙醇提取物具有最高的粗提物得率(23.76±0.04)%;60%乙醇提取物的总黄酮和总多酚含量均为最高,分别为74.29±0.01 mg/g和24.02±0.2 mg/g;80%乙醇提取物原花青素含量最高(12.92±0.46)mg/g。活性成分含量与抗氧化性之间呈正相关性。总多酚和总黄酮类化合物是‘鲁赫’刺蔷薇叶提取物抗氧化活性的主要贡献者。     

核桃青皮提取物的抑真菌活性研究

核桃青皮中含有种类较为丰富对供试真菌具有抑菌活性的次生代谢物质。以核桃青皮为原料,乙醇、石油醚、正丁醇、乙酸乙酯以作为提取剂进行浸提,得到核桃青皮的提取液,选取酵母菌、青霉、木霉、马拉色菌、脚气真菌作为供试菌种,通过实验观察不同溶剂提取液对供试菌种的抑制作用,研究核桃青皮提取物对真菌的抑制作用。核桃青皮中含有胡桃醌、多糖、黄酮等多种活性成分,利用分光光度法测定黄酮、胡桃醌、多糖的吸光值,通过吸光值计算提取物中各成分的质量浓度。结果表明：核桃青皮不同极性溶剂的浸提液对酵母菌、青霉、木霉均有抑制效果。核桃青皮95%乙醇浸提液对脚气真菌的抑制效果显著,抑菌率为59.64%;正丁醇核桃青皮浸提液对脚气真菌、马拉色菌有抑制效果。通过核桃青皮不同极性溶剂浸提液抑菌率的比较,和核桃青皮中所含三种活性物质的浓度与抑菌机制可知,核桃青皮不同极性溶剂的浸提液中主要起抑菌作用的是胡桃醌。     

黄精提取物的抗菌活性研究

为研究黄精的抑菌活性及其活性成分的差异,以生黄精和熟黄精为原料,采用不同极性溶剂提取活性物质,得到正丁醇相、乙酸乙酯相、水相和石油醚相提取物。分别测定各相中多糖、多酚和黄酮的含量,采用滤纸片法测定各相提取物对3种细菌和2种霉菌的抑菌圈直径,探究各相的抑菌效果。结果表明,生黄精各相活性物质含量均大于熟黄精,对细菌的抑制能力为正丁醇相乙酸乙酯相水相石油醚相,对霉菌的抑制能力为正丁醇相水相石油醚相乙酸乙酯相,黄精提取物对细菌的抑制能力比对霉菌的抑制能力强。     

金花葵花黄酮提取物不同溶剂萃取物的抗氧化活性

目的:研究金花葵花黄酮不同极性溶剂萃取物的体外抗氧化能力,并考察黄酮含量与抗氧化活性的相关性。方法:采用不同极性溶剂对金花葵花乙醇提取物进行液-液萃取,得到金花葵花黄酮样品为:石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相萃取物。测定不同极性溶剂萃取物中总黄酮含量,研究各萃取物的清除DPPH自由基能力、清除羟基自由基能力、还原能力、清除超氧阴离子能力和抗油脂氧化能力,分析黄酮含量与抗氧化活性的相关关系。结果:金花葵花黄酮不同极性溶剂萃取物均有抗氧化活性,顺序均为乙酸乙酯相正丁醇相乙醇提取物石油醚相水相。在0.20～1.00 mg/mL的萃取物质量浓度范围内,随着质量浓度的增加,抗氧化活性相应增大。质量浓度在1.00 mg/mL时,乙酸乙酯和正丁醇相萃取物的抗氧化活性接近于V_C。各萃取物中黄酮含量与抗氧化活性呈现较好相关关系(p0.05)。结论:金花葵花黄酮具有较高的体外抗氧化能力,乙酸乙酯相和正丁醇相萃取物可作为分离活性成分的研究重点。     

拐枣抗氧化活性的研究

用体外化学试验和TLC比较法对拐枣用乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提取物的抗氧化作用和抗氧化成分极性强弱进行了比较分析。结果表明拐枣提取物抗氧化作用从强到弱依次为乙酸乙酯提取物>正丁醇提取物>石油醚提取物>乙醇提取物>水提取物。拐枣具有较强的抗氧化活性,抗氧化活性成分主要存在乙酸乙酯提取物中。     

油茶蒲不同溶剂粗提液的总黄酮提取率与抗氧化活性比较

为探索油茶蒲的有效利用途径,采用各具5个体积分数梯度的5种有机溶剂对油茶蒲进行超声辅助浸提而得到25种粗提液,研究比较了各粗提液的总黄酮提取率和清除DPPH·的能力。结果表明:总黄酮提取率最高的5种溶剂及其对应的总黄酮提取率依次是60%丙酮溶液(6. 28%)、60%乙醇溶液(5. 24%)、80%甲醇溶液(4. 82%)、60%1,3-丁二醇溶液(4. 40%)、60%乙酸乙酯-乙醇溶液(4. 13%);清除DPPH·能力最强的5种粗提液及其对应的清除率依次是100%乙醇溶液提取物(92. 78%)、60%乙酸乙酯-乙醇溶液提取物(92. 69%)、100%1,3-丁二醇溶液提取物(89. 68%)、100%甲醇溶液提取物(86. 54%)、100%丙酮溶液提取物(81. 99%)。黄酮提取率最高的油茶蒲提取物所对应的DPPH·清除能力并不是最强的,说明油茶蒲提取物中除了黄酮以外,可能还有多酚、皂素、多糖等其他抗氧化活性成分。适合油茶蒲黄酮利用的最佳提取剂是60%乙酸乙酯-乙醇溶液,总黄酮提取率达4. 13%,所对应提取物对DPPH·清除率达92. 69%,是一种适应工业化开发利用油茶蒲黄酮的理想溶剂。     

菱角壳分级萃取物对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的:制备菱角壳乙醇提取物的分级萃取物,并研究其对肿瘤细胞增殖及凋亡的作用。方法:采用有机溶剂萃取法将菱角壳乙醇提取物分为乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物2个不同极性部分,并测定其黄酮与多酚含量,CCK-8法测定菱角壳分级萃取物对肿瘤细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测菱角壳萃取物诱导肿瘤细胞凋亡的作用。结果:乙酸乙酯萃取物中多酚和黄酮含量高于正丁醇萃取物。在两种萃取物浓度为25、50、100、200、400 μg/mL时均能抑制胃癌细胞(SGC-7901)、肝癌细胞(Hep G2)的增殖,最高抑制率均达60%以上,并存在明显的剂量与效应关系。两种萃取物均能促进肿瘤细胞凋亡,400 μg/mL的乙酸乙酯、正丁醇萃取物作用肝癌细胞24 h,凋亡率分别为45.57%和33.34%;作用胃癌细胞24 h,凋亡率分别为31.01%和21.65%。结论:菱角壳乙酸乙酯萃取物具有抑制肿瘤细胞增殖及促肿瘤细胞凋亡的生物活性。     

木瓜皮多酚和黄酮提取工艺优化及酪氨酸酶与胰脂肪酶抑制活性研究

以木瓜皮为原料,研究了木瓜皮多酚和黄酮的提取工艺及抗氧化、酪氨酸酶和胰脂肪酶抑制活性。在单因素实验基础上采用正交试验研究超声温度、超声时间、乙醇浓度、料液比对木瓜皮多酚和黄酮含量的影响,并测定木瓜皮对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力以及对酪氨酸酶和胰脂肪酶的抑制活性。结果表明,木瓜皮多酚和黄酮的最佳提取条件为:超声温度40 ℃,超声时间60 min,乙醇浓度60%,料液比1:25 g/mL,在此条件下多酚和黄酮含量分别为（82.00±0.65）mg/g和（162.76±2.82）mg/g。抗氧化活性实验结果表明,木瓜皮提取物对DPPH自由基和ABTS自由基的清除率分别为（94.79%±0.10%）和（96.94%±0.23%）。抑制酶活性实验结果表明,木瓜皮提取物对分别以L-Tyr和L-Dopa为底物的酪氨酸酶的抑制率为（83.33%±6.80%）和（67.12%±0.32%）,对胰脂肪酶的抑制率为（82.78%±1.28%）,说明木瓜皮具有较强的抗氧化能力、酪氨酸酶及胰脂肪酶抑制活性。     

微波辅助提取橄榄苦苷及其抗氧化性能研究

以油橄榄叶为原料,研究微波辅助提取橄榄苦苷的最佳工艺。通过单因素实验考察了溶剂种类,提取时间、提取温度、提取功率、乙醇浓度和料液比对橄榄苦苷得率的影响。在单因素实验的基础上,选取提取时间、提取温度和料液比进行L₉(33)正交实验,结果表明,最优提取条件为:乙醇浓度75%,料液比1:50 g/mL,提取温度40℃,提取时间3 min,提取功率600 W。在该条件下橄榄苦苷得率为(8.06%±0.06%),总多酚、总黄酮含量为(7.85%±0.01%)和(2.20%±0.11%),而热浸提橄榄苦苷的得率为(6.61%±0.16%),总多酚、总黄酮含量为(6.99%±0.13%)和(1.25%±0.11%)。同时探讨了不同干燥方式对DPPH自由基清除能力的影响,发现鼓风干燥(30℃)的效果高于真空干燥和真空冷冻干燥,其IC₅₀值分别为0.65、0.71和0.69 mg/mL。微波辅助提取橄榄苦苷等活性物质的含量高于热浸提,鼓风干燥(30℃)优于其他干燥方式,本文为油橄榄叶活性物质的提取和保存提供借鉴。     

洋葱皮不同溶剂提取物的体外抗氧化、抑制α-糖苷酶活性研究

研究不同溶剂对洋葱皮总多酚、总黄酮和槲皮素的提取效果及其提取物的抗氧化、抑制α-糖苷酶活性。以紫色洋葱皮为原料,分别以水、40%~100%乙醇溶液、乙酸乙酯、石油醚为溶剂提取洋葱皮活性成分,分析不同溶剂对总多酚、总黄酮及槲皮素的提取效果,测定不同溶剂提取物的总还原能力、清除DPPH·、ABTS+·、O₂-·能力及抑制α-糖苷酶活性,并分析提取物中总多酚、总黄酮及槲皮素含量与其生物活性的相关性。结果表明:60%乙醇对总多酚、总黄酮、槲皮素的提取效果最好,三种活性成分的提取率分别为5.5%、9.87%、3.25%,纯度分别达(33.12%±0.39%)、(59.44%±0.38%)、(19.56%±0.14%)。40%、60%乙醇提取物均具有较强总还原能力、清除DPPH·、ABTS+·、O₂-·能力和抑制α-糖苷酶活性能力。洋葱皮提取物总黄酮、槲皮素含量与其抗氧化、抑制α-糖苷酶活性的相关系数均达显著或极显著水平,其中,提取物的槲皮素含量与自由基清除活性、抑制α-糖苷酶活性相关性最高。     

山奈抗氧化活性部位研究

为筛选具有较优抗氧化活性的山奈抗氧化活性部位,采用80%乙醇溶液超声提取山奈,提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,制备了山奈乙醇提取物和石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水余相5个部位,并分别采用DPPH和ABTS法测试了其抗氧化活性。结果显示:山奈提取物具有较好的抗氧化活性,5个部位中,氯仿相抗氧化活性最好,其对ABTS的半清除浓度约为阳性对照V_C的2倍,对DPPH的半清除浓度约为阳性对照V_C的4倍,乙酸乙酯相也具有较好的抗氧化活性,再次是正丁醇相,石油醚相抗氧化活性较差,水余相基本没有抗氧化活性。山奈具有较好的抗氧化活性,抗氧化活性成分主要集中在氯仿相和乙酸乙酯相。     

枳椇果梗不同极性多酚及抗氧化活性研究

以不同极性有机溶剂对枳椇果梗多酚进行萃取分离,对各部分多酚进行紫外-可见光谱扫描确定其紫外吸收特性;以FC法测定总酚含量,通过清除DPPH自由基、ABTS+ ·能力测定和Fe3+还原法,对不同极性多酚体外抗氧化活性进行评价。结果表明：液-液萃取可以实现不同极性多酚的有效分离,枳椇果梗不同极性多酚萃取物均有特征紫外吸收;不同极性部分的多酚含量、抗氧化活性有显著差异。枳椇果梗多酚含量和抗氧化活性强弱次序为：水相＞正丁醇相＞乙酸乙酯相＞氯仿相。枳椇果梗多酚以极性酚为主。     

蛇菰提取物体外抗氧化活性研究

采用DPPH·法及Fe3+ 还原力法对蛇菰提取物的抗氧化活性进行研究,分别测定蛇菰乙醇提物、石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水层部分、水提粗多糖及碱提粗多糖的抗氧化作用,同时以VC 作为阳性对照。结果表明：蛇菰提取物具有较强的抗氧化活性,尤其是乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、总醇提取物及水提粗多糖;它们对DPPH·的清除作用与VC 相当,其中乙酸乙酯提取物IC50 值为6.0μg/mL,活性略高于VC,同时以上提取物对Fe3+ 也具有很强的还原能力。