尿路致病性大肠埃希菌和宿主膀胱防御反应的相互作用

尿路致病性大肠埃希菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)是大部分尿路感染的病 原菌。大多数UPEC表面具有纤毛状的粘附器官-1型菌毛。1型菌毛介导细菌与膀胱上皮细 胞接触,且侵入其中。UPEC侵入细胞后获得一个保护性环境,或在其中繁殖,或处于静止潜 伏状态。具1型菌毛的UPEC侵入细胞引发了宿主的一系列反应:细胞激酶的产生,炎症反应 和受感染膀胱上皮细胞的片状脱落。宿主反应和抗生素治疗虽能有效清除尿中细菌,但致病 菌可顽固地存在于膀胱组织中,从而成为复发性尿路感染的难治根源。     

尿路致病性大肠埃希菌和宿主膀胱防御反应的相互作用

尿路致病性大肠埃希菌（uropathogenic Escherichia coli,UPEC)是大部分尿路感染的病原菌,大多数UPEC表面具有纤毛状的粘附器官-1型菌毛,1型菌毛介导细菌与膀胱上皮细胞接触,且侵入其中,UPEC侵入细胞后获得一个保护性环境,或在其中繁殖,或处于静止潜伏状态,具1型菌毛的UPEC侵入细胞引发了宿主的一系列反应;细胞激酶的产生,炎症反应和受感染膀胱上皮细胞的片状脱落,宿主反应和抗生素治疗虽能有效清除尿中细菌,但致病菌可顽固地存在于膀胱组织中,从而成为复发性尿路感染的难治根源。     

绿脓杆菌菌毛制剂对人PBMC表达CD2、CD25、CD69抗原的促进作用

目的 :探讨含Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型菌毛的绿脓杆菌制剂 ,在体外对正常人外周血单个核细胞 (PBMC)的活化作用。方法 :以绿脓杆菌菌毛制剂 ,作用于体外培养的人PBMC ,采用生物素 -链霉亲和素 (BSA)免疫细胞化学法 ,检测人PBMC表面CD2、CD2 5、CD6 9的表达。结果 :该制剂在实验最适条件下 ,可使PBMC上CD2表达率增加15 2 % ,CD6 9表达率增加 2 9.1% ,CD2 5的表达率增加 18.7% ,这与对照组比较差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论 :绿脓杆菌菌毛制剂在体外能有效地促进单个核细胞的活化 ,提示该制剂可增强机体的细胞免疫功能。     

Syndecan-1及E钙粘素在胃癌组织中的表达及其与胃癌预后的关系

Syndecan是一组跨膜硫酸乙酰肝素糖蛋白(HSPGS)，存在于大多数上皮细胞表面，并与钙粘素、整合素共同构成细胞间粘附分子复合体，参与细胞与胞外基质之间的粘附作用。已证实Syndecan—1表达减少或缺如可促进肿瘤生长、侵袭和转移。E-钙粘素(E—CD)是一种钙依赖性细胞粘附分子，存在于正常细胞中，以维持组织正常形态，它具有特殊的     

单细胞RNA测序解析新型冠状病毒结合受体ACE2表达谱的研究进展

血管紧张素转换酶2(ACE2)是细胞表面的功能性受体,在心脏、肾脏和肺等组织细胞中表达.新型冠状病毒(SARS-CoV-2)通过其刺突蛋白的受体结合域与ACE2受体结合,将遗传物质注入宿主细胞,扩增繁殖.ACE2受体在人体呼吸、消化、生殖、泌尿等系统中都具有广泛表达,但SARS-CoV-2进入机体细胞不仅依赖于ACE2...     

支气管哮喘患儿血清可溶性细胞间粘附分子-1和E-选择素水平变化及其价值

支气管哮喘是儿科常见呼吸道疾病,是气道慢性变态反应性炎症性疾病,但对这类气道炎症的形成机制尚不清楚,多种炎性细胞、炎性介质和细胞因子,在发病过程中起着重要作用。可溶性细胞间粘附分子1(solubleintercellularadhesionmole cules1,sICAM1),是表达于内皮细胞和其他抗原递呈细胞表面上的细胞间粘附分子1(intercellularadhesionmolecules1,ICAM1)脱落后于血液中的可溶形式,通过与ICAM1竞争结合配体起到调节气道炎症的作用。内皮细胞表面细胞粘附分子的异常表达是内皮细胞损伤的早期变化[1]。E选择素(E selectin,E SLT)是介导内皮…     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在骨髓造血系统疾病中的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory Tcell,Treg)是具有独特免疫调节功能的T细胞亚群。天然CD4+CD25+Treg起源于胸腺,外周血中CD4+CD25-T细胞亦可诱导产生。其分子表面表达特异性的转录抑制因子Foxp3,还表达CD4、CD25、CTLA-4(CD152))、GITR、CD103、CD62L、CD69、CD134、CD71、CD54、CD45RA、TGF-β1、IL-10、半乳糖结合蛋白(glactin)-1、神经菌毛素(neuropilin)-1等膜分子,具有免疫抑制和免疫无能作用。近年来研究发现,急性髓细胞白血病(acute myeloid leuke-mia,AML)、慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)、高危骨髓异常增生综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者Treg表达异常增高,而在再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者表达明显降低,其异常表达还与急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的发生发展密切相关。文中就Treg在白血病、aGVHD、AA、MDS、多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)等骨髓造血系统疾病中的研究进展作一综述。     

新发现的伤寒杆菌ⅣB型菌毛致病性研究

目的 :研究伤寒杆菌菌株ⅣB型菌毛的致病特性。方法 :本研究将表达ⅣB型菌毛的的伤寒杆菌J341及另一插有强启动子Tac并表达ⅣB型菌毛的重组伤寒杆菌菌株TyphiA2 1 6和不表达ⅣB型菌毛的伤寒杆菌菌株TyphipilS∶∶kmr 分别攻击人的THP 1细胞和小鼠腹腔巨噬细胞 (MΦ) ,利用细胞毒检测试剂盒检测细胞受到伤寒杆菌攻击后 ,伤寒杆菌对细胞的毒性作用 ;同时进一步采用实时荧光定量PCR法检测伤寒杆菌毒力岛上的ⅣB菌毛对人单核细胞的侵袭作用 ,分析表达ⅣB菌毛的伤寒杆菌菌株J341及TyphiA2 1 6和不表达ⅣB型菌毛的伤寒杆菌菌株TyphipilS∶∶kmr 分别对THP 1细胞的侵袭作用 ,通过对细胞内侵入的伤寒杆菌的ⅣB菌毛基因 (pilS)和伤寒杆菌O抗原的聚合酶基因 (rfc)DNA的含量的检测 ,来比较进入胞内细菌含量的差别。结果 :比较发现J341及TyphiA2 1 6比TyphipilS∶∶kmr 对人的细胞有更强的毒性以及侵袭性 ,而对鼠的细胞毒性和侵袭性没有明显差异。结论 :说明伤寒杆菌ⅣB型菌毛与细菌侵入人体细胞的毒性和侵袭性密切相关 ;并且伤寒杆菌ⅣB型菌毛的侵袭性和细胞毒性具有种属特异性 ,即对人的单核细胞等细胞有致病性 ,而对鼠的巨噬细胞无致病性。     

HBVPreS2反义寡核苷酸对HepG 2.2.15细胞系HLA-I类抗原表达及生物活性的影响

目的 :观察针对乙型肝炎病毒 (HBV)PreS2 基因特异性反义寡核苷酸 (asON)对转基因细胞HepG2 .2 .15表面的人类白细胞I类抗原 (HLA I)基因表达的影响。方法 :设计合成互补于HBVPreS2 翻译起始区的反义寡核苷酸即序列I ,并设非互补序列作对照即序列II ,免疫细胞化学染色观察asON对HepG2 .2 .15表面表达的HLA I类抗原的影响 ,用ELISA法动态检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg的变化 ,放射免疫测定法检测asON对宿主细胞自身分泌蛋白 血清铁蛋白的影响。结果 :HepG2 .2 .15细胞表面HLA I类抗原表达降低 ,用药组和对照组相比有统计学意义 (P <0 .0 5 )。asON能够抑制HBV表达HBsAg和HBeAg ,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为 6 6 %和 91% ,而序列II对HBsAg和HBeAg的抑制率均为 11%。asON对宿主细胞自身分泌蛋白无影响 ,即对宿主细胞无毒性作用。结论 :asON以序列特异性方式抑制HBV基因表达而对宿主细胞无毒性作用 ,HLA I类抗原表达降低 ,这对减轻过度炎症反应 ,阻止慢性肝炎至重症肝炎的发生具有重要意义     

肠出血性大肠杆菌O157:H7紧密黏附素的基因克隆、表达及功能研究

目的 获得高纯度的eae基因表达蛋白紧密黏附素(Intimin),研究其黏附作用.方法 从肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7全基因组中扩增出eae基因,T-A克隆后,将eae插入载体pET28a(+),并转化至E.coli BL21(DE3)中表达;用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化出重组蛋白;SDS-PAGE检测目的 蛋白相对分子质量,免疫印记分析其免疫反应性,免疫荧光检测其黏附性.结果 获得了大小约2805 bp的eae片段;构建r重组载体pET28a(+)-eae,并在E.coli BL21(DE3)中以包涵体形式表达Intimin,Mr约97 000;Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化出Intimin;大肠杆菌O157:H7多抗血清在Mr约97 000处检测出一条特异性Intimin带;Intimin可黏附在HEp-2细胞表面.结论 高纯度的重组蛋白Intimin具有一定的免疫反应性,能与HEp-2细胞黏附,为进一步研究Intimin蛋白与宿主受体蛋白的相互作用奠定基础.     

肠出血性大肠杆菌O157P:H7紧密黏附素的基因克隆、表达及功能研究

目的 获得高纯度的eae基因表达蛋白紧密黏附素(Intimin),研究其黏附作用.方法 从肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7全基因组中扩增出eae基因,T-A克隆后,将eae插入载体pET28a(+),并转化至E.coli BL21(DE3)中表达;用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化出重组蛋白;SDS-PAGE检测目的 蛋白相对分子质量,免疫印记分析其免疫反应性,免疫荧光检测其黏附性.结果 获得了大小约2805 bp的eae片段;构建r重组载体pET28a(+)-eae,并在E.coli BL21(DE3)中以包涵体形式表达Intimin,Mr约97 000;Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化出Intimin;大肠杆菌O157:H7多抗血清在Mr约97 000处检测出一条特异性Intimin带;Intimin可黏附在HEp-2细胞表面.结论 高纯度的重组蛋白Intimin具有一定的免疫反应性,能与HEp-2细胞黏附,为进一步研究Intimin蛋白与宿主受体蛋白的相互作用奠定基础.     

尿路致病性大肠杆菌临床株I型菌毛FimH基因检测及分析

目的检测尿路致病性大肠杆菌 (uropathogenicEscherichiacoli,UPEC)临床株I型菌毛的携带频率 ,并对其粘附素基因FimH作序列分析。方法用血凝方法检测尿路致病性大肠杆菌的I型菌毛 ;根据GENEBANK的大肠杆菌I型菌毛粘附素FimH基因序列设计引物 ,用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)检测临床分离的 15 5株UPEC的目的基因 ,选取典型阳性株的扩增产物测序。结果 15 5株尿路致病性大肠杆菌 ,用血凝方法仅检测到 5 5株携有I型菌毛 ,阳性率 3 5 .5 % ;而用基因扩增方法检测 14 0株 (90 .5 % )含有FimH基因。扩增产物序列与尿路致病性大肠杆菌标准株J96的序列基本一致。结论FimH基因存在于大多数尿路致病性大肠杆菌临床株中 ,是其重要毒力因子 ,具有重要的临床意义。     

鸦胆子素D对HPV16感染细胞株的作用及其可能机制

目的:研究鸦胆子素D对高危型人类乳头瘤病毒(HPV)16感染细胞的增殖抑制作用、促凋亡作用及其可能机制。方法:以人宫颈鳞状上皮永生化细胞株(Ect1/E6E7)作为HPV16型感染的宫颈癌前病变的体外实验模型,用1、5、10、15、30μmol/L的鸦胆子素D分别体外作用于细胞24、48、72 h,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定细胞增殖活性改变;以1、5、10μmol/L的鸦胆子素D分别体外作用于细胞24、48、72 h后,Cell cycle staining solution检测细胞生长周期变化,Hoechst33258细胞核荧光染色法观察细胞凋亡情况,Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率。宫颈癌细胞株Caski含有完整的HPV16型E6、E7基因序列,以此作为阳性对照,通过实时荧光定量PCR技术检测两种细胞内HPV16 E6、E7基因m RNA的表达。结果:鸦胆子素D对Ect1/E6E7细胞具有明显的抑制体外增殖作用,MTT结果显示抑制作用呈时间和浓度依赖性(P<0.05)。经1、5、10μmol/L鸦胆子素D体外作用48 h后,细胞生长周期停滞于G1期。流式细胞仪检测显示,各实验组细胞经鸦胆子素D作用48 h后,细胞凋亡率分别为(6.25±0.76)%、(20.21±1.32)%和(8.61±1.59)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Hochest33258细胞核染色法显示细胞出现凋亡形态学改变。Real-time PCR技术检测结果显示Ect1/E6E7中HPV16 E6、E7m RNA表达水平无明显下降,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。而Caski中HPV16 E6、E7 m RNA表达水平下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:鸦胆子素D能有效地抑制Ect1/E6E7细胞增殖,其机制可能是通过抑制HPV16 E6、E7 m RNA表达从而促进细胞凋亡。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂的研究与临床应用进展

肾素-血管紧张素系统(RAS)是体内调节血压和水电解质平衡的主要系统,它通过一系列酶促反应将血管紧张素Ⅰ转化为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),AngⅡ与细胞表面的血管紧张素受体结合而发挥生物学作用.     

粘附分子与肿瘤

粘附分子(Adhesion molecule,AM)是一类介导细胞与细胞之间以及细胞与细胞外基质之间粘附作用的膜表面糖蛋白,主要包括五大类:选择素(selectin)家族、粘蛋白样(mucin-like)家族、整和素(integrin)家族、免疫球蛋白超家族(IgSF)和钙离子依赖的细胞粘附素家族(简称钙粘素),此外,还有一些尚未归类的,如CD44、CD36等,它们在体内多种生理和病理过程中发挥重要作用.本文主要介绍粘附分子与肿瘤的关系,并简述其分子基础.     

丹参减轻缺血再灌注白细胞损伤作用的机制研究

白细胞 (WBC)激活是缺血再灌注损伤 (ischemia reperfu sioninjury ,IRI)过程中WBC浸润引起急性炎性反应的首要前提 ,在微血管损伤中起重要作用。其诱导损伤的主要机制是大量WBC阻塞微血管 ,限制再灌流以及多形核白细胞(PMN)呼吸爆发产生的氧自由基等细胞毒性物质对组织细胞的直接损伤[1] 。活化的PMN在穿过血管壁向组织聚集移行过程中 ,有多种不同的细胞因子 (包括化学趋化和黏附分子 )参与调节。炎性细胞首先聚合或滚动 ,在局部小血管内皮细胞表面作往返运动。主要参与的黏附分子是WBC的L 选择素与内皮细胞上的E 选择素。聚合的…     

S型凝集素影响肿瘤细胞在细胞外基质上的粘着

目的：探讨肿瘤细胞表面Ｓ型凝集素在肿瘤细胞粘着于基膜中的作用。方法：测定乳糖等对小鼠黑色素瘤Ｂ１６细胞粘着于细胞外基质的影响。结果：小鼠黑色素瘤凝集素（ＭＭＡ）促进细胞粘着；抗ＭＭＡ抗体及乳糖明显抑制Ｂ１６细胞粘着于细胞外基质及层粘连蛋白；然而，ＭＭＡ等不影响Ｂ１６细胞粘着于纤粘连蛋白及ＩＶ型胶原蛋白。结论：肿瘤细胞表面Ｓ型凝集素参与肿瘤细胞粘着于基膜。     

CagA对幽门螺杆菌与宿主细胞相互作用影响的研究进展

在体外实验中,幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)和宿主细胞相互作用后发生很多变化,而H.pylori细胞毒素相关蛋白(cytotoxin associated gene A,CagA)是H.pylori重要的毒力因子之一,在H.pylori与宿主细胞相互作用中起着非常重要的作用,包括CagA转运进入细胞、CagA磷酸化和断裂,以及引起胞内信号转导通路的改变.本文就CagA对H.pylori与宿主细胞的相互作用影响进行综述.     

糖基在小鼠Lewis肺癌细胞与层粘连蛋白识别及结合中的作用

培养的小鼠Lewis肺癌细胞可粘着于固化在玻璃表面的层粘连蛋白(Laminin,LN)基质上。此过程可分别被抗LN兔血清和抗LN受体(LN-R)兔血清阻断,说明二者的结合是LN与细胞表面LN-R的作用结果。几种外源性单糖如唾液酸,α-甲基甘露糖等可抑制Lewis肺癌细胞与LN相结合,且有剂量依赖性。一种混合糖肽可分别与Lewis肺癌细胞和LN结合,而阻断二者的结合。     

卡提素对哮喘患者T-淋巴细胞亚群和血清总IgE的影响

目的 :比较哮喘患者应用卡提素治疗前后 T淋巴细胞亚群和血清总 Ig E的变化 ,进一步探讨该药对细胞免疫和体液免疫的影响。方法 :应用流式细胞仪检测 5 0例健康人、5 0例哮喘患者 T淋巴细胞亚群(OKT3、OKT4 、OKT8细胞 ) ,酶联免疫吸附法测定血清总 Ig E水平。结果 :用药后哮喘患者 OKT4 细胞减少 ,OKT8细胞增多 ,致使 T4 /T8比值降低 ,P<0 .0 5。健康人血清总 Ig E(3 0 2 .1± 3 3 .2 ) IU/ml,哮喘患者治疗前(866.8± 89.6) IU/m L,治疗后 (784.3± 80 .2 ) IU/ml,经 t检验 ,哮喘患者与对照组比较 ,有极显著性差异 ,P<0 .0 1。而治疗前后无显著性差异 ,P>0 .0 5。结论 :卡提素具有调节细胞免疫和体液免疫作用 ,可能是通过抑制 T辅助细胞增强 T抑制细胞功能来产生作用的