光动力作用对膀胱癌细胞生长影响的体外实验研究

目的观察光动力治疗(PDT)对体外培养的人膀胱癌细胞的杀伤效应以及形态改变,同时探讨光敏剂(PhtofrinⅡ)浓度与杀伤效应的关系。方法将膀胱癌细胞(T-24)分组进行培养,扩增至一定数目后,加入光敏剂,然后用激光照射,绘制细胞生长曲线,观察PDT对肿瘤细胞生长的抑制情况,同时进行细胞形态学观察。结果癌细胞生长随光敏剂用药剂量不同而受到不同程度抑制;显微镜下见治疗后癌细胞结构受到破坏。结论体外光动力治疗可明显抑制膀胱癌细胞的增长,其效应与光敏剂浓度呈正相关。     

竹红菌乙素-PDT与血卟啉衍生物-PDT对食管癌细胞杀伤效应的比较研究

目的探讨竹红菌素-光动力疗法(hypocrellins B-photodynamic therapy,HB-PDT)对食管癌细胞的杀伤效应,同时与第1代光敏剂血卟啉衍生物(hematoporphyrin derivative,HpD)作对比研究,初步揭示HB-PDT在食管癌治疗方面的优势和前景。方法以不同浓度的竹红菌乙素(HB)及HpD孵育食管癌细胞,然后分别在铜蒸汽激光混合光饱和光剂量条件下进行照光处理,照光后置于37℃含5%CO2的孵箱中继续孵育24h,然后用MTT法分别测定不同光敏剂浓度下的存活率,绘制杀伤曲线并拟合曲线方程,根据方程求出不同光敏剂对细胞的半数杀伤浓度(50%inhibition concen-tration,IC50)。结果HB-PDT对食管癌细胞具有很强的杀伤效应,对食管癌细胞杀伤的IC50为34.15ng/mL;HpD对食管癌细胞杀伤的IC50为1526.03ng/mL。两种方法之间差异有统计学意义,P=0.0001。结论HB-PDT对食管癌细胞具有很强的杀伤作用;HB-PDT对食管癌细胞株的杀伤效应明显优于HpD-PDT;竹红菌素是比第1代光敏剂HpD更为高效的光敏剂。     

竹红菌乙素-PDT与血卟啉衍生物-PDT对食管癌细胞杀伤效应的比较研究

目的：探讨竹红菌素-光动力疗法（hypocrellins B-photodynamic therapy, HB-PDT）对食管癌细胞的杀伤效应,同时与第1代光敏剂血卟啉衍生物（hematoporphyrin derivative, HpD）作对比研究,初步揭示HB-PDT在食管癌治疗方面的优势和前景.方法：以不同浓度的竹红菌乙素（HB）及HpD孵育食管癌细胞,然后分别在铜蒸汽激光混合光饱和光剂量条件下进行照光处理,照光后置于37℃含5% CO2的孵箱中继续孵育24 h,然后用MTT法分别测定不同光敏剂浓度下的存活率,绘制杀伤曲线并拟合曲线方程,根据方程求出不同光敏剂对细胞的半数杀伤浓度 （50% inhibition concentration, IC50）.结果：HB-PDT对食管癌细胞具有很强的杀伤效应,对食管癌细胞杀伤的IC50为34.15 ng/mL;HpD对食管癌细胞杀伤的IC50为1 526.03 ng/mL.两种方法之间差异有统计学意义,P=0.000 1.结论：HB-PDT对食管癌细胞具有很强的杀伤作用;HB-PDT对食管癌细胞株的杀伤效应明显优于HpD-PDT;竹红菌素是比第1代光敏剂HpD更为高效的光敏剂.     

放射线诱导hEgr-1-CD对鼻咽癌CNE放射增敏作用的研究

目的 研究放射线诱导hEgr-1-CD自杀基因前药系统对鼻咽癌CNE细胞株放射增敏作用。方法 将pcDNA3.1（＋）Egr-1-CD利用脂质体转染的方法 转染入鼻咽癌细胞株,给予不同剂量的X线照射观察基因表达与放射的剂量效应关系,观察不同的放射线及不同剂量的前药对鼻咽癌细胞的杀伤效应。结果 电离辐射可诱导增强自杀基因阳性鼻咽癌CNE细胞株中CD基因的表达,电离辐射与前药5-Fc的联合应用大大增强了对自杀基因阳性细胞的杀伤作用,其杀伤作用大于单独自杀基因前药系统和单独照射。结论 hEgr-1-CD自杀基因前药系统对鼻咽癌CNE细胞株有放射增敏作用,其与放射联合应用对CNE细胞有明显的协同杀伤作用。     

光动力学反应治疗恶性肿瘤的机制及应用

光动力学反应是指进入生物组织内的光敏剂在一定波长的光照射下所发生的生物氧化反应,是光化学反应的一种特殊形式。这种氧化反应在正常生物代谢中是不存在的。血卟啉衍生物(Hematoporphgrinderivative HPO)与激光配合治疗恶性肿瘤是近几年来发展起来的一种新技术,其基本原理是HPO作为光敏剂进入机体后,在肿瘤组织内滞留时间长,经一定波长的光照射,发生光动力学反应,杀伤癌细胞,     

新城疫病毒对癌细胞的杀伤作用

 目的　探讨新城疫病毒NDV对癌细胞的直接杀伤作用。方法　将NDV与各组细胞的混悬液一起加入细胞培养板中三孔法,同时设不加NDV的对照孔,经8、16、24、36和48小时五个时相观测细胞生长情况和病毒复制情况。结果　成纤维细胞和对照组细胞生长良好,而实验孔的各组癌细胞逐渐减少,出现融合、裂解。48小时癌细胞组的上清液病毒效价较高而成纤维细胞的上清液病毒效价为0。结论　NDV对癌细胞有较强的亲和力,可在癌细胞内大量复制,具有直接杀伤癌细胞的作用,而对正常细胞无明显的杀伤作用。     

IL-15基因修饰的NK细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤作用

目的:探讨γ射线照射后的IL-15基因修饰的NK细胞(简称NK-ustc细胞)对原代卵巢癌细胞的体内外杀伤活性。方法:分离卵巢癌患者腹水原代卵巢癌细胞。不同剂量γ射线(0、1、2、4、8、16 Gy)照射NK-ustc细胞,3H-TdR掺入法检测照射后NK-ustc细胞的增殖情况,51Cr释放法检测NK-ustc细胞对K562和原代卵巢癌细胞的杀伤活性。建立人裸鼠荷卵巢癌模型,随机分为NK-ustc治疗组(模型鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞)和培养基对照组,同时设空白对照组(正常裸鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞),观察各组裸鼠体重、腹围及生存期。结果:1、2、4、8、16 Gy辐照后NK-ustc细胞的增殖率分别为(62.1±9.8)%、(41.3±8.7)%、(14.6±4.1)%、(0.1±0.03)%和(0.2±0.04)%。当效靶比为10∶1时,0、8 Gy辐照后NK-ustc细胞对K562的杀伤率分别为(45.4±8.9)%和(43.1±6.4)%,对原代卵巢癌细胞的杀伤率分别为(54.6±6.4)%和(48.3±5.8)%,说明辐照不影响NK-ustc细胞的杀伤活性(P>0.05)。辐照后NK-ustc细胞治疗组荷瘤小鼠的中位生存期为75 d,对照组为39 d(P<0.05),空白对照组小鼠全部存活。结论:γ射线照射可有效抑制NK-ustc细胞增殖,但保留该细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤活性。     

510.6nm绿色铜蒸气激光加血卟啉衍生物(HpD)对动物移植瘤杀伤作用的实验研究

本文报告510.6nm绿色铜蒸气激光与HpD对动物移植瘤的杀伤作用.给带S_(180)和B_(16)—MB小鼠腹腔注射HpD50mg/kg,注后72小时,用510.6mm铜蒸气激光照射肿瘤,照后肿瘤体积和重量,均明显减少(P<0.01和<0.05),病理检查照区肿瘤均有坏死,深度为5.5～8.8mm,平均约7mm,单纯铜激光照射,肿瘤坏死深度最大达5mm.HpD组和非激光非HpD组无上述变化.HpD对小鼠B_(16)—MB生长抑制试验,未显示其本身抑制肿瘤生长的作用.本实验结果表明510.6nm铜激光对癌细胞杀伤作用是肯定的,可作为浅表癌肿PDT治疗的光源.     

藻红蛋白介导的光敏反应可诱导人肝癌7721细胞凋亡

目的 :探讨藻红蛋白介导的光动力效应对肝癌细胞的杀伤机制是否与诱导瘤细胞凋亡有关。方法 :对培养的人肝癌细胞进行光动力治疗处理 ,通过观察DNALadders的形成和形态学改变 ,判断凋亡的发生与否。结果 :可观察到在经过光动力治疗处理一定时间后 ,772 1细胞出现典型的凋亡形态学改变 ,同时伴有特征性的DNALadders出现。结论 :藻红蛋白介导的光敏反应杀伤肿瘤细胞与诱导人肝癌细胞凋亡相关 ,是一种很有前景的光动力药物。     

人细胞毒T淋巴细胞杀伤胃癌细胞及诱发凋亡的实验研究

目的　测定特异性细胞毒 T淋巴细胞 (CTL )对胃癌细胞的体外杀伤活性及观察形态学改变。方法　用分离胃腺癌患者的癌细胞经丝裂霉素 C处理后 ,作为抗原与抗CD3单克隆抗体、重组白细胞介素 - 2刺激患者自体外周血单个核细胞 ,体外诱导 CTL,用 MTT比色法测定 CTL 对自体癌细胞、人胃癌细胞株 (BGC- 82 3和 MGC- 80 3)的体外杀伤活性。将 CTL与 BGC- 82 3共同温育 ,通过透射和扫描电镜观察杀伤靶细胞的形态改变。结果　 CTL对自体胃癌细胞有特异性杀伤作用 ,可使靶细胞凋亡或溶解坏死。结论　体外混合细胞培养诱导出的 CTL,对靶细胞有明显的杀伤作用     

曲妥珠单抗联合放疗对HER2高表达胃癌细胞的协同杀伤作用

目的:研究曲妥珠单抗联合放疗对人类表皮生长因子受体2（HER2）高表达胃癌细胞NCI-N87的协同杀伤作用。方法:应用细胞增殖与毒性检测（CCK-8）法筛选曲妥珠单抗杀伤胃癌细胞的IC20浓度;将NCI-N87分为对照组与加药组,两组依次给予照射剂量不同的X线（0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy）,应用克隆形成实验分析两者的杀伤作用;凋亡实验分4组:对照、曲妥珠单抗、2 Gy照射、2 Gy照射+曲妥珠单抗,流式细胞仪用于测定凋亡率。结果:IC20为10 μg/ml。与单纯放疗相比,曲妥珠单抗与放疗同时作用可明显降低细胞存活率,差异具有统计学意义（P＜0.05）。凋亡率为对照（3.80±0.26）%、曲妥珠单抗（4.84±0.14）%、2 Gy照射（6.83±0.17）%、联合组（13.60±0.35）%,曲妥珠单抗或照射组均可增加NCI-N87细胞凋亡率,其中凋亡率在联合组中最高（P＜0.05）。结论:曲妥珠单抗和放疗可协同杀伤HER2高表达的胃癌细胞。     

低能超声对人肺癌细胞的体外杀伤作用

目的 探讨低能超声对人肺癌细胞的影响。方法 用低能量连续波超声处理小细胞肺癌细胞系ＳＭ、腺癌细胞系Ａ２及人肺纤维母细胞ＦＢ,用胎盘蓝染料排斥试验及克隆存活试验判定效果,结果 低能量（０．８Ｗ／ｃｍ＾２）超声３分钟分各种人肺癌细胞及人肺纤维母细胞有杀伤作用（Ｐ〈０．０５）,１０分钟可杀死全部细胞（Ｐ〈０．００１）,细胞浓度越高,杀伤作用越低,超声１０分钟后含细胞悬液的试管内温度未见显著上升,声强０．８Ｗ／ｃｍ＾２的超声使阿霉对肺癌细胞ＳＭ的杀伤作用增加１００倍（Ｐ〈０．００１）,结论 低能连续波超声可杀伤肺癌细胞,并能显著增加阿霉素对肺癌细胞的细胞毒性。     

治癌方法新探讨——“导弹”疗法

目前已发现的抗癌药不下数百种,它们都能有效地杀伤癌细胞。但为什么临床化疗并不十分理想呢?这是因为这些药物都有以下两种缺点:一、敌我不分,既可杀伤癌细胞,也可杀伤正常细胞;二、多向分布,在癌内不能达到有效浓度而限制了治疗效果。因此,科学家们绞尽脑汁想寻找一种既能杀伤癌细胞而又不伤害正常细胞的理想方法。几经周折,国外科     

藻红蛋白介导的光敏反应可诱导人肝癌7721细胞凋亡

目的：探讨藻红蛋白介导的光动力效应对肝癌细胞的杀伤机制是否与诱导瘤细胞凋亡有关。方法：对培养的人肝癌细胞进行光动力治疗处理，通过观察DNA Ladders的形成和形态学改变，判断凋亡的发生与否。结果：可观察到在经过光动力治疗处理一定时间后，7721细胞出现典型的凋亡形态学改变，同时伴有特征性的DNA Ladders出现。结论：藻红蛋白介导的光敏反应杀伤肿瘤细胞与诱导人肝癌细胞凋亡相关，是一种很有前景的光动力药物。     

体外培养的食管癌细胞光动力疗法的电镜观察

背景与目的： 研究光动力疗法对食管癌细胞超微结构的影响。 材料与方法： 培养的食管癌细胞分别与光敏剂作用6、12和24 h后,再经紫外线(Ultraviolet B,UVB)照射0.5 h。 通过透射电镜观察各实验组和对照组食管癌细胞的超微结构。 结果： 电镜下可见实验组食管癌细胞出现线粒体固缩,粗面内质网减少,滑面内质网扩张,核膜断裂,核仁固缩。上述膜性结构的损伤随着光敏剂作用时间延长而加重。 结论： 光动力疗法可导致食管癌细胞超微结构,尤其是膜性结构损伤,因而可能具有治疗食管肿瘤的效应。     

特异性增殖型腺病毒CNHK300-mIFN-γ治疗胃癌的体外实验研究

 目的　研究增殖型腺病毒CNHK300-mIFN-γ在胃癌细胞BGC-823中的特异性增殖能力、目的基因表达能力、肿瘤杀伤作用及安全性。方法　通过增殖实验比较CNHK300-mIFN-γ与CNHK300在胃癌细胞BGC-823与成纤维细胞BJ中的增殖能力;ELISA法检测CNHK300-mIFN-γ和复制缺陷型腺病毒Ad-mIFN-γ在不同细胞中mIFN-γ蛋白的表达量;MTT与细胞病变效应（CPE）实验观察CNHK300-mIFN-γ对胃癌细胞的杀伤效应及安全性。结果　增殖实验结果表明CNHK300-mIFN-γ能选择性地在端粒酶阳性的胃癌细胞中大量增殖;ELISA实验结果表明CNHK300-mIFN-γ在胃癌细胞BCG-823中mIFN-γ的表达量可至（171.93±33.61）ng／ml,表达量高于复制缺陷型腺病毒Ad-mIFN-γ[（0.92± 0.24）ng／ml];MTT与CPE实验表明CNHK300-mIFN-γ对胃癌细胞BGC-823有较强的杀伤作用,对正常细胞并无明显杀伤。结论　增殖型腺病毒CNHK300-mIFN-γ感染胃癌细胞BGC-823后能高效增殖并大量表达mIFN-γ蛋白,对胃癌细胞有明显杀伤作用且安全性良好。     

恶性黑色素瘤细胞光免疫治疗的研究

目的:探讨光免疫治疗(PIT)能否选择性提高人眼黑色素瘤细胞的光毒作用.方法:单克隆抗体IG12连结光敏物质CMA,形成免疫连结物(McAb-CMA),以评价其对体外人眼黑色素瘤培养细胞OCM431的光免疫治疗作用,RPMI1846黑色素瘤细胞与单克隆抗体IG12无交叉反应,作为对照组.氩离子-染料激光波长654nm,连结1mm光导纤维,光斑大小35mm.靶细胞和对照细胞的存活率用MTT法测定.结果:靶细胞OCM431预先与McAb-CMA培养,激光照射剂量5～40J/cm2显示靶细胞存活率随着激光剂量增加而明显降低.在相同激光照射剂量下,增加McAb-CMA的剂量,细胞存活曲线亦随着降低,当McAb-CMA的量增加超过6.7μmol/L时,肿瘤的光免疫杀伤作用趋平缓.对照细胞(RPMI1846)给予相同的照射条件,在激光剂量40J//cm2时仍有74%±2.6%细胞存活.结论:这一结果显示单克隆抗体IG12 PIT可选择性提高人眼黑色素瘤的光杀伤作用.     

光动力疗法的抗肿瘤机制研究进展

光动力作用是指由光敏剂介导，在光的作用下，使机体细胞或生物分子发生功能或形态变化，累积而致细胞的损伤和坏死，又称光敏化－氧化作用。光动力疗法(PDT)是利用光敏剂介导的光动力作用进行疾病诊断和治疗的技术，由于光敏剂选择性地在肿瘤部位高浓度积聚，在激光照射下杀伤肿瘤细胞，目前PDT在临床上主要被用于治疗恶性实体瘤，也可用于一些癌前病变的治疗以及肿瘤诊断。本文对光动力疗法的特点以及抗肿瘤机制的研究进展做一综述。     

IL-15基因修饰的NK细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤作用

目的:探讨γ射线照射后的IL-15基因修饰的NK细胞(简称NK-ustc细胞)对原代卵巢癌细胞的体内外杀伤活性。方法:分离卵巢癌患者腹水原代卵巢癌细胞。不同剂量γ射线(0、1、2、4、8、16 Gy)照射NK-ustc细胞,3H-TdR掺入法检测照射后NK-ustc细胞的增殖情况,51Cr释放法检测NK-ustc细胞对K562和原代卵巢癌细胞的杀伤活性。建立人裸鼠荷卵巢癌模型,随机分为NK-ustc治疗组(模型鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞)和培养基对照组,同时设空白对照组(正常裸鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞),观察各组裸鼠体重、腹围及生存期。结果:1、2、4、8、16 Gy辐照后NK-ustc细胞的增殖率分别为(62.1±9.8)%、(41.3±8.7)%、(14.6±4.1)%、(0.1±0.03)%和(0.2±0.04)%。当效靶比为10∶1时,0、8 Gy辐照后NK-ustc细胞对K562的杀伤率分别为(45.4±8.9)%和(43.1±6.4)%,对原代卵巢癌细胞的杀伤率分别为(54.6±6.4)%和(48.3±5.8)%,说明辐照不影响NK-ustc细胞的杀伤活性(P>0.05)。辐...     

放射线照射后NK-92 细胞对人宫颈癌细胞体外杀伤活性的研究

 目的 研究放射线照射后NK-92细胞对人宫颈癌细胞的体外杀伤活性。方法 应用医用电子直线加速器对NK-92细胞进行照射处理(0、400cGy)后，以体外培养人宫颈癌细胞系Hela为靶细胞，以NK-92的敏感细胞株K562作为对照，应用4h^51Cr释放法检测不同效靶比情况下NK-92细胞的杀伤活性。结果 NK-92细胞0cGy照射组，效靶比较低时(1：1、5：1)对Hela细胞杀伤率为15％～33％，随效靶比升高，杀伤率随之上升，10：1时杀伤率显著上升为47％，20：1时杀伤率仅上升了3％；对于K562细胞，杀伤率为33％～69％。400cGy组照射后2d，NK-92细胞对Hela细胞不同效靶比的杀伤率与0cGy组相比稍有降低，其总体杀伤率为14％～47％，对K562细胞杀伤范围在30％～60％之间。结论 放射线照射后的NK-92细胞对人宫颈癌Hela细胞系具有一定的杀伤活性。