一种提高玉米蛋白水解度和降解率的方法

研究在没有外加碱的pH值渐变条件下,用黑曲霉酸性蛋白酶(酶活力3000U/g)水解玉米渣,利用特殊的热处理提高其水解度和降解率的方法。考察未经热处理、经热处理各种水解条件对玉米蛋白降解率和水解度的影响,并在此基础上通过正交试验进一步优化出水解玉米蛋白的最佳条件:水解温度为60℃、酸性蛋白酶加入量为10%(g/g)、底物浓度为80g/L、水解时间为8h。在上述最佳条件下,玉米蛋白的降解率可达36.70%,蛋白质的水解度可达19.85%。结果表明,采用特殊的热处理方法能够显著提高玉米蛋白降解率以及蛋白质水解度。     

高水解度大豆寡肽专用复合酶的配方优化

为提高大豆分离蛋白(SPI)的水解度,实现深度酶解,生产低分子质量寡肽,比较不同蛋白酶与不同配方的复合酶对SPI的水解能力,并采用响应面法对复合酶的组成进行优化。结果表明：不同蛋白酶对SPI的酶解能力不同,其中以碱性蛋白酶的水解度寡肽收率最高。多酶复合水解可以提高SPI的水解度与寡肽收率,其中以同时加入碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶进行水解时水解度最高。由此3种酶组成的复合酶的最佳组成是碱性蛋白酶39.6%、风味蛋白酶25.4%、中性蛋白酶35.0%,最适用量为SPI干质量的3%。以此复合酶在55℃、SPI质量浓度10g/100mL、自然pH值的条件下酶解6h,SPI的水解度可达27.2%,寡肽收率高达83%。     

内切酶与端肽酶协同水解大豆蛋白的研究

大豆蛋白酶解常常会产生苦味,端肽酶可有效水解苦味肽,但它们对于完整的蛋白大分子几乎没有作用,因此必须与内切酶联合使用或在其后使用。研究了内切酶枯草杆菌碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)与端肽酶黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)协同水解大豆蛋白制备寡肽的可行性,结果表明:采用端肽酶黑曲霉酸性蛋白酶与内切酶枯草杆菌碱性蛋白酶协同作用水解大豆蛋白,不但水解液的苦味值显著下降,而且大豆蛋白降解率和水解液水解度显著提高。     

鸽肉寡肽的制备及分子量分布

以鸽肉为原料,用风味蛋白酶催化水解鸽肉来制备鸽肉寡肽。采用10%(w/v)三氯乙酸沉淀水解物中大分子蛋白质再结合双缩脲试剂来测定水解物中寡肽含量;用单因素实验和正交实验研究水和鸽肉之比、pH、水解温度、水解时间和酶用量对鸽肉水解物中寡肽含量的影响;用液相色谱质谱联用检验寡肽的分子量。以水解液中寡肽含量为衡量因子,通过正交实验优化鸽肉蛋白适宜水解条件。结果表明鸽肉蛋白适宜水解条件为酶解时间3.5h、水解温度50℃、风味蛋白酶添加量2100u/g、水与鸽肉之比5∶1(m/v)、pH6.5,寡肽吸光度值为0.308,其对应寡肽浓度和含量为别为0.056g/mL和28%。     

酶法制取鲮鱼皮胶原蛋白寡肽工艺的研究

本文以水解度为指标,在2709碱性蛋白酶、537酸性蛋白酶、A.S.1.398中性蛋白酶三种蛋白酶中确定2709碱性蛋白酶为最佳水解用酶.在单因素试验的基础上利用通过响应面法优化2709碱性蛋白酶水解鲮鱼皮制取胶原蛋白寡肽的最佳工艺条件为:底物浓度120g/L,pH值10.0,酶与底物比2200U/g,温度50℃,水解时间2h,最大水解度为28.23%.     

玉米蛋白粉的剪切乳化处理及酸性蛋白酶的水解研究

探讨了高速剪切乳化预处理对提高玉米蛋白粉酸性蛋白酶酶解效果的作用。结果表明,利用高速剪切乳化方法在7000r/min下预处理玉米蛋白粉达1h,可使玉米蛋白粉的颗粒度从420μm降到10μm左右。在此情况下,采用酶活力为50000u/g的酸性蛋白酶在50℃,酶与底物比10%,底物浓度80g/L和水解时间24h的水解条件下(不加碱维持水解液的pH),可将玉米蛋白粉的降解率和蛋白质水解度分别提高到70.19%和58.64%。     

蛋白酶水解低温豆粕制备大豆寡肽的研究

以低温豆粕为原料,利用复合酶法水解蛋白质制备大豆寡肽.通过测定不同蛋白酶对蛋白质水解后的蛋白质转化率和水解度,并综合生产成本、实验条件等因素,确定最优蛋白酶种类以及最优水解条件.得到蛋白酶Ⅰ的最优水解条件为:[S]=7%,E/S=4%(w/w),在pH=8.5,T=65℃条件下,水解3h;蛋白酶Ⅱ的最优水解条件为:pH=6.0,T=50℃,加入0.2%(m/v)EDTA,蛋白酶Ⅱ用量为8000u/g蛋白,水解2h.而后对水解物的水解度(DH)进行测定,并计算大豆肽平均肽链长度(PCL),得出PCL在2～7间,水解物为大豆蛋白寡肽混合物.     

多酶复合水解法生产高水解度大豆寡肽的工艺优化

为提高大豆蛋白的水解度,生产低分子量大豆寡肽,采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解,并采用中心组合试验和Box-Behnken试验对复合酶的组成和酶解工艺进行了优化。研究结果表明:复合酶的最佳组成为碱性蛋白酶38.4%、风味蛋白酶27.2%、中性蛋白酶34.4%。最佳水解条件为pH 8.79、温度50.46℃、底物浓度10%g/ml,在此条件下酶解6 h,大豆分离蛋白的水解度可达28.7%,寡肽收率高达83.56%,所得大豆寡肽产品中肽含量高达81.3%,数均分子量低至850,各理化指标均符合国标GB/T22492-2008对一级大豆寡肽产品的质量要求。     

响应面法优化金带细鲹鱼肉蛋白质双酶酶解工艺

选用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶和菠萝蛋白酶对金带细鲹鱼蛋白质进行水解,以蛋白质的水解度为指标,筛选出酶解效果最好的酶类。通过响应面法对影响酶解效果的主要因素进行研究,并确定金带细鲹的最适酶解工艺。结果表明:对金带细鲹鱼酶解效果最好的方法是采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶进行双酶酶解,双酶最适酶解条件为:先加入胰蛋白酶,在45℃,p H8.0,加酶量2.0%(g/g),固液比1∶5(g/g)条件下酶解5h后,再加入木瓜蛋白酶,其加酶量1.6%(g/g)、温度60.76℃,p H 6.27,时间3.52h,在此条件下,实际测得蛋白质水解度可达43.23%。比胰蛋白酶单酶水解蛋白质水解度提高了12.72%。利用双酶法水解金带细鲹鱼蛋白质,能缩短生产周期,提高原料的利用率。     

蛋白酶水解豆渣制备大豆肽的研究

以大豆豆渣为原料,分别采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶对大豆豆渣进行水解制备大豆肽.研究了3种蛋白酶在不同温度、pH值、水解时间、酶浓度下水解大豆豆渣的最适酶反应条件,以及水解产物对酸豆乳发酵的影响.结果得出,实验豆渣蛋白质含量为10.4 g/(100 g);木瓜蛋白酶的最适水解条件是底物质量分数5％,酶浓度20 000 U/g,水解温度为50℃,pH7,水解6h,最大水解度可达87.31％;碱性蛋白酶的最适水解条件是底物质量分数5％,酶浓度15 000 U/g,水解温度为55℃,pH9,水解3h,最大水解度可达91.23％;中性蛋白酶的最适水解条件是底物质量分数5％,酶浓度15 000 U/g,水解温度为45℃,pH7,水解8h后达到最大水解度,最大水解度可达81.42％.     

液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。     

酸枣仁ACE抑制肽酶解工艺优化

本试验以脱脂后的酸枣仁渣通过碱溶酸沉法提取得到的酸枣仁蛋白为研究对象,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率和水解度为指标,筛选复合酶种类,采用响应面分析法,以中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例、pH、底物浓度、酶解温度、酶解时间为试验因素,优化酸枣仁ACE抑制肽最佳酶解工艺参数。结果表明:筛选出中性蛋白酶和碱性蛋白酶作为复合酶,最适酶添加量确定为6000 U/g,5个因素对ACE抑制率和水解度的影响由大到小的顺序为:酶解温度、酶解时间、pH、中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例、底物浓度。通过拟合方程分析,得到酸枣仁ACE抑制肽酶解的最佳工艺条件为:中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例为2.1:1、酶解温度为54 ℃,底物浓度为3.1%,pH为7.5,酶解时间为62 min。在此条件下,复合酶解酸枣仁蛋白酶解液的实际ACE抑制率和水解度分别为（79.46%±0.49%）和（31.45%±0.85%）,与理论值接近。制备得到酸枣仁ACE抑制肽与阳性对照组卡托普利对比,酸枣仁ACE抑制肽的ACE抑制率大小为（79.46%±0.49%）,与卡托普利的ACE抑制率偏差为（19.28%±0.12%）,证明酸枣仁ACE抑制肽具有显著降压效果。本研究证明了酸枣仁蛋白通过酶解有效得到ACE抑制肽并优化其酶解工艺,旨在为酸枣仁渣废物再利用提供参考方向和理论依据。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

两步水解法制备玉米-大豆复合抗氧化肽及其稳定性研究

采用麦芽粉和碱性蛋白酶Alcalase两步水解玉米醇溶蛋白和大豆分离蛋白的混合物(质量比1∶1)制备复合抗氧化肽,以水解度、可溶性蛋白含量和抗氧化活性为指标,对第二步Alcalase的水解条件进行优化,确定两步水解法制备复合抗氧化肽的最适条件。另外,对复合抗氧化肽相对分子质量分布、稳定性和氨基酸组成进行了研究。结果表明,制备复合抗氧化肽的最适条件为在底物质量分数10%、pH 5.5、50℃、酶(麦芽粉)底质量比30%条件下水解3 h后,再在底物质量分数10%、pH 8.5、60℃、酶(Alcalase)底质量比0.75%条件下继续水解3 h。在最适条件下,水解度、可溶性蛋白含量、羟自由基清除率和亚铁离子螯合率分别为36.32%、36.83 mg/mL、40.01%和86.83%,相对分子质量主要分布在300~6 500 Da (含量92.44%)范围内,必需氨基酸指数(EAAI)值为8.02(n=9),属于优质蛋白源。复合抗氧化肽具有热稳定性,在中性及碱性条件下稳定,但不耐受酸性(pH 3~5)、4℃贮存和反复冻融的加工条件。     

响应面法优化玉米黄粉蛋白的酶解工艺

利用pH-stat法测定碱性蛋白酶和中性蛋白酶对玉米黄粉蛋白的水解度,通过Box-Benhnken响应曲面法优化水解条件。根据单因素试验结果设计中心组合试验,以水解度为指标,采用响应面分析法确定最优水解工艺参数。结果表明：蛋白酶水解的最适条件为酶解pH11.10、酶解温度55.00℃、底物质量浓度112g/L、碱性蛋白酶与中性蛋白酶酶活单位比值5:1、加酶量48000U/g、酶解时间120min;在此条件下,玉米黄粉蛋白水解度实测值为30.23%,模型的预期值为30.84%。采用复合酶水解可提高玉米黄粉蛋白水解度,且工艺简单。     

酶法水解富硒平菇蛋白工艺优化

研究碱性蛋白酶对富硒平菇蛋白的水解作用,并优化其工艺条件。以恩施产地的富硒平菇粉为原料,选取碱性蛋白酶进行试验,研究料液比、加酶量、温度、pH、水解时间五个因素对碱性蛋白酶水解富硒平菇蛋白的影响。以水解度和蛋白质溶出率为评价指标,在单因素试验的基础上进行正交试验,优化碱性蛋白酶水解富硒平菇的工艺条件。结果表明,酶法水解富硒平菇蛋白的最佳工艺条件为:料液比1:30,碱性蛋白酶添加量为4200 U/g,水解温度55 ℃,pH为10.5,水解反应时间为4 h。在此条件下,富硒平菇蛋白水解度可达到28.46%,蛋白质溶出率为82.85%,水解所得蛋白肽中硒含量为2739.78 μg/g。本研究确定了碱性蛋白酶水解富硒平菇蛋白工艺的最佳条件。     

剪切乳化预处理对玉米蛋白酶解反应的促进作用

研究了剪切乳化预处理对黑曲霉酸性蛋白酶水解玉米蛋白反应的影响。实验结果表明，在酸性蛋白酶与玉米蛋白粉的质量比为10％，底物浓度为80g／L，反应温度为55℃，水解24h的条件下，当玉米蛋白粉未经高速剪切乳化预处理时，蛋白质溶出率为62．79％，所得的水解产物中分子量小于1000u的寡肽占45％；而当玉米蛋白粉经7000r／min高速剪切乳化预处理1h后，蛋白质溶出率提高到88．47％，所得的水解产物中分子质量小于1000u的寡肽占78％。利用高效液相色谱法测定了玉米蛋白粉酶解产物的氨基酸组成，发现高速剪切乳化预处理能增加水解产物中支链氨基酸的含量，有利于生产高F值寡肽。     

Protex-6L碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白的工艺研究

选用Protex-6L蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解生成肽和氨基酸。以水解度为考察指标,对其酶解工艺进行优化。基于单因素实验,考察了酶解参数:pH、酶解温度、底物浓度、加酶量、酶解时间等对酶解的影响,利用designexpert软件设计响应面对酶解条件进行优化分析,并在最优条件下通过SephadexG-75分析水解产物的分子量分布。结果表明:pH8.85、酶解温度57.34℃、底物质量分数7.00%、加酶量6884.36U/g、酶解时间4.19h,此条件下的绿豆分离蛋白的水解度(DH)为36.60%。水解得到的小肽分子量大部分都小于4000u。     

氨肽酶与中性蛋白酶协同水解大豆分离蛋白的研究

以大豆分离蛋白为底物,游离氨基酸含量、多肽分布、水解度为指标,氨肽酶ProteAXG为对照,开展中性蛋白酶和氨肽酶双酶协同水解的研究。在底物质量浓度6 g/dL,中性蛋白酶添加量5000 U/g,氨肽酶添加量9.75×105U/g,pH 8.5,温度50℃,水解4 h后,水解液中游离氨基酸含量13.6 mg/mL,多肽相对分子质量在1100以下,其中600左右的多肽约占16%,二肽三肽约占75%,水解度达50.8%。氨肽酶与中性蛋白酶优化后,水解度达62%。结果表明:该氨肽酶无论单独或与中性蛋白酶组合水解,都能达到较为深度的水解效果。