化瘀通络解毒颗粒对肝纤维化大鼠肝脏PDGFB、α-SMA表达的影响

目的探讨化瘀通络解毒颗粒对肝纤维化大鼠肝脏肝组织血小板衍生生长因子(PDGFB),α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响及其抗肝纤维化的作用机制。方法采用四氯化碳(CCl4)复合因素制备大鼠肝纤维化模型,予化瘀通络解毒颗粒进行干预,造模8 w后取肝组织,用免疫组织化学方法评价PDGFB、α-SMA的表达情况。结果模型组、阳性对照组及治疗组动物肝组织中出现不同程度的肝纤维化病变,PDGFB、α-SMA表达水平升高,其中模型组升高最明显。化瘀通络解毒颗粒组各项指标与模型组相比均有明显改善(均P<0.05)。结论化瘀通络解毒颗粒显著降低肝纤维化大鼠肝组织PDGFB、α-SMA的表达,其抗肝纤维作用机制可能与抑制肝星状细胞活化及肝脏胶原合成有关。     

血小板源生长因子B及其受体β与支气管哮喘血管再生与重塑

目的 进一步明确支气管哮喘时血管相关因子血小板源生长因子B(PDGFB)和血小板源生长因子受体β(PDGFRβ)在支气管哮喘小鼠模型气管及肺组织中的变化和作用.方法 在建立小鼠支气管哮喘模型的基础上,应用免疫荧光染色和HE染色计数血管平滑肌细胞数量变化,应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测气管和肺组织PDGFB及其受体(PDGFB/PDGFRβ)mRNA表达情况,应用Western blot方法检测PDGFB/PDGFRβ蛋白水平.结果 ①血管平滑肌细胞数量在支气管哮喘急性期减少,在慢性期又恢复正常;②应用RT-PCR技术及琼脂糖凝胶电泳,PDGFB mRNA及PDGFRβ mRNA在正常气管未检测到,而在慢性延长期哮喘小鼠气管组织PDGFB mRNA显示出清晰的条带.周围肺组织在正常小鼠也表达PDGFB mRNA,哮喘小鼠肺组织表达增强,在慢性延长期表达明显增加.应用Western blot蛋白检测技术,哮喘小鼠气管及肺组织PDGFB及PDGFRβ蛋白表达情况与基因检测结果相一致.结论 PDGFB和PDGFRβ基因与蛋白表达水平在支气管哮喘气管及肺组织均增加,特别在慢性延长期,PDGFB和PDGFRβ表达改变是血管平滑肌细胞数量变化的重要因素.PDGFB和PDGFRβ系统在支气管哮喘气道血管再生和重塑过程中可能起着重要的作用.     

血小板源生长因子B及其受体β与支气管哮喘血管再生与重塑

目的进一步明确支气管哮喘时血管相关因子血小板源生长因子B（PDGFB）和血小板源生长因子受体β（PDGFRβ）在支气管哮喘小鼠模型气管及肺组织中的变化和作用。方法在建立小鼠支气管哮喘模型的基础上,应用免疫荧光染色和HE染色计数血管平滑肌细胞数量变化,应用逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）方法检测气管和肺组织PDGFB及其受体（PDGFB／PDGFRβ）mRNA表达情况,应用Westernblot方法检测PDGFB／PDGFRβ蛋白水平。结果①血管平滑肌细胞数量在支气管哮喘急性期减少,在慢性期又恢复正常;②应用RT—PCR技术及琼脂糖凝胶电泳,PDGFBmRNA及PDGFRβmRNA在正常气管未检测到,而在慢性延长期哮喘小鼠气管组织PDGFBmRNA显示出清晰的条带。周围肺组织在正常小鼠也表达PDGFBmRNA,哮喘小鼠肺组织表达增强,在慢性延长期表达明显增加。应用Westernblot蛋白检测技术,哮喘小鼠气管及肺组织PDGFB及PDGFRβ蛋白表达情况与基因检测结果相一致。结论PDGFB和PDGFRβ基因与蛋白表达水平在支气管哮喘气管及肺组织均增加,特别在慢性延长期,PDGFB和PDGFRβ表达改变是血管平滑肌细胞数量变化的重要因素。PDGFB和PDGFRβ系统在支气管哮喘气道血管再生和重塑过程中可能起着重要的作用。     

糖尿病大鼠心力衰竭时心肌细胞凋亡的研究

目的探讨糖尿病大鼠心力衰竭时是否存在心肌细胞凋亡.方法建立STZ糖尿病大鼠模型,饲养12周,经心功能检测后确认为糖尿病心力衰竭的大鼠,采用TUNEL法及TEM法,检测糖尿病大鼠左室心肌的凋亡细胞.结果 糖尿病大鼠出现心功能异常并可见凋亡的心肌细胞,而对照组左室心肌组织中未见心肌细胞凋亡.结论心肌细胞凋亡与糖尿病大鼠心力衰竭密切相关.     

血管紧张素Ⅳ对糖尿病大鼠胆碱乙酰转移酶表达及认知功能的影响

目的 观察血管紧张素Ⅳ(AngⅣ)对糖尿病大鼠海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达及认知功能的影响.方法 38只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病+AngⅣ组,建立STZ糖尿病大鼠模型, Morris水迷宫测试大鼠学习和记忆能力,免疫组化观察大鼠海马ChAT的表达,RT-PCR检测ChAT mRNA水平的表达.结果 糖尿病+ AngⅣ组海马chAT及其mRNA表达与糖尿病组相比明显增高(P<0.05),糖尿病+ AngⅣ组大鼠学习和记忆成绩也明显优于糖尿病组(P<0.05).结论 AngⅣ对糖尿病大鼠认知功能有改善作用,其机制可能与ChAT表达增加有关.     

糖尿病大鼠胃肠功能紊乱时结肠组织中Cajal间质细胞的表达

目的观察糖尿病大鼠胃肠功能紊乱时结肠组织内Cajal间质细胞的分布及表达变化,探讨Cajal间质细胞在糖尿病胃肠功能紊乱发病机制中的作用。方法30只SD大鼠随机分为两组,糖尿病组20只,正常对照组10只。糖尿病组大鼠用链脲佐菌素单剂量腹腔注射建立糖尿病模型,对照组注射等量枸橼酸缓冲液。两组大鼠饲养6周后处死,计算胃肠推进率并且收集结肠组织标本。用免疫组化方法观察Cajal间质细胞在两组大鼠结肠组织内的分布和表达,用W estern b lot方法检测c-k it蛋白在两组大鼠结肠内的表达。结果糖尿病组大鼠胃肠推进率较对照组明显降低（P〈0.05）。免疫组化和W estern b lot检测都显示糖尿病大鼠结肠组织内Cajal间质细胞的表达较正常大鼠明显减少（P均〈0.05）。结论糖尿病大鼠结肠组织内Cajal间质细胞表达减少,推测与糖尿病大鼠胃肠功能紊乱有一定相关性。     

大鼠实验性糖尿病的一种亚型

我们在制备大鼠糖尿病模型的实验中,其中一组动物注射链脲霉素后表现的糖尿病症状与成模糖尿病大鼠的表现有所不同,颇似临床隐性期糖尿病,我们将其称为糖尿病亚型。本文对此类大鼠糖尿病的症状特点与糖尿病成模大鼠的区别及其形成原因作一简单报道。 一、实验动物:受体为纯系DA大鼠,供体为纯系DA大鼠的仔鼠(生后5日内),本院动物室供给,体重250mg左右,雄性。     

应用体视学方法比较糖尿病大鼠和正常大鼠海马的体积

目的用体视学方法比较正常大鼠和糖尿病大鼠的海马体积。方法通过链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,成模12 w时,Morris水迷宫测试大鼠的空间学习和记忆能力,体视学方法测量大鼠海马体积。结果 Morris水迷宫测试中,糖尿病大鼠组潜伏期21.10 s(10.95~29.03 s)较正常大鼠组13.16 s(9.97~21.34 s)明显延长(P0.05),糖尿病组中心区停留时间百分比(15.03±3.36)%,较正常大鼠组(25.33±1.91)%明显下降(P0.05)。糖尿病大鼠海马平均体积小于正常大鼠组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论糖尿病大鼠海马体积和正常大鼠相比无显著性变化,但存在明显的认知障碍。     

丝胶对2型糖尿病大鼠坐骨神经神经微丝蛋白表达的影响

目的观察丝胶对2型糖尿病大鼠坐骨神经神经微丝蛋白(NFP)表达的作用。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型并给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃。SP免疫组织化学染色法观察大鼠坐骨神经NFP的表达。结果 NFP免疫阳性产物为棕黄色,位于坐骨神经的轴索。与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠坐骨神经NFP的表达明显降低(P<0.01);丝胶治疗组大鼠坐骨神经NFP的表达明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.05)。结论丝胶可通过上调糖尿病模型大鼠坐骨神经NFP的表达,发挥对糖尿病坐骨神经损伤的保护作用。     

糖尿病大鼠磷酸化表皮生长因子受体表达的改变及其与隐形皮肤损害的关系

目的探讨糖尿病大鼠皮肤的隐形损害现象,以及磷酸化的表皮生长因子受体（P-EGFR）在糖尿病皮肤中的表达与这种隐形损害的关系。方法对比观察不同病期的糖尿病大鼠模型背部和尾巴皮肤组织学改变以及超微结构变化,用免疫组化及蛋白印迹的方法检测P-EGFR在糖尿病大鼠皮肤中的表达。结果糖尿病大鼠皮肤存在组织学和超微结构的改变,p-EGFR在皮肤组织中的表达下降。结论P-EGFR在糖尿病大鼠皮肤组织中表达下调可能与糖尿病皮肤损害的发生有关。     

血小板源生长因子在糖尿病大鼠心肌的表达及意义

目的探讨血小板源生长因子-B（PDGF-B）在糖尿病心肌病发病机制中的作用。方法8周龄雄性sD大鼠60只,随机分为对照组30只、糖尿病组30只。链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射建立糖尿病模型,每2周测量血糖、体重。在病程4周、8周、12周分别从两组大鼠中随机选择6只,称量并计算心体比（H／B）和左室重量指数（LVMI）。电镜观察比较12周糖尿病组与对照组大鼠心肌超微结构,光镜观察比较两组冠脉病变。RT～PCR比较不同病程各组大鼠心肌PDGF—B、纤维连接蛋白（FN）、Ⅲ型胶原（Colm）的mRNA表达情况。结果STZ诱导糖尿病SD大鼠在病程12周糖尿病心肌病已形成。在病程4周、8周、12周,糖尿病组H／B、LVMI逐渐增加,心肌PDGF—B mRNA表达显著上调（P〈0．01）,随着病程延长,呈逐渐增高趋势,与FN、Col Ⅲ表达进行性增高相平行。PDGF—B与FN、Col ⅢmRNA表达呈明显正相关（r=0．766,0．794,均P〈0．01）。结论糖尿病大鼠心肌PDGF—B表达上调与细胞外基质（ECM）的积聚密切相关,在糖尿病心肌病形成过程中起重要作用。     

糖尿病大鼠肾脏一氧化氮系统基因表达的研究

目的 研究糖尿病大鼠肾脏一氧化氮系统基因的表达。方法 观察了１２周ＳＴＺ－糖尿病大鼠肾脏皮质一氧化氮（ＮＯ）含量及一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活力,并应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测了肾脏皮质诱生型一氧化氮合成酶ｍＲＮＡ水平的改变。结果 糖尿病大鼠肾脏皮质ＮＯＳ活性及ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ水平明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,然而ＮＯ含量却反而下降（Ｐ〈０．０５）。结论 糖尿病大鼠肾脏一氧化氮合成障碍,灭活加速     

糖尿病鼠肾小管周围新生血管与促血管生长因子关系研究

目的探讨促血管生成素-2(Ang-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病肾脏血管新生中的作用及其意义。方法2004年3月至2005年3月在四川大学华西医院用SD大鼠建立链唑霉素(STZ)诱导的糖尿病肾病模型,定量分析肾脏VEGF和Ang-2的表达变化,用逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测肾脏VEGF、Ang-2的mRNA的表达。结果糖尿病组肾脏VEGFmRNA表达从2周开始持续上调,16～20周达高峰;免疫组化显示糖尿病组各时点肾小管的VEGF着染均强于对照组;糖尿病组仅于16周和20周时探及肾组织Ang-2mRNA表达,12～24周免疫组化显示皮质区管周Ang-2着染管周微血管,整个实验期间对照组未探及Ang-2mRNA和蛋白表达;VEGF与Ang-2的改变呈正相关。结论糖尿病肾脏中后期皮质区存在Ang-2着染的新生管周微血管,VEGF与Ang-2参与糖尿病肾脏新生血管生成。     

伊贝沙坦对2型糖尿病大鼠肾皮质fractalkine表达的影响

目的研究血管紧张素受体Ⅱ（ATⅡ）的AT1受体阻滞剂伊贝沙坦对2型糖尿病（T2DM）大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响。方法制备T2DM大鼠模型,随机分为正常对照组、糖尿病组及伊贝沙坦治疗组。分别用半定量RT-PCR和免疫组化法检测肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达。结果糖尿病组血清糖基化终产物-肽、尿素氮（BUN）、24h尿总蛋白（24hUPro）、肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达均明显高于对照组;伊贝沙坦治疗组血清BUN、24hUPro、肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达则明显低于糖尿病组。结论伊贝沙坦可能通过抑制肾皮质fractalkine表达发挥其肾保护作用。     

糖基化终末产物对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶2活性和表达的影响

的　研究糖基化终末产物 (AGEs)对肾皮质基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )活性及其mRNA表达的影响。方法　用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型。大鼠血清蛋白与 0 .5mol/L葡萄糖孵育制备AGEs,分静脉注射AGEs(AGEs组 )、静脉注射大鼠正常血清 (阴性对照组 )和未注射大鼠 (对照组 ) 3组进行观察。ELISA测定肾皮质和血清AGEs含量 ,RT PCR检测MMP 2、金属蛋白酶组织抑制物 2 (TIMP 2 )mRNA表达水平 ,酶谱法测定MMP 2活性。结果　糖尿病大鼠肾皮质AGEs含量明显升高 ,MMP 2mRNA表达下降 ,TIMP 2mRNA表达上调 (均P <0 .0 1)。AGEs处理组大鼠肾皮质AGEs含量明显升高 (P <0 .0 1) ,MMP 2活性也明显下降 (均P <0 .0 5)。结论　AGEs通过降低大鼠肾皮质MMP 2的活性及其mRNA表达及增加TIMP 2mRNA表达 ,由此减少肾小球细胞外基质 (ECM )降解 ,可能是导致糖尿病肾病ECM积聚的原因之一     

转化生长因子βI型受体在糖尿病大鼠肾皮质中的表达及苯那普利对其 …

目的 研究转化生长因子βⅠ型受体（ＴＧＦβＲⅠ）在糖尿病大鼠肾皮质中的表达及血管紧张素转换酶抑制剂苯那利普利对其调节作用。方法 纯种雄性成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分单侧肾切除组（Ｃ组）,糖尿病组（Ｄ组）和糖尿病苯那普利治疗组（ＤＢ组）,给药４周末观察各组血清、血肌酐水平、体重、肾重和肾组织蛋白含量及血浆、肾皮质、髓质血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性的变化;分别采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、Ｎ     

非诺贝特对2型糖尿病大鼠肾皮质纤溶酶原激活物抑制物1表达的影响

小剂量链脲佐菌素加高脂饮食诱导的糖尿病大鼠给予非诺贝特灌胃8周，检测显示糖尿病大鼠肾皮质纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）mRNA表达明显下降，同时肾小球肥大部分改善，提示非诺贝特对糖尿病肾脏的保护作用可能与其下调肾皮质PAI-1基因表达有关。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响

目的 观察罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响.方法 SD大鼠30只,10只分至正常对照组,20只腹腔注射小剂量链脲佐菌素结合高能量饲料制备2型糖尿病大鼠模型,然后分至糖尿病组(n=10)及罗格列酮干预组(n=10).运用流动注射分析法测定血清糖基化终产物-肽(advanced glycosylation end products-peptide,AGE-P),应用半定量逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学法分别检测肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达.选用单因素方差分析进行数据统计分析.结果 糖尿病组大鼠血清AGE-P[(2.87±0.21)U/ml]、肾皮质fractalkine mRNA(1.41±0.03)及fractalkine蛋白表达(0.79±0.04)均明显高于对照组[分别为(0.90±0.13)U/ml、0.85±0.04及0.46±0.03,P<0.01];罗格列酮干预组大鼠血清AGE-P[(1.45±0.15)U/ml]、肾皮质fractalkine mRNA(1.00±0.05)及fractalkine蛋白表达(0.67±0.03)则明显低于糖尿病组(P<0.01).结论 罗格列酮可能通过抑制肾皮质fractalkine表达发挥其肾脏保护作用.     

Effects of angiotensin II on insulin receptor binding and mRNA levels in normal and diabetic rats

Summary Both the density and level of mRNA encoding insulin receptors in the kidney are inversely related to the dietary sodium content, suggesting a feedback mechanism that limits the insulin-induced sodium retention when extracellular fluid volume is expanded. Because angiotensin II affects tissue sensitivity to insulin in humans, we investigated whether angiotensin II affects insulin receptor binding and mRNA levels in the kidney, liver, and renal arteries of normal rats and rats with streptozotocin-induced diabetes mellitus. Non-diabetic and diabetic rats were infused for 7 days with either vehicle or angiotensin II at a rate of 200 ng · kg⁻¹· min⁻¹. In a separate experiment, normal rats were treated with an angiotensin converting enzyme inhibitor (captopril, 100 mg/dl in the drinking water) or vehicle for 7 days. Regional analysis of insulin receptor binding in the kidney and renal arteries was performed by an in situ technique using computerized microdensitometry and emulsion autoradiography. Insulin receptor mRNA levels were determined in renal and hepatic tissue by Northern blot hybridization and normalized with 28S rRNA. No differences in blood pressure were observed among diabetic and non-diabetic rats infused with either vehicle or angiotensin II, whereas captopril-treated rats had significantly lower blood pressure levels than their respective controls. Angiotensin II significantly decreased plasma renin concentration in both non-diabetic and diabetic rats. Insulin receptor number was significantly greater in the renal cortex of diabetic rats than in non-diabetics, whereas no significant differences were found in the outer medulla, inner medulla, or renal arteries. Angiotensin II infusion did not affect either the number or affinity of insulin receptors in any of the renal regions studied. Insulin receptor mRNA levels were significantly greater in the kidney and liver of diabetic rats than in non-diabetics and were not affected by angiotensin II infusion. Similar to angiotensin II infusion, captopril treatment did not affect either renal insulin receptor binding or mRNA levels. Thus, diabetic rats have increased insulin receptor binding and mRNA levels in comparison to non-diabetic rats. Angiotensin II infusion and captopril treatment do not affect insulin receptor binding and mRNA levels in the kidney, arguing against a role for this peptide in the modulation of renal sensitivity to insulin. [Diabetologia (1997) 40: 770–777] Received 14 November 1996 and in revised form: 4 March 1997