耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性、mecA及blaTEM基因检测

目的了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)耐药性、mecA及blaTEM基因存在状况.方法采用ATB Staph药敏试验板微量肉汤法对40株MRSA进行15种抗菌药物敏感性测定,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测mecA和blaTEM基因.结果所有菌株对万古霉素、替考拉宁、呋西地酸和奎奴普丁-达福普汀均敏感,对青霉素、庆大霉素、红霉素、克林霉素、四环素、诺氟沙星和左旋沙星均耐药,对利福平、呋喃妥因、复方新诺明和米诺四环素的耐药率分别为5.0%、2.5%、97.5%和97.5%.mecA和blaTEM基因阳性率分别100.0%和37.5%.结论临床分离的MRSA多重耐药性十分严重;金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药均由mecA基因介导,blaTEM基因阳性率较高;治疗MRSA引起的感染,应以药敏试验结果为依据.     

医院感染MRSA的mecA基因和耐消毒剂基因qacA的流行病学研究

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因和耐消毒剂基因qacA携带情况。方法采用全自动微生物分析系统VITEK2-COMPACT及配套鉴定卡、药敏卡对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行鉴定和药敏试验．并用WHONET5．6软件进行数据统计分析;用PCR扩增mecA基因和qacA基因,并对阳性基因进行测序分析。结果2009年1月至12月共分离金黄色葡萄球菌260株,其中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）140株f53．8％1．对其中50株进行mecA基因和qacA基因检测,发现mecA基因阳性50株,阳性率为100％。未检出qacA基因。结论50株MRSA菌株均携带meCA基因,均未检测到耐消毒剂基风ⅡacA。     

耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌

英国的Jevons于1961年首次证实了金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药性。耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus,MRSA)除了对甲氧西林耐药外,对其他所有β-内酰胺类和头孢类抗生素耐药;MRSA还可通过多种机制,对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟喹诺酮类、磺胺类、利福平类等产生不同程度的耐药,因此MRSA是多重耐药菌。由金黄色葡萄球菌染色体编码的mecA基因,是MRSA主要的耐药表达机制之一。     

金黄色葡萄球菌基因检测及耐药性分析

目的 了解清远地区金黄色葡萄球菌(SA)的耐药性及耐药基因的分布情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 收集2018年7月至2019年7月清远市人民医院检验科微生物室分离的80株SA,采用BD PhoenixTM100全自动微生物鉴定和药敏试验系统以及纸片扩散法进行细菌鉴定与药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因.结果 80株SA中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)各40株.在抗菌药物中,SA对青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸的耐药率较高,分别为95.00％、55.00％、55.00％,其中MRSA对这三种抗菌药物的耐药率均为100.00％,未发现SA对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁和替加环素耐药.80株SA中均未检测到mecC与sasX基因;MSSA中mecA基因的阳性率为20.00％(8/40),PVL基因的阳性率为7.50％(3/40);MRSA中mecA基因的阳性率为100.00％(40/40),PVL基因的阳性率为20.00％(8/40).结论 该院耐药基因mecA、PVL检出率较高,可能是产生耐药的重要原因,临床上应予以足够重视.     

153株金黄色葡萄球菌的分布及耐药性分析

目的分析近两年医院住院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）分离株的临床分布及耐药性特点。方法2010年1月-2012年1月从临床标本中分离的153株金黄色葡萄球菌,进行分离鉴定及药敏试验。结果153椿金黄色葡萄球菌主要来自痰液,占66．O％;其次为伤口分泌物占17．O％。153株金黄色葡萄球菌中,检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌75株,检出率为49．O％。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对临床常用杭茼药物具有较高耐药性,其中对膏霉素、氨苄青霉素、苯唑青霉素、红霉素、氯林可霉素、四环素、庆大霉素和环丙沙星的耐药率均高于90％;对万古霉素的耐药率为0。结论临床分离的金黄色葡萄球茼对临床常用抗菌药物均有较高的耐药性,尤其MRSA对常用抗菌药物表现为多药耐药,应引起临床高度重视,合理使用抗生素。     

前列腺液中耐甲氧西林金黄色葡菌球菌耐药分析

目的检测前列腺液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对争内酰胺类抗生素、头孢菌素、氨基糖甙类、大环内酯类以及其他抗生素药物的耐药性。方法在前列腺液中分离出99株金黄色葡萄球菌。应用1μg／片苯唑青霉素检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）76株，采用纸片扩散法测定细菌对15种抗生素（包括苯唑青霉素）的敏感性。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRsA）对青霉素、红霉素、苯唑青霉素、庆大霉素、四环素、环丙沙星、氯霉素高度耐药，耐药率分别为100．00％、97．37％、96．05％、84．21％、82．89％、81．58％、81．58％。结论泸州地区前列腺液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种抗生素耐药，对万古霉素的敏感性达100．00％。建议临床医师参照实验室提供的药敏试验结果，合理选用治疗MRSA的抗生素。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的耐药情况。方法对临床分离的金黄色葡萄球菌进行耐药性分析。结果共分离出金黄色葡萄球菌137株，MRSA的分离率为37．2％。MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）对常用抗生素的耐药率明显不同，未发现万古霉素敏感性降低的金黄色葡萄球菌。结论治疗金黄色葡萄球菌感染时应筛查MRSA，根据药敏试验结果选择抗菌药物，延缓细菌耐药性的产生，控制耐药菌株的播散和流行。     

金黄色葡萄球菌63株耐药性分析

目的探讨金黄色葡萄球菌分布及耐药性。方法采用法国生物梅里埃ATB STAPH5药敏卡，对金黄色葡萄球菌进行耐药性检测。结果63株金黄色葡萄球菌中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）33株，占52．4％，对青霉素、红霉素、庆大霉素、诺氟沙星、氯林可霉素和四环素均100％耐药，对利福平、左旋沙星表现为较高耐药率；甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）30株，对青霉素、红霉素和庆大霉素的耐药率都在80％以上，两者对临床常用抗菌药物的耐药率比较有一定差异。结论金黄色葡萄球菌对抗生素表现为多重耐药，临床应注意合理使用抗生素。     

中国51家医院2000年葡萄球菌属临床分离株的耐药性

目的：监测全国51家医院2000年葡萄球菌属临床分离株耐药性，以探讨葡萄球菌属临床分离株的耐药性现状。方法；药敏试验采用纸片扩散法（K－B法）。结果：（1）在2191株金黄色葡萄球菌（SAU）中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）652株，分离率为29．8％，3619株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）中，2595株中甲氧西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS），分离率为71．7％。（2）MRSA、MRCNS对环丙沙星、红霉素、庆大霉素、复方磺胺甲恶唑、四环素、氯霉素和克林霉素的耐药率分别为76．0％，91．0％，72．0％，55．0％，72．0％，44．0％，74．0％和55．2％，82．0％，32．2％，77．4％，58．8％，45．1％，52．7％；（3）甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）对环丙沙星，氯霉素，复方磺胺甲恶唑和四环素的耐药率较甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）为高，但仍对临床常用抗生素环丙沙星，庆大霉素，氯霉素，克林霉素有较好的敏感性，耐药率分别为24．3％，7．5％，31．3％，24．4％。结论：加强对葡萄球菌耐药性的临床 是非常必要的。     

金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的相关性研究

目的研究携带TSST-1和PVL基因的金黄色葡萄球菌耐药特点、分布特征及与致病性的关系。方法临床收集74株金黄色葡萄球菌,采用PCR法检测TSST-1、PVL和mecA基因,纸片扩散法进行17种抗菌剂的耐药性检测。结果 74株金黄色葡萄球菌中mecA基因检出率为55.4%,其中22株检出PVL基因(30.3%),PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为15株(36.6%),甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)为7株(21.2%),两者间差异无统计学意义(P>0.05)。5株金黄色葡萄球菌中检出TSST-1基因(6.3%),均为MRSA。MRSA耐药性严重,并呈多重耐药性,携带基因PVL和TSST-1的MRSA除对万古霉素敏感外,对其他抗菌剂均耐药。结论携带基因TSST-1和PVL的金黄色葡萄球菌耐药性及致病力更强,增加了临床抗感染治疗的难度。     

多重聚合酶链反应检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的应用一种敏感快速的多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）,检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）和凝固酶阴性葡萄球菌（ＭＲＣＮＳ）。方法临床分离的北京地区金黄色葡萄球菌１２３株,ＭＲＣＮＳ１２２株,用溶壁素和蛋白酶Ｋ制备模板ＤＮＡ,设计葡萄球菌甲氧西林耐药的决定基因,金黄色葡萄球菌独有的一个辅助基因和细菌中均有的１６ＳｒＲＮＡ基因引物,通过多重ＰＣＲ技术对标本进行扩增。结果１２３株金黄色葡萄球菌的ｆｅｍＡ基因１００％（１２３／１２３）阳性,ｍｅｃＡ基因阳性的占１８．７％（２３／１２３）,１２２株ＭＲＣＮＳ的ｆｅｍＡ１００％（１２２／１２２）阴性,ｍｅｃＡ阳性的占２４．６％（３０／１２２）。１６ＳｒＲＮＡ基因片断在多重ＰＣＲ中作为内部参照避免了假阴性结果的出现。结论建立的多重ＰＣＲ技术检测ＭＲＳＡ和ＭＲＣＮＳ具有敏感、快速、特异的特点,是一种可靠的实验诊断手段。     

金黄色葡萄球菌致病毒素基因与耐药性的相关性研究

目的研究金黄色葡萄球菌的致病毒素基因与耐药性的关系.方法对临床收集的74株金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因 mecA 和致病毒素基因中毒休克综合征毒素‐1(TSST‐1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验,对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株做 D‐试验.结果74株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为55.4%. MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因敏感外,对其他抗菌药物均高度耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对抗药物的耐药性较轻,两组间的耐药性差异有统计学意义(P<0.05). PVL 基因阳性的 MRSA 耐药性与 PVL 基因阴性的 MRSA 比较,两组间耐药性差异无统计学意义(P>0.05). PVL 基因阳性的 MSSA 耐药性比不携带 PVL 基因的 MSSA 强,两者间差异有统计学意义(P<0.05).携带 TSST‐1基因的 MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因无耐药菌株外,对其他16种抗菌药物100%耐药. D‐试验阳性菌株占所检菌株的10.8%,占红霉素耐药、克林霉素敏感菌株的88.9%.只有1株 PVL 基因阳性的 MRSA D‐试验阳性.结论MRSA 的耐药性非常严重,表现为对多种抗菌药物同时耐药,并且具有较高的红霉素诱导克林霉素耐药率;PVL 和 TSST‐1可增强金黄色葡萄球菌的致病力及 MSSA 的耐药性,增加了临床抗感染治疗的难度.     

Detection and expression of methicillin/oxacillin resistance in multidrug-resistant and non-multidrug-resistant Staphylococcus aureus in Central Sydney,Australia

Ninety clinical Staphylococcus aureus isolates from separate patients were examined phenotypically and genotypically for susceptibility to methicillin/oxacillin. Thirty were methicillin/oxacillin susceptible and 60 were methicillin and oxacillin resistant (MRSA). The 60 MRSA isolates examined were subdivided into two groups according to their antibiotic profiles and comprised 30 non-multidrug-resistant (NMDR) isolates, resistant to less than two non-beta-lactam antibiotics, and 30 multidrug-resistant (MDR) isolates, resistant to three or more non-beta-lactam antibiotics. Phenotypic and genotypic analysis of methicillin/oxacillin showed that despite use of the guidelines published by the NCCLS for the testing of S. aureus susceptibility to methicillin/oxacillin, MIC values of some NMDR MRSA isolates fell below the NCCLS-recommended breakpoints. Etest strips failed to detect two NMDR MRSA isolates tested with oxacillin and four tested with methicillin. Lowering the NCCLS-recommended oxacillin screen agar concentration from 6 to 2 mg/L and temperature of incubation to 30 degrees C, improved the specificity and sensitivity of NMDR MRSA detection from 87% to 100%. On PFGE analysis these NMDR MRSA strains were genotypically different. Genotypic tests, such as multiplex PCR for the mecA/nuc genes and DNA hybridization for the mecA gene, or phenotypic monoclonal antibody-based tests to detect penicillin-binding protein 2a (PBP2a) offer advantages for problematic isolates in detecting or confirming low-level phenotypic heterogeneous mecA expression of oxacillin and methicillin resistance in NMDR MRSA.     

虎杖对3种耐药细菌的抗菌效果分析

目的观察中药虎杖不同含量熬制成中药汤对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、多重耐药铜绿假单胞菌及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的抗菌效果,并进行分析。方法收集攀枝花市十九冶医院住院患者分离的45株MRSA,其中非meca基因介导的25株、meca基因介导的20株,20株多重耐药铜绿假单胞菌,65株产ESBLs大肠埃希菌分别配成0.5个麦氏点的菌悬液,分别用20、30、40、50、60、70g虎杖熬成不同含量的中药汤,采用琼脂稀释法制备平板,在制备的平板上用打孔的方法接种细菌。结果 25株非meca基因介导的MRSA和20株多重耐药的铜绿假单胞菌在30g含量以下虎杖中药汤制备的平板中均生长、40g及40g以上含量虎杖中药汤制备的平板中均不生长;20株meca基因介导的MRSA在50g含量以下虎杖中药汤制备的平板中均生长、50g及50g以上含量虎杖中药汤制备的平板中不生长;65株产ESBLs大肠埃希菌在所有含量虎杖中药汤制备的平板中均生长。结论 40g及40g以上含量的虎杖中药汤可以抑制非meca基因介导的MRSA和多重耐药的铜绿假单胞菌的生长,具有抗菌效果;50g及50g以上含量虎杖中药汤可以抑制meca基因介导的MRSA的生长,具有抗菌效果;所有含量的虎杖中药汤均不能抑制产ESBLs大肠埃希菌,对产ESBLs大肠埃希菌不具有抗菌效果。     

MRSA和MSSA氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因检测

目的比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(M SSA)对氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因携带的不同。方法运用K-B法和PCR方法分别对16株M RSA和24株M SSA 4种氨基糖苷药物(丁胺卡那霉素、奈替米星、庆大霉素、妥布霉素)耐药性和氨基糖苷类耐药基因进行检测。结果M RSA与M SSA对氨基糖苷类药物耐药率分别为93.8%,62.5%,100%,100%和0.0%,0.0%,29.2%,33.3%,三种氨基糖苷类药物耐药基因aac(6')/aph(2')、aph(3')III、an t(4',4')携带率分别为68.8%,62.5%,6.3%和29.2%,8.3%,0.0%。结论M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物有着更高的耐药性和耐药基因携带率。M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物存在着更为复杂的耐药机制。     

皖北地区MRSA耐药基因研究

目的了解皖北地区临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)所携带5类药物的7种耐药基因状况,并探讨其耐药特性。方法应用PCR方法检测64株MRSA中mecA、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、tetM耐药基因。结果 64株MRSA中,mecA基因携带率为100%,tetM、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB基因携带率分别为95.3%、81.3%、34.4%、15.6%、39.1%、28.1%;基因组合以mecA+tetM+gyrA模式最多,为26.5%。MRSA对万古霉素无耐药,对氯霉素、磷霉素、利福平的耐药性较低,对多种药物表现出较高的耐药性。结论皖北地区MRSA中,mecA、tetM、gyrA基因携带率较高,而qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB基因携带率相对较低。     

医院与社区获得性感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因初步研究

目的比较耐消毒剂基因在本地区医院与社区获得性感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）中的流行状态。方法从临床标本中分离出的MRSA菌株分为医院与社区获得性感染2组,用聚合酶链反应（PCR）检测耐消毒剂基因qacA/B,并对组间检出率进行比较。结果40株医院获得性感染MRSA中qacA/B阳性19株,20株社区获得性感染MRSA中qacA/B阳性2株,2组耐消毒剂基因的检出率分别为47.5%和10.0%,组间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论医院获得性感染MRSA耐消毒剂基因的携带率高于社区获得性感染MRSA。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌产色培养基临床应用评估

目的通过头孢西丁纸片法、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）产色筛选平板法和聚合酶链反应（PCR）检测MRSA,评估MRSA产色筛选平板的敏感性和特异性。方法收集仁济医院2008年8月至9月临床分离的金黄色葡萄球菌68株,分别采用头孢西丁纸片法、MRSA产色筛选平板法和PCR检测MRSA,以PCR检测femA基因和mecA基因结果为金标准,比较MRSA产色筛选平板的敏感性和特异性。结果甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）除万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺外,对其他11种抗菌药物的敏感率明显高于MRSA。68株金黄色葡萄球菌中,头孢西丁纸片法筛选出50株MRSA,产色平板法筛选出51株MRSA,PCR检测到51株mecA基因阳性,MRSA产色筛选平板结果和mecA基因检测结果符合率为100%。结论MRSA产色筛选平板可用于临床快速检测MRSA。     

金黄色葡萄球菌临床分离株spa分型和耐药特征研究

目的研究临床分离金葡菌的耐药性和分子特征。方法对2011年511月在成都某医院分离的56株金葡菌进行抗菌药物敏感性检测,检测菌株携带mecA基因和pvl基因情况,并进行spa基因分型分析。结果56株金葡菌中,共检出耐甲氧两林金葡菌（MRSA）21株（37．5％）,其中mecA基因阳性20株（95．2％）;甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）35株（62．5％）。与MSSA相比,MRSA对利福平、左氧氟沙星、莫西沙星、环丙沙星、庆大霉素和四环素的敏感率显著降低（P〈0．05）,MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替加环素、喹奴普丁达福普汀和呋喃妥因全部敏感。MRSA分为6个spa型别,以t030（66．7％）为主,MRSA～t030、MRSA—t002具有突出的多药耐药特征。MSSA共分为18个spa型别,以t189、t377和t034列前3位,分别占14．3％、／4．3％和1I．4％,并在脓液标本榆出I株新spa基因型new1。检出5株杀白细胞毒素（PVL）阳性菌株,其中3株为MSSA—t189。结论t030是医院MRSA临床分离株中的spa优势型别,具有突出的多药耐药特征,在医院内广泛传播。MSSA遗传多样性高,以t189、t377和t034列前3位。     

146例金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药分析

目的了解金黄色葡萄球菌(SA)对红霉素和克林霉素的耐药性,检测红霉素对克林霉素诱导耐药的发生率及诱导耐药基因。方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散法,用头孢西丁纸片检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)并以红霉素、克林霉素双纸片法(D试验)分析红霉素对克林霉素诱导耐药表型,用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因。结果 146株SA中MRSA占57.5%。SA对红霉素及克林霉素同时耐药的有82株,占56.2%,红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的有34株,其中D试验阳性26株,红霉素诱导克林霉素耐药率76.5%。红霉素耐药而克林霉素敏感或中介的MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)中D试验阳性分别为80.0%和71.4%。克林霉素耐药菌株主要由erm基因决定,结构型耐药菌株主要耐药基因为ermA,诱导型耐药菌株的主要耐药基因为ermC。结论临床微生物实验室应加强对SA中克林霉素诱导耐药的检测,以指导临床医师合理选用大环内酯类、林可酰胺类抗菌药物。