人大肠癌HT29细胞株裸鼠移植及转移模型的建立

本研究利用人大肠癌HT29细胞株在建立裸鼠皮下移植瘤模型的基础上,再建立大肠癌由尾静脉至肺,由脾至肝的转移模型,从而为建立高转移癌细胞系打下基础。我们发现肝转移灶的分化程度低于移植瘤,P53表达也与移植瘤有差异。我们认为这表明了肿瘤细胞的异质性。说明癌细胞在宿主体内是朝着有利于存活、发展、转移的方向生长。这样就可以在将来利用这个转移模型来筛选具有高转移能力的癌细胞亚群。     

小鼠子宫颈癌14号移植到近交系小鼠后生长特性和转移规律研究(简报)

小鼠子宫颈癌14号(u14)自1958年在远交系km小鼠建株后,已传代近30年。本实验将上述腹水瘤分别在近交系615小鼠皮下和腹腔内移植后,其生长特性和形态结构同1976年检查结果相似(阳滋等:肿瘤学附刊6:276,1976)-仍为未分化癌。腹腔内移植组:荷瘤小鼠的平均寿命是12.1天,中间存活时间为10天,未发现淋巴结和肺转移。皮下移植组:荷瘤宿主寿命15～31天,平均存活时间27.5天,中间存活时间     

68Ga⁃DOTA⁃K⁃PEG2⁃（K⁃FA）2靶向卵巢癌及其腹腔转移灶显像的实验研究

目的：制备68Ga?1,4,7,10?四氮杂环十二烷?1,4,7,10?四乙酸?赖氨酸?聚乙二醇?赖氨酸叶酸二聚体［68Ga?DOTA?K?PEG2?（K?FA）2,简称68Ga?DOTA?2P?FA2］,并研究其用于卵巢癌及腹腔转移灶靶向显像的价值。方法：合成68Ga?DOTA?2P?FA2并考察其体外理化特性,构建皮下荷人卵巢癌（SKOV3）及其腹腔转移灶裸鼠模型。设立叶酸受体阻断组、荷人肺癌（A549：叶酸受体表达阴性）裸鼠阴性对照组及空白对照组。考察68Ga?DOTA?2P?FA2体内生物学分布,皮下荷瘤鼠在显像剂尾静脉给药后120 min行microPET检查、腹腔转移荷瘤鼠在显像剂尾静脉给药后60 min行microPET?CT显像。结果：68Ga?DOTA?2P?FA2放射化学纯度为（96.30±1.28）%,体外稳定性好,叶酸受体亲合实验IC50为17.1 nmol/L,辛醇/水分配系数（lg P）为-1.89。尾静脉注射后120 min,卵巢癌皮下肿瘤放射性摄取达到峰值,可被过量叶酸有效阻断,其在血液、心及肺中清除迅速,肝脏摄取少,主要通过肾脏排泄,培美曲赛预注射有效加快其在肾脏的排泄。microPET显像提示皮下卵巢癌肿瘤放射性摄取明显高于叶酸受体阻断组和阴性对照组。microPET?CT显像提示腹腔转移灶放射性摄取明显高于空白对照组。结论：68Ga?DOTA?2P?FA2能靶向聚集在叶酸受体高表达的肿瘤部位,是卵巢癌及其腹腔转移灶显像的良好显像剂。     

小鼠慢性移植物抗宿主病荷瘤模型的建立

目的 通过供鼠淋巴细胞输注诱导小鼠慢性GVHD,并在此基础上荷瘤建立慢性GVHD的GVL模型,为研究慢性GVHD和GVL作用奠定基础.方法 以雄性BALB/c(H-2d)为供鼠,雌性CB6F1(BALB/c×C57BL/6 F1,H-2d/b)为受鼠,通过尾静脉输注8×107/个脾细胞诱导小鼠慢性移植物抗宿主病,在输注25天后,受鼠随机分组,通过尾静脉或腹腔或皮下方式接种P815肿瘤细胞,构建慢性GVHD荷瘤模型,用于研究慢性GVHD的同时研究GVT作用.结果 3种荷瘤方式均可形成荷瘤.尾静脉方式可形成小鼠白血病模型,符合人类疾病特点,成功构建慢性GVDH荷瘤的GVL模型.结论 成功建立小鼠慢性移植物抗宿主病荷瘤模型.     

小鼠网织细胞肉瘤L_Ⅱ移植到近交系小鼠后生长特性和转移规律观察

小鼠网织细胞肉瘤L_(11)1964年在远交群昆明(km)小鼠建株后,已传代和冻存近30年。本实验将L_(11)实体瘤分别移植到近交系615小鼠皮下和腹腔内,接种成活率为100％,无自发消退现象,肿瘤的组织学结构和细胞形态仍保持了原L_(11)瘤株的特点,其生长特征为:(1)皮下移植组:荷瘤小鼠寿命21～63d,平均寿命39.3d,中间存活时间39d;淋巴道转移率为95.7％,肺转移率为60.9％,肿瘤移植后21d首先出现肺转移,最早于第28d发现淋巴结转移。(2)腹腔内移植组:荷瘤小鼠寿命9～15d,平均寿命13.1d,中间存活时间13d,有2只动物出现肺转移,但未见到浅表淋巴结转移。     

鼠抗人hMIC-l单克隆抗体抑制裸鼠移植人胰腺癌体内研究

目的初步研究鼠抗人hMIC-l单克隆抗体对胰腺癌体内给药的抗肿瘤活性,为hMIC-l抗体应用于肿瘤治疗提供实验依据。方法 2种人胰腺癌细胞株PANC-1和SW1990各腋窝皮下接种24只Balb/c裸鼠,共计48只皮下接种荷瘤裸鼠分别随机共分为8组,每组6只荷瘤鼠。模型对照组荷瘤裸鼠腹腔注射0.9%氯化钠注射液(10 mL/kg,NS,Biw,ip×8),阳性对照组荷瘤裸鼠腹腔注射键择(50 mg/kg,qw,ip×4),鼠抗人hMIC-l单克隆抗体组分别荷瘤鼠尾静脉内注射鼠抗人hMIC-l单克隆抗体(10 mg/kg,Biw,ip×8)共4周或(2 mg/kg,Biw,ip×8)共4周。观察荷瘤裸鼠日常表现、肿瘤生长、实验后肿瘤组织切片HE染色后光镜下的组织形态学改变。结果荷瘤裸鼠尾静脉内注射鼠抗人hMIC-l单克隆抗体组裸鼠(10 mg/kg,Biw,iv×8)肿瘤生长缓慢,瘤体明显小于模型对照组,并呈现量效关系。镜下观察鼠抗人hMIC-l单克隆抗体组实验后肿瘤组织切片胰腺结构破坏,有大量淋巴细胞浸润,肿瘤细胞明显坏死,细胞溶解。结论尾静脉内注射鼠抗人hMIC-l单克隆抗体(10 mg/kg,Biw,iv×8)能有效抑制裸鼠移植人胰腺癌PANC-1肿瘤生长,使瘤组织坏死、结构破坏。     

时空表达可控的转基因动物模型调控体系的研究

目的通过筛选建立裸小鼠人胃癌肝靶向高转移模型。方法采用原位移植技术，将组织学完整的MKN-45肿瘤组织块移植至裸小鼠胃壁上，按照胃原位移植→肝转移→皮下扩增→胃原位移植方法进行反复筛选，观察肿瘤原位移植成瘤率、侵袭和转移及形态学特征（光镜、电镜）。结果筛选出一个裸小鼠人胃癌肝靶向高转移模型，将其命名为MKN-45sci，已传至第5代。肿瘤的原位移植成瘤率、肝转移率和腹腔淋巴结转移率皆为100％，部分动物伴发肺、脾、膈等脏器转移及血性腹水。组织病理学和电镜观察结果证明其特征与原肿瘤相似。结论建立的裸小鼠人胃癌肝转移模型完整地再现了胃癌患者的临床过程，为探讨人胃癌肝转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的实验动物模型。     

小鼠子宫颈癌转移模型及形态学研究

小鼠子宫颈癌(U_(14))移植于成年鼠。新生鼠的背部及爪垫皮下、腹腔。分别于第12h～38d处死行组织学及电镜检查。结果:(1)新生鼠皮下组在移植后第12h已见淋巴管中癌细胞栓,第42h肺泡壁毛细血管中见癌细胞栓,第2～3d肺组织已见明显的癌转移。提示新生鼠皮下移植是癌转移最迅速的动物模型。(2)癌在新生鼠皮下组织侵袭过程中未见明显潜伏期。(3)宿主年龄是癌浸润与转移的重要因素。(4)针吸细胞学检查对腹水癌病例并不安全。     

SCID鼠人宫颈癌组织模型的建立及其生物学特性初探

目的研究人原代宫颈癌组织在SCID鼠体内成瘤性及生物学特性。方法接种人宫颈癌组织于SCID鼠皮下,以建立人宫颈癌SCID鼠模型,观察荷瘤鼠成瘤、一般特性和移植瘤生长,组织学特性,检测肿瘤组织,外周血和肝、脾等脏器HPVDNA表达情况。结果成瘤率为100%,移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查一致,HPVDNA呈阳性,亚型与所种植人宫颈癌组织HPV亚型一致,而外周血与肝、脾等脏器HPVDNA呈阴性。结论初步建立SCID鼠人宫颈癌组织模型,其较好的模拟了人宫颈癌的生物学特性,为进一步探讨宫颈癌的发病机制及鉴定治疗的新方法提供了一个理想的动物模型。     

瘤内注射β干扰素基因转染的人骨髓间充质干细胞对前列腺癌皮下移植瘤的治疗作用

目的 观察人β干扰素(IFN-β)基因修饰的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)治疗人前列腺癌皮下移植瘤的作用.方法 构建人IFN-β基因腺病毒表达载体Ad-IFN-β,体外转染hMSCs,使用4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记表达IFN-β的hMSCs(IFN-β -hMSCs).应用人前列腺癌细胞株PC-3异种皮下种植建立前列腺癌动物模型,IFN-β-hMSCs瘤内注射入小鼠模型体内,收集肿瘤和肝、肺、脾、肾等脏器作冰冻切片和石蜡切片,荧光显微镜下观察肿瘤及各脏器中]FN-β -hMSCs的分布情况,记录IFN-β -hMSCs瘤内注射后荷瘤小鼠肿瘤大小及生存期.结果 瘤内注射IFN-β -hMSCs后14 d,前列腺癌组织冰冻切片和石蜡切片中均可见DAPI标记的IFN-β -hMSCs,而肝、肺、脾、肾等脏器的切片中均未见IFN-β -hMSCs的存在.瘤内注射IFN-β -hMSCs可延长荷瘤鼠的生存期,抑制肿瘤的生长,实验组与对照组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IFN-β -hMSCs在体内能够抑制前列腺癌移植瘤的生长,延长荷瘤鼠的生存期.     

STAT3诱饵寡核苷酸抑制人胃癌细胞裸鼠腹腔种植的初步研究

目的 通过研究STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌MKN45细胞增生及荷瘤裸鼠的作用,探讨其对人胃癌细胞株裸鼠腹腔种植转移的影响.方法 以人胃癌细胞MKN 45为对象,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetralolium,MTT)法检测STAT3诱饵寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖抑制效应,凝胶迟滞电泳法(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测各组细胞STAT3 DNA结合活性.裸鼠随机分为4组,将不同方法处理的胃癌细胞接种裸鼠腹腔,观察各组裸鼠的腹腔肿瘤生成、腹水产生、死亡率及生存情况.结果 ①STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性.②STAT3诱饵寡核苷酸可特异性抑制胃癌细胞STAT3的DNA结合活性.③STAT3诱饵寡核苷酸能明显减少裸鼠腹水产生,降低荷瘤鼠的死亡率,延长荷瘤鼠的生存期,与其他组相比有显著性差异(P＜0.05).结论 STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌裸鼠腹腔种植有明显的抑制作用.     

白细胞介素12基因转染抑制B16细胞成瘤性及转移性的研究

目的探讨白细胞介素１２（ＩＬ１２）基因转移对弱免疫原性的小鼠Ｂ１６黑色素瘤细胞生长与转移的影响。方法构建小鼠ＩＬ１２两个亚单位ｐ４０、ｐ３５ｃＤＮＡ表达载体;经脂质体ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮ介导,将两真核表达载体同时导入Ｂ１６细胞;应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ｐ４０、ｐ３５ｍＲＮＡ表达;用生物学活性检测法（致分裂激活的活化的小鼠脾细胞增殖）检测ＩＬ１２分泌;经皮下或静脉接种肿瘤细胞,检测其体内成瘤性及转移性。结果ＩＬ１２基因转染的Ｂ１６细胞（Ｂ１６ＴＩＬ１２）能够表达ｐ４０及ｐ３５ｍＲＮＡ,分泌有生物活性的ＩＬ１２;Ｂ１６ＴＩＬ１２细胞体内成瘤性降低,成瘤延迟,肿瘤生长慢,荷瘤小鼠存活期延长（Ｐ＜００１）;肺转移率降低,肺内转移灶明显减少（Ｐ＜００１）。结论ＩＬ１２基因转染可明显抑制肿瘤生长与转移     

采用小动物活体荧光成像对胃癌皮下和原位移植肿瘤生长的动态观察

目的 采用小动物活体荧光成像系统对裸小鼠皮下和原位移植MKN-45-Luc胃癌细胞组织瘤块后,进行肿瘤生长的动态观察.方法 将转染Luc的MKN-45胃癌细胞接种于裸小鼠皮下,成瘤后取瘤块分别接种于裸小鼠的皮下和胃部,并用活体荧光成像系统定期监测MKN-45-Luc细胞在小鼠体内成瘤的动态变化过程.结果 从第1～5周,随着肿瘤移植时间的增加,皮下和原位瘤所表达荧光素酶的面积逐渐增大,荧光光子数也逐渐增加,移植瘤体积、荧光面积与荧光光子数成正相关（r=0.882,P＜0.001）.5～6周时移植瘤体积、荧光面积与荧光光子数无相关性.结论 采用活体荧光成像系统能非常完整地观察活体动物体内胃癌的生长及转移过程.为研究MKN-45胃癌生长的生物学特性提供依据.     

博落回总碱对肝癌细胞的毒性作用和体内抗肿瘤作用

目的 观察博落回总碱(TAPP)的体内外抗肿瘤活性作用。方法 MTT法检测TAPP体外对人肝癌Hep3B细胞、小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用;用小鼠移植性肿瘤法检测TAPP对小鼠H22肝癌细胞、S180肿瘤细胞的体内抑瘤作用。测3次重复实验结果。结果 (1)TAPP在体外有明显的细胞毒性作用,可抑制Hep3B、H22细胞增殖,且呈剂量依赖性:其对Hep3B细胞的半数抑制浓度(IC₅₀) 3次重复实验结果分别为3.04、3.98、2.98µg/ml,对H22细胞则分别为2.89、2.21、2.34µg/ml。(2)体内实验表明,TAPP可抑制H22细胞皮下移植瘤的生长,在剂量为每天1、2、4 mg/kg·b.w.时,3次腹腔注射给药实验测得抑瘤率分别为18.6%、35.1%、44.9%,而以每天4 mg/kg·b.w.时口服给药抑瘤率则为7.9%;另外,TAPP可明显延长S180腹水瘤小鼠存活时间,剂量为每天1、2、4 mg/kg·b.w. 时静脉注射给药生命延长率3次重复结果平均分别为24.8%、48.9%、52.7%。结论 TAPP在体内外均有明显的抗肿瘤活性。     

博落回总碱对肝癌细胞的毒性作用和体内抗肿瘤作用

OBJECTIVE: To observe the cytotoxic effects in vitro and antitumor effects in vivo of total alkaloid of Macleaya cordata. METHODS: MTT assay was used to assess the proliferation of Hep3B and H22 cells in vitro treated with the alkloid, and the inhibitory effects of the alkaloid on H22 and S180 tumors were observed in mice with subcutaneous inoculation of the tumor cells. RESULTS: The total alkaloid significantly inhibited the proliferation of human Hep3B cells and murine H22 cells in a dose-dependent in vitro. IC(50) of the alkloid in 3 repeated experiments was 3.04, 3.98 and 2.98 mug/ml respectively in Hep3B cells, and was 2.89, 2.21 and 2.34 mug/ml in H22 cells. In the tumor-bearing mice, the alkaloid inhibited the development of H22 tumor and prolonged the survival of S180 tumor-bearing mice. At the daily dose of 1, 2, and 4 mg/kg.b.w (i.p.) and 4 mg/kg.b.w. (i.g.) for 10 days, the inhibition rates of the alkaloid on H22 tumor in 3 repeated experiments were 18.6%, 35.1%, 44.9% and 7.9% respectively, and the rates of survival prolongation of the tumor-bearing mice were 24.8%, 48.9%, and 52.7%, respectively. CONCLUSION: The alkloid possesses antitumor effects both in vitro and in vivo.     

Effect of all-trans retinoic acid on growth of xenograft tumor and its metastasis in nude mice

Ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄｄｉｓｐｌａｙｓａｗｉｄｅｒａｎｇｅｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｎｃｅｌｌｕｌａｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ,ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ,ｖｉｓｉｏｎ,ｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄｍａｌｉｇｎａｎｔｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ,ａｎｄｈａｓｂｅｅｎｓｈｏｗｎｔｏｓｕｐｐｒｅｓｓｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｉｍａｌｓ.Ｉｔａｌｓｏｅｘｈｉｂｉｔｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｇｒｅｅｓｏｆｅｆｆｉｃａｃｙｉｎｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ…     

H5N1流感病毒不同途径接种BALB/c小鼠临床病理学比较

目的 比较BALB/c小鼠不同途径接种H5N1流感病毒产生的临床和病理学变化.方法 利用1株鹅源性H5N1流感病毒通过鼻腔、静脉和脑内等方式接种BALB/c小鼠,观察小鼠在接种后7 d内的临床症状和病理变化.结果 接种1 d后,小鼠出现明显的临床症状,接种2 d后开始出现死亡,接种5 d后,临床症状明显恢复.组织病理学检查显示,小鼠不同途径接种H5N1流感病毒后,所产生的主要病变相似,且病毒最先到达的器官损伤相对严重.从病程进展来看,接种后2 d各组织器官的病变最严重,随着时间增长,肺脏和肾脏等器官的病变有不同程度的恢复,心脏和肝脏等器官的病变在感染过程中未见明显恢复.结论 小鼠不同途径接种H5N1流感病毒后引发相似的症状,病毒最先到达的器官损伤相对严重.     

THE ESTABLISHMENT OF A NEW ANIMAL MODEL FOR GASTRIC CANCER STUDY BY ORTHOTO PIC IMPLANTATION OF GASTRIC CANCER CELLS INTO ATHYMIC NUDE MICE

An animal model mimicking human gastric cancer by gastric wall implantation technique in athymic nude mice was reported. Two human gastric cancer cell lines. MKN-45 and MKN-28, were used in this study. All animals with gastric wall implantation of cancer cells of these two cell lines developed grossly visible gastric tumors after 3-4 weeks of implantation. Histopathological examination showed that tumors prirnarily grew at serosal side of stomach, and progressively invaded the gastric mucosa, but none showed metastasis in this study. All tumor-bearing animals died within 5-8 weeks after implantation. These results indicated that gastric wall of nude mice provided a good soil for growth and propagation of human gastric cancer cells. The model was useful for in vivo study on biological behavior of various types of human gastric cancers.     

转染STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞的影响

目的 通过研究STAT3诱饵寡核苷酸对人胃腺癌MKN45细胞增生活性及其MMP-2,CD44v6和ICAM-1表达的影响,寻求胃癌治疗中的新靶点.方法 以人胃癌细胞MKN45为对象,体外药物敏感实验(MTT)法检测STAT3诱饵寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖抑制效应,免疫组化S-P法检测胃癌细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1表达变化情况.结果 (1)STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性;(2)STAT3诱饵寡核苷酸可明显抑制胃癌细胞株细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1的表达.结论 STAT3诱饵寡核苷酸可通过抑制胃癌细胞的分裂和增殖,抑制胃癌细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1的表达,干扰肿瘤的转移与复发.     

穿心莲内酯滴丸抗小鼠黑色素瘤作用的研究

目的 研究穿心莲内酯滴丸的抗肿瘤作用.方法 采用C57BL/6小鼠作为实验动物于右腋下皮下接种小鼠黑色素瘤细胞B16,建立小鼠B16皮下移植瘤模型,用穿心莲内酯滴丸(0.143 mg·20 g-1)和对照药物氢化穿心莲内酯滴丸(0.143 mg·20 g-1)灌胃治疗,观察肿瘤体积、肿瘤质量、小鼠生存率的变化,分析穿心...