硒对镉诱导的在体大鼠肝细胞DNA损伤、细胞凋亡和细胞增殖的影响

目的　研究亚硒酸钠对氯化镉诱导的大鼠肝细胞DNA损伤、细胞凋亡、细胞增殖周期变化以及DNA相对含量的影响。方法　选用雄性SD大鼠 ,每组 5只 ,用 5 μmol/kg亚硒酸钠分别与5、10和 2 0 μmol/kg的氯化镉联合作用 ,腹腔注射染毒。用单细胞凝胶电泳研究DNA损伤 ,用末端标记法 (TUNEL)和流式细胞术检测大鼠肝细胞凋亡 ,用流式细胞术研究细胞增殖周期和DNA相对含量。结果　 5 μmol/kg的亚硒酸钠对 5、10和 2 0 μmol/kg的氯化镉引起的DNA损伤和细胞凋亡显示出良好的拮抗作用 ,也可使DNA损伤率和细胞凋亡率显著下降。 5 μmol/kg的亚硒酸钠明显抑制5 μmol/kg氯化镉引起的G0 /G1期细胞减少 ,并使 10 μmol/kg和 2 0 μmol/kg氯化镉引起减少的G2 /M期细胞显著增多。 5 μmol/kg的亚硒酸钠还对 10 μmol/kg和 2 0 μmol/kg氯化镉引起的DNA相对含量的下降表现出拮抗作用。结论　一定剂量的亚硒酸钠对一定剂量的氯化镉诱导的DNA损伤、细胞凋亡、细胞增殖周期变化和DNA相对含量下降具有一定的拮抗作用     

硒对镉诱导的雄性SD大鼠肝细胞c-myc和p53蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的 探讨不同剂量亚硒酸钠对氯化镉诱导的雄性SD大鼠肝细胞的凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达的影响.方法 将65只健康SPF级SD雄性大鼠随机分为13组,分别设对照(生理盐水)组、氯化镉(5.0、10.0、20.0 μmol/kg)组及亚硒酸钠(2.5、5.0、10.0 μmol/kg)+氯化镉(5.0、10.0、20.0 μmol/kg)联合作用组,每组5只.氯化镉采用一次性腹腔注射染毒,亚硒酸钠采用一次性灌胃染毒.染毒后48 h,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化法测定c-Myc和P53蛋白的表达量.结果 与相同剂量氯化镉组相比,亚硒酸钠剂量为2.5 μmol/kg时,全部联合作用组的大鼠肝细胞凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达均降低(P＜0.05或P＜0.01);而亚硒酸钠剂量为5.0、10.0 μmol/kg时,部分联合作用组的大鼠肝细胞凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达降低(P＜0.05或P＜0.01).大鼠细胞凋亡率与c-Myc、P53蛋白表达量均呈正相关(P＜0.01).结论 2.5 μmol/kg的亚硒酸钠对氯化镉所诱导的大鼠肝细胞的凋亡及c-Myc和P53蛋白表达的升高具有一定的拮抗作用.     

硒对镉诱导大鼠肝细胞端粒酶活力作用研究

目的 研究硒对镉诱导的大鼠肝细胞端粒酶活力、癌基因c-myc和p53表达的影响.方法 80只雄性SD大鼠随机分为16组,包括对照组,2.5、5.0和10.0 μmol/kg亚硒酸钠组,5.0、10.0和20.0μmol/kg氯化镉组,9个硒镉联合作用组.氯化镉采用腹腔注射染毒、亚硒酸钠采用灌胃染毒.用端粒重复序列扩增法(TRAP)检测端粒酶活力,用逆转录聚合酶链反应法检测c-myc和p53表达.结果 3个镉单独作用组的大鼠肝细胞端粒酶活力、c-myc和p53表达较对照组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).硒镉联合作用组中,当2.5和5.0μmol/kg亚硒酸钠分别与5.0、10.0和20.0μmol/kg氯化镉联合作用时,大鼠肝细胞端粒酶活力、c-myc和p53 mRNA水平较相应剂量的镉单独作用组下降;当10.0 μmol/kg亚硒酸钠分别与5.0、10.0和20.0 μmol/kg氯化镉联合作用时,大鼠肝细胞端粒酶活力、c-myc和53 mRNA水平与相应剂量的镉单独作用组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 相对较低剂量的硒对镉引起的大鼠肝细胞端粒酶活力增高具有抑制作用,其抑制作用可能是通过降低c-myc和p53表达.     

镉对硒引起的离体大鼠肝细胞DNA损伤作用的影响

应用单细胞凝胶电泳研究氯化镉对亚硒酸钠引起的大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤作用的影响。结果表明，在８７５μｍｏｌ／Ｌ、１７５０μｍｏｌ／Ｌ、３５００μｍｏｌ／Ｌ的剂量下，亚硒酸钠单独作用时，可引起肝细胞ＤＮＡ损伤。当氯化镉与亚硒酸钠联合作用时，８７５μｍｏｌ／Ｌ的氯化镉对８７５μｍｏｌ／Ｌ、１７５０μｍｏｌ／Ｌ、３５００μｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠引起的ＤＮＡ损伤存在明显的拮抗作用，而３５００μｍｏｌ／Ｌ的氯化镉对８７５μｍｏｌ／Ｌ、１７５０μｍｏｌ／Ｌ、３５００μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠引起的ＤＮＡ损伤不但未显示出拮抗作用，反而使得ＤＮＡ损伤程度加重。１７５０μｍｏｌ／Ｌ的氯化镉与１７５０μｍｏｌ／Ｌ的亚硒酸钠联合作用，拮抗作用最为明显。本研究结果提示，在一定剂量条件下，氯化镉对亚硒酸钠引起的大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤存在拮抗作用，并与镉和硒的相对剂量有关     

硒对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响

目的：研究亚硒酸钠对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响。方法：选用雄性SD大鼠，每组5只，用5，10和20μmol/kg的亚硒酸钠腹腔注射染毒。用流式细胞术研究大鼠肝细胞增殖周期和DNA相对含量（DNARC)，用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。结果：10和20μmol/kg的亚硒酸钠均可使大鼠肝细胞G0／G1期细胞显减少，5μmol/kg的亚硒酸钠虽可使G0／G1期细胞减少，但无显性差异。S期和G2／M期细胞以及增殖指数变化不明显。5、10和20μmol/kg的亚硒酸钠可引起大鼠肝细胞DNARC下降，DNA损伤率较对照组显增高，而且DNARC和DNA损伤率之间存在负相关关系，随DNA损伤率的增高，DNARC下降，相关系数为：－0．9887（P＜0．01）。结论：一定剂量的亚硒酸钠不仅改变了大鼠肝细胞的增殖周期，还引起DNA损伤，并影响DNA合成，使DNA相对含量显下降。     

亚硒酸钠拮抗氯化镉染毒大鼠肝、肾细胞损伤的研究

目的观察亚硒酸钠处理对亚慢性氯化镉中毒大鼠肝、肾结构的影响,为氯化镉慢性中毒的防治和亚硒酸钠蓄积性毒性研究提供依据。方法雄性SD大鼠54只,随机分成3组。对照组大鼠饮用蒸馏水;其余两组大鼠饮用含30 mg/L氯化镉蒸馏水;硒干预组大鼠给予5μmol/kg亚硒酸钠溶液灌胃。结果与对照组比较,氯化镉组大鼠组织中GSH-Px及SOD活性降低、MDA含量增加;硒干预组大鼠组织GSH-Px及SOD活性显著升高、MDA含量降低。组织病理切片观察结果,单纯给氯化镉组大鼠肾小球肿胀或固缩,肾小囊囊腔增大,肾小管上皮细胞变性坏死并脱落等病理损伤。硒干预组大鼠肝、肾脏组织结构未见明显损伤。结论饮用含氯化镉的水源可致肾脏组织明显损伤,低剂量亚硒酸钠可拮抗氯化镉对肾组织的损伤作用,对氯化镉所致组织氧化损伤有一定的修复作用。     

镉对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响

目的　研究氯化镉对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响。方法　选用雄性SD大鼠 ,每组 5只 ,用5 ,10和 2 0 μmol/kg的氯化镉腹腔注射染毒。用流式细胞术研究大鼠肝细胞增殖周期和DNA相对含量 (DNARC) ,用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。结果　 5 ,10和 2 0 μmol/kg的氯化镉均可使大鼠肝细胞G0 /G1期细胞显著减少 ,S期和G2 /M期细胞以及增殖指数变化不明显。 5 ,10和 2 0 μmol/kg的氯化镉可引起大鼠肝细胞DNARC显著下降 ,DNA损伤率较对照组显著增高 ,而且DNARC和DNA损伤率之间存在负相关关系 ,随DNA损伤率的增高 ,DNARC下降 ,相关系数为 :- 0 9990 (P <0 0 1)。结论　一定剂量的氯化镉不仅改变了大鼠肝细胞的增殖周期 ,还引起DNA损伤并影响DNA合成使DNA相对含量显著下降     

硒对镉诱导的大鼠肝脏端粒酶逆转录酶和c-Myc及p53表达的影响

目的研究亚硒酸钠时氯化镉诱导的大鼠肝脏端粒酶逆转录酶（TERT）mRNA、c-Myc蛋白、p53蛋白表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为6组，对照组、硒组（5μmol／kg亚硒酸钠）、5μmol／kg氯化镉组、10μmol／kg氯化镉组、研（5μ／kg亚硒酸钠）＋5μmol／kg氯化镉组、硒（5μmol／kg亚硒酸钠）＋10μmol／kg氯化镉组。每组动物5只，染毒48h后取出肝脏，用RT-PCR方法检测TERP基因的表达，用免疫组织化学方法检测c-Myc蛋白和p53蛋白的表达。结果与对照组比较，5μmol／Lkg氯化镉组和10μmol／kg氯化镉组TERP表达增多，10μmol／L kg氯化镉组c-Myc蛋白表达增多，5μmol／L kg氯化镉组和10μmol／L kg氯化镉组p53蛋白表达增多。TERT的表达，硒＋10μmol／Lkg氯化镉组与10μmol／L kg氯化镉组比较降低；硒＋10μmol／L kg氯化镉组比10μmol／L kg氯化镉组c-Myc蛋白表达降低；硒＋5μmol／L kg氯化镉组、硒＋10μmol／L kg氯化镉组与相对应的镉组比较p53蛋白表达降低。结论镉在5～10μmol／L kg的剂量条件下可以诱导大鼠肝脏高表达TERT、c-Myc蛋白和p53蛋白，而硒对镉引起的TERT、c-Myc蛋白和p53蛋白的表达增高具有一定的拮抗作用。     

硒对苯并[a]芘诱导的小鼠肺细胞DNA损伤的作用

目的　研究亚硒酸钠对苯并 [a]芘 (BaP)诱导的小鼠肺细胞DNA损伤的影响。方法　选用雄性昆明种小鼠。亚硒酸钠采用腹腔注射处理 ,BaP灌胃染毒。BaP单独作用的剂量是 12 5、2 5 0、5 0 0mg/kg;硒和BaP联合作用组采用 0 .75、1.5 0、3.0 0mg/kg的亚硒酸钠分别与 2 5 0mg/kgBaP联合染毒。设立溶剂对照组。用单细胞凝胶电泳方法检测DNA损伤的情况。结果　 12 5、2 5 0、5 0 0mg/kgBaP组小鼠肺细胞DNA损伤程度较对照组严重 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,总损伤细胞百分率分别为4 3.5 0 %、84 .0 0 %、95 .6 3% ,较对照组 (9.75 % )明显增高 ,差异亦有显著性 (P <0 .0 1) ,且存在着明显的剂量 -反应关系。 0 .75、1.5 0、3.0 0mg/kg的亚硒酸钠对 2 5 0mg/kgBaP诱导的小鼠肺细胞DNA损伤具有明显的拮抗效应 ,1.5 0mg/kg亚硒酸钠的拮抗作用优于 0 .75、3.0 0mg/kg的亚硒酸钠 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　 12 5～ 5 0 0mg/kg的BaP可以引起小鼠肺细胞DNA损伤 ,而 0 .75～ 3.0 0mg/kg的亚硒酸钠对 2 5 0mg/kgBaP诱导的小鼠肺细胞DNA损伤具有明显的拮抗作用。     

硒和锌对小鼠成釉细胞DNA损伤的作用研究

目的 探讨硒和锌对小鼠成釉细胞DNA损伤的保护作用.方法 以2.50、5.00、10.00 μmol/L亚硒酸钠用于小鼠成釉细胞为硒作用组,以5.00、10.00、20.00 μmol/L硫酸锌作用于小鼠成釉细胞为锌作用组.细胞作用24h后,采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测DNA单链断裂情况.结果 与对照组比较,2.50和5.00 μmol/L亚硒酸钠作用组小鼠成釉细胞DNA损伤的指标尾长、Olive尾矩、尾DNA％和尾长/头长值均明显下降(P＜0.05);10.00 μmol/L亚硒酸钠作用组小鼠成釉细胞的尾长、尾/头长比值较对照组均显著性降低(P＜0.05).与对照组比较,5.00、10.00和20.00 μmol/L硫酸锌作用组可使小鼠成釉细胞尾长和Olive尾距明显下降,差异均有统计学意义(P ＜0.05);5.00和10.00 μmol/L硫酸锌作用组尾长/头长值明显下降(P＜0.05).以Olive尾矩为观察指标,2.50和5.00 μmol/L亚硒酸钠的保护作用要优于10.00μmo1/L亚硒酸钠,以2.50 μmol/L亚硒酸钠保护作用相对较好;10.00和20.00 μmol/L硫酸锌的保护作用要优于5.00μmol/L硫酸锌,以10.00 μmol/L硫酸锌保护作用相对较好.结论 2.50～10.0 μmol/L的亚硒酸钠和5.00～20.00 μmol/L硫酸锌均对成釉细胞DNA损伤具有一定的保护作用,其中2.50 μmol/L亚硒酸钠和10.00 μmol/L硫酸锌的相对保护作用较好.     

硒和镉对大鼠肝细胞DNA损伤的联合作用

应用单细胞凝胶电泳研究硒和镉对大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤的联合作用。结果表明，硒和镉在浓度超过８．７５μｍｏｌ／Ｌ时，均可引起细胞ＤＮＡ损伤，硒引起的损伤程度较镉轻。在８．７５、１７．５μｍｏｌ／Ｌ浓度条件下，当硒和镉联合作用时所致ＤＮＡ损伤程度明显低于相同剂量下硒、镉的单独作用，而在３５μｍｏｌ／Ｌ浓度条件下，硒镉联合作用所致ＤＮＡ损伤与硒、镉单独作用时比较，差异无显著性。本研究结果提示，在一定剂量时，硒和镉致大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤存在拮抗作用。     

硒和砷对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的作用

目的研究硒和砷单独及联合作用对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的影响。方法采用不同浓度的硒(2.5、5.0和10.0μmol/L亚硒酸钠)和砷(1.56、3.13、6.25、12.5和25.0μmol/L亚砷酸)为受试物单独或联合处理HepG2细胞。荧光法测定丙二醛(MDA)作为氧化应激的指标,高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-EC)测定8-羟基鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化损伤的指标,Western Blot检测hOGG1表达作为DNA氧化损伤修复的指标。结果在硒和砷单独作用的条件下,可观察到:(1)5.0、10.0μmol/L的亚硒酸钠和6.25、12.5、25.0μmol/L的亚砷酸均引起HepG2细胞MDA含量增加、8-OHdG生成增多、hOGG1表达明显下降(P<0.05,P<0.01);(2)较低浓度的亚硒酸钠(2.5μmol/L)具有有限的抑制8-OHdG生成的作用(P>0.05)。在硒和砷联合作用的条件下,可观察到:(1)2.5μmol/L的亚硒酸钠和6.25μmol/L的亚砷酸同时染毒使MDA含量和8-OHdG的生成均较相应砷剂量组下降(P<0.05);(2)2.5μmol/L的亚硒酸钠与6.25、12.5和25.0μmol/L的亚砷酸同时染毒,hOGG1表达与相应砷剂量组比较没有明显差异(P>0.05)。结论5.0、10.0μmol/L的亚硒酸钠和6.25、12.5、25.0μmol/L的亚砷酸均可引起HepG2细胞氧化应激增强、8-OHdG生成增多、hOGG1表达明显下降;一定剂量的硒(2.5μmol/L的亚硒酸钠)对砷诱导的HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤具有抑制作用,但对砷所致的DNA氧化损伤修复不产生明显影响。     

硒对镉诱导的大鼠肝细胞原癌基因表达的影响

目的 研究亚硒酸钠对氧化镉诱导的在体大鼠肝细胞原癌基因c-myc、c-fos、c-jun表达增强的影响。方法 选用雄性SD大鼠,每组5只,腹腔注射染毒,用Northern斑点杂交方法观察。用5μmol/kg Na2SeO3分别与5μmol/kg、10μmol/kg、20μmol/kg CdCl2联合作用。结果 观察Na2SeO3对CdCl2所致大鼠肝细胞c-myc、c-fos、c-jun表达增强的拮抗效应。结论 一定剂量的亚硒酸钠能抑制一定剂量的氧化镉引起的大鼠肝细胞原癌基因c-myc、c-fos、c-jun表达增强。     

活性氧在硒致HepG2 DNA损伤中的作用

目的探讨亚硒酸钠(Na2SeO3)致HepG2细胞DNA损伤的作用机制。方法用0、2·5、5、10、20μmol/L的Na2SeO3、及分别加有还原性谷胱甘肽(GSH)和N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)的Na2SeO3(10μmol/L)处理HepG2。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞活性;流式细胞仪测细胞内活性氧(ROS)的水平以及用彗星实验检测细胞的DNA损伤。结果5、10、20μmol/L Na2SeO3作用于HepG21h即引起ROS增加,12h后即导致细胞HepG2活性下降,24h后DNA损伤增强,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0·05);抗氧化剂GSH和NAC有效抑制了ROS升高,并增强了细胞活性,减弱了细胞DNA损伤,与未加GSH和NAC的Na2SeO3组(10μmol/L)相比,差异有统计学意义(P<0·05)。结论ROS的产生可能是亚硒酸钠造成HepG2DNA损伤的重要原因。     

Organ and subcellular distribution of selenium in rats exposed to cadmium,mercury, and selenium

Three groups of rats were given sodium selenite (Se), sodium selenite and cadmium chloride (Se + Cd), or sodium selenite, cadmium chloride, and mercuric chloride (Se + Cd + Hg), respectively. All animals received subcutaneous doses of ¹¹⁵CdCl₂ (0.3 mg Cd/kg) every other day for a fortnight. Mercuric chloride was administered intravenously at doses of 0.5 mg Hg/kg every other day and Na₂⁷⁵SeO₃ intragastrically at doses of 0.1 mg Se/kg every other day for 2 weeks. The whole-body retention of selenium was slightly elevated by cadmium and increased threefold by cadmium with mercury (mainly blood, liver, and kidneys). Cadmium did not affect subcellular levels of selenium in the kidneys and slightly increased the selenium content in the soluble fraction of the liver. On the other hand, combined administration of mercury and cadmium induced a significant elevation of the selenium content in all subcellular fraction of the kidneys and in the nuclear and mitochondrial fractions of the liver. In all animal groups selenium was bound in the soluble fractions of both the liver and kidneys by high-molecular-weight proteins.     

Organ and subcellular distribution of cadmium in rats exposed to cadmium, mercury, and selenium

Four groups of rats were given: cadmium chloride (Cd), cadmium chloride and mercuric chloride (Cd + Hg), cadmium chloride and sodium selenite (Cd + Se), or cadmium chloride, mercuric chloride, and sodium selenite (Cd + Hg + Se). All animals received subcutaneous doses of 115mCdCl2 (0.3 mg Cd/kg) every other day for 2 weeks. Mercuric chloride was administered intravenously at doses of 0.5 mg Hg/kg every other day, and Na2 75SeO3 intragastrically at doses of 0.1 mg Se/kg every day for a fortnight. The whole-body and organ retention of cadmium changed slightly with the type of exposure. A significant interaction effect of the examined elements was noted in the nuclear and soluble fractions of the liver and kidneys. Mercury decreased the cadmium concentration in both the nuclear and soluble fractions of the kidneys and diminished the effect of selenium on the cadmium level in the soluble fraction of the kidneys. In the liver the presence of mercury contrary to selenium, lowered the cadmium level in the nuclear fraction. The pattern of cadmium binding to proteins of the soluble fraction of the kidneys and liver remained the same in all groups of animals.     

Effect of Selenium and Iodine on Oxidative Stress in the First Trimester Human Placenta Explants

Imbalanced maternal micronutrient status, poor placentation, and oxidative stress are associated with greater risk of pregnancy complications, which impact mother and offspring health. As selenium, iodine, and copper are essential micronutrients with key roles in antioxidant systems, this study investigated their potential protective effects on placenta against oxidative stress. First trimester human placenta explants were treated with different concentrations of selenium (sodium selenite), iodine (potassium iodide), their combination or copper (copper (II) sulfate). The concentrations represented deficient, physiological, or super physiological levels. Oxidative stress was induced by menadione or antimycin. Placenta explants were collected, fixed, processed, and embedded for laser ablation inductively coupled plasma-mass spectrometry (LA ICP-MS) element imaging or immunohistochemical labelling. LA ICP-MS showed that placenta could uptake selenium and copper from the media. Sodium selenite and potassium iodide reduced DNA damage and apoptosis (p < 0.05). Following oxidative stress induction, a higher concentration of sodium selenite (1.6 µM) was needed to reduce DNA damage and apoptosis while both concentrations of potassium iodide (0.5 and 1 µM) were protective (p < 0.05). A high concentration of copper (40 µM) increased apoptosis and DNA damage but this effect was no longer significant after induction of oxidative stress. Micronutrients supplementation can increase their content within the placenta and an optimal maternal micronutrient level is essential for placenta health.