肝细胞生长因子受体在高糖诱导肾I间质成纤维细胞中的表达及其意义

目的体外观察高糖刺激成纤维细胞时,肝细胞生长因子(HGF)受体c-met的表达及HGF/c-met系统的活性.方法高糖刺激细胞后,采用RT-PCR方法分析HGF、c-met mRNA水平.Western印迹分析c-met蛋白质.同时检测外源加入HGF对TGF-β、c-met表达影响,以及采用抗c-met抗体处理后的表达.结果高糖刺激早期HGF、c-met mRNA快速上升.另外,c-met mRNA、蛋白水平明显上调.HGF可以诱导c-met表达,同时降低TGF-β表达.结论c-met局部上调在糖尿病肾脏损伤过程中起重要作用.     

肺高血压大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体相关因子6表达的变化

目的明确肺高血压(PH)大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达的变化。方法 SPF级健康雄性SD大鼠16只, 8周龄, 体质量200～220 g, 采用随机数字表法分为2组(n=8):对照组(C1组)和PH1组。采用皮下注射野百合碱的方法制备大鼠PH模型。模型制备开始后28 d时, 测量大鼠平均肺动脉压力(mPAP), 计算Fulton指数, 计算肺中小动脉中膜厚度百分比, 计算肌化血管百分比, Western blot法检测肺组织TRAF6、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT3)和G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)表达, 计算p-STAT3/STAT3, 免疫共沉淀法检测TRAF6与STAT3的相互作用。原代培养正常大鼠肺动脉平滑肌细胞(C2组)和PH大鼠肺动脉平滑肌细胞(PH2组)于6孔板(n=3)。采用qPCR法检测TRAF6 mRNA表达, Western blot法检测TRAF6、STAT3、p-STAT3和Cyclin D1表达。结果与C1组比较, PH1组大鼠mPAP、Fulton指数、肺中...     

大鼠野百合碱肺高压模型血小板衍生生长因子mRNA的表达及作用

目的 观察血小板衍生生长因子(PDGF)A、B及其α,β受体在大鼠野百合碱肺高压模型中的表达,探讨PDGF在肺血管重构中的作用.方法 SD大鼠24只,体质量250～300g,随机分为野百合碱注射组(MCT,12只)和对照组(Con,12只).MCT组给与野百合碱60 mg/kg单次皮下注射.喂养6周后,使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察肺组织PDGF-A、PDGF-B及其α、β受体mRNA转录量的变化.结果 MCT组肺组织中PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β的mRNA转录水平都高于对照组(1.5609±0.1246比0.4057±0.0007,P＜0.05;0.4810±0.0733比0.2639±0.0070,P＜0.05:0.4963±0.0137比0.3038±0.0859,P＜0.05;1.1257±0.2490比0.0736±0.0185,P＜0.05).结论 血小板衍生生长因子(PDGF)-A、PDGF-B及其α、β受体活性表达的增强,参与了肺动脉高压肺血管重构的机制.     

hHGF基因修饰对MSCs移植改善重度肺动脉高压大鼠肺微血管稀薄作用的影响

目的 评价人肝细胞生长因子(hHGF)基因修饰对骨髓间质于细胞(MSCs)移植改善重度肺动脉高压大鼠肺微血管稀薄作用的影响.方法 将原代培养的F344大鼠MSCs转导携带HGF基因的慢病毒载体和空载体,以获得HGF-MSCs和EGFP-MSCs.7周龄近交系雄性F344大鼠,体重180 ～ 250 g,采用野百合碱复合单肺切除法建立重度肺动脉高压大鼠模型.取重度肺动脉高压大鼠66只,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=22):对照组(C组)、空载体慢病毒转导的MSCs(EGFP-MSCs)组(E组)和hHGF转导的MSCs (hHGF-MSCs)组(H组).C组经颈外静脉注射DMEM1ml,E组注射含5× 105个EGFP-MSCs的DMEM 1 ml和H组注射含5×105个hHGF-MSCs的DMEM 1ml.注射野百合碱后45 d内进行生存分析；颈外静脉注射后2周,记录平均肺动脉压(MPAP),计算有心室肥厚指数,观察肺组织MSCs分布情况,测定肺组织鼠肝细胞生长因子(rHGF)和hHGF蛋白的含量,测定Ⅷ因子的表达情况以计算肺微血管密度,并行肺动脉钡剂灌注造影.结果 C组和E组肺组织均未检测出hHGF.与C组比较,E组和H组MPAP和右心室肥厚指数降低,肺组织rHGF蛋白含量、肺微血管密度和生存率升高(P＜0.01).与E组比较,H组MPAP和右心室肥厚指数降低,肺组织rHGF蛋白含量、肺微血管密度和生存率升高(P＜0.01).E组和H组肺内均可见大量绿色荧光的MSCs分布.肺动脉钡剂灌注造影显示,H组末梢血管灌注背景明显多于E组和C组.结论 hHGF基因修饰可促进MSCs移植改善重度肺动脉高压大鼠肺微血管稀薄的作用.     

盐酸戊乙奎醚对野百合碱致大鼠肺动脉高压的抑制作用

目的探讨盐酸戊乙奎醚是否能够减缓野百合碱导致的大鼠肺动脉高压及是否能够预防或缓解肺血管重构。方法 3~4周龄健康雄性SD大鼠30只,体重90~100g,随机均分为正常对照组(C组)、野百合碱肺高压组(M组)、盐酸戊乙奎醚组(P组),每组10只。M组和P组腹腔注射野百合碱60mg/kg建造大鼠肺动脉高压模型,C组腹腔注射等容量生理盐水。P组大鼠于建模前15min时腹腔注射盐酸戊乙奎醚2mg/kg,建模第2天腹腔注射盐酸戊乙奎醚1mg/kg,C组和M组在相应时点腹腔注射等容量生理盐水,连续使用3周。在建模后第21天,三组大鼠检测血流动力学(肺动脉压、右心室压);处死大鼠前采集静脉血以备血液生化检测:ELISA法检测一氧化氮(NO)含量、内皮素-1(ET-1)含量。处死大鼠后留取左肺组织行病理切片以观察肺组织病理形态学变化,取右肺组织于-80℃冻存以备后续检测。结果 M组和P组右心室SBP、平均肺动脉压、肺动脉SBP和肺动脉DBP明显高于C组(P0.05);P组右心室SBP、平均肺动脉压、肺动脉SBP和肺动脉DBP明显低于M组(P0.05)。M组肺小动脉明显增厚,肺小动脉管腔狭窄甚至闭塞,肺组织炎性细胞浸润非常明显。P组肺小动脉壁增厚减轻,肺组织炎性细胞浸润减轻。M组大鼠血清中NO含量明显低于,ET-1的含量明显高于C组(P0.05);P组大鼠血清中NO含量明显高于M组和C组(P0.05),ET-1含量明显高于C组,但明显低于M组(P0.05)。结论使用野百合碱成功建造了大鼠肺动脉高压模型,NO含量降低、ET-1含量增加可能与野百合碱致大鼠肺动脉高压的形成有关;盐酸戊乙奎醚减缓野百合碱致大鼠肺动脉高压模型的肺动脉压力的升高、改善肺小动脉壁增厚可能与增加NO含量、降低ET-1含量有关。     

西地那非对肺动脉高压大鼠肺血管重塑的影响

目的观察磷酸二酯酶V抑制剂西地那非对肺动脉高压大鼠肺血管重塑的影响及其机制。方法40只SD大鼠,体重220～230 g,随机分为4组(n=10)：对照组(C组)、肺动脉高压组(P组)、盐酸西地那非25 mg·kg~(-1)(S1组)、盐酸西地那非50 mg·kg~(-1)组(S2组)。P组、S1组、S2组腹腔注射野百合碱60 mg·kg~(-1)(用生理盐水稀释至1ml),C组给予等量生理盐水。S1组、S2组注射野百合碱后2周腹腔注射相应剂量的盐酸西地那非,每天1次,给药时间持续6周。测定平均动脉压(MAP)及平均肺动脉压(MPAP)后处死大鼠,计算右心室壁重量与左心室+室间隔之和的比值(右心室肥厚指数),光镜下观察肺组织的形态学,计算肺小动脉管壁与管腔厚度的比值(管壁/管腔比),用RT-PCR方法测定肺组织血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,用Western blot方法测定肺组织总ERK_1/ERK_2、磷酸化ERK_1/ERK_2及MKPl水平。结果野百合碱可导致MPAP、右心室肥厚指数及肺小动脉管壁/管腔比增加,并可增加肺组织VEGF mRNA、磷酸化ERK_1/ERK_2、MKP1水平,但是对MAP无影响,西地那非除增加肺组织MKP1水平外,可减弱野百合碱诱发的上述改变。结论西地那非可减轻肺动脉高压大鼠的肺血管重塑,其机制与下调肺组织VEGF、ERK_1/ERK_2磷酸化水平有关。     

肝细胞生长因子受体在高糖诱导肾间质成纤维细胞中的表达及其意义

目的 体外观察高糖刺激成纤维细胞时，肝细胞生长因子（HGF）受体c-met的表达及HGF／c-met系统的活性。方法 高糖刺激细胞后，采用RT－PCR方法分析HGF、c-met mRNA水平。Western印迹分析c-met蛋白质。同时检测外源加入HGF对TGF－β、c-met表达影响，以及采用抗c-met抗体处理后的表达。结果 高糖刺激早期HGF、c-met mRNA快速上升。另外，c-met mRNA、蛋白水平明显上调。HGF可以诱导c-met表达，同时降低TGF－β表达。结论 c-met局部上调在糖尿病肾脏损伤过程中起重要作用。     

肝癌术后肝再生状态与肝癌复发关系的初步研究

目的:探讨肝癌肝切除术后再生激素的变化，以评估肝再生激素与肝癌复发之间的关系。方法:收集2年内确诊为原发性肝癌行手术治疗的患者129例的临床资料，将小肝癌及大肝癌术后复发患者分别分为术后1，6个月，1年复发组，并以肝癌TAE治疗患者40例作为对照组。分别于术前1d与术后1, 3, 7, 10, 14 d清晨抽取静脉血检测血清肝细胞生长因子(HGF)，观察其在手术前后HGF的变化。手术中切取癌及癌旁组织为标本分别采用半定量RT-PCR及Western Blot法检测HGF受体c-met的mRNA及蛋白表达，比较复发时间早晚与表达量的差别。将所得结果与病理检查发现的脉管癌栓发生率对照。结果:肝切除后，患者血清HGF水平升高，术后约10 d达高峰期，14 d 开始降低。大肝癌组的HGF升高水平明显高于小肝癌组(P<0.05)。大、小两肝癌组的c-met mRNA及蛋白的水平变化均显示肿瘤复发时间越早，c-met水平越高，脉管癌栓发生率越高。结论:肝癌患者肝部分切除术后血清HGF水平明显增高及肿瘤本身c-met 蛋白过度表达可能与术后早期复发有关。     

靶向纳米载体包封西地那非对肺高压大鼠肺血管重构的影响

目的观察包封西地那非的靶向纳米载体对野百合碱肺高压大鼠肺动脉压力、肺小血管中膜增殖以及右心室心肌肥厚的治疗作用。方法雄性SD大鼠42只,随机分为六组,每组7只。除对照组(CON组)外,其余各组皮下注射野百合碱60mg/kg,4周后分别经尾静脉注射西地那非8mg/kg(SIL组)、靶向纳米空载体(GL组)、普通纳米载体包封西地那非(L-SIL组)和靶向纳米载体包封西地那非(GL-SIL组)干预2周,CON组与模型组(MCT组)则给予等体积的生理盐水。2周后,开胸测量大鼠平均肺动脉压(mPAP)并处死动物取心肺组织,进行HE染色,测定肺小血管中膜厚度比例(WT),右心室心肌细胞的面积。采用免疫组织化学法检测肺血管中膜α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)含量。采用活体荧光示踪观察靶向纳米载体的组织分布。结果与CON组比较,MCT组、GL组、SIL组和L-SIL组mPAP明显升高(P0.05)。与MCT组比较,GL-SIL组mPAP明显降低(P0.05)。与CON组比较,MCT组、SIL组、GL组和L-SIL组WT明显增加(P0.05),α-SMA表达明显增高(P0.05)。与MCT组比较,GL-SIL组WT和α-SMA的表达明显降低(P0.05)。与CON组比较,MCT组、SIL组、GL组和L-SIL组心肌细胞面积明显增大(P0.05)。但GL-SIL组明显小于MCT组(P0.05)。结论靶向纳米载体包封西地那非可明显降低肺动脉高压大鼠的平均肺动脉压力,改善肺血管中膜增殖和右心室肥大,与其具有良好的肺组织靶向性相关。     

生存素在二氯乙酸盐治疗大鼠肺动脉高压中的表达变化

目的 观察早期和晚期二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)干预对左肺切除(pneumonectomy,PE)联合野百合碱(monocrotaline,MCT)皮下注射诱导大鼠肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)的治疗作用以及对生存素(survivin)表达的影响.方法 雄性SD大鼠(体重200 g～250 g)采用随机数字表法随机分为5组,每组8只:正常对照组(N),DCA对照组(D),肺高压模型组(PM),早期DC预防组(PMD1),晚期DCA治疗组(PMD2).除N组和D组外,其余组别大鼠均行左肺切除,并于14 d后项背部皮下注射MCT(剂量为60 mg/kg).同时PMD1组和PMD2组分别在左肺切除14 d和35 d后开始每天给予DCA(剂量为80 mg· kg-1·d-1)灌胃,而PM组在左肺切除14 d后给予相同容积的生理盐水灌胃,D组同N组大鼠,只是左肺切除14 d后同样给予相同剂量的DCA灌胃.PMD1组和PMD2组大鼠分别在左肺切除35 d和56 d行开胸进行肺动脉压力(PAP)的测量.测量后处死动物,取肺组织进行常规病理染色,采用荧光定量PCR法检测survivin mRNA的表达,采用western blot法检测大鼠survivin蛋白的表达.结果 PM组大鼠平均PAP为(37.8±1.3) mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),肺小血管中膜厚度占外径的百分比(WT％)和右心室与左心室加室间隔之比(RV/LV+S)分别为(40±8)％和(44.8±2.2),survivin mRNA和Western blot蛋白表达分别为(4.03±0.27)和(0.684±0.055),与N组、D组比较均明显升高(P＜0.05).早期DCA预防后PAP明显下降为(26.2±1.5) mm Hg,WT％和RV/LV+S分别降为(24±3)％和(29.5±1.9),而survivin mRNA和western blot蛋白表达也分别降为(2.00±0.12)和(0.415±0.027),与PM组比较均明显下降(P＜0.05),而晚期干预后PAP为(36.0±1.6) mm Hg,WT％和RV/LV+S分别为(38±3)％和(42.0±1.3),survivin mRNA和western blot蛋白表达也分别(3.77±0.45)和(0.732±0.101),与PM组比较没有统计学差异(P＞0.05).结论 Survivin在PAH的发生及肺血管重构中起重要作用,而DCA早期预防能缓解PAP升高和肺血管中膜增厚以及降低survivin的表达量,然而晚期干预后和PM组比较差异没有统计学意义.     

杭州健康女性定量骨超声测定原发性骨质疏松

目的 评价杭州健康女性骨超声速度(SOS)值随增龄减少和骨质疏松患病率，建立杭州地区女性骨超声速度值参考数据库。方法 定量超声法测定1208例杭州地区健康女性桡骨远端(RAD)，第3指骨近节(PLX)，第V跖骨(MTR)和胫骨中段(TIB)的超声速度值。结果 RAD、PLX、MTR和TIBSOS峰值(Peak of SOS)均出现在40-45岁，TJB的SOS峰值出现在35—40岁，此后随年龄增长而下降。绝经后妇女在绝经后早期和晚期各有1个SOS快速减少期，前见于桡骨近端，平均年减少率为2．4％，后见于胫骨中段，平均年减少率为1．8％。各部位骨SOS累积减少率随年龄增长而增加，到85岁4部位累积减少为13％-18％。60岁以后骨质疏松性症(OP)检出率为45％-70％，OP检出率以桡骨远端最高，60-70岁平均为67％，第3指骨近端次之约50％，胫骨中段最低为36％；75岁以后分别为70％，65％和45％。结论 全身各部位骨超声速度值到达峰值的年龄不同，峰值也各有差异。绝经后妇女骨超声速度值随年龄增加减少较快，应予激素和补钙治疗，桡骨远端为本地区SOS检测和OP检出的敏感部位。     

脊髓胶质细胞在大鼠炎性痛形成中的作用

目的 评价脊髓胶质细胞在大鼠炎性痛形成中的作用.方法 清洁Ⅱ级成年雄性SD大鼠,体重180～220 g,取蛛网膜下腔置管成功的大鼠65只,随机分为5组(n=13),生理盐水组(NS组):右后肢踝关节外侧皮下注射NS 50μl;炎性痛组(IP组):采用右后肢踝关节外侧皮下注射完全弗氏佐剂50μl的方法制备炎性痛模型;氟代柠檬酸组(FC组):经蛛网膜下腔导管注射FC 1 nmol/10 μl,15 min后右后肢踝关节外侧皮下注射NS 50 μl;NS+IP组:经蛛网膜下腔导管注射NS 10 μl,15 min后制备炎性痛模型;FC+IP组:经蛛网膜下腔导管注射FC 1 nmol/10 μ,15 min后制备炎性痛模型.于模型制备前2 d(T_0)、皮下注射药物前(T_1)和注射药物后2、4、6、8、10、12、24、26 h(T_(2～9))时测定机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).皮下注射药物后8 h时采用免疫组化法测定脊髓背角星形胶质细胞标记物(GFAP)和小胶质细胞标记物(OX-42)的表达水平.结果 与NS组比较,IP组和NS+IP组T_(3～9)时MWT和TWL降低,FC+IP组T_(3～9)时MWT降低,T_(8,9)时TWL降低,IP组、NS+EP组和FC+EP组脊髓GFAP和OX-42的表达水平均上调(P<0.05);与IP组比较,FC组T_(3～9)时MWT和TWL升高,FC+IP组T_(3～7)时MWT和TWL升高,2组脊髓GFAP和OX-42的表达水平均下调(P<0.05或0.01).结论 脊髓胶质细胞的活化参与了大鼠炎性痛的形成.     

中脑导水管周围灰质小胶质细胞活化在大鼠神经病理性痛中的作用

目的 评价中脑导水管周围灰质小胶质细胞活化在大鼠神经病理性痛中的作用.方法 雄性SD大鼠176只,体重200 ～ 250 g,9周龄,采用随机数字法,将其分为4组:假手术组(S组,n=40)、神经病理性痛组(NP组,n=40)、生理盐水组(NS组,n=48)和米诺环素组(M组,n=48).NP组、NS组和M组采用慢性坐骨神经缩窄性损伤法制备大鼠神经病理性痛模型;S组仅暴露坐骨神经,而不结扎.术后第7天时,NS组和M组分别于中脑导水管周围灰质的腹外侧区注射生理盐水或米诺环素0.5μl.取8只大鼠,分别于术前1 d(T0)、术后第3天(T1)、第7天给药前30 min(T2)、第7天给药后30 min(T3)、第14天(T4)和第21天(T5)时测定机械痛阈.于T1-5时各处死8只大鼠,取脑组织,行小胶质细胞计数.结果 与S组比较,NP组、NS组和M组T1-5时机械痛阈降低,小胶质细胞计数升高(P＜0.05);NP组和NS组各时点机械痛阈和小胶质细胞计数差异无统计学意义(P＞0.05);与NP组和NS组比较,M组T3时机械痛阈升高,小胶质细胞计数降低(P＜0.05).结论 中脑导水管周围灰质小胶质细胞的活化参与了大鼠神经病理性痛中的形成与维持.     

脊髓胶质细胞在小鼠骨癌痛形成中的作用

目的 评价脊髓胶质细胞在小鼠骨癌痛形成中的作用.方法 健康雄性C3H/He小鼠40只,周龄8～10周,体重18～22 g,随机分为4组(n=10):假手术组(S组)、骨癌痛组(B组)、PBS组(P组)和米诺环素组(M组).S组跟骨骨髓腔内注射PBS 10 μl;余3组跟骨骨髓腔内注射含2×105个骨纤维肉瘤细胞的PBS 10 μl制备骨癌痛模型,于造模前即刻开始PBS组鞘内注射PBS 5μl,M组鞘内注射米诺环素(用PBS溶解为0.2 mmol/L)5μl,1次/d,连续11 d.于造模前1 d、造模后即刻、3、5、7、9、11 d时测定机械痛阈;于造模后3、7、9、11 d机械痛阈测定结束后测定冷痛阈.痛阈测定结束后处死小鼠,取脊髓组织,测定神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和CD11b的表达水平.结果 与S组比较,B组和P组造模后3-11 d时、M组造模后3、5 d时机械痛阈升高,B组、P组和M组造模后7～11 d时冷痛阈升高,脊髓CD11b和GFAP表达上调(P<0.05).与B组比较,M组造模后3-11 d时机械痛阈降低,造模后7-11 d时冷痛阈降低,脊髓CD11b和GFAP表达下调(P<0.05).结论 脊髓胶质细胞(星形胶质细胞和小胶质细胞)的激活参与了小鼠骨癌痛的形成.     

沈阳男性髋部骨折多于女性原因探讨

为找出沈阳地区髋部骨折发生男性多于女性的原因，探索该病在不发达国家或地区的流行特点，我们再次通过查阅病例记录，对沈阳市１９９４年５０岁以上人口的部分髋部骨折病发生的原因进行了较详细的调查分析。共调查分析２６６髋部骨折病例，其中男１６３例，女１０３例。损伤原因记为单纯摔倒（滑倒或绊倒）、骑自行车摔倒、自行车撞倒、机动车事故和高位跌下（滚楼梯或从较高位置掉下）。结果表明：男女在髋部骨折伤因构成上有差别（Ｐ＝０．００４）。女性髋部骨折的大多数（７０％）是由单纯摔倒引起，而在男性则不足一半（４９％），即男性髋部骨折的一半以上不是由于单纯摔倒而是由各种意外事故造成的（Ｐ＝０．０００８）。在各种意外事故中，男性骑自行车摔倒引起骨折的频率（２８％）明显高于女性（１０％）。除了骑自行车摔倒外，男性由自行车撞倒和高位跌下引起骨折的频率稍高于女性，但无太大差别。机动车事故造成骨折的频率男女基本一致。此结果在一定的程度上说明，１９９４年沈阳５０岁以上的男性髋部骨折发病率高是由于男性发生的各种意外事故多，尤其是骑自行车引起的事故造成的。     

脊柱侧凸顶椎区椎间盘纤维环中多聚蛋白多糖的表达及意义

目的：探讨脊柱侧凸患者顶椎区椎间盘纤维环中多聚蛋白多糖的表达及其意义。方法：采集2003年7月至2004年9月间行前路松解或矫形手术的40例脊柱侧凸患者侧凸顶椎区椎间盘组织。青少年特发性脊柱侧凸患者（adolescent idiopathic scoliosis，AIS）25例，胸椎椎间盘11例，腰椎椎间盘14例；先天性脊柱侧凸患者（congenital scoliosis，CS）15例，胸椎椎间盘6例，腰椎椎间盘9例。利用RT—PCR扩增多聚蛋白多糖（Aguecan），琼脂糖凝胶电泳，在UVP（紫外光测定法）成像系统进行扫描．GelWork图像分析系统中进行灰度测定半定量分析。分别计算AIS组和CS组凹侧、凸侧纤维环中Aggrecan含量，并对CS组和AIS组胸椎和腰椎以及椎间盘的凹侧和凸侧进行比较。结果：AIS组和CS组椎间盘凹侧纤维环中Aggrecan含量低于凸侧．差异有显著性（P〈0．01），胸椎椎间盘纤维环中Aggrecan的含量低于腰椎，但无统计学差异。AIS组Aggrecan的含量和CS组相应部位Aggrecan的含量无明显差别。结论：AIS椎间盘纤维环凹凸侧存在Aggrecan代谢差异．并且可能是脊柱侧凸所致的继发改变．但也可能是脊柱侧凸发生、发展中的重要因素。     

标准化患者在评估麻醉临床型研究生术前访视能力中的应用

目的 在现有的研究生培训体系中,术前访视能力缺少有效的评估方法。本研究拟评价标准化患者(standardized patients, SP)情景模拟在术前访视能力评估中的可行性和有效性。方法 将SP情景模拟整合到多站式考核的术前访视考核站点中,对我院第二、第三年麻醉临床型研究生进行考核。考核过程中由SP和2名现场考官分别对考生进行评分,评分方法采用一个核查表评估术前访视的内容,采用一个量表评估病史采集技巧、交流技巧及人文素养的能力,同时由现场考官对SP的表现进行打分。考核结束后,另一名考官通过回顾视频对考生和SP的表现进行打分。SP与考官打分采用Pearson相关性分析。结果 在量表评估中,病史采集技巧评分(r=0.701,P<0.001)、交流技巧评分(r=0.752,P<0.001)和人文素养评分(r=0.595,P<0.001)在SP与考官之间均存在良好的相关性。在核查表评估中,SP评分与考官评分也具有良好的相关性(r=0.718,P<0.001)。结论 标准化患者情景模拟能够为麻醉临床型研究生术前访视过程中非技术技能的考核提供一种直观可靠的方法。     

脊髓背角卡配因在大鼠足底炎性痛形成中的作用

目的 探讨脊髓背角卡配因在大鼠足底炎性痛形成中的作用.方法 雄性SD大鼠48只,6周龄,体重160～200 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组:正常对照组(C组,n=8)、PBS组(n=16)和酵母多糖诱发足底炎性痛组(Z组,n=24).Z组于大鼠左侧后足足底皮下注射酵母多糖1.25 mg,制备酵母多糖诱发足底炎性痛模型,PBS组给予等容量PBS 100μl.分别于给药前(T0)、给药后30 min(T1)、1 h(T2)、2 h(T3)、4 h(T4)、8 h(T5)、24 h(T6)和48 h(T7)时测定左侧后足机械刺激缩足阈值(MWT)、热缩足反应潜伏期(PWTL)和左侧后足足底最大厚度.PBS组于T4时处死8只大鼠,Z组分别于T4、T6和T7时各处死8只大鼠,取左侧脊髓L4～6节段,采用Western blot法测定脊髓背角spectrin αⅡ降解产物、IκBα、环氧化酶-2(COX-2)的表达和NF-κB活性.结果 与C组比较,Z组MWT降低,PWTL缩短,足底最大厚度增厚,脊髓背角spectrin αⅡ降解产物和COX-2的表达上调,IκBα表达下调,NF-κB活性升高(P＜0.05或0.01),PBS组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脊髓背角卡配因活化参与了大鼠足底炎性痛的形成,其机制与激活NF-κB,上调COX-2表达有关.     

Effect of dantrolene in an in vivo and in vitro model of myocardial reperfusion injury

BACKGROUND: In skeletal muscle, dantrolene reduces free cytosolic calcium by inhibiting calcium release from the sarcoplasmic reticulum. A similar effect in ischemic-reperfused heart cells would protect myocardial tissue against reperfusion injury. We tested the hypothesis that dantrolene infusion during reperfusion protects the heart against reperfusion injury. METHODS: Isovolumetric beating rat hearts were subjected to 30 min of ischemia followed by 60 min of reperfusion. Left ventricular (LV) developed pressure (LVDP) and creatine kinase release (CKR) were determined as indices of myocardial performance and cellular injury, respectively. In the treatment groups, dantrolene (25 (DAN25) or 100 (DAN100) micromol l(-1)) was infused during the first 15 min of reperfusion; control hearts received the respective concentration of the vehicle (mannitol (CON25, CON100), each group n=7). To investigate the effects of dantrolene on reperfusion injury in vivo, 18 chloralose-anesthetized rabbits were subjected to 30 min occlusion and 180 min reperfusion of a major coronary artery. LV pressure (LVP), cardiac output (CO), and infarct size were determined. During the last 5 min of ischemia, nine rabbits received 10 mg kg(-1) dantrolene intravenously (DAN). Another nine rabbits received the vehicle (dimethylsulfoxide) and served as controls (CON). RESULTS: In isolated rat hearts, there was no recovery of LVDP in any group. Total CKR during 1 h of reperfusion was 845+/-76 (CON100) and 550+/-81 U g(-1) dry mass (DAN100, P<0.05). In rabbits in vivo, hemodynamic baseline values were similar between groups (CON vs. DAN: LVP, 99+/-6 (mean+/-SEM) vs. 91+/-6mm Hg, P=0.29; CO, 252+/-26 vs. 275+/-23 ml min(-1), P= 0.53). During coronary artery occlusion, LVP and CO were reduced in both groups (CON: LVP, 89+/-3%; CO, 90+/-5% of baseline values) and LVP did not recover to baseline values during reperfusion (51+/-5% (CON) vs. 67+/-7% (DAN) of baseline, P=0.10). Infarct size was 41+/-4% of the area at risk in controls and 37+/-6% in dantrolene treated hearts (P=0.59). CONCLUSIONS: Dantrolene reduced CKR, indicating an attenuation of lethal cellular reperfusion injury in isolated rat hearts. However, in the rabbit in vivo, there was no effect on the extent of reperfusion injury after regional myocardial ischemia.