富血小板血浆凝胶及其在骨科的应用

富血小板血浆（PRP）是通过离心自体全血后而得到的血液制品，其本质是血小板的浓缩物，含有大量的生长因子，如血小板衍生长因子（PDGF），转化生长因子-β（TGF-β），类胰岛素生长因子（IGF），表皮生长因子（EGF），血管内皮生长因子（VEGF），PRP凝胶是PRP与凝血酶和氯化钙混合而成的一种具有粘性的胶状凝块。     

富血小板血浆促进骨缺损修复的进展

富血小板血浆（p late let-rich p lasm a,PRP）是通过离心自体全血而得到的含高浓度血小板的血浆。PRP中含有高浓度生长因子,如：血小板源性生长因子（p late let-derived grow thfactor,PDGF）、转化生长因子-β（transform ing grow th fac-tor-,βTGF-β）、类胰岛素生长因子（insu lin-like grow th fac-tor,IGF）、表皮生长因子（ep iderm a l grow th factor,EGF）和血管内皮细胞生长因子（vascu lar endothe lia l grow th factor,VEGF）等。经酶联免疫吸附试验证实,PRP中除IGF以外,     

富血小板血浆的研究进展及其在骨科的应用

骨缺损的修复和再生是骨科学研究领域中的重要课题，目前研究热点是利用多种生长因子来促进、增强骨的爬行替代和新骨形成的能力，对骨缺损的修复及愈合起重要作用。20世纪90年代以来，国内外一些学者发现富血小板血浆（platelet—rich plasma，PRP）中含有高浓度的生长因子如：血小板衍生生长因子（platelet—derived growth factor，PDGF）.     

富血小板血浆制备套装的评估研究

目的通过分析富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)中血小板、白细胞和生长因子的浓度,计算回收率和富集系数,并做相关性分析,探讨PRP制备套装的实用性和稳定性。方法取30例符合纳入标准的自愿者自愿捐赠的外周血各40mL,应用山东威高集团医用高分子制品股份有限公司的PRP制备套装制备PRP各4mL。全自动血液分析仪计数全血和PRP中血小板和白细胞浓度,并计算血小板或白细胞回收率及富集系数;并分别测定男、女自愿者血小板及白细胞浓度。ELISA法定量分析激活后全血及PRP中PDGF、TGF-β、VEGF的浓度。结果全血和PRP中血小板浓度分别为(131.40±29.44)×109/L和(819.47±136.32)×109/L,比较差异有统计学意义(t=—27.020,P=0.000);PRP中血小板回收率为60.85%±8.97%,富集系数为6.40±1.06。全血和PRP中白细胞浓度分别为(5.57±1.91)×1012/L和(32.20±10.42)×1012/L,比较差异有统计学意义(t=—13.780,P=0.000);PRP中白细胞回收率为58.30%±19.24%,富集系数为6.10±1.93。PRP中血小板浓度和白细胞浓度分别与全血中血小板浓度(r=0.652,P=0.000)和白细胞浓度(r=0.460,P=0.011)成正相关。男性组和女性组PRP中血小板浓度和白细胞浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。PRP中PDGF、TGF-β、VEGF浓度分别为(698.15±64.48)、(681.36±65.90)、(1071.55±106.04)ng/mL,是全血的(5.67±1.18)、(6.99±0.61)、(5.74±0.83)倍。PRP中PDGF浓度(r=0.832,P=0.020)、TGF-β浓度(r=0.835,P=0.019)、VEGF浓度(r=0.824,P=0.023)均与PRP中血小板浓度成正相关。结论 PRP制备套装可以稳定地制备出富含高浓度血小板、白细胞和生长因子的PRP。     

富血小板血浆修复骨缺损的机制研究进展

富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)是含有高浓度血小板的血浆,其中含丰富的生长因子,广泛应用于口腔颌面外科、骨科,用于骨组织、软骨组织和软组织的修复,其中生长因子对骨修复的多个阶段和多个方面都起作用,以血小板衍化生长因子(PDGF)和转化生长因子-β(TGF-β)的作用最为显著,机制研究也较为透彻。     

不同比例激活富血小板血浆对其生长因子浓度及人骨髓基质干细胞增殖的影响

目的 确定激活剂凝血酶与富血小板血浆(PRP)混合的最适比例,并探讨凝血酶与PRP中血小板衍生生长因子.AB(PDGF.AB)和转化生长因子-β(TGF-β)对人骨髓基质干细胞(hBMSCs)增殖的联合作用.方法 按1000 U凝血酶溶于1 mL质量百分比为10%的CaCl2配制激活剂.按PRP与激活剂混合比例为1:1、5:1、10:1、20:1、40:1分为A、B、C、D、E 5组.ELISA法测定各组0、1、8、24、120 h后PRP凝胶中PDGF-AB、TGF-β1的浓度;MTT法评价各组PRP凝胶上清对hBMSCs增殖的影响.结果 PRP与凝血酶混合后,PDGF-AB、TGF-β1浓度立即升高,在激活1 h后达到高峰.B、C、D组PRP凝胶中PDGF-AB、TGF-β1的浓度最高,并明显促进hBMSCs的增殖;而A组则抑制hBMSCs的增殖.结论 PRP对hBMSCs增殖的作用与其所含有PDGF-AB、TGF-β1存在浓度依赖性,而凝血酶可能在一定浓度范尉内主要通过对PRP中生长因子浓度的调控来影响hBMSCs的增殖,但是当凝血酶浓度过高时则抑制hBMSCs的增殖.     

富含血小板血浆在医疗美容领域的应用进展

血小板是血液中的组成成分，其生理功能主要是止血、凝血并维持毛细血管的完整性等。富含血小板血浆（Platelet—Rich Plasma，PRP）是白体全血经离心分离、血小板含量高于普通全血4～8倍的浓缩血浆。因其含有多种高浓度的生长因子，这些生长因子相互协同作用，有促进组织再生、创面愈合、新生血管形成、减少瘢痕等作用，临床已有大量报道PRP应用于骨科、眼科、皮肤科、颌面外科、烧伤整形等学科取得了良好的效果。尤其近年来，随着组织工程、基因工程和干细胞培养等研究的深入和广泛的发展，有关PRP的应用发挥出了更大的优势，显示出独特的作用。PRP在医疗美容领域的研究和应用，也成为目前众多学者聚焦的热点。     

复合细胞和人工骨的富血小板血浆成骨能力研究

目的探讨复合细胞和人工骨的富血小板血浆（platelet—rich plasma，PRP）促进骨缺损修复的能力。方法取新西兰大白兔骨髓，分离培养骨髓基质干细胞（marrow stromal stem cells，MSCs）；取兔全血体外诱导培养为类成骨样细胞，应用低密度两次离心法制备PRP。取48只1岁左右新西兰大白兔建立双侧桡骨1．2cm骨缺损模型，根据缺损中植入材料的不同随机分为4组，每组12只。A组：左侧PRP／Mscs／β-磷酸三钙（β-tricalcium phosphate，pTCP），右侧MSCs／β-TCP；B组：左侧自体骨，右侧PRP／Mscs／β-TCP；C组：左侧自体骨，右侧MSCs／β-TCP；D组：左侧PRP／β-TCP，右侧β-TCP。术后2、6及12周通过大体观察、X线片、组织学及生物力学观察桡骨缺损的愈合情况。结果制备的PRP血小板浓度稳定，约为全血的5．45±0．23倍。大体标本与X线片显示2、6周时PRP／MSCs／β-TCP在缺损处桥接及新生骨外形较自体骨差，与MSCs／β-TCP无明显区别；12周，PRP／MSCs／β-TCP在缺损处桥接及新生骨外形接近于自体骨，优于MSCs／β-TCP。组织学观察，在新生骨数量及成熟度方面，术后各时间点PRP／MSCs／β-TCP明显优于MSCs／β-TCP（P〈0．05），PRP／MSCs／β-TCP与自体骨无差异（P〉0．05）；2、6周PRP／β-TCP与β-TCP无差异（P〉0．05）；12周PRP／β-TCP优于β-TCP（P〈0．05）。新生骨生物力学强度检测，6、12周PRP／MSCs／阻TCP优于MSCs／β-TCP（P〈0．05）；6周PRP／MSCs／β-TCP小于自体骨（P〈0．05），但12周与自体骨无差异（P〉0．05）；12周PRP／β-TCP与β-TCP无差异（P〉0．05）。结论PRP复合MSCs和β-TCP显示出了良好的成骨能力，PRP可通过提高MSCs和成骨细胞的增殖与分化活性，促进骨缺损的修复。     

可注射组织工程材料壳聚糖-β-磷酸三钙/富血小板血浆对体外培养骨髓基质干细胞增殖的影响

目的研究富血小板血浆(PRP)与可注射性材料壳聚糖-β-磷酸三钙(β-TCP)复合后对体外培养骨髓基质干细胞(BM-SCs)的增殖作用,探讨PRP作为壳聚糖-β-TCP生长因子来源的可行性。方法将体外培养并扩增的中国青山羊BMSCs与可注射的壳聚糖-β-TCP支架体外复合培养,分为空白对照组、单纯材料组和PRP/材料组,通过倒置显微镜观察细胞生长情况,MTT法检测材料中PRP对细胞增殖的影响。结果PRP/材料组中体外培养的BMSCs增殖优于单纯材料组和空白对照组(P<0·05),单纯材料组和空白对照组细胞增殖无明显差异。结论复合材料中的PRP能促进体外培养的BMSCs增殖,PRP作为可注射性材料壳聚糖-β-TCP中的生长因子是可行的。     

自体血小板分离在心血管手术中的应用

体外循环(CPB)期间,由于血小板激活和α-颗粒释放,导致血小板减少和功能下降。CPB前,利用自体血小板分离技术可将部分血小板从患者全血中分离出来制成富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP),PRP可在术后回输,以达到血小板数量和功能的双重保护,另一方面可将PRP制备成自体血小板胶(autologousplateletgel,APG),APG中含有丰富的生长因子,并且具有足够的抗张强度和粘性,因此可起到术中止血、封闭伤口、促进胸骨及伤口愈合的作用。     

骨质疏松性骨折愈合过程中的骨重建因子

一般性骨折愈合过程分为血肿机化演进期、原始骨痂形成期和骨痂改造塑形期；而骨质疏松性骨折愈合过程分为纤维骨痂期、软骨骨痂期和骨性骨痂期。骨质疏松性骨折愈合的组织学观察表明，纤维骨痂期主要是成纤维细胞合成Ⅲ型胶原；软骨骨痂期主要是成软骨细胞合成、分泌Ⅱ型胶原；骨性骨痂期主要是随着软骨内成骨的出现和发展，Ⅱ型胶原消失，逐渐由抗张力性能较强的Ⅰ型胶原所取代。一般来说，实验性骨质疏松性骨折的愈合方式与一般性骨折愈合方式相似，软骨内成骨和膜内成骨共同参与了骨质疏松性骨折的修复过程，但以软骨内成骨为主。     

生长因子在动物肌腱损伤修复中的机制和治疗进展

肌腱损伤的治疗近年来呈多样化发展,保守治疗和手术治疗各有利弊,没有统一的标准。目前生长因子在肌腱损伤修复中体现出越来越重要的作用,生长因子联合手术治疗成为肌腱损伤治疗新的希望。该文对当前生长因子在动物肌腱损伤治疗中的进展做一综述,其中包括肌腱的生理解剖、影响肌腱损伤的因素、肌腱损伤动物模型的建立、动物肌腱损伤的生长因子治疗进展和生长因子治疗肌腱损伤的机制等方面。     

β转化生长因子／smad信号通路与慢性移植肾肾病

慢性移植肾肾病（chronic allograft nephropathy，CAN）是移植后期肾功能丧失的主要原因。尽管CAN发病机制仍未阐明，但β转化生长因子（transforming growth factor—beta，TGF—β）作为最关键的促纤维化细胞因子已得到公认，其能导致细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的集聚和肾脏的慢性损伤，在CAN的发病机制中起重要作用。smad蛋白为TGF—β家族信号从受体到核的细胞内转导分子，其发现使TGF—β信号转导机制的研究进展迅速。本文就smad蛋白所介导的TGF—β信号转导与CAN的关系作一综述。     

高海拔地区微创外固定架固定治疗胫骨骨折92例

胫腓骨是长管状骨中最常发生骨折的部位,约占全身骨折的13.7%。骨折后髓内血运受到破坏,局部软组织血运较差,胫前软组织坏死率较高,处理不当容易造成感染、骨折延迟愈合、不愈合及骨髓炎的发生。特别是在高海拔地区选择正确的治疗方案尤为重要。2001年3月至2007年11月我院开展微创外固定架固定治疗胫骨骨折92例,取得较好效果。现将治疗体会报告如下。     

Association of XRCC1 gene polymorphisms with idiopathic azoospermia in a Chinese population

Aim： To assess the possible role of genetic polymorphisms in DNA repair gene XRCC 1 （X-ray repair cross-comple- menting group l） during spermatogenesis by investigating the associations of one promoter polymorphism （T-77C） and two exonic polymorphisms （Argl94Trp and Arg399Gln） in XRCC1 gene with risk of idiopathic azoospermia in a Chinese population. Methods： The genotype and allele frequencies of three observed polymorphisms were examined by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism based on a Chinese population consisting of 171 idiopathic azoospermia subjects and 247 normal-spermatogenesis controls. Results： In our study, all the observed genotype frequencies were in agreement with Hardy-Weinberg equilibrium. The 399A （GA＋AA） allele frequency for idiopathic azoospermia subjects and controls was 0.216 and 0.269, respectively. Compared with GG genotype, the AA genotype of Arg399Gln showed a significant association with a decreased risk of idiopathic azoospermia （odds ratio = 0.315; 95% confidence interval = 0.12-0.86）. However, no significant differences were found between the cases and controls for T-77C and Arg194Trp polymorphisms. The major haplotypes of XRCC1 gene were TCG, TrG and TCA, whereas no haplotypes appeared to be significantly associated with idiopathic azoospermia based on the cutoff of P 〈 0.05. Conclusion： In a selected Chinese population, AA genotype of Arg399Gln appears to contribute to a decreased risk of idiopathic azoospermia, while we have not any evidence of involvement of XRCC1 T-77C and Arg194Trp polymorphisms in idiopathic azoospermia. （Asian J Androl 2007 Nov; 9： 843-848）     

Improved sexual behavior in male rats treated with a Chinese herbal extract： hormonal and neuronal implications

Aim： To investigate the influence of an extract obtained from five Chinese medicinal plants on sexual behavior of adult male rats. Methods： The extract was administered at doses of 30, 60 and 120 mg/kg by oral gavage, acutely （one time, 45 min before mating test） or subchronically （daily for 10 days） in sexually potent and sexually sluggish/impotent rats. Sexual behavior, serum levels of luteinizing hormone （LH） and testosterone （T） were evaluated in treated rats and compared with controls receiving vehicle. The effect of the extract on central dopaminergic neurotransmission was assessed in the nucleus accumbens using a microdialysis technique. Results： In sexually potent rats, both acute and subchronic treatment with the extract dosed at 30 and 60 mg/kg reduced mount latency and intromission latency. In sluggish/impotent rats, the acutely administered extract at the dose of 60 mg/kg shortened ejaculation latency, whereas subchronically administered at the doses of 30 and 60 mg/kg, reduced mount, intromission and ejaculation latencies, increasing also the percentage of mounting and ejaculating rats. The extract dosed at 60 mg/kg significantly increased LH and T following acute and subchronic administration and increased 3,4-dihydroxyphenylacetic acid levels in the nucleus accumbens, 30 min after the acute administration. Conclusion： The improvement in both appetitive and consummatory components of sexual behavior observed in male rats treated with the extract could be ascribed to increased serum T level in parallel with the activation of the central dopaminergic system.     

Gonadotrophin-releasing hormone-Ⅰ and -Ⅱ stimulate steroidogenesis in prepubertal murine Leydig cells in vitro

Aim： To study the effect and mechanism of gonadotrophin-releasing hormone （GnRH） on murine Leydig cell steroidogenesis. Methods： Purified murine Leydig cells were treated with GnRH-Ⅰ and -Ⅱ agonists, and testosterone production and steroidogenic enzyme expressions were determined. Results： GnRH-Ⅰ and -Ⅱ agonists significantly stimulated murine Leydig cell steroidogenesis 60%-80% in a dose- and time-dependent manner （P 〈 0.05）. The mRNA expressions of steroidogenic acute regulatory （STAR） protein, P450scc, 3β-hydroxysteroid dehydrogenase （HSD）, but not 17β-hydroxylase or 17β-HSD, were significantly stimulated by both GnRH agonists with a 1.5- to 3-fold increase （P 〈 0.05）. However, only 3β-HSD protein expression was induced by both GnRH agonists, with a 1.6- to 2-fold increase （P 〈 0.05）. Conclusion： GnRH directly stimulated murine Leydig cell steroidogenesis by activating 3β-HSD enzyme expression.     

微创经皮钢板内固定治疗胫骨骨折

2005年3月～2008年3月,我科采用微创经皮钢板内固定治疗胫骨骨折34例,疗效满意。1材料与方法1.1病例资料本组34例,男20例,女14例,年龄12～68岁。致伤原因：交通事故24例,坠落伤4例,砸伤6例,均为闭合性损伤。合并多发骨折8例,颅脑、胸腹损伤6例。其中胫骨近端损伤7例,胫骨干损伤17例,胫骨远端损伤10例,合并腓骨骨折28例,合并下胫腓联合分离3例。     

仙贞汤对去卵巢大鼠骨密度及生物力学影响的实验研究

骨质疏松的特征是骨矿质量减少,骨的微细结构遭到破坏而导致骨的脆性增加,使骨折的发生率增高。骨矿物质密度（bone mineral density,BMD）的测量在骨质疏松的诊断中有极其重要的意义。本实验采用了单光子吸收法（SPA）及双能X线吸收法（DXA）对实验中大鼠左下肢BMD进行测定。     

经尺骨鹰嘴截骨入路治疗肱骨髁间粉碎性骨折

2005年4月～2009年3月,我科采用经尺骨鹰嘴截骨入路钢板内外侧固定治疗肱骨髁间骨折17例,取得了较好疗效.