用RT—PCR法检测新鲜癌组织中多药耐药基因（mdr—1）表达的体会

目的：恶性肿瘤细胞的多药耐药性（ＭＤＲ）已普遍受到关注，其分了学基础之一是ｍｄｒ－１基因的过表达，检测ｍｄｒ－１基因的方法较多。本研究旨在介绍反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍｄｒ－１基因表达的经验。方法：选取安阳市肿瘤医院１９９４年１１月～１９９５年９月术前未作治疗的恶性肿瘤切除标本１５１份。以ＲＴ－ＰＣＲ检测其ｍｄｒ－１基因的表达情况，评价ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ－１基因中的注意事项及优点     

国人大肠肿瘤与DCC基因mRNA表达缺失的相关性研究

应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测了３４例大肠肿瘤及其相应正常粘膜中ＤＣＣ基因ｍＲＮＡ表达情况。结果：５例大肠腺瘤和２９例大肠癌组织中分别有１例（２０％）、１５例（５１．７％）ＤＣＣ基因ｍＲ－ＮＡ表达发生缺失。其中高、中、低分化的大肠癌组织中该基因ｍＲＮＡ表达缺失率分别为２５．０％（２／８）、４４．４％（４／９）、７５．０％（９／１２）（Ｐ＜０．０５）。而有转移者为７６．９％（１０／１３），无转移者３１．２％（Ｐ＝０．０１８）。ＤＣＣ基因ｍＲＮＡ表达缺失与性别、肿瘤大小及部位无关。提示：对大肠癌原发病灶ＤＣＣ基因ｍＲＮＡ表达的检测将有助于识别高度恶性的大肠癌及判断大肠癌的转移潜能。     

RT—PCR方法检测临床乳癌组织的多药耐药基因表达

作者采用逆转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术、建立了临床乳腺癌ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ表达的检测方法，同时筛选优化了影响实验结果的几个主要条件，检测７４例乳癌标本发现，原发乳癌ｍｄｒ－１基因性表达为３４．３％（１２／３５）；复发转移乳癌为４９．０％（２３／３９）。其中３２例复发转移乳癌的基因表达状况，与多药耐药（ＭＤＲ）相关药物疗效的总符合率为７８．１％。初步结果显示，ＲＴ－ＰＣＲ方法检测临床乳癌     

CD44v9基因在恶性卵巢肿瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨恶性缲ＣＤ４４Ｖ８基因表达及其临床意义。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了４１例恶性卵巢肿瘤、２０例良性卵巢肿瘤和２１例正常卵巢组织中ＣＤ４４Ｖ９基因表达情况并分析相关的临床病理因素。结果：１）ＣＤ４４Ｖ９基因表达阳性纺恶性组明显高于良性组和正常组，良性组高于正常组：２）ＣＤ４４Ｖ９基因表达在有转移者阳性率显著高于无转移者，转移灶阳性率高于原发灶：３）ＣＤ４４Ｖ９阳性表达率与临床期别有一定关     

实体肿瘤MDR1多药抗药基因表达RT—PCR检测的临床意义

多药耐药性是化疗失败的主要原因。采用ＲＴ－ＰＣＲ核酸扩增技术检测了１８例实体肿瘤，１６例恶性胸腹水肿瘤细胞多药抗药基因ｍＲＮＡ的表达水平，并分析了表达水平与化疗药物治疗反应的关系。３４例中ＭＤＲ１不表达（—）３例，低表达１２例，中度表达１０例和高表达９例。ＣＲ３例ＭＤＲ１表达均为（＋）和（－），并初步观察到，肿瘤组织中ＭＤＲ１中、高表达临床无效（ＮＲ）的占８８．９％（１６／１８例）；ＭＤＲ１不或低表达临床反应ＣＲ／ＰＲ的８１．１％（１３／１６）；ＭＤＲ１阴性临床ＣＲ的２例，ＰＲ的１例。本组病例中有８例无化疗史，其中２例检测示中度表达（＋＋），临床治疗无效，为原发耐药。２例ＮＲ的ＭＤＲ１表达为（＋）。结果提示，ＲＴ－ＰＣＲ法检测肿瘤组织ＭＤＲ１的ｍＲＮＡ表达水平，对临床预测化疗反应及判断预后可能有所裨益。     

RT－PCR方法检测临床乳癌组织的多药耐药基因表达

作者采用逆转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，建立了临床乳腺癌ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ表达的检测方法，同时筛选优化了影响实验结果的几个主要条件。检测７４例乳癌标本发现，原发乳癌ｍｄｒ－１基因阳性表达为３４．３％（１２／３５）；复发转移乳癌为５９．０％（２３／３９）。其中３２例复发转移乳癌的基因表达状况，与多药耐药（ＭＤＲ）相关药物疗效的总符合率为７８．１％。初步结果显示，ＲＴ－ＰＣＲ方法检测临床乳癌标本具有灵敏度高、相对定量、结果可靠的优点。     

急性非淋巴细胞白血病多药耐药基因与其免疫表型的关系

目的：探讨急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）多药耐药基因（ＭＤＲ１）与免疫表型表达的关系及意义。方法：应用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和间接免疫荧光法对５２例初治ＡＮＬＬ患者进行了ＭＤＲ，基因及免疫表型的检测。结果：ＡＮＬＬ患者ＭＤＲ１阳性表达率为３０．７％，其中Ｍ３明显低于其他亚型。ＭＤＲ１阳性ＡＮＬＬ患者ＣＤ３４表达率显著高于ＭＤＲ１阴性者；而其安全缓解率（３７．５％）则低于后者（８８．８     

胃癌组织大肠癌丢失基因杂合性丢失及表达缺失的研究

为探讨大肠癌丢失基因（ＤＣＣ）改变在胃癌发生发展中的作用，应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ及ＲＴ－ＰＣＲ技术对手术切除胃癌组织ＤＣＣ基因的杂合性丢失及ｍＲＮＡ表达进行分析。５１例胃癌中发现杂合丢失１８例，占３５．３％。临床Ⅲ～Ⅳ期组杂合丢失率（５０．０％）显著高于Ⅰ～Ⅱ期组（１４．３％，Ｐ值＜０．０５）。杂合丢失与组织学类型、肿瘤大小、侵袭深度、淋巴转移无显著相关（Ｐ＞０．０５）。５１例胃癌中有２６例检测了ＤＣＣ基因ｍＲＮＡ表达，发现表达缺失８例，占３０．７％。表达缺失与杂合丢失及临床病理参数无关（Ｐ＞０．０５）。胃癌组织中存在着ＤＣＣ基因杂合丢失和ｍＲＮＡ表达缺失。杂合丢失是胃癌的晚期改变     

人食管癌相关基因大肠杆菌中的表达

目的 研究食管癌相关基因－１（ＥＣＲＧ－１）的编码蛋白质在大肠杆菌中的表达,进一步制备抗ＥＣＲＧ－１编码蛋白质的多克隆抗体。方法 用逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法克隆ＥＣＲＧ－１基因蛋白编码序列。构建该基因的表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达,以Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定。用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳）纯化的蛋白免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠制备多抗。结果 ＲＴ－ＰＣＲ所分离的ＥＣＧＥ     

逆转录-聚合酶链反应联合检测乳腺癌腋窝淋巴结和骨髓的微转移

目的：检测原发性乳腺癌常规病理检查一淋巴结和骨髓中微转移琢与其它临床参考指标的关系。方法：利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）联合检测腋窝淋巴结和骨髓中细胞是白１９（ＣＫ－１９）基因表达。将乳腺癌细胞株（Ｔ４７Ｄ）与骨髓细胞按不同比例混合，比较ＲＴ－ＰＣＲ与免疫组化（ＩＨＣ）方法的检测敏感性。结果：３５例乳腺癌共１３７枚淋巴结有８例１１枚ＣＫ－１９表达阳性；３５份髓标本，其中８份ＣＫ－１９表达     

大肠癌nm23H1基因表达及其临床意义

目的：研究大肠恶性肿瘤nm23H1基因表达及其临床意义。方法：应用免疫组化SP法检测1990年8月－1996年2月间收治的60例大肠恶性肿瘤。Dusk‘s分期为A期10例,B期25例,C期16例,D期9例。结果：大肠恶性肿瘤nm23H1强阳性23例,中度阳性18例,阴性19例,表达阳性率随分期的进展逐渐下降,有淋巴结转移的表达阳性率明显低于无转移者。结论：抑癌基因nm23H1表达,在大肠癌病期、淋巴结转移和预后研究中可作为判断指标。     

黏附分子CD44的表达与大肠癌生物学特性间的关系

目的:探讨CD44s、CD44v6、CD44v3的表达水平与大肠癌生物学特性之间的关系及临床意义。方法:应用Envision TM免疫组化法,检测57例大肠癌组织标本和20例癌旁正常组织中CD44s、CD44v6、CD44v3的表达水平。结果:57例结直肠癌的组织标本中CD44s、CD44v6、CD44v3的阳性表达率为分别66.67%、63.16%、70.18%,而在20例正常组织中基本不表达,二者间具有统计学差异(P<0.01)。CD44s、CD44v6、CD44v3阳性表达与临床分期、肿瘤细胞分化程度显著性相关(P<0.05)。CD44v6、CD44v3阳性表达还与淋巴结转移显著相关。大肠癌组织中CD44s、CD44v6、CD44v3阳性,阴性表达的患者5年生存率分别为55.26%,78.95%;52.79%,80.95%;52.50%,88.24%,CD44s二者间差异无统计学意义(P>0.05);CD44v6、CD44v3二者间差异具有统计学意义(P<0.01)。生存率分析显示CD44s、CD44v6、CD44v3均是对生存有影响的因子。结论:黏附分子CD44s、CD44v6、CD44v3可能参与了大肠癌的发生与转移,检测其表达水平有助于预后判断。     

大肠癌中CD44v6、nm23-H1基因蛋白表达的研究

目的 :探讨 CD44 v6 和 nm2 3 -H1基因蛋白表达与大肠癌临床病理指标的关系。方法 :应用 SP免疫组化染色法 ,对 76例大肠癌标本进行 CD44 v6 和 nm 2 3 -H1基因蛋白测定。结果 :CD44 v6 基因蛋白的高表达和 nm2 3 -H1基因蛋白的低表达与大肠癌淋巴结转移有关 ( P<0 .0 1)。大肠癌 CD44 v6 和nm2 3 -H1基因蛋白的表达无相关性 ( P>0 .0 5) ,但 CD44 v6 阳性表达伴 nm2 3 -H1阴性表达的患者发生淋巴结转移的可能性大。结论 :CD44 v6 和 nm2 3 -H1与大肠癌淋巴结转移密切相关 ,两者在淋巴结转移中起协同作用 ,联合检测对判断大肠癌淋巴结转移是一个有用的指标。     

大肠癌淋巴结转移与CD44v mRNA、DCC mRNA表达的关系

目的:探讨大肠癌淋巴结转移与CD44v mRNA、DCC mRNA表达的关系.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测92份原发性大肠癌及20份正常大肠粘膜的CD44v mRNA和DCC mRNA的表达情况.结果:92例原发性大肠癌中,淋巴结转移组60例,淋巴结未转移组32例,CD44v mRNA中度以上表达率分别为93.33%、43.75%(P<0.01).DCC mRNA表达缺失率分别为80.00%、50.00%(P<0.01).20份正常大肠粘膜CD44v mRNA表达均为阴性,DCCmRNA的表达均为强阳性.结论:CD44v mRNA的高表达、DCC mRNA的表达缺失与原发性大肠癌的侵袭转移关系密切.     

黏附分子CD44的表达与大肠癌生物学特性间的关系

目的：探讨CD44s、CD44v6、CD44v3的表达水平与大肠癌生物学特性之间的关系及临床意义。方法：应用Envision TM免疫组化法,检测57例大肠癌组织标本和20例癌旁正常组织中CD44s、CD44v6、CD44v3的表达水平。结果：57例结直肠癌的组织标本中CD44s、CD44v6、CD44v3的阳性表达率为分别66.67%、63.16%、70.18%,而在20例正常组织中基本不表达,二者间具有统计学差异（P〈0.01）。CD44s、CD44v6、CD44v3阳性表达与临床分期、肿瘤细胞分化程度显著性相关（P〈0.05）。CD44v6、CD44v3阳性表达还与淋巴结转移显著相关。大肠癌组织中CD44s、CD44v6、CD44v3阳性,阴性表达的患者5年生存率分别为55.26%,78.95%;52.79%,80.95%;52.50%,88.24%,CD44s二者间差异无统计学意义（P〉0.05）;CD44v6、CD44v3二者间差异具有统计学意义（P〈0.01）。生存率分析显示CD44s、CD44v6、CD44v3均是对生存有影响的因子。结论：黏附分子CD44s、CD44v6、CD44v3可能参与了大肠癌的发生与转移,检测其表达水平有助于预后判断。     

鼻咽癌中CD44v6和nm23H1表达的原位杂交研究

目的　探讨CD44v6mRNA和nm2 3H1mRNA表达与鼻咽癌 (NPC)临床意义及其相关性。方法　应用催化信号放大原位杂交方法 ,检测 65例NPC中CD44v6mRNA和nm2 3H1RNA表达 ,结合临床病理指标及随访病例进行研究分析。结果　在NPC中CD44v6mRNA和nm2 3H1mRNA表达阳性率分别为 47 7%和 5 2 3 %。CD44v6mRNA阳性表达和nm2 3H1mRNA阴性表达与NPC原发病灶分期和淋巴结转移均呈正相关 ,患者 5年内复发转移率高 (P <0 0 1) ,5年存活率低 (P <0 0 5 )。CD44v6mRNA表达与nm2 3H1mRNA表达呈负相关。结论　NPC中CD44v6mRNA表达与nm2 3H1mRNA表达具有负调节的协同作用 ,均可作为预测NPC转移、复发和评估预后的重要生物学指标     

Endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) expression in colorectal cancer

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Vascular endothelial growth factor (VEGF) is known as an important factor in the growth and metastasis of cancer cells. In 2001, a novel angiogenesis factor, endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor (EG-VEGF), was cloned. In this study, we investigated the expression of EG-VEGF in colorectal cancer, the relationship between its expression and clinicopathological factors, and the in vitro activity of EG-VEGF transfectants. METHODS: We determined expression levels of EG-VEGF in 113 advanced colorectal cancers resected in our hospital by quantitative PCR, and compared the expression levels and clinicopathological findings by multivariate analyses. RESULTS: The expression of EG-VEGF mRNA was positive in 31 cancers and negative in 82 cancers. We found that compared with the negative expression of the EG-VEGF gene, its positive expression was more frequently associated with hematogenous metastasis, and was associated with a poorer survival rate. In addition, EG-VEGF transfectants showed a higher degree of in vitro tubular formation than control cells. CONCLUSIONS: We speculate that, in colorectal cancers, the EG-VEGF gene functions as an important factor in angiogenesis in primary and metastatic lesions, and consider that it is useful as a novel prognostic factor. EG-VEGF molecule-targeted therapy has the potential for improving survival rates.     

Involvement of vascular endothelial growth factor and urokinase-type plasminogen activator receptor in microvessel invasion in human colorectal cancers

To evaluate the association among known angiogenic growth factors or factors related to the plasminogen activation system and clinicopathological factors in patients with colorectal cancer, we examined the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), basic fibroblast growth factor (bFGF), transforming growth factor-α (TGF-α), urokinase-type plasminogen activator (u-PA), u-PA receptor (u-PA-R) and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) in clinical specimens of colorectal cancers by Northern blot analysis. In comparison with the expression of these angiogenesis-related genes in 7 paired samples of colorectal cancers and the adjacent normal mucosa, VEGF mRNA level was significantly higher in the cancer tissues than in the adjacent normal mucosa (p < 0.05). We analyzed expression of these genes in 44 cases of primary colorectal cancers. Among the 3 angiogenic growth factors we examined, VEGF mRNA expression was significantly higher in the cancer tissues with blood vessel invasion or with lymphatic vessel invasion than in those without, respectively (p < 0.05). On the other hand, u-PA-R mRNA expression was significantly higher in the cancers with blood vessel invasion than in those without (p < 0.05). In addition, there was a correlation between the expression levels of VEGF and u-PA-R mRNA in the cancer tissues we have examined. Using immunohistochemistry, strong staining of VEGF or u-PA-R was observed in the cancer cells invading the microvessels. Our findings suggest that malignant transformation might accompany the upregulation of VEGF expression in colorectal cancers and that VEGF and u-PA-R might contribute cooperatively to increase angiogenesis around the tumor as well as the metastasis via microvessels. Int. J. Cancer (Pred. Oncol.) 79:179–186, 1998.© 1998 Wiley-Liss, Inc.