FasL,Fas与肝脏疾病

介绍ＦａｓＬ，Ｆａｓ的结构，功能及其介导的细胞凋亡机制研究的最新进展，并重点对细胞凋亡与肝脏疾病的密切关系和证据。ＹａｓＬ，Ｆａｓ的病毒性肝炎，酒精性肝病肝组织中的表达和分布作了详细综述。细胞凋亡与细胞坏死同是病毒性肝炎，酒精性肝病的发病机制。     

HBV感染者肝细胞凋亡与乙型肝炎表面抗原双染色研究

目的探讨乙型肝炎肝细胞凋亡与病毒感染的关系。方法应用原位末端标记技术和免疫组化方法对一组乙肝患者肝细胞凋亡和乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）表达状况同时进行了检测。结果受检的８例乙型肝炎患者肝组织中均可检出凋亡细胞，阳性信号位于细胞核以及肝窦内之凋亡小体中；阳性细胞在肝细胞索多散在分布，在肝细胞坏死灶中亦可检出凋亡细胞；凋亡多发生于病毒抗原弱表达细胞，而大多数抗原阳性细胞未检测到凋亡信号，此外，少数凋亡细胞ＨＢｓＡｇ呈阴性。结论乙型肝炎患者感染和未感染病毒的肝细胞均可发生凋亡，但凋亡只在少数细胞发生。     

肝细胞凋亡信号转导途径的研究进展

肝细胞凋亡与再生平衡是肝脏维持正常平衡状态的基本特征.目前很多研究显示,肝细胞凋亡异常参与了病毒性肝炎、酒精性肝病、自身免疫性肝炎、肝细胞癌等多种肝脏疾病的发生发展过程.细胞凋亡的发生是多种凋亡刺激因素作用于细胞以后经过凋亡信号的转导、凋亡基因的激活、凋亡的执行、凋亡细胞的清除4个步骤而完成的.     

虫草菌丝对非酒精性脂肪肝病大鼠肝细胞凋亡的作用及其相关机制

目的（1）证实肝细胞凋亡的异常增多存在于非酒精性脂肪性肝病中。（2）观察虫草菌丝对肝细胞凋亡异常增多的影响，并探讨可能的分子机制。方法通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的模型，同时设立正常饮食对照组，病理对照组（NASH组），虫草菌丝干预组（CS组）。肝组织切片HE染色观察肝脏病理改变；检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性；TUNEL检测肝组织肝细胞凋亡情况；免疫组织化学染色观察肝组织Bax、Bcl-2、Caspase-3、NF-κB P65蛋白表达情况。结果（1）与正常对照组相比，病理对照组大鼠肝组织广泛弥漫肝细胞脂肪变性，炎性细胞浸润、坏死、局部有纤维组织增生；肝脏SOD活性显著降低（P〈0．01）；TUNEL法检测肝细胞凋亡显著增多（P〈0．01）；免疫组化染色显示Bax、Caspase-3蛋白表达增加（P〈0．01），而Bcl-2无显著变化（P〉0．05）；（2）与病理对照组相比，虫草菌丝组大鼠肝组织有广泛肝细胞脂肪变性，炎性细胞浸润，可见灶性及点状坏死，未见纤维组织增生；肝组织SOD活性高于病理对照组（P〈0．05）；TUNEL法检测凋亡的肝细胞显著减少（P〈0．01）；免疫组化染色显示Bax、Caspase-3蛋白表达也明显降低（分别为P〈0．05、P〈0．01），而Bcl-2、NF-κB P65蛋白表达增加（P〈0．01）。结论（1）NASH时肝细胞凋亡异常增多。（2）虫草菌丝可以通过增加超氧化物歧化酶（SOD）活性来减少活性氧含量，降低Bax表达，增加Bcl-2表达和活化NF-κB P65减轻NAFLD中肝细胞凋亡从而在一定程度上具有保护肝脏功能的作用，对延缓或阻止脂肪肝病变的进展起到一定的作用。     

内质网应激介导的凋亡途径在大鼠酒精性脂肪性肝病中的变化及意义

目的研究内质网应激相关因子及其介导的凋亡途径在酒精性脂肪性肝病大鼠发病过程中的变化及意义。方法 Wistar大鼠40只随机分为正常组(8只)、模型组(酒精混合液喂养);模型组又分为4、8、12、16周4个时相点(各8只);采集标本后检测血清生化指标,观察肝脏病理组织学改变,对肝脏脂肪变程度和炎症活动度评分及肝组织中GRP78、SREBP1-c、Caspase-3蛋白表达及动态变化。结果与正常组比较,模型组大鼠第8周时肝组织中GRP78、SREBP1-c、Caspase-3蛋白表达开始升高,于16周时达最强,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论由GRP78、SREBP1-c、Caspase-3等相关调控因子介导的肝细胞内质网应激和凋亡反应途径参与了酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏脂肪变性和炎症反应,并与酒精性脂肪性肝病发病机制关系密切。     

五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝细胞凋亡的影响机制

目的 探讨五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝细胞凋亡和肝组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、Caspase-3 mRNA表达的影响.方法 将100只Wistar大鼠随机分成6组:对照组10只、模型组、五田保肝液低、中、高剂量组、易善复组各18只,采用白酒辅以吡唑、玉米油的混合食料灌胃的方法建立大鼠酒精性肝病模型,12 w末处死大鼠,TUNEL法检测肝细胞凋亡情况,实时定量RT-PCR法检测TNF-α、Caspase-3 mRNA的表达.结果 五田保肝液可降低酒精性肝病大鼠肝细胞的凋亡指数(AI)和肝组织TNF-α、Caspase-3 mRNA的表达,且以中、高剂量效果更加显著;TNF-α、Caspase-3 mRNA的表达与AI呈正相关(r=0.803,r=0.795,P＜0.01).结论 五田保肝液尤其是中、高剂量对大鼠酒精性肝病肝细胞凋亡具有抑制作用,其机制可能与降低TNF-α、Caspase-3 mRNA的表达有关.     

细胞凋亡在肝病发病机理中作用

细胞凋亡在肝病发病机理中作用陆东东１．肝细胞凋亡与乙型肝炎Ｎａｇａｔａ在小鼠体内用抗Ｆａｓ单抗引起广泛性肝坏死，认为其可能与暴发性肝炎发病有关，引起肝病研究者的高度重视。至于肝细胞凋亡在肝炎发病中的作用，特别是Ｆａｓ抗原的作用，目前认识不一。Ｃｈｉｓ...     

内质网应激与肝脏疾病研究进展

内质网应激是一种重要的细胞自我防御机制,内质网应激时,首先启动生存途径,但是持续的内质网应激将启动细胞凋亡途径.肝细胞内有大量的内质网,许多肝脏疾病均与内质网应激及其介导的细胞凋亡有关,如病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、药物性肝病、急性肝衰竭、肝癌等,针对内质网应激途径来进行凋亡保护或促进凋亡以寻找新靶点药物来治疗肝脏疾病在理论上成为可能.本文将从内质网应激反应的生存途径、凋亡途径,内质网应激及其介导的细胞凋亡在肝脏疾病发病机制中的作用以及在肝病干预治疗上的意义等方面进行综述.     

幽门螺杆菌和雪貂螺杆菌表达人类血型抗原

目的研究幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）和雪貂螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｍｕｓｔｅｌａｅ，Ｈｍ）的脂多糖对人类血型抗原的表达。方法应用酶联免疫吸附分析、聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法，利用ＬｅｗｉｓＸ／Ｙ抗体以及血型抗原、抗体对Ｈｐ和Ｈｍ进行血清学标定，并对脂多糖的生物化学结构进行分析。结果Ｈｐ表达ＬｅｗｉｓＸ和ＬｅｗｉｓＹ，而Ｈｍ表达血型抗原Ａ，血清学结果与免疫印迹结果一致。结论Ｈｍ与Ｈｐ有诸多生物学共性，两者都表达人类血型抗原，进一步支持Ｈｍ感染雪貂可能是模拟人Ｈｐ感染较为理想的动物模型。     

大鼠酒精性肝病细胞凋亡与细胞色素P4502E1和氧化应激的关系

目的:观察大鼠酒精性肝病组织病理形态学改变,探讨细胞凋亡与细胞色素P4502E1的表达以及和氧化应激的关系.方法:用酒精灌胃法制备酒精性肝病大鼠模型,模型组给予酒精8 g/kg,每天分2次灌胃连续8 wk,对照组给予等量的生理盐水灌胃.实验8 wk末,观察肝组织的病理形态学改变,用原位末端标记法(TUNEL)检测肝细胞凋亡,用免疫组化法检测肝组织中Caspase-3蛋白表达,用全自动生化仪检测ALT和AST的含量,用PCR法测定肝细胞色素P4502E1的基因表达,分别用硫代巴比妥酸法(TBA法)和黄嘌呤氧化酶法测定肝组织丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活力.结果:模型组凋亡的肝细胞明显增多,主要分布在中央静脉周围、点状和灶状坏死区;Caspase-3主要分布于中央静脉及肝细胞坏死灶周围细胞的胞质中.模型组肝细胞凋亡指数(AI)和Caspase-3蛋白表达强度明显高于对照组(AI:6.2%±1.7% vs 1.7%±0.8%;Caspase-3:66.7% vs 9.5%,P<0.05,P<0.01).CYP2E1表达:对照组c1基因频率为91.6%,c2基因频率为8.4%;模型组c1基因频率为53.4%,c2基因频率为46.6%,均有显著性差异(P<0.05).长期酒精摄入大鼠血清MDA含量增加(41.53±7.43μmol/L vs 15.72±2.06μmol/L,P<0.05),SOD活力下降(353.12±61.02 kU/L vs 636.82±138.60 kU/L,P<0.05),与酒精性肝病肝细胞凋亡程度有相关性(r=0.644,r=-0.511).结论:长期酒精摄入可引起大鼠酒精性肝病及及肝功能损伤,肝细胞凋亡明显增加.CYP2E1基因PstⅠ及RsaⅠRFLPs与酒精性肝病有关,其中c2基因可能与大鼠酒精性肝病的发生有关.MDA含量和SOD活力在酒精性肝病的肝细胞凋亡过程及脂质过氧化反应中发挥重要作用.     

银杏总黄酮对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞凋亡的影响及其机制的研究

[目的]研究银杏总黄酮对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞凋亡的影响,并检测大鼠肝脏Caspases 3蛋白磷酸化水平的表达,探讨银杏总黄酮抑制肝细胞损伤的作用机制。[方法]利用高脂饲料喂养法构建NAFLD大鼠模型。SPF级雄性大鼠分为正常对照组、NAFLD模型组和银杏总黄酮治疗组3组。光镜检查大鼠肝组织病理形态变化,细胞原位TUNEL法检测肝细胞凋亡率。Western-blot法检测Caspase 3蛋白磷酸化水平。[结果]成功构建NAFLD大鼠模型。TUNEL法检测结果显示第4周后,NAFLD模型组和银杏总黄酮治疗组大鼠肝细胞凋亡较正常对照组增加,Western-blot法检测结果显示Caspase 3蛋白磷酸化水平较正常对照组增加。在第8周、第12周后,模型组肝细胞凋亡数目逐渐增多,Caspase 3蛋白磷酸化水平逐渐增强;银杏总黄酮治疗组大鼠肝细胞凋亡逐步降低,Caspase 3蛋白磷酸化水平逐步下降。[结论]银杏总黄酮抑制NAFLD大鼠肝细胞凋亡,对NAFLD大鼠肝细胞有保护作用,其机制可能是通过降低Caspase 3蛋白磷酸化水平实现的。     

肝病患者肝组织中Fas抗原表达及其与病毒和凋亡关系的研究

目的 探讨肝组织中Ｆａｓ抗原的表达及其与病毒感染的和细胞凋亡的关系。方法 应用免疫组织化学方法检测了８２例慢性肝病患者肝组织中Ｆａｓ抗原，ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶＮＳ５蛋白表达状况，并采用原位末端标记方法对部分患者肝组织中细胞凋亡状况进行研究。结果 ６４例检出Ｆａｓ抗原（７８．１％），检出率慢活肝和肝硬化组较慢迁肝组高，病毒抗原阳性较阴性组高；抗原主要位于肝细胞浆，少数位于胞膜，阳性细胞主要分布在碎屑坏     

Fas/FasL、Bcl-2/Bax、Caspase-8在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用机制

目的:探讨肝细胞凋亡及其相关因素Fas/FasL、Bcl-2/Bax蛋白及Caspase-8 mRNA的表达在大鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的作用.方法:采用改良高脂饮食建立大鼠NAFLD模型,以正常饮食设立对照组.HE染色观察肝脏脂肪变、炎症活动和纤维化程度,采用流式细胞仪法测肝细胞凋亡百分数;免疫组织化学法检测Fas、FasL、Bcl-2及Bax在肝组织中表达情况;实时荧光定量PCR法检测肝脏Caspase-8 mRNA的表达.结果:NAFLD模型组脂肪变性明显,纤维化和炎症活动度记分均显著高于正常对照组.流式细胞仪检测显示,与对照组比较,实验组大鼠肝细胞凋亡百分数增加,随造模时间延长凋亡率增加更明显(均P<0.01);免疫组织化学染色显示随着肝脏脂肪变加重,Fas、FasL蛋白染色加深,阳性细胞数增加;Bcl-2、Bax在对照组的表达均为散在弱阳性,实验组4、8、12wk阳性细胞数渐增加,并在脂肪变明显的部位着色深且随着脂肪肝的进展,Bcl-2/Bax比率进行性下降.实时荧光定量PCR法显示Caspase-8 mRNA表达量在高脂组中显著高于对照组(均P<0.01),且随肝脏脂肪变及炎症加重呈进行性上升.结论:在NAFLD发生过程中,肝细胞凋亡促进NAFLD大鼠病情进展;Fas、FasL、Caspase-8 mRNA相关调控蛋白的活化是引起NAFLD脂肪变性、炎症及纤维化的重要因素.细胞凋亡调节蛋白Bax、Bcl-2表达上调,二者表达的相对比例发生异常,这可能是NAFLD中肝细胞发生凋亡的重要原因之一.     

酒精性肝病病人血浆中可溶性Fas和Fas配体增加

重症急性酒精性肝炎（AAH）的特点是肝活检见变性的肝细胞周围有多型核中性粒细胞（PMN）浸润。有关AAH和酒精性肝硬化的发病机制尚未完全清楚。推测可能与伴随枯否细胞活化的肠源性内毒素易位、PMN募集与活化。细胞因子和肝损伤等有关。有关肝细胞凋亡在酒精性肝病中的作用目前尚知之甚少。肝细胞凋亡可以出现在正常肝脏，并以肝组织内Fas和Fas配体表达增加的形式参与乙。丙两型肝炎的肝损伤。目前已经发现淋巴细胞性疾病和病毒性肝炎所致肝硬化病人有高水平的可溶性Fas和可溶性Fas配体。为此，本文作者测定了一组酒精性肝病病人血…     

乙型肝炎病毒基因注入大鼠肝脏后的短暂抗原表达

目的建立ＨＢＶ感染的急性乙型肝炎大鼠模型。方法将经磷酸钙沉淀的含３．２ｋｂ全序列ＨＢＶＤＮＡ的ＨＢＶ－ＰＣＮＣＸ质粒直接导入大鼠肝脏。结果１０只实验动物中，８只大鼠血清ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ阳性，肝细胞中ＨＢＶｍＲＮＡ及ＨＢｓＡｇ得到表达，肝脏出现局灶性炎性细胞浸润，肝细胞坏死、浊肿等典型的病毒性肝炎病理变化。结论将磷酸钙沉淀后的ＨＢＶＤＮＡ导入大鼠肝脏细胞，可产生病毒抗原血症和典型的急性病毒性肝炎病理变化     

非酒精性脂肪性肝病中肝细胞死亡模式的研究进展

目前在非酒精性脂肪性肝病中关于细胞凋亡和坏死性凋亡的研究较为深入，但对于在非酒精性脂肪性肝病中的代谢紊乱所引起的细胞死亡形式尚存争议，而不同的动物模型异质性、额外的饮食因素、肝脏实质细胞与间质细胞的差异表达等因素均有可能造成实验结果偏差，因而必须重视实验模型和实验方法的合理选择以保证实验结果的准确。     

柴胡总皂苷对酒精性肝病大鼠肝脏转化生长因子-β1和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 研究柴胡总皂苷对酒精性肝病大鼠肝脏转化生长因子(TGF)-β1和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)表达的影响,以探讨柴胡皂苷防治酒精性肝病的机制.方法 SD大鼠45只随机分为正常组、模型组、柴胡皂苷保护组,利用白酒灌胃辅以高脂饲料制备大鼠肝损伤模型,同时给予柴胡总皂苷(200 mg/kg)保护,每天一次,连续8w,8 w末处死全部大鼠.测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,观察肝组织病理形态学改变,检测肝组织TGF-β1和α-SMA的表达.结果 和模型组比较,柴胡皂苷能明显降低大鼠血清ALT、AST活性,减少肝细胞坏死和纤维组织增生;模型组肝组织中TGF-β1和α-SMA表达呈强阳性,给予柴胡皂苷后TGF-β1和α-SMA的表达明显降低.结论 柴胡皂苷对酒精性肝病具有一定的预防作用,其机制可能是通过抑制TGF-β1信号通路对肝星形细胞的活化,保护肝细胞的结构和功能,抑制细胞外基质在肝脏的分泌和沉积.     

蛋白酶体活性中心低分子量多肽7亚基在酒精性肝病中的表达及其意义

目的 研究蛋白酶体活性中心低分子量多肽7(LMP7)亚基与酒精性肝病发生和发展的关系. 方法采用酒精灌胃的方法建立大鼠酒精性脂肪肝模型,HE染色观察肝脏病理变化,实时荧光定量RT-PCR测定肝组织中LMP7亚基mRNA的表达情况,Western blot测定LMP7亚基蛋白含量.结果 肝脏病理学结果显示:脂肪肝组主要为小泡性脂肪变,小叶内点状坏死,肝小叶结构完整,肝炎组肝小叶结构破坏,可见明显淤血、Mallory小体、炎性细胞浸润,肝细胞明显肿胀,肝炎对照组病变减轻,肝小叶结构明显恢复,肝内瘀血显著减轻,可见散在点状坏死.与正常对照组相比,脂肪肝组LMP7亚基mRNA水平为对照组的36%,肝炎对照组为51%,肝炎组为26%.Western blot结果:正常对照组LMP7亚基蛋白含量为0.50±0.01,脂肪肝组为0.39±0.02,肝炎对照组为0.38±0.02,肝炎组为0.30±0.04.结论 蛋白酶体活性中心LMP7亚基mRNA及蛋白的表达在酒精性肝病组下调,这可能是酒精性肝病蛋白酶体活性下降的原因之一,它在酒精性肝病中可能起重要作用.     

NF-κB、Bcl-2与酒精性肝病

酒精性肝病（ALD）是由于长期过度饮酒而引发的一系列肝脏损害疾病。现研究表明肝细胞的凋亡对该病的发生、发展起着十分重要的作用。其中核因子κB（NF-κB）、B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）与ALD关系密切。ALD患者肝细胞内活化的NF-κB,通过刺激大量炎性细胞因子释放,引发肝组织炎症、纤维化、坏死和凋亡,同时通过调控凋亡蛋白酶（Caspase）、Bcl-2、死亡受体等基因来干预肝细胞凋亡;被激活的Bcl-2,除本身具有抗凋亡功能外,还与NF-κB以复合物的形式发挥抗凋亡作用,同时与同家族促凋亡蛋白Bax以二聚体的形式依比例对肝细胞凋亡发挥抑制或促进作用。肝细胞凋亡和抗凋亡的动态失衡将成为酒精性肝病发病的重要途径之一。     

柴胡皂苷对酒精性肝病大鼠肝脏再生增强因子表达的影响

目的 研究柴胡皂苷对酒精性肝病(ALD)大鼠肝脏肝再生增强因子(ALR)表达的影响.方法 通过长期酒精灌胃方法造出酒精性肝病大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、ALD组、柴胡皂甙组、酒精戒断组.观察各组大鼠肝脏ALR基因表达含量的变化.结果 与ALD组比较,柴胡皂甙组大鼠肝脏ALR表达升高,经柴胡皂苷治疗后,这一表达水平降至正常.结论 柴胡皂苷通过改变ALR能有效地改善大鼠酒精性肝损害造成的影响.