罗格列酮对2型糖尿病大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响

目的观察2型糖尿病（T2DM）大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能和一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（eNOS）的变化及罗格列酮（RSG）治疗对其内皮功能的影响。方法SD大鼠经高糖高脂喂养6周后予小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型，糖尿病大鼠又分为对照（DM）组和RSG治疗组，RSG组用RSG干预8周，另选正常大鼠为正常对照（NC）组。实验终止时用正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率（GIR）评价胰岛素抵抗，观察大鼠离体主动脉内皮依赖性血管舒张反应和主动脉NO、eNOS的变化。结果T2DM大鼠GIR、胸主动脉内皮依赖性血管舒张反应、主动脉NO含量及eNOS阳性表达较NC组显著降低（P〈0、01），RSG治疗后上述指标均显著升高（P〈0．05）。结论T2DM大鼠存在内皮依赖性血管舒张功能紊乱，RSG治疗可改善内皮功能，增强NO水平和eNOS的活性。     

胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠主动脉内皮依赖性舒张功能及相关活性物质的变化

目的观察胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷脂酰肌醇-3激酶（PBK）、蛋白激酶B（PKB）的变化,探讨胰岛素抵抗和高血糖状态下内皮功能障碍的发生机制。方法4～6周龄雄性SD大鼠高糖高脂喂养6周,建立胰岛素抵抗模型（IR组）,再从中取20只予小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型（DM组）,喂养8周后用正常血糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率评价胰岛素抵抗,用大鼠离体主动脉环对乙酰胆碱的血管舒张反应来评价大鼠的内皮依赖性血管舒张功能,Gress重氮化反应法检测主动脉NO含量,免疫组化法检测主动脉eNOS阳性表达,RT—PCR方法检测主动脉PBK、PKB、eNOSmRNA表达,透射电镜检测大鼠主动脉超微结构变化,并检测空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯和胆固醇水平,计算胰岛素敏感指数。结果（1）IR和DM组大鼠体重、空腹胰岛素、甘油三酯和胆固醇均较正常对照组显著高（P〈0．01）,胰岛素敏感指数、葡萄糖输注率显著低（P〈0．01）。（2）IR和DM组大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能显著低于NC组（P〈0．05）,DM组又低于IR组,大鼠主动脉对乙酰胆碱诱导的最大舒张反应与空腹血糖、甘油三酯、胆固醇和空腹胰岛素呈显著负相关,与胰岛素敏感指数显著正相关（P均〈0．01）。（3）IR、DM组大鼠离体主动脉NO浓度及PBK、PKB、eNOSmRNA相对光密度较正常对照组显著低（P〈0．01）,而DM组上述指标又低于IR组（P〈0．05）。免疫组化显示IR、DM组主动脉eNOS阳性表达较正常对照组显著低（P〈0．01）。（4）IR和DM组大鼠胸主动脉透射电镜检查均可见内皮细胞和内皮下超微结构的病理改变。结论胰岛素抵抗和2型糖尿病大鼠存在内皮依赖性血管舒张功能下降和主动脉超微结构的病理改变,同时主动脉NO浓度、eNOS免疫组化阳性表达、PBK、PKB、eNOSmRNA表达也下降,提示PI-3K、PKB、eNOS表达下降致NO产生减少可能是胰岛素抵抗和高血糖内皮功能障碍的机制之一。     

罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠主动脉内皮功能的影响及其机制的研究

目的:观察罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张和一氧化氮(NO)含量、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、磷脂酰肌醇-3激酶及蛋白激酶B表达的影响。方法:4~6周龄雄性SD大鼠予高糖高脂喂养8周,建立胰岛素抵抗模型,分为对照组和治疗组,每组各15只,治疗组用罗格列酮[3mg/(kg.d)]干预8周,另取15只正常大鼠为正常组。实验终止时用葡萄糖输注率评价胰岛素抵抗,观察大鼠离体主动脉对乙酰胆碱依赖性血管舒张反应,Griess重氮化反应法检测主动脉NO含量,逆转录聚合酶链反应方法检测磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B和eNOS mRNA表达,电镜观察主动脉超微结构。结果:对照组葡萄糖输注率、主动脉内皮依赖性舒张功能、NO浓度、磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B、eNOS mRNA表达较正常组均显著降低(P<0.01),治疗组上述指标均显著升高(P<0.01)。透射电镜检查可见对照组主动脉内皮细胞和内皮下结构的病理改变,治疗组胸主动脉超微结构接近正常。结论:胰岛素抵抗大鼠存在内皮依赖性舒张功能紊乱和主动脉NO浓度、磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B、eNOS mRNA表达下降,用罗格列酮治疗可改善其内皮功能,增强NO产生和磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B、eNOS mRNA表达。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体对2型糖尿病大鼠内皮依赖性血管舒张功能的影响

目的 观察TNF相关的凋亡诱导配体（TRAIL）对T2DM大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响及其可能的机制. 方法 选取4周龄雄性SD大鼠,分为正常对照组（NC,n=10）与模型组（n=40）,随机将模型组分为T2DM亚组（n=10）与TRAIL亚组（TRAIL,n=10）.TRAIL干预6周后,检测各组FPG及FIns水平,计算ISI.检测NC组与TRAIL亚组血清TRAIL水平.观察大鼠离体主动脉内皮依赖性血管舒张反应,并检测主动脉一氧化氮（NO）含量、内皮型一氧化氮合酶活性（eNOS）.结果 与NC组比较,T2DM亚组FPG、FIns水平升高（P＜0.01）,ISI降低（P＜0.01）,血清TRAIL水平降低（P＜0.01）;血管内皮功能失调,乙酰胆碱（Ach）引起的血管最大舒张率降低（P＜0.01）,血管中NO含量及eNOS阳性表达降低（P＜0.01或P＜0.01）.TRAIL亚组血管Ach的舒张反应改善（P＜0.01）;血管中NO含量增加且eNOS阳性表达上调（P＜0.05或P＜0.01）;FPG、FIns降低,ISI提高（P＜0.01）. 结论 TRAIL改善T2DM大鼠内皮依赖性血管舒张功能的同时,可促进具有血管保护作用的NO生成.     

胰岛素对自发性高血压大鼠离体主动脉的舒张作用及机制

目的 :探讨自发性高血压大鼠 （SHR）的动脉血管对胰岛素 （Ins）反应性的改变及其主要机制。方法 :采用离体血管灌流方法 ,对比观察成年 （15周龄 ）和幼年 （5周龄 ）自发性高血压大鼠以及成年和幼年正常大鼠 （WKY）的胸主动脉环 ,在未加干预或施加干预 （机械法去除血管内皮或用一氧化氮合酶抑制剂处理 ）后对 Ins反应的变化。结果 :Ins（1～ 12 0 U/ L ）对成年和幼年 WKY胸主动脉血管具有舒张作用 ,而对相应年龄 SHR的舒张作用均降低。在12 0 U/ L Ins时 ,成年 SHR和 WKY大鼠的血管收缩率为 :73 %± 4% vs2 9%± 4% ,P<0 .0 1;幼年 SHR和 WKY大鼠的血管收缩率为 :61%± 5% vs 3 2 %± 6% ,P<0 .0 1。去除内皮或用 10μm ol/ L一氧化氮合酶抑制剂处理后 ,Ins对成年和幼年 WKY胸主动脉血管的舒张作用均降低 ,且和相应周龄的 SHR无显著差异。此外 ,成年 SHR动脉环在去除内皮前后对 Ins的反应无显著差异 （73 %± 4% vs82 %± 6% ,P>0 .0 5） ,而幼年 SHR在去除内皮后对Ins的反应显著降低 （61%± 5% vs 78%± 5% ,P<0 .0 5）。结论 :Ins对血管的舒张作用是部分通过内皮和一氧化氮 （NO）介导的。成年 SHR血管内皮细胞功能受损 ,而幼年 SHR内皮功能无明显损害。此外 ,两者可能都存在胰岛素抵抗的状态 ,从而降低了血管对 In     

植物雌激素α-玉米赤霉醇内皮依赖性舒张效应的机制研究

目的探讨植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对大鼠胸主动脉环内皮依赖性舒张效应中一氧化氮合酶(NOS)-NO-环磷酸鸟苷(cGMP)系统的作用。方法采用体外血管环灌流的方法,先用10-6mol/L苯肾上腺素预收缩血管。观察10-10～10-5mol/L6个不同浓度α-ZAL对内皮完整和去除内皮的大鼠胸主动脉环的舒张作用。α-ZAL10-10～10-8mol/L为低浓度组,α-ZAL10-7～10-5mol/L为高浓度组,0.1%乙醇浓度为对照组。在高浓度组中分别预先加用10-5mol/L左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME组)和亚甲蓝(MB组)并观察其影响,测定动脉环中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和cGMP含量及灌流液中NO含量变化。结果L-NAME组和MB组均可减弱高浓度组中α-ZAL的内皮依赖性胸主动脉环舒张作用(P<0.05,P<0.01);与对照组比较,高浓度组胸主动脉环中eNOS、cGMP含量及灌流液中NO含量增高(P<0.05,P<0.01);与高浓度组比较,L-NAME组可降低灌流液中NO含量及胸主动脉环中cGMP含量(P<0.05,P<0.01);MB组可降低胸主动脉环中cGMP含量(P<0.01)。结论α-ZAL的内皮依赖性舒张作用与NOS-NO-cGMP系统的激活有关。     

不同HO-1表达水平对糖尿病模型大鼠血管舒张功能及NOS的影响

目的 探讨改变血红素加氧酶-1(HO-1)表达水平对糖尿病(DM)大鼠血管舒张功能的影响及与一氧化氮合酶(NOS)/一氧化氮(NO)的关系.方法 以链脲佐菌素(STZ)诱导DM大鼠模型.SD大鼠分成4组:对照组、DM组、正铁血红素(HO-1诱导剂)组、锌原卟啉(HO-1抑制剂)组.应用离体血管张力检测技术观察胸主动脉舒张功能变化;RT-PCR法及比色法分别检测血管组织和血清中诱生型NOS(iNOS)及内皮型NOS(eNOS)的表达和NO含量.结果 与DM组相比,正铁血红素组血管环对乙酰胆碱舒张百分率有所提高,而锌原卟啉组血管舒张反应继续下降.应用正铁血红素可在提高DM大鼠血管和血清eNOS表达的同时降低iNOS/NO表达;而锌原卟啉组血清中iNOS活性及其在血管组织表达均增高.结论 提高HO-1的表达水平有益于改善DM大鼠血管舒张反应失调,这种保护作用与抑制iNOS/NO的生成、上调eNOS表达水平有关.     

ApoAⅠ/ABCA1通过STAT3/TTP途径调节炎症因子mRNA降解

目的增龄伴随着血管结构和功能的改变及相关内皮细胞的损害,是动脉粥样硬化血管疾病发生发展的独立危险因素之一。加强增龄有关的内皮功能障碍的研究,对老年人心、脑血管疾病的防治有着重要意义。本研究通过观察增龄对大鼠血管结构和内皮功能的影响,探讨增龄所致的血管内皮功能障碍及其可能机制,为进一步研究如何早期延缓增龄性内皮功能障碍提供新思路。方法选择青年组(3月龄)、成年组(9月龄)、中年组(15月龄)健康雄性大鼠,通过检测血管内皮功能相关指标(血浆NO、eNOS、iNOS、ET-1及主动脉组织NO、eNOS、iNOS),测定离体主动脉环内皮依赖性与非内皮依赖性血管舒张功能,观察大鼠主动脉的形态学变化,寻找出早期出现内皮功能明显改变的月龄组大鼠。结果青年组、成年组、中年组大鼠血浆NO、eNOS、iNOS及主动脉组织的NOS活性随月龄增加逐渐降低(P<0.05),NO、eNOS、iNOS与月龄呈负相关;ET-1则逐渐升高(P<0.05),ET-1与月龄呈正相关;主动脉环对于乙酰胆碱所致的最大血管舒张程度随着月龄增加降低(P<0.05),对硝普钠所致的舒张反应各组基本一致(P>0.05);主动脉形态随着月龄的增加,内膜中膜厚度...     

替米沙坦对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用

目的观察替米沙坦对大鼠离体胸主动脉环张力的影响,并探讨其作用机制。方法采用离体血管张力实验方法。观察替米沙坦在1&#215;10-9mol/L,1&#215;10^-8mol/L,1&#215;10^-7mol/L,1&#215;10^-6mol/L,1&#215;10^-5mol/L浓度时,对去甲肾上腺素（NE,1&#215;10^-6mol/L）诱发大鼠离体胸主动脉环收缩的影响。观察内皮型一氧化氮合酶（eNOS）抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME,10-4mol/L）、环氧合酶抑制剂吲哚美辛（10^-5mol/L）对替米沙坦作用的影响,以及替米沙坦对血管环外钙依赖性收缩和内钙依赖性收缩的影响。结果替米沙坦对NE（1&#215;10^-6mol/L）预收缩的离体胸主动脉环产生浓度依赖性的舒张作用。用Indo预处理的血管环对替米沙坦的舒张反应与未经处理时比较无统计学意义（P〉0.05）。去内皮及L-NAME可显著减弱替米沙坦对血管环的舒张作用（P〈0.05）。替米沙坦对血管环外钙依赖性收缩和内钙依赖性收缩无影响作用。结论替米沙坦对NE预收缩的大鼠胸主动脉环具有浓度依赖性的舒张作用,其舒张反应可能有内皮依赖性,与内皮产生的NO有关,与前列环素的合成无关,不通过抑制外钙内流和内钙释放发挥舒张作用。     

二甲双胍抑制血管紧张素Ⅱ诱导的成年大鼠心脏成纤维细胞增殖

目的　观察二甲双胍对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的成年大鼠心脏成纤维细胞（CF）增殖的影响，并探讨其可能机制。方法　通过胰酶、胶原酶Ⅱ联合消化法获取成年大鼠CF，AngⅡ（100　nmol/L）刺激CF建立细胞增殖模型，并给予不同浓度（10、50及200　μmol/L）二甲双胍进行干预。采用噻唑蓝法观察CF的增殖情况，EdU掺入法测定CF的DNA合成能力。免疫印迹法检测内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷酸化内皮型一氧化氮合酶（p-eNOS）蛋白表达情况，硝酸还原酶法测定CF培养上清一氧化氮（NO）含量。结果　AngⅡ刺激48　h能够明显促进成年大鼠CF增殖（P<0.05），二甲双胍呈浓度依赖性抑制AngⅡ诱导的CF增殖，二甲双胍呈浓度依赖性增加CF内eNOS磷酸化水平和NO含量（P<0.05），eNOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）能阻断二甲双胍抑制AngⅡ诱导的CF增殖的作用（P<0.05）。结论　二甲双胍能抑制AngⅡ诱导的成年大鼠CF增殖，与二甲双胍激活CF内eNOS/NO通路有关。     

Globular adiponectin upregulates nitric oxide production in vascular endothelial cells

Aims/hypothesis Adiponectin, also called ACRP30, is a novel adipose tissue-specific protein that has been shown to improve insulin sensitivity and to exert anti-atherogenic effects. It is known that knockout mice lacking endothelial NO synthase (eNOS) develop hypertension, insulin resistance, hyperlipidaemia, and show augmented ischaemia-reperfusion damage. Thus, we examined whether globular adiponectin activates eNOS to produce NO.Methods To analyze NO production in bovine aortic endothelial cells (BAE), NOx (nitrite and nitrate) was measured in the medium with an automated NO detector/high-performance liquid chromatography system. eNOS activation was assessed by phosphorylation of the enzyme and its activity was evaluated by citrulline synthesis in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). eNOS mRNA and protein expressions in HUVEC were evaluated by Realtime PCR and Western blot analysis.Results Gobular adiponectin increased NO production in BAE. It also caused eNOS phosphorylation and potentiated eNOS activity in HUVEC. In addition, globular adiponectin up-regulated the eNOS gene to increase protein expression in HUVEC.Conclusion/interpretation Globular adiponectin increases NO production through two mechanisms, namely, by activation of eNOS enzyme activity and via an increase in eNOS expression. Activation and up-regulation of eNOS could explain some of the observed vasoprotective properties of globular adiponectin, as well as its beneficial effects on the cardiovascular system.Abbreviations NO nitric oxide - eNOS endothelial NO synthase - BAE bovine aortic endothelial cells - HUVEC human umbilical vein endothelial cells - ACRP30 adipocyte complement-related protein of 30 kDa - GAPDH glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase     

The impact of estrogen and L-arginine on serum NO and eNOS expression in aorta of aged rats

Background Cardiovascular diseases (CVD) are less prevalent in postmenopausal women received estrogen replacement therapy (ERT) than those who did not receive ERT.Previous study has shown that the increase of nitric oxide (NO) synthesis is one of the cardioprotective effects of estrogen.This study investigated the effects of estrogen and L-arginine (L-Arg) on serum NO concentrations and the possible regulatory role in endothelial nitric oxide synthase (eNOS) expression in aortas of aged rats.Methods Fifty aged female wistar rats (18-20 months) were randomly divided into five groups (n=10):Sham group (sham operated,0.9 % NaCl 10 μg every three day for 4 months),OVX group (ovariectomized,0.9 % NaCl 10 μg i.m every three day for 4 months),OVE group (ovariectomized + 17β-estradiol 10 μg i.m every three day for 4 months),OVE + L-Arg group (ovariectomized + 17β-estradiol 10ug i.m every three day + 2.25 % L-Arg contained in drinking water every day for 4 months) and L-Arg group (ovariectomized + 2.25 % L-Arg contained in drinking water every day for 4 months).NO concentration and the expression of eNOS mRNA in aorta were measured after 4 months.Results Serum NO synthesis did not alter after ovariectomized (P=0.362),but were increased in OVE group,L-Arg group and OVE + L-Arg group compared with OVX group (P < 0.05,P < 0.05,P < 0.01,respectively).NO concentration also increased in OVE + L-Arg group when compared with OVE group (P < 0.05) or L-Arg group (P < 0.05).There was no significant difference in eNOS mRNA expression in aortas of aged rats between sham,OVX,OVE,OVE + L-Arg and L-Arg group (F=0.550,P=0.700).Conclusions Estrogen treatment and L-Arg supplementation increase serum NO synthesis,but do not upregulate eNOS mRNA expression in aortas of aged rats.     

氯吡格雷对尼古丁诱导的血管内皮损伤的保护作用

目的探讨尼古丁对血管内皮细胞的影响及氯吡格雷的保护作用。方法将40只SD大鼠分为5组,对照组、模型组(尼古丁2 mg/kg)、尼古丁损伤+氯吡格雷低剂量组(低剂量组)、尼古丁损伤+氯吡格雷中剂量组(中剂量组)、尼古丁损伤+氯吡格雷高剂量组(高剂量组),每组8只。尼古丁造模4周后,测定大鼠血浆超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素1、NO及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)浓度,免疫组织化学法及Western blot法测定血管eNOS阳性细胞的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血浆NO、eNOS及SOD浓度明显下降,而内皮素1浓度明显上调,eNOS阳性细胞表达明显减少(P0.01);与模型组比较,低、中、高剂量组大鼠NO、eNOS及SOD浓度明显升高,eNOS阳性细胞表达明显增多,且中、高剂量组大鼠增多更显著(P0.05,P0.01)。结论氯吡格雷可能抑制氧化应激反应,调节内皮细胞中eNOS的正常表达,从而缓解尼古丁对血管内皮细胞的损害。     

Norfloxacin reduces aortic NO synthases and proinflammatory cytokine up-regulation in cirrhotic rats: role of Akt signaling

BACKGROUND & AIMS: Arterial vasodilation plays a role in the pathogenesis of the complications of cirrhosis. This vasodilation is caused by the overproduction of arterial nitric oxide (NO). Bacterial translocation may be involved in NO synthase (NOS) up-regulation by activating both endothelial NOS (eNOS) and inducible NOS (iNOS). The prevention of intestinal gram-negative translocation by norfloxacin administration corrects systemic circulatory changes by decreasing NO production in cirrhosis. However, the signaling mechanisms for NO overproduction from bacterial translocation are unknown. In this study, we investigated the signal transduction pathway of bacterial translocation-induced aortic NOS up-regulation in cirrhotic rats. METHODS: Proinflammatory cytokine levels, Akt and NOS activities, eNOS phosphorylation, and NOS expressions were assessed in aorta from norfloxacin-treated and untreated cirrhotic rats. Norfloxacin was administered to reduce intestinal bacterial translocation. RESULTS: Aortic eNOS and iNOS protein expressions, Akt activity, and eNOS phosphorylation by Akt at serine 1177 were up-regulated in cirrhotic rats. Norfloxacin administration significantly decreased the incidence of gram-negative translocation and proinflammatory cytokine (tumor necrosis factor-alpha, interferon-gamma, and interleukin-6) levels; norfloxacin also decreased aortic Akt activity, eNOS phosphorylation, and NOS expressions and activities. The decrease in aortic Akt activity and NOS expressions also was obtained after colistin or anti-tumor necrosis factor-alpha antibody administration to cirrhotic rats. CONCLUSIONS: This study identifies a signaling pathway in which bacterial translocation induces aortic NOS up-regulation and thus NO overproduction in cirrhotic rats. These results strongly suggest that bacterial translocation and proinflammatory cytokines play a role in systemic NO overproduction in cirrhosis by the Akt pathway.     

小凹蛋白与内皮型一氧化氮合成酶在大鼠肝硬化组织中的表达

目的探讨小凹蛋白Caveolin-1、内皮型一氧化氮合成酶eNOS在大鼠肝硬化组织中的异常表达及其意义。方法构建二甲基亚硝胺（DMN）致肝纤维化大鼠模型，在造模4周后观察肝纤维化程度。免疫组织化学染色检测30例大鼠肝硬化肝组织和30例正常大鼠肝组织中Caveolin-1和eNOS的细胞定位；Western Blot检测Caveolin-1和eNOS的蛋白表达水平变化。结果Caveolin-1和eNOS均主要分布于肝窦内皮细胞中，Caveolin-1在肝硬化组表达阳性率为90％，对照组为37％，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；eNOS在肝硬化组表达阳性率为30％，对照组为66％，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。Westem Blot检测Caveolin-1在肝硬化组织中较正常肝组织中表达明显增强；eNOS在肝硬化组织中呈低水平表达，较正常肝组织中表达明显减少。结论肝硬化肝窦内皮细胞中Caveolin-1的异常表达促进eNOS-Caveolin-1复合物的生成，结合形式的eNOS活性降低，导致NO合成减少，肝内血管阻力持续增加，从而导致了门静脉高压症的形成。     

Uncoupled endothelial nitric oxide synthase and oxidative stress in a rat model of pregnancy-induced hypertension

BACKGROUND: Preeclampsia is a human pregnancy-associated syndrome associated with hypertension, proteinuria, and endothelial dysfunction. We tested whether increased reactive oxygen species (superoxide and peroxynitrite) production and decreased bioavailability of the endothelial nitric oxide (NO) synthase (eNOS) cofactor tetrahydrobiopterin (BH4) contributes to maternal endothelial dysfunction in rats with pregnancy-induced hypertension and several characteristics of preeclampsia. METHODS: Nonpregnant (DS) and pregnant (PDS) rats were treated with deoxycorticosterone acetate and 0.9% saline for approximately 3 weeks and nonpregnant (Con) and pregnant (P) rats received tap water. Blood pressure, urinary protein levels, mesenteric vascular reactivity, aortic protein expression, and aortic reactive oxygen species levels were compared between the four groups. RESULTS: The PDS rats had significantly decreased mesenteric endothelium-dependent relaxation responses and aortic NO production compared to Con, DS, and P rats despite increased aortic eNOS expression. Aortic superoxide and peroxynitrite levels were increased in PDS rats compared with Con, DS, and P rats. Scavenging of reactive oxygen species or increasing tetrahydrobiopterin levels normalized mesenteric endothelium-dependent relaxation responses, aortic NO production, and aortic superoxide and peroxynitrite levels in PDS rats. CONCLUSIONS: These data suggest that increased superoxide production by NADPH oxidase, peroxynitrite degradation of BH4, and uncoupled eNOS contribute to endothelial dysfunction in a rat model of pregnancy-induced hypertension.     

高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞中eNOS/NO的变化及调节机制研究

目的:探讨高糖条件下大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中内皮一氧化氮合酶一氧化氮(eNOS/NO)的变化及可能的调节机制.方法:将大鼠GMCs常规培养在含5.5 mmol/L葡萄糖的RPMIl640培养液中,用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(EDTA)混合消化酶传代.用RT、实时-PCR和Western blot测定GMCs中eN...     

磷酸二酯酶抑制剂对乳鼠心肌细胞PI3K—Akt—eNOS信号通路的影响

目的：探讨西洛他唑（Cilostazol）对乳鼠心肌细胞PI3K-Akt-eNOS信号通路的影响。方法：观察西洛他唑对乳鼠心肌细胞NO影响的时效和量效关系，再用PI3K及eNOS抑制剂进行干预。检测NO的浓度，Western免疫印迹法检测总Akt、磷酸化Akt（p—Akt—ser473）及总eNOS、磷酸化eNOS（p-eNOS-Ser1177）表达水平。结果：西洛他唑升高心肌细胞NO浓度呈剂量和时间依赖性，不同浓度的西洛他唑均能升高Akt和eNOS磷酸化水平，但对Akt及eNOS总蛋白表达无明显影响。eNOS抑制剂L—NAME和P13K抑制剂Wortmannin均能抑制西洛他唑诱导的NO浓度升高，Wortmannin还能阻断西洛他唑诱导的Akt和eNOS的磷酸化。结论：西洛他唑可能激活乳鼠心肌细胞的PI3K—Akt—eNOS信号通路而促进NO的产生。