加味丹参饮体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究

目的探讨加味丹参饮体外诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs)向心肌样细胞分化的实验研究。方法采用贴壁法获取大鼠BMSCs,流式细胞术检测细胞表面抗原。MTT法检测加味丹参饮对BMSCs最大无毒浓度,用第3代细胞分组诱导:正常对照组,加味丹参饮组,5-氮胞苷组,加味丹参饮+5-氮胞苷组,应用western blot检测各组细胞结合蛋白(Desmin),α-肌球蛋白重链(α-MHC),心肌肌钙蛋白T(c Tn T)蛋白表达,RT-PCR法检测各组细胞GATA-4,缝隙连接蛋白43(CX43)及Nkx2-5 mRNA表达。结果大鼠BMSCs表面CD90阳性率高于95%,CD34及CD45阳性率低于5%。加味丹参饮对BMSCs最大无毒浓度为0.625 g/L。与正常对照组比较,加味丹参饮组,5-氮胞苷组,加味丹参饮+5-氮胞苷组中Desmin,α-MHC及c Tn T蛋白表达量上调,GATA-4,CX43及Nkx2-5 mRNA表达量上调,差异有统计学意义(P0.01)。与加味丹参饮组或5-氮胞苷组比较,加味丹参饮+5-氮胞苷组中Desmin,α-MHC及c Tn T蛋白表达量上调,GATA-4,CX43及Nkx2-5 mRNA表达量上调,差异有统计学意义(P0.01)。结论加味丹参饮能够诱导BMSCs向心肌样细胞转化,与5-氮胞苷联合给药具有协同作用。     

骨髓间充质干细胞向心肌诱导过程中GATA-4和Nkx2.5基因的表达

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌诱导分化过程中,心肌转录因子GATA.4和Nkx2.5基因表达的变化规律,探讨其分子生物学机理.方法 体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,取第3代以10 pmol/L 5-氮杂胞苷(5-aza)诱导.分别于第1、2、3、4周收集细胞,免疫细胞化学法和Western blot法检测肌钙蛋白I(troponinI,TnI)表达·RT-PCR法分析GATA-4和Nkx2.5基因的表达.结果 诱导后细胞停止生长,并倾向集落化,诱导第2周开始出现TnI阳性细胞,第1周开始即有GATA-4和Nkx2.5基因表达,逐渐增强,第3周达到高峰,持续到第4周.结论 GATA·4和Nkx2.5基因表达在骨髓同充质干细胞向心肌样细胞诱导过程中逐渐增强,可能参与调控心肌细胞的分化过程.     

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的研究

目的观察体外不同诱导条件下大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在不同时间段分化为心肌样细胞的能力及表达心肌细胞特异性标志物的差别。方法分离培养SD大鼠BMSCs和SD乳鼠心肌细胞并鉴定,取第3代BMSCs分别进行5-氮胞苷(5-Aza)诱导、与心肌细胞共培养及单独培养,分别于第2、4、6、8、10周使用倒置显微镜观察细胞生长情况和形态变化,反转录-聚合酶链反应检测每组细胞心肌特异性基因肌钙蛋白I(cTnI)、缝隙连接蛋白43(Cx43)和心肌特异性转录因子4(GATA-4)的表达。结果对照组未见有搏动细胞,cTnI、Cx43和GATA-4基因表达阴性;5-氮胞苷诱导组于第2周时细胞呈梭形且排列方向趋于一致,未见有搏动细胞,cTnI、Cx43基因表达第8周达到高峰,GATA-4基因表达第4周达高峰;共培养组细胞多为梭形,呈肌性排列,可见搏动频率不一致的搏动细胞,cTnI、Cx43基因表达于第2⁸周表达逐渐增加,GATA-4基因表达第6周达高峰;相同时段内,共培养组的cTnI、Cx43和GATA-4基因表达高于5-氮胞苷诱导组(P<0.05)。结论 BMSCs经5-氮胞苷诱导或与心肌细胞共培养可转化为心肌样细胞并表达基因cTnI、Cx43和GATA-4,且共培养组BMSCs分化为心肌样细胞的能力比5-氮胞苷诱导组强,推测心肌微环境可促进BMSCs定向分化为心肌样细胞。     

BMP-2和PFT-α对骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的影响

目的:探索骨形态发生蛋白2(BMP-2)、P53抑制剂(PFT-α)以及二者联合诱导对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法:分离4周龄SD大鼠的骨髓间充质干细胞并进行体外培养,对第二代BMSCs定向诱导,依次为BMP-2组、PFT-α组、BMP-2+PFT-α组以及空白对照组,相差显微镜观察细胞的形态学变化。免疫细胞化学法检测诱导4周后心肌特异性标记物(α-actin、CTn T、desmin、P38-Mark)的表达,并进行统计学分析;透射电镜观察细胞的内部结构。结果:诱导4周后,诱导组大鼠BMSCs的细胞形态变长,呈杆状,紧密平行排列,方向一致;空白对照组大鼠BMSCs细胞呈星形或三角形。免疫细胞化学检测显示:各诱导组BMSCs均可见α-actin、C-Tn T、desmin、P38-Mark阳性的细胞,其中联合诱导组的阳性表达率高于BMP-2或PFT-α单独诱导组,诱导各组与对照组的以上各标记物的阳性率具有统计学差异(P﹤0.05)。透射电镜结果显示:诱导组大鼠BMSCs细胞呈分支杆状,核卵圆形,且位于细胞中央,细胞质中有肌丝平行排列,可见线粒体、大量粗面内质网、核糖体等。结论:BMP-2、PFT-α均可诱导BMSCs向心肌样细胞分化,且两者联合应用效果强于单一应用的效果。     

叶酸对胎鼠心肌细胞Cx43表达的影响

目的:观察叶酸对胚胎大鼠心肌细胞Cx43表达的影响,探讨叶酸预防先天性心脏畸形作用的可能机制。方法:受孕大鼠随机分为两组,实验组给予叶酸(2mg/kg/d)灌胃,对照组灌服等量生理盐水。选择ED13.5和ED16.5的胚胎大鼠作为研究对象,SP免疫组织化学染色法观察Cx43在心肌细胞的表达。结果:免疫组织化学染色显示各组胎鼠心肌细胞均可见Cx43阳性表达,阳性产物以颗粒形式散在分布于细胞质内,或呈短线状、链状排列在细胞侧-侧连接处。实验组胎鼠心肌Cx43阳性细胞数明显高于同胎龄对照组(P0.01)。结论:叶酸可增强胎鼠心肌细胞Cx43的阳性表达。     

缝隙连接蛋白α7促进骨髓间充质干细胞转化为心脏起搏样细胞的实验研究

目的 探讨缝隙连接蛋白α7(GJA7)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs),经与乳鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVMs)共培养,诱导心脏起搏样细胞相关基因表达的变化.方法 构建携带GJA7基因的慢病毒载体,转染rMSCs,经嘌呤霉素加压筛选纯化后,与NRVMs共培养.分为RFP(red fluorescent protein,红色荧光蛋白)-rMSCs组(A组)、GJA7-RFP-rMSCs组(B组)、RFP-rMSCs+ NRVMs组(C组)、GJA7-RFP-rMSCs+NRVMs组(D组)4组.荧光定量PCR法检测心脏起搏细胞相关基因(HCN4、GJA7、Tbx3、Tbxl8)及工作心肌细胞相关基因(Cx43、Nkx2.5)的表达.全细胞膜片钳检测各组细胞起搏电流(If).结果 携带GJA7基因的慢病毒载体成功转染rMSCs,经嘌呤霉素加压筛选,转染效率高达95％以上.RT-qPCR结果显示,D组HCN4、GJA7、Tbx3、Tbxl8表达较其他各组明显增高(P＜0.05);C组Nkx2.5、Cx43则较其他组表达明显升高(P＜0.05).全细胞膜片钳检测结果显示,仅D组记录到超极化激活的内向电流,该电流具有明显时间电压依赖性,且可被Cscl(4 mmol/L)阻断,符合If电流特性.结论 经GJA7基因修饰并通过与心肌细胞共培养,使rMSCs在体外诱导出具有If电流的心脏起搏样细胞.     

connexin43基因体外转染大鼠L6骨骼肌成肌细胞的研究

目的将含有connexin43基因的质粒在脂质体的介导下转染进入大鼠L6骨骼肌成肌细胞,使用G418根据有限稀释法筛选单克隆细胞株L6 myoblast-Cx43。方法通过免疫细胞化学技术、Western blot技术,对整合有connexin43基因的阳性细胞克隆进行检测。结果两个阳性克隆组Cx43蛋白表达均明显高于对照组。结论获得的两个持续高表达connexin43蛋白的细胞株可用于进行移植细胞之间及移植细胞与宿主细胞之间能否形成良好的电偶联的研究。     

人胚胎生殖细胞向心肌细胞诱导分化的研究

目的诱导人胚胎生殖细胞（hEGC）向心肌细胞分化,初步探讨其定向分化过程及调控机制。方法组织块培养法体外培养hEGC,采用抗坏血酸诱导hEGC向心肌细胞分化,通过CCK-8法测定诱导后心肌细胞增殖率,免疫荧光法检测心肌连接蛋白Cx43的表达;利用半定量RT-PCR的方法鉴定hEGC和诱导后心肌细胞GATA-4和ACTC1等基因的表达;结合生物信息学方法推断分化过程中各蛋白的相互作用关系。结果诱导后细胞阳性表达Cx43,且表现出一定的增殖能力;其表达GATA-4、ACTC1等基因的强度与未经诱导的hEGC均有所不同;GATA-4、Nkx2.5与各类心肌肌钙蛋白有着密切的联系。结论 hEGC能诱导分化为心肌细胞;蛋白质组学方法可以协助探讨其分化过程及调控机制。     

MiR499促进MSCs心肌样细胞分化及其机制的初步探讨

目的：探讨miR 499体外是否能诱导大鼠骨髓来源的间充质干细胞( MSCs)向心肌细胞分化,并验证其是否通过靶作用于结肠腺瘤样息肉( APC)调控WNT信号通路发挥作用。方法：在MSCs中过表达miR 499后,Q RT PCR检测心肌特异性基因GATA4、Nkx2.5、cTnI及miR 499及其靶基因APC的表达情况,双荧光素酶报告系统验证靶基因 APC。结果： miR 499、GATA4、Nkx2.5、cTnI 表达明显上调( P<0.05),但APC表达无明显差异(P＝0.3);双荧光素酶报告系统结果显示与转染空载体组比较荧光素酶活性无明显变化( P＝0.37);结论：miR 499可促进MSCs向心肌样细胞分化,但不通过靶作用于APC发挥促分化作用。     

3种体外培养方法诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化效果比较

目的：采用3种体外培养方法对骨髓间充质干细胞（BMSCs）进行诱导分化,探讨体外诱导BMSCs向心肌细胞分化的最佳方法。方法：采用密度梯度离心法结合贴壁培养法体外分离培养大鼠BMSCs,分为5-氮胞苷（5-aza）组、扩张型心肌病（DCM）模型大鼠心肌细胞裂解液组和DCM模型大鼠血清+5-aza组,同时设对照组（同等条件下在含10%胎牛血清的L-DMEM培养基中培养）,观察细胞形态表现,采用RT-PCR法、Western blotting法和免疫组织化学染色法检测细胞中肌钙蛋白T（cTnT）的表达。结果：密度梯度离心法结合贴壁培养法获得大鼠BMSCs,BMSCs高表达间充质干细胞（MSCs）的特征性表面标记CD44、CD29和CD105,不表达造血干细胞的特征性表面标志CD34;特定诱导条件下,BMSCs可以向成骨细胞及脂肪样细胞分化。体外3种培养方法均可诱导BMSCs表达cTnT,分化为心肌样细胞;5-aza组细胞生长状态差,其余2组细胞生长状态较好,DCM模型大鼠血清+5-aza组细胞中cTnT阳性表达率最高。结论：采用DCM模型大鼠血清联合5-aza诱导BMSCs向心肌细胞分化的效果最佳。     

骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞的鉴定指标

越来越多的研究发现,骨髓间充质干细胞(BMSCs)在一定的诱导条件下可以定向分化为心肌样细胞。该文对BMSCs定向分化为心肌样细胞的鉴定指标结蛋白、α肌动蛋白、肌钙蛋白、间隙连接蛋白43、肌细胞增强子2C、心脏转录因子GATA结合蛋白4、Csx/Nkx2.5、超极化激活的核酸环化酶门控的离子通道2/4、肌球蛋白重链等予以综述。     

Effect of silencing connexin 43 gene on release of glutamate from astrocytes in rats

目的 构建能有效抑制大鼠星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)连接蛋白43(connexin 43,Cx43)基因表达的siRNA载体,并检测抑制Cx43表达对星形胶质细胞谷氨酸释放的影响.方法 合成针对大鼠Cx43基因的siRNA寡核苷酸,构建pGCsi.U6.neo.GFP质粒载体.质粒通过电转方法转染原代星形胶质细胞后,用免疫荧光染色及Western blot检测转染干扰质粒对大鼠ASTs Cx43蛋白表达的影响.用谷氨酸ELISA定量试剂盒检测释放至培养基中谷氨酸的浓度,并用DAPI染色进行细胞计数.结果 测序结果显示,Cx43基因的目的片段正确插入载体,并保持正确的读码框.干扰质粒转染ASTs 48 h后与对照组相比,Cx43蛋白表达明显下降(P＜0.05),细胞存活未受影响,而谷氨酸释放明显减少(P＜0.05).结论 成功构建了抑制大鼠Cx43基因表达的siRNA载体,抑制Cx43表达可降低ASTs谷氨酸的基础释放.     

Cx43基因干扰对大鼠星形胶质细胞谷氨酸基础释放的影响

目的构建能有效抑制大鼠星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)连接蛋白43(connexin 43,Cx43)基因表达的siRNA载体,并检测抑制Cx43表达对星形胶质细胞谷氨酸释放的影响。方法合成针对大鼠Cx43基因的siRNA寡核苷酸,构建pGCsi.U6.neo.GFP质粒载体。质粒通过电转方法转染原代星形胶质细胞后,用免疫荧光染色及Western blot检测转染干扰质粒对大鼠ASTs Cx43蛋白表达的影响。用谷氨酸ELISA定量试剂盒检测释放至培养基中谷氨酸的浓度,并用DAPI染色进行细胞计数。结果测序结果显示,Cx43基因的目的片段正确插入载体,并保持正确的读码框。干扰质粒转染ASTs 48 h后与对照组相比,Cx43蛋白表达明显下降(P<0.05),细胞存活未受影响,而谷氨酸释放明显减少(P<0.05)。结论成功构建了抑制大鼠Cx43基因表达的siRNA载体,抑制Cx43表达可降低ASTs谷氨酸的基础释放。     

BMP-13在C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化过程中的作用

目的研究骨形态形成蛋白-13(bone morphogenetic proteins-13,BMP-13)促骨髓间充质干细胞C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的作用。方法骨髓间充质干细胞C3H10T1/2经pAdEasy-BMP-13重组腺病毒质粒感染后,利用Western blot以及免疫荧光技术于1、2、3周时分别检测C3H10T1/2干细胞心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达变化;同时以实时荧光定量PCR技术进行心肌分化特异性基因GATA4、MEF2C的检测,4周后应用电子显微镜观察干细胞超微结构变化。结果 C3H10T1/2干细胞经pAdEasy-BMP-13感染诱导后,细胞开始伸展,折光性增强,细胞间连接较紧密且细胞排列趋向一致;pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞于3周时,Western blot技术检测出心肌特异性肌钙蛋白(cardiac isoform of tropnin T,cTnT)、连接蛋白Cx43(connexin 43,Cx43)(P<0.05),免疫荧光检测有蛋白α-MHC、α-actin表达,而于1周和2周时未检测出。同时pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞1、2周和3周均未发现有心肌特异性蛋白cTnT、Cx43、α-MHC、α-actin的表达。3周对各组均出现心脏早期发育特异性基因GATA4、MEF2C的表达,但pAdEasy-BMP-13和pAdEasy-BMP-2感染后细胞表达量明显高于pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞(P<0.05);pAdEasy-BMP-13感染后细胞于4周时透射电镜下观察出现闰盘及肌丝样细胞超微结构,而pAdEasy-GFP感染后细胞和未感染组细胞没有出现类似结构。结论 pAdEasy-BMP-13可以诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化。     

心肌微环境中Wnt11与BMP2协同作用促大鼠BM—MSCs分化为心肌样细胞的实验研究

目的探讨在心肌微环境的旁分泌作用中,Wnt11与BMP2对促进大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow—mesenchymal stem cells,BM—MSCs）分化为心肌样细胞的协同作用。方法建立Transwell共培养模型,将心肌细胞及转染Wnt11质粒的3T3细胞置于上层、BM—MSCs置于下层培养,前3天应用含50μg/L Noggin（BMP抑制剂）培养液、第4天换用含0．5μg/L BMP2的培养基诱导培养至第14天。根据不同诱导条件,培养细胞分为7组：阳性对照组（Heart组）、CM组、CM＋BMP2组、CM＋Wnt11组、Wnt11＋BMP2组、CM＋Wnt11＋BMP2组、阴性对照组（BM—MSCs组）。诱导培养结束后,采用RT—PCR方法,检测心肌特异性转录因子（Nkx2．5、GATA4、Mef2c）和成熟心肌细胞特异性基因（cTnI、ANP、d—MHC、B—MHC）mRNA表达水平。结果RT—PCR结果显示,在心肌细胞旁分泌微环境下,Wnt11与BMP2协同作用组（CM＋Wnt11＋BMP2组）心肌特异性转录因子和成熟心肌细胞特异性基因的表达明显高于阴性对照组和其他共培养对照组,低于阳性对照组（P〈0．05）。结论在心肌细胞旁分泌微环境中,Wnt11协同BMP2表达可提高BM—MSCs向心肌样细胞分化的效率。     

形成拟胚体细胞数量对小鼠胚胎干细胞心肌细胞及内皮细胞分化的影响

目的:探讨形成拟胚体(EBs)起始小鼠胚胎干细胞(ESCs)数量对心肌细胞及内皮细胞分化的影响。方法:将形成EBs起始ESCs数量为400,1 000,4 000的3个组(HD400,HD1000,HD4000)通过悬滴法促进其分化。免疫荧光检测TnT及CD31的表达;在不同时间点计算三个组搏动EBs百分比;RT-PCR检测Nkx2.5,GA-TA4,β-MHC,flk-1,CD31,tie-2基因表达水平。结果:通过悬滴法形成的EBs能够出现自发性搏动并且有TnT及CD31表达;HD1000组和HD4000组相比HD400组有更高的搏动EBs百分比及Nkx2.5,GATA4,β-MHC基因表达水平;HD400组相比HD1000组和HD4000组有更高的flk-1,CD31,tie-2基因表达水平(P<0.05)。结论:形成EBs起始ESCs数量是影响心肌细胞和内皮细胞分化的一个重要因素,起始细胞数量多则心肌细胞分化程度高,数量少则内皮细胞分化程度高。     

Shox2基因转染后犬骨髓间充质干细胞HCN4表达的变化

目的 探讨矮小同源盒基因亚型2(short stature homobox 2,Shox2)外源基因对犬骨髓间充质干细胞(canine mesenchymal stem cells,cMSCs)体外诱导分化的影响.方法 分离培养犬骨髓间充质干细胞,用包装好的两种慢病毒载体pLentis-mShox2-RFP及pLentis-RFP分别转染第3代cMSCs,收集转染阳性的cMSCs与乳鼠心肌细胞(rat ventricular myocytes,NRVMs)共培养.实验分4组:A组(RFP-cMSCs组)、B组(RFP-cMSCs+ NRVMs共培养组)、C组(Shox2-RFP-cMSCs组)、D组(Shox2-RFP-cMSCs+NRVMs共培养组).共培养诱导分化5d后,利用嘌呤霉素对cMSCs进行纯化,运用全细胞膜片钳检测诱导出内向电流的动力学特征,运用实时荧光定量PCR、Western blot检测HCN4、Tbx3、Cx45/43、Nkx2.5等标志性基因mRNA和蛋白的表达情况,并行免疫荧光检测.结果 Western blot及RT-PCR检测结果显示,D组细胞Shox2、HCN4、Tbx3、Cx45窦房结细胞特异性基因的表达较A、B、C组明显增高(P＜0.05),B组细胞Cx43及Nkx2.5较C、D组细胞明显增高(P＜0.05);免疫荧光结果显示,在Shox2基因调控作用下,cMSCs有HCN4通道生成;膜片钳检测结果显示,C、D组细胞产生了具有明显时间-电压依赖性的内向电流,且对细胞外Cs+敏感,符合起搏离子流Ⅰf的动力学特征;而A、B组未检测出此电流.结论 经mShox2基因修饰的cMSCs通过体外诱导,产生了起搏离子流Ⅰf并高表达窦房结标志性基因,成功向具有一定自主搏动能力的窦房结样细胞分化.     

新生小鼠心脏细胞体外共培养体系的建立及其在心肌细胞增殖研究中的应用

目的 建立新生C57乳鼠心肌细胞和成纤维细胞体外原代培养和共培养体系,探讨不同日龄乳鼠心脏细胞的体外增殖特征.方法 分离不同日龄C57新生小鼠的心肌细胞和成纤维细胞,分别进行原代培养和共培养,观察细胞的形态和活力变化,测定CyclinD1、CDK4、GATA4、Nkx2.5以及FGF1的表达.结果 差速贴壁90 min后成纤维细胞先贴壁,培养12h后心肌细胞几乎全部贴壁;共培养心肌细胞多以细胞团的形式贴壁生长.出生5d以内的乳鼠心肌细胞数量明显增加,共培养的心肌细胞活力更大、增殖速度快;出生5d以后乳鼠的心肌细胞数量变化并不明显.出生5d内乳鼠心肌细胞中CyclinD1和CDK4的表达量较高,且共培养的心肌细胞表达量要高于单独培养的心肌细胞表达量.GATA4、Nkx2.5和FGF1的表达随日龄增大而增加.结论 成功建立了新生小鼠心肌细胞和成纤维细胞的体外共培养体系;出生5d内的乳鼠心肌细胞体外培养时具有较强的增殖能力,且成纤维细胞能促进心肌细胞的增殖,GATA4、Nkx2.5和FGF1有阻止心肌细胞增殖作用.出生5d后乳鼠的心肌细胞增殖能力减弱甚至消失.     

心脏营养素-1对骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的作用

目的 观察心脏营养素-1(CT-1)是否能促进经诱导分化剂5-氮杂胞苷(5-aza)诱导的骨髓间充质于细胞(BMMSCs)分化为心肌样细胞,并研究其相关机制.方法 自成年大鼠骨髓中分离BMMSCs,分别以普通培养基(A 组)、加入含CT-1的培养基(B组)培养、经5-aza诱导后加入普通培养基(C组)及5-aza加入含CT-1的培养基(D组)培养.观察细胞形态的改变,并通过免疫组化分析分化后细胞表达心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)的情况.电镜观察分化后细胞的超微结构及实时荧光定量检测a-actin、β-myosin heavy chain(ffMHC)、Nkx2.5、GATA4基因表达.结果 C、D组的BMMSCs在培养4周后均形成心肌样细胞形态,并且均表达eTnT D组BMMSCs分化的心肌样细胞形成了肌管样结构;D组α-actin、β-MHC、Nkx2.5、GATA4基因表达明显高于C组.结论 CT-1可能通过对GATA4、Nkx2.5基因表达的调控而促进5-aza诱导的BMMSCs分化为心肌样细胞.     

骨髓间充质干细胞在心肌细胞诱导下的分化研究

目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）在不同心肌细胞微环境作用下,向心肌样细胞分化能力。方法将心肌细胞与BMSCs分为：接触性、非接触性、对照组联合培养;2周后检测各实验组细胞中,心肌特异性蛋白肌钙蛋白T（cTnT）表达情况。结果免疫细胞化学鉴定：1）接触性联合培养组细胞均表达cTnT;2）非接触性联合培养组细胞均表达cTnT;3）对照组细胞不表达cTnT。