环(组氨酸-脯氨酸)二肽的高温高压辅助合成工艺优化（英文）

将高温高压技术应用于环(组氨酸-脯氨酸)二肽(cyclo(His-Pro),CHP)的制备。以二肽甲酯盐酸盐为原料,采用高温高压辅助环化法在水中制备CHP,通过单因素试验考察了各种反应变量如压力、时间、溶液p H值以及底物质量浓度对CHP产率的影响,采用正交试验对高温高压辅助环化工艺条件进行优化。采用超高效液相色谱法和电喷雾质谱技术对产物中的CHP进行定量和定性分析。结果表明,最佳的反应条件为:反应压力0.20 MPa、反应时间3.5 h、溶液p H 6.0、底物质量浓度15 mg/m L。在此条件下可以得到较高产率(91.35%)的CHP,并且反应中没有观察到消旋。与传统的甲醇回流法相比,本研究的环化方法省时、高效、环保,并且能够得到较高的产率,同时产物没有发生消旋。     

响应面试验优化高温高压制备玉米环（组氨酸-脯氨酸）二肽关键工艺

将高温高压技术应用于玉米环（组氨酸-脯氨酸）二肽（cyclo（His-Pro）,CHP）的制备,以玉米蛋白水解物为原料,在水相溶液中采用高温高压法对其进行环化,合成CHP。通过单因素试验考察反应温度、底物质量浓度、反应时间和KHCO3浓度对CHP提取量的影响,应用响应面试验设计对高温高压环化反应条件进行优化。结果表明最佳反应条件为反应温度125.9 ℃、反应压力0.25 MPa、底物质量浓度20.5 mg/mL、KHCO3浓度0.16 mol/L、反应时间5.3 h,此条件下CHP提取量可达6.58 mg/g。采用超高效液相色谱-串联质谱法对水解物中的CHP进行进一步鉴定,结果表明制备的玉米CHP与预期结构相符。     

玉米环二肽（组氨酸-脯氨酸）的分离纯化、结构鉴定及其生物活性

环二肽（组氨酸-脯氨酸）（cyclo (His-Pro),CHP）是一种活性环二肽,在降血糖、抗氧化方面具有显著效果。实验通过DE-52阴离子交换层析、Sephadex G-25凝胶层析、半制备型高效液相色谱等方法,对高温高压环化后的玉米蛋白水解物进行分离纯化研究,得到CHP。采用超高效液相色谱、傅里叶变换红外光谱、核磁共振氢谱和碳谱对产物的结构进行鉴定,并通过体外降血糖和抗氧化实验初步测定了其生物活性。结果表明：采用本研究的分离纯化方法制备得到的CHP的纯度为97.36%,傅里叶变换红外光谱和核磁共振波谱的测定表明该肽的结构与预期结构相符,初步的生理活性鉴定结果表明,玉米CHP经分离纯化后对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性具有很强抑制能力,半抑制浓度（IC50）分别为1.1、1.9 mg/mL;且具有很强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除活性（IC50 67 μg/mL）和还原力。     

玉米蛋白环（组氨酸-脯氨酸）二肽前体的制备及其鉴定

以玉米蛋白为原料,制备活性环（组氨酸-脯氨酸）二肽（cyclo（His-Pro））前体——His-Pro和Pro-His二肽。分别采用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对提取的玉米γ-醇溶蛋白进行单酶和双酶分步水解,筛选出最佳酶解工艺。采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的水解产物中cyclo（His-Pro）前体的含量比其他水解产物要高。采用响应面和L16（45）正交试验对碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解γ-醇溶蛋白的工艺进行了优化,最佳水解条件为：底物质量浓度32 mg/mL,先加入12 100 U/g的碱性蛋白酶水解6.5 h,再加入17 000 U/g的风味蛋白酶于pH 7.5、55 ℃条件下水解6 h。采用超高效液相色谱法和电喷雾质谱法对cyclo（His-Pro）前体进行定量和定性分析,结果表明水解产物中含有较高含量的脯氨酸-组氨酸二肽（6.88 mg/g）。     

响应面法优化酶法制备驴血红蛋白源二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽

食源性二肽基肽酶Ⅳ（dipeptidyl peptidase Ⅳ,DPP-Ⅳ）抑制活性肽成为近年来健康产品研究的方向之一。本研究以驴血红蛋白为原料,采用计算机模拟蛋白水解方法筛选最佳蛋白酶,研究酶解时间、温度和加酶量对蛋白水解度（degree of hydrolysis,DH）和酶解产物DPP-Ⅳ抑制率的影响,响应面优化酶解法制备DPP-Ⅳ抑制活性肽的工艺条件。结果表明,最佳蛋白酶为蛋白酶K,驴血红蛋白源制备DPP-Ⅳ抑制活性肽的最佳酶解条件为：底物质量浓度1 g/100 mL、酶解时间3.15 h、温度65 ℃、pH 8、加酶量400 U/g,此条件下2 mg/mL酶解产物对DPP-Ⅳ的抑制率为53.44%。     

化学催化法制备甘油磷酸胆碱的研究

本文研究了反应时间、搅拌条件、催化剂用量、反应温度和底物浓度对以磷脂酰胆碱（PC70）为原料化学催化法制备甘油磷酸胆碱（GPC）的影响。单因素试验表明：较佳的反应温度为20℃,反应时间为80min,底物浓度为10%（m/v）,催化剂用量为0.75（v/m,甲醇溶液）,反应溶液与催化剂搅拌均匀后进行静置反应。该试验条件下GPC产率为97.4%。     

高固液比体系中酶催化合成Z-Phe-Leu-OMe的研究

以模型二肽Z—Phe—Leu—OMe的合成为对象讨论了高固液比条件下酶催化体系的性质。研究了固液比高低对二肽产率的影响，测定了高固液比条件下随着反应进行体系pH的变化，尝试提出该类体系pH变化的机理，并采用KHCO3和CaCO3调节该体系的pH来提高催化效率。     

氢过氧化物裂解酶合成己烯醛反应的研究

以苋菜作为氢过氧化物裂解酶（HPL）的酶源,研究了氢过氧化物裂解酶合成己烯醛的反应,并通过顶空-气相联用法（HS-GC）对产物进行分析。该反应中HPL对产物具有较强的吸附作用,大大影响了产物测量的准确度。通过一个校正方法来减少误差,并在此基础上考察了该反应的反应时间、pH、温度、底物浓度、酶浓度、BHT浓度等因素对己烯醛产率的影响,其中当反应时间10min,pH7.5,温度20℃,40mmol/L底物,酶浓度为12U/mL,BHT浓度为1mmol/L时,己烯醛的产率达到985mg/L。     

硫酸锆与二肽相互作用研究

以硫酸锆(Zr(SO4)2·4H2O)作为无铬金属复合鞣剂的替代物,以二肽作为皮革胶原的模拟物,选择了甘氨酰甘氨酸二肽、L-丙氨酰甘氨酸二肽、L-甘氨酰酪氨酸二肽与硫酸锆反应。当二肽与硫酸锆的摩尔比为1∶2时,40℃的条件下反应5~6h,二肽反应完全。通过红外光谱、核磁共振谱、XRD等分析表明:在pH≈1.5的条件下,硫酸锆与二肽中的羧基(—COOH)发生作用,锆离子(Zr4+)与羧基离子(—COO-)形成离子键,同时由于二肽结构的特殊性,锆离子(Zr4+)有可能与二肽酰胺键中羰基上的氧、氨基中的氮连接,形成五元环的螯合物。与离子键相比,这种作用较强,使得产物具有晶态。     

麦芽糖转糖基酶产环糊精性质的研究

通过β-淀粉酶对未环化的直链淀粉进行降解,采用DNS法对反应体系中还原糖进行测定,依据环化反应前后还原糖的变化来计算环糊精的产率,研究底物浓度、酶量、温度、pH、麦芽糖、乙醇、二甲基亚砜对转化率的影响。结果表明,直链淀粉终浓度为0.1～0.125%时转化率最高,而酶用量对最终转化率影响不大,最适转化pH值和温度分别是6.5和40℃,麦芽糖对转化率起抑制作用,乙醇和二甲基亚砜则能够提高转化率。     

氧气对涡流空化降解壳聚糖的影响

研究了氧气在不同壳聚糖溶液初始质量浓度、pH值、温度、进口压力、空化时间等条件下,对壳聚糖涡流空化降解的影响。结果表明：壳聚糖溶液的初始质量浓度越低涡流空化降解效果越好,当溶液pH值为4.4、温度为70 ℃、进口压力为0.4 MPa、空化时间为3 h时,壳聚糖的特性黏度下降率最高;在不同涡流空化降解条件下,连续通入氧气均可显著促进壳聚糖降解产物特性黏度下降率的提高,在本实验中最大可提高35.36%;氧气对高质量浓度壳聚糖降解的促进作用更显著;氧气的通入减弱了pH值对壳聚糖降解的影响、在反应的初期大大加快了反应速率;降解后的壳聚糖主链结构及官能团基本没发生变化。     

苦杏仁皮水不溶性膳食纤维提取工艺优化及其特性分析

以苦杏仁皮为原料,选取NaOH溶液浓度、超声时间和超声温度为试验因素,采用响应面法优化苦杏仁皮中水不溶性膳食纤维的提取工艺,并对影响其持水性和溶胀性的因素进行研究。结果表明,苦杏仁皮中水不溶性膳食纤维提取的最佳工艺条件为NaOH溶液浓度0.70 mol/L、超声时间51 min、超声温度86 ℃,此时水不溶性膳食纤维提取率为49.73%。在研究范围内,其持水性和溶胀性受葡萄糖质量分数的影响较小,受酸碱度和超声温度的影响较为显著。     

机械活化玉米淀粉的辛烯基琥珀酸酐酯化改性

采用行星式球磨机对玉米淀粉进行机械活化,再与辛烯基琥珀酸酐（octenyl succinic anhydride,OSA）发生酯化反应制备OSA淀粉酯。研究机械活化时间、反应温度、反应体系pH值、淀粉乳质量分数、反应时间因素对玉米淀粉酯化反应的影响,并采用二次回归正交旋转组合设计方法和响应面分析对制备条件进行优化。结果表明,机械活化对玉米淀粉OSA酯化反应有明显的增强作用,且反应不受pH值的影响;得到最优工艺条件为机械活化10 h、反应温度33.1 ℃、pH 8.45、淀粉乳质量分数12.2%、反应时间3 h,在此条件下制得机械活化辛烯基琥珀酸淀粉酯的平均取代度为0.020 3。     

新型花色苷衍生物oxovitisin A制备条件优化及其体外抑制癌细胞增殖活性

以植物花色苷为原料,通过羧基吡喃花色苷形成及微氧化两步反应法制备出具有非氧鎓离子结构和内酯型吡喃环结构的吡喃酮型花色苷衍生物（oxovitisin A）,进行了反应温度、pH值、反应介质乙醇体积分数和反应时间影响oxovitisin A生成量的单因素试验,正交试验优化得到oxovitisin A的最佳制备条件。高效液相色谱监测反应过程,高效液相色谱-二极管阵列检测-串联离子阱多级质谱法对反应产物进行定量和定性分析。利用“罗丹明B蛋白染色法”考察了oxovitisin A以及不同结构的吡喃花色苷衍生物（羧基吡喃花色苷、甲基吡喃花色苷）、前体花色苷（锦葵花色苷）的体外抗癌细胞增殖活性。结果表明：以1.0 mg/mL的羧基吡喃花色苷为原料,oxovitisin A的最佳制备条件是pH 3.6、反应温度45 ℃、乙醇体积分数20%、反应时间21 d,各因素对oxovitisin A得率影响的大小次序为pH值＞反应温度＞反应时间＞乙醇体积分数。高效液相色谱-串联质谱结合多级质谱裂解分析表明,反应的主要产物是oxovitisin A,反应第21天得率为26.59%。抗癌细胞活性实验结果表明,oxovitisin A能显著抑制人肠癌细胞（Caco-2）和人乳腺癌细胞（MCF-7）细胞增殖,IC50分别为（238.8±24.6）、（85.7±9）μg/mL,抑制作用明显强于羧基吡喃花色苷和甲基吡喃花色苷。     

石榴皮多糖硒酸酯制备工艺参数优化及其结构分析

以石榴皮多糖与亚硒酸钠为原料制备石榴皮多糖硒酸酯,以产物硒含量和收率为指标,原料配比、硝酸体积分数、反应温度和反应时间为单因素,通过单因素试验和Box-Behnken试验设计方法对工艺条件进行优化,并对产物结构进行分析。结果显示：石榴皮多糖硒酸酯最佳制备工艺条件为原料配比1∶1.0（g/g）、硝酸体积分数0.61%、反应温度77.0 ℃、反应时间11.3 h,在该工艺条件下,制得石榴皮多糖硒酸酯中硒含量为4.48 mg/g,产物收率为41.87%;紫外光谱、红外光谱和热重分析充分证实石榴皮多糖硒酸酯中含有Se＝O键、Se-O键和Se-C键。优化后的石榴皮多糖硒酸酯制备工艺条件实现了石榴皮多糖的硒化,为石榴皮资源的充分开发利用提供良好条件。     

响应面法优化谷氨酸亚铁的制备工艺

以氯化亚铁和谷氨酸钠为原料,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法优化谷氨酸亚铁的固液相法制备工艺条件,选定介质pH值、反应温度和反应时间,通过中心组合试验,建立二次回归方程。结果表明,反应物物质的量比、介质pH值、反应时间及温度对反应产物产率均有一定的影响。优化的制备工艺条件为谷氨酸与Fe2＋物质的量比1∶1、介质pH 5.76、反应时间0.75 h、反应温度58.9 ℃,产率为77.79%。反应产物谷氨酸亚铁螯合物的组成为Fe(C5H7NO4)·2H2O。     

响应面试验优化广枣黄酮的微波提取工艺及黄酮的提纯

通过单因素试验和响应面分析法确定了微波辅助提取广枣黄酮的最佳条件：提取温度75 ℃、液料比62∶1、乙醇体积分数62%、微波功率500 W和提取时间7 min。在此条件下,黄酮得率远高于文献所报道的方法。通过动态法确定了AB-8型大孔树脂纯化广枣黄酮的最优工艺参数：样品液流速2 BV/h、样品液pH 2、洗脱液流速3 BV/h、洗脱液乙醇体积分数60%。同时利用制备色谱对广枣黄酮进行纯化,高效液相色谱法分析结果证明,制备色谱用于纯化广枣黄酮具有可行性。     

响应面法优化莲藕中结合态阿魏酸的提取工艺

为从莲藕中提取出结合态阿魏酸,首先用质量分数75%乙醇除去莲藕中游离态阿魏酸,再用NaOH溶液提取结合态阿魏酸,紫外分光光度法在324 nm波长处测定其含量。通过单因素试验对影响结合态阿魏酸提取的4 个因素即NaOH浓度、提取温度、提取时间、液固比进行初步优化分析,再通过Box-Behnken试验设计和响应面优化最终提取条件。结果表明：NaOH溶液浓度1.49 mol/L、提取时间2.66 h、提取温度84.45℃、液固比5.5∶1（mL/g）为最佳提取工艺,在此条件下,莲藕中结合态阿魏酸提取率为0.217 mg/g（以干质量计）。