六种纳米化鱼骨的理化特性比较研究

以四种淡水鱼（白鲢、草鱼、鮰鱼和罗非鱼）鱼骨和两种海水鱼（鳕鱼和鲨鱼）鱼骨为原料,制备纳米化骨液并比较研究其特性,以期为纳米化鱼骨液的加工和应用提供理论依据。结果显示,鲨鱼骨粗蛋白和胶原蛋白含量最高,胶原交联度最大。鳕鱼骨的灰分含量最高。在前2 h球磨中,鱼骨粒径从6.40~85.41 μm急剧降低至62.95~259.12 nm,其中鳕鱼骨粒径降低速率最快,鲨鱼骨最慢。延长球磨时间,鱼骨粒径趋于稳定（106.37~172.37 nm）。纳米鱼骨的钙释放率、游离氨基酸、TCA可溶性肽和水溶性蛋白含量随球磨时间延长而一直增加（p<0.05）,说明鱼骨钙的释放机制与鱼骨粒径降低和生成多肽/氨基酸螯合钙均相关。六种纳米鱼骨颗粒为近似圆球形,草鱼骨液的钙释放率最高,罗非鱼和鳕鱼骨液的白度相对较高,鳕鱼和鲨鱼骨液的pH值相对较高。     

鮟鱇鱼骨胶原多肽螯合钙的工艺优化

为减少水产品加工过程中副产物对环境的污染与资源的浪费、提高水产品的附加值,对鮟鱇鱼骨制备胶原多肽螯合钙的工艺进行优化。以鮟鱇鱼骨为原料,在适宜条件下制备小分子胶原多肽,并与鱼骨钙提取液进行螯合,制成胶原多肽螯合钙,分别考察螯合温度、鱼骨胶原多肽与鱼骨浸提液的质量比、时间、pH值对螯合率和螯合物中钙含量的影响。根据单因素试验结果,对胶原多肽螯合钙工艺进行四因素三水平正交试验,得到鮟鱇鱼骨胶原多肽螯合钙的最佳工艺参数为螯合温度30℃、时间50 min、鮟鱇鱼鱼骨胶原多肽与钙浸提液质量比2∶1、pH 6,此条件下的螯合率和螯合物中的钙含量分别为98.00%和21.29%。对螯合钙进行氨基酸组成成分分析,其中,具备典型的胶原多肽氨基酸的含量占总氨基酸含量的17.37%。     

鳕鱼源金属螯合肽体外模拟胃肠消化稳定性研究

为了评价鳕鱼皮胶原蛋白源金属螯合肽,Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Arg(多肽M),的胃肠消化耐受性,建立体外模拟胃肠消化模型(SGID),该模型包括模拟人体中胃消化环境和肠消化环境两个阶段。多肽M的钙螯合率为0.88±0.02μg/mg,铁螯合率为33.67%。胃消化产物S,钙螯合率为0.87±0.03μg/mg,与纯肽相比钙螯合率下降1.14%;铁螯合率为33.72%,与纯肽相比反而上升0.05%。肠消化产物D,钙螯合率为0.85±0.01μg/mg,与纯肽相比下降3.40%;铁螯合率为34.13%,与纯肽相比上升0.46%。利用反相高效液相色谱、质谱和圆二色谱技术,发现经过两个阶段多肽M分子量未发生变化,肽键未发生断裂,构象发生变化,其中无规卷曲减少,β折叠和β转角构象增加。因此,多肽M在体外模拟胃肠消化过程中其多肽链氨基酸组成不变,空间构象发生改变,钙铁离子螯合能力变化不大,体外模拟胃肠消化耐受性高。     

汉麻肽钙螯合物的制备及其结构表征和稳定性

汉麻籽仁经脱脂、提取汉麻蛋白、酶法水解制备汉麻肽（HPIH）,再与钙螯合制备汉麻肽钙螯合物（HPIH-Ca）。以钙螯合率为指标,采用单因素实验和正交实验优化HPIH-Ca制备工艺条件;运用红外光谱和圆二色谱分析HPIH-Ca的结构,利用扫描电镜表征HPIH-Ca微观结构,通过热处理、pH和体外模拟消化评价HPIH-Ca的稳定性。结果表明：胰酶是最佳水解酶;HPIH-Ca的最佳制备工艺条件为肽钙比2∶ 1（10 mg/mL HPIH溶液与0.05 mol/L无水氯化钙溶液体积比）、pH 8.0、反应温度60 ℃、反应时间45 min,在最佳条件下钙螯合率为47.61 mg/g;Ca2+与汉麻肽主要通过羧基氧原子和氨基氮原子相互作用; Ca2+与HPIH结合后形成了更为有序和紧凑的二级结构;HPIH与Ca2+交联形成结构有序、紧密的呈片状或大颗粒的肽钙螯合物;HPIH-Ca具有一定的耐热性,但在酸性条件下不稳定;体外模拟消化实验结果显示,HPIH-Ca能保持70%以上的持钙率,具有较高的生物利用度。     

猪皮胶原多肽螯合钙的制备及其结构表征

以猪皮明胶复合酶解胶原多肽和葡萄糖酸钙为原料,多肽钙螯合率为指标,在一定条件下制备多肽螯合钙。通过Plackett-Buiman(PB)和中心组合设计(CCD),考察胶原多肽/水料液比、多肽/葡萄糖酸钙质量比、p H、反应温度、反应时间、搅拌时间、搅拌速度等因素对多肽螯合率的影响。结果表明:通过PB设计筛选出多肽/葡萄糖酸钙质量比、p H和反应时间为多肽钙螯合主要影响因素,经CCD优化确定最佳螯合工艺为多肽/葡萄碳酸钙质量比5.5∶1,p H6.0,反应时间130 min,胶原多肽/水料液比1.5∶100,反应温度60℃,搅拌速度30 r/min,搅拌时间20 min。在此条件下,多肽螯合率达78.3%。采用紫外光谱、红外光谱、扫描电镜、X衍射等手段,研究了猪皮胶原多肽螯合钙的结构,结果表明猪皮胶原多肽与钙形成了螯合物,且胶原多肽的氨基和羧基均与Ca2+发生了螯合反应。     

真鳕鱼骨胶原肽及鱼骨钙联产工艺的优化设计

以真鳕鱼骨为原料,进行了鱼骨胶原活性肽与活性钙的联产工艺优化,通过高压脉冲电场(PEF)技术与复合酶解技术结合,对骨胶原多肽风味进行优化研究,通过正交实验,考察了电场强度、脉冲频率、酶用量及酶解时间对鱼骨胶原多肽提取工艺的影响;并利用复合果酸通过双次酸提法提取鱼骨中的活性钙。结果表明,脉冲频率对感官评价的影响最为显著,最佳处理参数为电场强度30 k V/cm,脉冲频率200 Hz,风味酶用量0.15%,酶解时间40 min;在酸总用量为10%的前提下,2次复合酸提取比例为2:1时,果酸钙提取率最高为93.8%。该工艺获得了感官性状优良的鱼骨胶原活性肽,在有限成本下提高了果酸钙的得率,并且将废弃物全部回收利用。     

林蛙皮胶原多肽螯合钙的制备及表征

为了有效利用林蛙资源,以林蛙皮胶原多肽和氯化钙为原料,多肽螯合率为指标,在一定条件下制备胶原多肽螯合钙。首先通过正交试验,中性蛋白酶进行酶解,以水解度为指标,确定最佳水解条件为:温度45℃、pH7、水解时间2 h、加酶量1.7%,该条件下水解度为18.21%。得到的林蛙皮胶原多肽与CaCl_2进行螯合,通过单因素响应面试验,以螯合率为指标,确定螯合的最优条件为:螯合时间40 min、温度40℃、钙肽比1.5:1、无水乙醇添加倍数为8,该条件下螯合率为79.43%。采用傅里叶红外光谱仪、扫描电镜和X射线衍射等手段,研究了胶原多肽和多肽螯合钙的结构,结果表明林蛙皮胶原多肽与钙形成了新的螯合物。     

白鲢鱼皮胶原蛋白肽钙螯合物的制备及其对Caco-2细胞钙转运的影响

利用食品工业加工副产物白鲢鱼皮,制备一种具有良好吸收性的新型补钙剂——胶原蛋白肽钙螯合物,并探究其在肠道细胞的钙转运吸收效果。以钙螯合率为指标,通过单因素正交试验确定肽钙螯合物的制备工艺,结果表明,螯合工艺确定为螯合时间60 min、温度60 ℃、pH8、肽钙质量比3:1,最终螯合率可达68.10%。傅里叶红外光谱显示Ca~(2+)与胶原蛋白肽的氨基和羰基相结合生成肽钙螯合物;X射线衍射显示,肽与钙螯合后,从不规则的非晶体结构转变为规则的晶体结构。体外模拟消化试验证明,肽钙螯合物具有良好的抗消化性,经过体外模拟消化后,仍保留了64.8%的持钙能力。在Caco-2细胞单层模型中,与CaCl_2组相比,肽钙螯合物具有显著钙吸收活性(P0.05)。研究结果为白鲢鱼皮的高值利用和新型钙补充剂的开发提供了科学依据。     

蚕蛹多肽螯合钙的制备工艺优化及结构表征

利用蚕蛹多肽为原料制备多肽螯合钙,以可溶性钙含量为主要指标,综合考察螯合率和得率,研究了螯合pH、温度、时间以及肽钙比等单因素的影响,并进一步通过响应面优化法对制备工艺进行优化,确定最优的反应条件为反应时间80min、反应温度73℃、pH 10、肽钙质量比3.41.0,该条件下蚕蛹多肽螯合钙的含钙量为14.51%。傅利叶红外光谱分析表明蚕蛹多肽主要通过羧基、胺基和磷酸基团与钙离子结合。     

微波辅助制备鸡蛋壳膜多肽螯合钙的研究

以鸡蛋壳和鸡蛋壳膜为原料,通过微波辅助的方法制备多肽螯合钙,并考察了多肽质量浓度、微波功率和微波时间对螯合率的影响。使用基于Box﹣Behnken设计的响应曲面法对螯合条件加以优化,并通过体外模拟的方法对多肽螯合钙的肠道吸收性质进行评价。结果显示,微波可以显著增加螯合率,经过优化后的钙螯合率可达88.1%。体外模拟实验显示,相比市售补钙制剂,产物具有更高的肠道吸收效果。     

鳕鱼皮复合肽螯合钙的制备及抗氧化活性研究

利用木瓜蛋白酶与风味酶组合成的复合酶对鳕鱼皮蛋白进行酶解,制得酶解液,以氯化钙为钙源,与多肽酶解液反应制备多肽螯合钙,并对其抗氧化性进行了研究。结果表明,制备多肽螯合钙的最佳条件是:氯化钙与多肽的质量比为0.3:3,pH值为7.0,反应温度为25℃,反应时间为20min,在此条件下钙离子的螯合率为58.85%,产物对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)均有较强的清除作用。     

利用扇贝壳制备胶原螯合钙的研究

为了有效利用废弃扇贝壳,提高贝类加工废弃物的附加值,采用双酶法水解猪皮制得胶原多肽,并利用灰化的扇贝壳制备胶原螯合钙。优化的胶原螯合钙制备条件是:pH8,胶原多肽与氯化钙的比为0.3g∶7mL,反应时间50min。经95%乙醇沉淀得到胶原螯合钙产品。用红外光谱法对胶原螯合钙进行表征,结果表明胶原多肽的氨基和羧基都参与了与Ca2+的配位,找到Ca-N伸缩振动峰,说明经酶水解得到的胶原多肽成功螯合了贝壳中的钙离子,使该产品既具有胶原多肽增加骨胶原韧性的作用又具有补钙的特性。     

罗非鱼蛋白酶解液的多肽与钙复合物的制备及其抑菌分析

采用木瓜蛋白酶和风味酶的复合酶解罗非鱼蛋白,制取富含多肽的酶解液;并将酶解液中的多肽与Ca2+反应制备多肽-钙螯合物,探讨反应液的pH值、反应温度、反应时间、多肽与CaCl2的质量比对螯合反应的影响,并对产物进行抑菌实验。结果表明：多肽液与Ca2+的最佳螯合工艺为反应pH7.13,反应温度29.5℃,反应时间24.05min,多肽与CaCl2的质量比2.68:1,在此最佳条件下钙的螯合率为87.5%;产物对多种微生物,特别是对细菌的生长有良好的抑制作用。     

桃仁多肽螯合亚铁的结构表征及体外模拟消化

以桃仁蛋白酶解分离所得多肽和氯化亚铁为原料,研究不同品种多肽、铁盐和不同分子质量多肽组分对螯合率的影响,以及对多肽螯合亚铁(PKP3-Fe)的结构表征和体外模拟消化的影响。研究结果表明,桃仁多肽与亚铁离子的螯合率显著高于(P<0.05)大豆多肽、玉米多肽和鱼胶原蛋白肽,氯化亚铁和小分子质量桃仁多肽具有更高的螯合率。桃仁多肽与亚铁离子螯合前、后的紫外光谱和荧光光谱图对比显示,螯合后紫外吸收峰位置、峰值均发生迁移,内源荧光强度明显减弱,有螯合物形成;傅里叶红外光谱分析表明,亚铁离子与桃仁多肽中的-COO-、N-H、C-N、O-H形成配位键;扫描电镜图显示,桃仁多肽螯合后微观结构发生明显改变,有光滑球状颗粒生成。在模拟胃部消化过程中,PKP3-Fe的铁离子释放率显著低于硫酸亚铁片和乳酸亚铁片(P<0.05),避免了大量氢氧化铁沉淀的生成,进入模拟肠液后,PKP3-Fe仍有相当部分成分在肠道中以离子态或与多肽以螯合物的状态存在,能更好地被人体吸收利用。     

白鲢鱼骨胶原多肽螯合钙的工艺优化

为减少淡水鱼加工过程中副产物对环境的污染和资源的浪费、提高淡水鱼的附加值,对白鲢鱼骨制备胶原多肽螯合钙的工艺进行研究。以白鲢鱼骨和氯化钙为原料,在一定条件下制备胶原多肽螯合钙,考察温度、鱼骨胶原多肽与氯化钙的质量比、时间、pH值对螯合率和螯合物中钙含量的影响。根据单因素试验结果,对胶原多肽螯合钙工艺进行四因子二次正交旋转设计优化,得到鱼骨胶原多肽螯合钙的最佳工艺参数为温度42 ℃、时间38 min、鱼骨胶原多肽与氯化钙的质量比2.1∶1、pH 6.8,此条件下的螯合率和螯合物中的钙含量分别为80.4%和12.1%。对螯合钙进行氨基酸组成成分分析,其总氨基酸含量为61.03%,且具备典型的胶原蛋白氨基酸组成特征。红外光谱扫描和电镜扫描观察表明：钙离子与胶原多肽发生了螯合反应,结合方式有离子结合、配位结合和吸附作用。     

响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铁工艺

采用响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽与氯化亚铁进行螯合反应的条件,制备小分子肽螯合铁产品。以pH值、小分子肽与FeCl2的质量比和小分子肽液质量分数3因素的5水平进行二次正交旋转组合试验,建立螯合物得率的二次回归方程。结果表明：最佳螯合工艺条件为胶原蛋白肽与氯化亚铁的质量比4:1、小分子肽液质量分数3.5%、pH7.0。在此条件下,螯合物得率为37.31%,与模型的预测值37.46%接近。红外光谱检测结果显示,亚铁离子与小分子肽中的NH2+和COO－有螯合,是一种新型螯合物。     

Influence of calcium chloride on systemic acid-base status and calcium metabolism in dairy heifers

Twenty heifers (12 Holsteins and 8 Jerseys) ranging from 15 to 22 mo of age (SD = 2.2 mo) and weighing 271 to 486 kg (SD = 72 kg) were offered diets containing 0, .5, 1, and 1.5% CaCl2 for 3 wk followed by a 1-wk readjustment period to evaluate the effect of CaCl2 on acid-base status, diuresis, and Ca metabolism. These evaluations were conducted under conditions simulating changes in dietary cation-anion balance that potentially can be utilized as prophylaxis for parturient paresis during transition from dry cow period to lactation. Free proton concentration in blood increased and blood bicarbonate decreased with increasing dietary CaCl2. Plasma protein and blood hematocrit were unaffected by dietary CaCl2. Plasma Ca and urinary hydroxyproline excretion also were unaffected, but urinary Ca excretion rose with increasing dietary CaCl2, possibly reflecting either increased bone mobilization or intestinal absorption of Ca. Elevating dietary Cl increased both plasma Cl and urinary Cl excretion. During the readjustment period, all differences caused by CaCl2 disappeared. Based on the responses of acid-base status and Ca metabolism to the different dietary concentrations of CaCl2, we suggest that feeding 1% CaCl2 to dry cows for 3 wk prepartum could be a suitable method to prevent parturient paresis without causing detrimental acid-base disturbances.     

正交试验优化胶原多肽螯合钙的制备工艺

以胶原多肽及氯化钙为原料制备胶原多肽螯合钙并确定其最佳制备工艺,结果表明：胶原多肽螯合钙最适的螯合条件为钙元素和胶原多肽的质量比为13:100、pH6.0、时间30min、温度30℃。在该最佳螯合条件下得到的胶原多肽螯合钙的螯合率达到77.7mg/g。傅里叶变换红外光谱分析结果表明胶原多肽螯合钙是一种新的物质,后期的动物实验也证明了胶原多肽螯合钙具有增加骨密度的功能。     

氧化绿原酸改性鳕鱼皮明胶功能特性的研究

该试验研究经不同浓度氧化绿原酸(2.5%、5.0%、10.0%和20.0%)改性后鳕鱼皮明胶的抗氧化能力和乳化性。测定氧化绿原酸改性的鳕鱼皮明胶游离氨基的含量、表面疏水性、浊度、抗氧化活性以及硫代巴比妥酸值。结果表明,经氧化绿原酸改性的明胶抗氧化活性提高,但游离氨基含量和表面疏水性降低。5.0%氧化绿原酸改性明胶的浊度最高,较高浓度的氧化绿原酸会影响明胶的乳化性能。氧化绿原酸能够增强供氢能力,并作为金属螯合剂增强明胶的抗氧化活性。此外,氧化绿原酸改性的明胶能够增加乳状液的氧化稳定性。     

Structural Characteristics of Tilapia (Oreochromis mossambicus) Bone Gelatin: Effects of Different Liming Methods

Fish bone is a good source of gelatin. In this study, gelatins were prepared from tilapia bone after the bone was pretreated with alkali protease, desalted immediately by 0.6 mol L^?1 HCl, and hydrolyzed by papain or limed by Ca(OH)₂. Gelatins extracted from papain-treated tilapia bone exhibited space structures similar to those of alkali-treated tilapia bone. Despite this similarity, many differences were observed between these gelatin samples. Compared with alkali-treated gelatin, papain-treated gelatins showed higher values for imino residue content, molecular weight proportion, bloom strength, and viscosity. The bloom strengths of the second and third papain-treated gelatins were 163 and 94 bloom, respectively, which were lower than the bloom strength of the first papain-treated gelatin (189 bloom). The viscosities of the three papain-treated gelatin samples were 4.18, 2.81, and 0.51 mPa.s^?1. The first papain-treated gelatin achieved the highest gelling (16 °C) and melting points (23.9 °C). The yields of the first (5.40%) and second (6.71%) papain-treated gelatins were higher than those of the alkali-treated gelatins (3.33 and 5.76%, respectively). However, the yield of the third papain-treated gelatin (2.27%) was lower than that of the third alkali-treated gelatin (5.42%). More importantly, papain hydrolysis can prevent destruction by Ca(OH)₂ in the bone structure and effectively reduce the denaturation temperature of tilapia bone collagen. Moreover, papain hydrolysis can dramatically reduce the time required for liming (0.8% of traditional liming process spent). Papain hydrolysis is a clean production method that can replace traditional liming.