RNAi技术对A549细胞survivin基因表达及顺铂敏感性的影响

目的 利用RNA干扰(RNAi)技术沉默抗凋亡基因survivin,观察其对人肺腺癌细胞A549增殖以及顺铂药物敏感性的影响.方法 将靶向survivin的基因片段插入到载体后构建重组质粒,将其导入A549细胞,RT-PCR及免疫荧光法分析转染前后A549细胞survivin mRNA及蛋白的表达情况,MTT法检测转染后A549细胞对顺铂的敏感性变化.结果 成功构建pGenesil1.1-survivin重组质粒.转染重组质粒后,A549细胞survivin mRNA和蛋白的表达明显降低;转染前顺铂对A549细胞的IC50明显高于转染后(P＜0.05).结论 靶向survivin的RNAi表达载体能下调survivin基因表达,增强顺铂对A549细胞的药物敏感性.     

循环系统疾病

20060071 拓扑替康联合顺铂治疗小细胞肺癌的疗效观察；20060072 紫杉醇、顺铂方案与长春瑞滨、顺铂方案治疗晚期非小细胞肺癌疗效比较；20060073 多指标联合检测在良恶性胸水中的诊断价值；20060074 支气管镜对单纯性胸腔积液的诊断价值；20060075 门控心肌灌注显像与超声心动图评价左室功能和容积……     

晚期非小细胞肺癌化疗新方案的探索

近十年来治疗非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的新药层出不穷,化疗方案不断翻新,更新的药物正在开发,旧的方案受到质疑。本文综述了ＮＳＣＬＣ化疗新方案的进展。近１０年随着６个新药：泰素,长春瑞宾（ＮＶＢ）,多西紫杉醇,双氟胞苷,伊立替康（ＣＰＴ－１１）,拓朴替康的广泛用于临床,ＮＳＣＬＣ的化疗有了突破性进展,其经典方案为新药十铂类（如泰素＋卡铂,双氟胞昔十顺铂等）。然而近来的研究显示铂类（顺铂或卡铂）为基础的新药联合方案与新药十新药方案相比,疗效虽然相似,但毒副反应更大,前者的经典地位受到冲击。由此开展了…     

奈达铂联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌

目的评价奈达铂联合长春瑞滨治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和不良反应。方法对28例初治晚期非小细胞肺癌行奈达铂联合长春瑞滨化疗，方案：奈达铂80mg／m^2静滴d1。长春瑞滨25mg／m^2静注d1、d8，3～4周为一周期，用药4周期。对照组25例，化疗方案为顺铂加长春瑞滨。结果奈达铂组PR11例，有效率（CR＋PR）为39．2％；对照组CR1例、PR8例，有效率40．0％，两组间差异不明显（P〉0．05）；毒性反应白细胞与血小板减少治疗组与对照组无显著性差别（P〉0．05）；消化道反应奈达铂组明显小于顺铂组（P〈0．05）。结论奈达铂联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的疗效与顺铂相当，消化道毒性小于顺铂。奈达铂联合长春瑞滨化疗是治疗晚期小细胞肺癌较为有效的化疗方案之一。     

UGT1A1*28基因多态性与小细胞肺癌

尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A1 (uridine diphosphate glucuronosyl transferase 1A1,UGT1A1)是伊立替康(Irinotecan,CPT-11)活性产物的主要代谢酶,其活性与CPT-11的疗效和不良反应均密切相关,而UGT1A1* 28基因多态性可显著降低UGT1A1酶的表达与活性.IP(伊立替康+顺铂)方案是广泛期小细胞肺癌的一线化疗方案,UGT1A1* 28基因多态性可影响IP方案的疗效及不良反应,检测UGT1A1* 28基因多态性对于指导小细胞肺癌患者的个体化治疗具有一定的临床意义.     

人参皂苷增加顺铂抗肺癌A549细胞活性的机理研究

目的观察人参皂苷与顺铂联合作用肺癌A549细胞的细胞毒作用,探索相关作用机制。方法 MTT实验检测人参皂苷、顺铂对人肺癌A549细胞的细胞毒作用;提取药物处理细胞总蛋白,Western blot检测细胞survivin蛋白的表达变化;Annexin V/PI双染、流式细胞仪检测细胞凋亡的发生。结果人参皂苷和顺铂对肺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50)值分别为(43.26±3.27)和(2.34±0.15)μmol/L;20、40μmol/L人参皂苷与顺铂联合作用A549细胞,顺铂对A549细胞的IC50值减少为(1.42±0.33)、(0.61±0.04)μmol/L,P<0.01。Western blot检测显示人参皂苷剂量依赖性的降低肺癌A549细胞survivin蛋白的表达。流式细胞仪凋亡检测显示人参皂苷使顺铂诱导的细胞凋亡增加(P<0.01)。结论人参皂苷可以显著增加顺铂对肺癌A549细胞的致凋亡作用,下调survivin蛋白表达可能是其增敏的主要机制。     

长春瑞滨联合顺铂治疗非小细胞肺癌临床观察

非小细胞肺癌是临床常见的恶性肿瘤，大多数患确诊时已为晚期，失去了手术机会。其治疗主要以化疗为主的综合治疗。近年来，由于新的化疗药物的不断出现，晚期非小细胞肺癌的近期疗效、生存质量及1年生存率都得到了明显的提高，其中长春瑞滨（NVB）的疗效得到肯定，我科在2004年4月-2006年4月应用长春瑞滨联合顺铂治疗30例非小细胞肺癌患，取得较好疗效。[第一段]     

吉西他滨联合长春瑞宾或顺铂治疗晚期非小细胞肺癌临床观察

目的观察吉西他滨联合长春瑞宾或顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效和不良反应。方法50例非小细胞肺癌患者随机分为GN组25例、GP组25例;GN组给予吉西他滨联合长春瑞宾进行化疗,GP组给予吉西他滨联合顺铂进行化疗,共2-3个周期。结果GN组有效率36%、中位生存期9.9个月、1 a生存率44.7%,GP组分别为40%、10.1个月、40%,两组相比,P均〉0.05;GN、GP组恶心、呕吐发生率分别为40%和76%,两组相比,P〈0.05。结论吉西他滨联合长春瑞宾或顺铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效相近,吉西他滨联合长春瑞宾不良反应较小,患者更易耐受。     

肺癌药敏与耐药基因MRP1、P-gp、GST-π和TopoⅡ表达的相关性研究

目的 研究多药耐药相关蛋白1 （MRP1）、P-糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽S转移酶-π（GST-π）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）基因表达和肺癌药物敏感试验相关性.方法 药物敏感试验采用MTT比色法,MRP1、P-gp、GST-π及TopoⅡ采用免疫组化检测.结果 MRP1、P-gp、GST-c及TopoⅡ在肺癌中总的阳性率分别为72.5％、67.5％、57.5％、50.0％.在鳞癌和腺癌中,这四种因子其表达无显著性差异（P＞0.05）,但P-gp、GST-π在鳞癌或腺癌中与在小细胞肺癌中表达有明显差异（P＜0.05）.P-gp和GST-π表达与顺铂、吉西他滨、长春瑞滨、紫杉醇耐药性呈正相关（P＜0.05）,与异环磷酰胺的耐药性无相关性（P ＞0.05）;MRP1的表达与顺铂、吉西他滨、长春瑞滨的耐药性均呈正相关（P＜0.05）,其表达与紫杉醇、异环磷酰胺的耐药性无相关性（P＞0.05）;TopoⅡ的表达与顺铂、吉西他滨、紫杉醇、异环磷酰胺的耐药性均呈正相关（P＜0.05）,其表达与长春瑞滨的耐药性无相关性（P＞0.05）.结论 MRP1、P-gp和GST-π的高表达及TopoⅡ的低表达共同介导参与了肺癌耐药的机制,且与检测的化疗药物耐药性有不同程度的相关性.     

VEGFR-1抗体对肺癌A549细胞顺铂药物敏感性的影响

目的观察血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)抗体影响人肺腺癌A549细胞对顺铂(CDDP)的药物敏感性。方法将VEGFR-1抗体与顺铂单独及联合作用于A549细胞,72 h后用MTT法,克隆形成法检验化疗药物的敏感性。结果VEGFR-1抗体(30μmol/L)和顺铂(10μg/mL)联用组抑制A549细胞生长均显著强于VEGFR-1抗体与顺铂单独用药组。结论VEGFR-1抗体能显著增强顺铂抑制人肺癌细胞A549细胞生长的作用,可能是很有潜力化疗增敏剂。     

恩度联合长春瑞滨、顺铂治疗晚期非小细胞肺癌不良反应的护理

目的 探讨恩度联合长春瑞滨、顺铂治疗晚期非小细胞肺癌不良反应的护理对策.方法 对11例晚期非小细胞肺癌患者应用恩度联合长春瑞滨、顺铂进行治疗,治疗前加强心理疏导,治疗期间重点做好不良反应的观察和护理.结果 所有患者均顺利完成治疗.治疗过程中,发生心脏毒性反应2例、消化系统反应6例、Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制3例、高血压1例,经处理后均好转,无药物外渗及静脉炎发生.结论 恰当的护理可预防和减轻恩度及化疗药物不良反应的发生,确保治疗顺利进行,提高治疗效果.     

长春瑞滨、顺铂联合鸦胆子油乳剂在非小细胞肺癌术后的应用效果观察

目的观察长春瑞滨、顺铂联合鸦胆子油乳剂在术后非小细胞肺癌术后的应用效果。方法Ⅱ/ⅢA期非小细胞肺癌术后患者71例,其中Ⅱ期21例,ⅢA期50例。治疗方案为长春瑞滨25 mg/m2,第1、8天静滴;顺铂75 mg/m2,3～5 d内静滴;鸦胆子油乳剂40 ml,第1～10天静滴,每21 d为1个周期,共4个周期。停用化疗药物后,按上述剂量继续应用鸦胆子油乳剂6～8个周期。结果可评价疗效的61例患者中,1年生存率为68.9%（42/61）,3年生存率为41.0%（25/61）,中位生存期16.2个月（2.5～54.2个月）。主要不良反应为骨髓抑制及恶心、呕吐。结论长春瑞滨、顺铂联合鸦胆子油乳剂辅助治疗非小细胞肺癌术后患者疗效较好。     

适形放疗联合吉非替尼同步治疗局部晚期老年非小细胞肺癌的疗效

国内外一般以70岁为界,将≥70岁的肺癌患者称为老年肺癌患者。ⅢA和ⅢB期的老年肺癌患者术后死亡率较年轻患者明显提高,故局部晚期老年肺癌治疗一般以内科放化疗为主。传统的化疗以长春瑞滨、紫杉醇类、吉西他滨等第三代化疗药物联合铂类方案为主,缺乏特异性,副反应较大。联合放化疗毒性反应明显,部分患者难以接受。近年来靶向治疗显示     

紫杉醇和微小RNA对非小细胞肺癌的协同抑制作用

目的探讨表皮生长因子受体抑制性微小RNA和紫杉醇在非小细胞肺癌中的协抑制效应。方法人非小细胞肺癌细胞株A549和HCC827进行体外培养过程中,将miR-545前体转染入细胞,转染48 h后,以不同浓度的紫杉醇处理细胞72 h,以MTT法检测细胞生长抑制。结果紫杉醇对A549和HCC827非小细胞肺癌细胞的增殖均表现出显著的抑制作用。在0.1⁵.0 nmol/L的剂量区间内,抑制效应随剂量的增加表现出近乎线性的同步增加。miR-545对紫杉醇的细胞生长抑制作用具有增强效应,在HCC827中的增效(IC50减少41.6%)高于A549(IC50减少27.3%)。结论在非小细胞肺癌中,miR-545对紫杉醇生长抑制作用具有协同加强效应,为改善非小细胞肺癌化疗的耐药问题提供新的探索途径。     

Livin异构体基因转染对肺腺癌A549细胞生长及放化疗敏感性的影响

目的研究转染Livin α、β两种异构体基因对肺腺癌A549细胞生长及放、化疗敏感性的影响。方法基因转染获得稳定表达Livinα和β的A549细胞克隆，逆转录一聚合酶链反应及免疫荧光化学法了解Livin α、β在转染细胞中基因水平和蛋白水平的表达情况；用平板克隆形成实验研究细胞生长情况；甲基偶氮唑蓝法研究细胞对放、化疗的敏感性；细胞周期分析法了解细胞凋亡情况。结果与转染前比较，基因转染后，阳性细胞尤其是表达Livin α的A549细胞克隆形成能力提高约20％、倍增时间缩短5～6h（P〈0．05），对多种化疗药物和放射线敏感性降低（P〈0．01），10Gy放射线照射下仅有0．2％细胞发生凋亡。结论Livin尤其是Livin α参与肺癌的发生发展，是肺癌细胞对放、化疗耐受的重要机制之一。     

长春瑞滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的探讨长春瑞滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法将60例晚期非小细胞肺癌患者随机分为观察组和对照组,每组各30例,观察组给予长春瑞滨联合顺铂治疗,对照组给予长春瑞滨治疗,比较两组患者的临床疗效。结果观察组和对照组的总有效率分别为96.67%和70.00%,观察组疗效明显优于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论长春瑞滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效显著,不良反应少,容易耐受,值得临床推广和应用。     

长春瑞滨合并西紫杉醇联合顺铂辅助化疗糖尿病合并肺癌的疗效分析

目的探究长春瑞滨合并西紫杉醇联合顺铂辅助化疗糖尿病合并肺癌的临床疗效,以供参考以及研究。方法该次研究对象从2014年12月—2016年1月于该院就诊的糖尿病合并肺癌患者中选取35例,针对其实施长春瑞滨合并西紫杉醇联合顺铂辅助化疗,探究35例糖尿病合并肺癌患者治疗后第一周期、第二周期、第三周期的疗效以及毒性反应、生存期的情况。结果通过该文研究结果中可以看出,第一周期的有效率为62.86%,第二周期的有效率为60.00%,第三周期的有效率为48.57%,第三周期的有效率明显低于第一周期(P0.05)。毒性反应一般为白细胞减少、静脉炎、神经毒、恶心呕吐、便秘等,分别占总例数的40.00%、28.57%、22.86%、14.29%以及11.43%。生存期限在4~6个月之间的患者有17例,9~12个月的患者有13例,1年以上的患者有5例。结论针对糖尿病合并肺癌患者采用长春瑞滨合并西紫杉醇联合顺铂辅助化疗,能够对肿瘤进行抑制。     

靶向表皮生长因子受体的RNA干扰技术对非小细胞肺癌细胞株A549细胞抑制及顺铂敏感性的研究

目的 利用RNA干扰(RNAi)技术,将携带表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)同源基因的重组质粒稳定转染非小细胞肺癌细胞株A549细胞,观察其对A549细胞生长抑制作用及对顺铂敏感性的变化.方法 根据RNAi原理,体外设计并合成靶向EGFR特异性干扰片段,即h-EGFR,以pGensil-1为载体,构建重组质粒pGensil-1-EGFR,以Lipofectamine 2000介导转染肺腺癌细胞株A549细胞,经G418筛选后挑选出稳定转染的单克隆细胞.将所挑选出的单克隆细胞大量培养后加入不同浓度顺铂(40 mg/L、10 mg/L、2.5 mg/L),采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞活力,绘制生长曲线,流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡的变化,观察RNAi对A549细胞抑制作用及是否与顺铂有协同作用.结果 与对照组、阴性对照组相比,从第2天起实验组生长缓慢,吸光度有统计学差异(P＜0.05);顺铂或联合dsRNA-EGFR对A549细胞有抑制作用,且随着浓度的增加和时间的延长抑制作用增强,dsRNA-EGFR联合顺铂与等浓度顺铂吸光度有统计学差异(P＜0.05),顺铂作用24 h后40 mg/L、10 mg/L、2.5 mg/L顺铂抑制率分别提高了7.8%、30.70%、34.42%.实验组G0/G1细胞百分比较对照组增加了13.84%,较阴性对照组增加了14.65%,进入S期的细胞百分比较对照组减少了19.10%,较阴性对照组减少了18.68%;40 mg/L、10 mg/L、2.5 mg/L顺铂处理细胞24 h后,与对照组相比,凋亡率明显增高(P＜0.05),且浓度越高,凋亡率越高;同一浓度顺铂作用下转染pGensil-1-EGFR的A549细胞凋亡率较A549细胞增高(P＜0.05).结论 dsRNA-EGFR可有效抑制A549细胞生长,使细胞阻滞在G0-G1期,顺铂可有效诱导细胞凋亡,RNAi与顺铂具有协同效应,提高细胞对顺铂的敏感性,RNAi技术为非小细胞肺癌基因治疗提供了新策略.     

鸦胆子油乳对肺癌A549细胞顺铂化疗的增敏作用及其机制

目的 观察鸦胆子油乳对肺癌A549细胞顺铂化疗的增敏作用并分析其机制。方法 体外培养人肺癌细胞A549,MTT法检测鸦胆子油乳、顺铂对细胞生长的抑制率,计算鸦胆子油乳、顺铂对细胞的半数抑制浓度（IC50）,观察不同浓度（2.44、9.77、78.12μg/mL）鸦胆子油乳对顺铂IC50的影响。将A549细胞分为对照组、鸦胆子油乳组、顺铂组及鸦胆子油乳+顺铂组,对照组不做处理正常培养细胞,鸦胆子油乳组、顺铂组及鸦胆子油乳+顺铂组分别给予鸦胆子油乳单药、顺铂单药、鸦胆子油乳及顺铂联合处理。采用荧光显微镜观察细胞形态及生长情况,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率,二氯荧光素二乙酸酯荧光探针染色检测细胞内ROS水平。结果 顺铂IC50随着鸦胆子油乳处理浓度的增高而下降（P均<0.05）。对照组细胞生长较好,细胞数量较多且形状为正常生长状态;顺铂组及鸦胆子油乳组细胞数量较对照组均减少,可见少量碎片;鸦胆子油乳+顺铂组细胞生长受抑制较明显,细胞数量最少,细胞形状不规则且细胞碎片增多。G0/G1期细胞比例鸦胆子油乳+顺铂组>顺铂组、鸦胆子油乳组>对照组,细胞凋亡率鸦胆子油乳+顺铂组...     

伊立替康联合顺铂治疗小细胞肺癌常见毒副反应的预防及护理

小细胞肺癌约占所有肺癌的20%～25%,其恶性程度高,发展快,治疗难度较大。近年来我科采用伊立替康联合顺铂治疗小细胞肺癌取得了较好的疗效,但由于伊立替康的独特的作用机制,也出现了一些特殊的毒副反应,现将其主要毒副反应的预防及护理总结如下。