一种新的可经输血传播病毒(TTV)的分子流行病学研究

目的 分析深圳地区不同人群中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）感染情况及其基因型。方法 在ＴＴＶ ＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应，检测深圳地区不同人群血清中ＴＴＶ ＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果 ９０例一般人群、８８例有偿献血员、７９例静脉毒瘾者、５２例非甲￣非庚型肝炎、６７例     

丙型及非甲-庚型肝炎患者血清TTV检测及临床分析

目的 了解郑州地区不同肝病患者中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ）感染状况及其临床特点。方法 自行设计ＴＴＶ ＯＲＦ１保守区的两对引物,对２０例非甲－庚型肝炎和９７例丙型肝炎患者血清进行ＰＣＲ检测,并对３０例资料完整的丙肝患者是否合并ＴＴＶ感染及其临床特点进行分析。结果 丙型和非甲－庚型肝炎患者血清ＴＴＶ ＤＮＡ检出率分别为１６．５％（１６／９７）和２０％（４／２     

山东地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

了解ＴＴＶ山东分离株感染状况及基因变异的情况。应用逆转录聚合酶链反应检测 2 6例山东地区非甲～庚型肝炎和 12例肝细胞癌患者血清中ＴＴＶＤＮＡ ,并对阳性扩增的产物利用ＰＣＲ技术片段直接克隆和测序 ,分析其基因变异的情况。结果显示 ,2 6例非甲～庚型肝炎中 11例ＴＴＶＤＮＡ阳性 ( 4 2 .3% )。对其中 2株 (ＴＴＶＳＤ4、ＴＴＶＳＤ5)部分基因克隆测序 ,并与日本株(ＡＢＯＯ8394 )相比较 ,其核苷酸序列同源性分别为 99.9%和 10 0 % ,而 12例肝细胞癌患者中 3例ＴＴＶＤＮＡ阳性(2 5.0 % ) ,对其中 1株 (ＴＴＶＳＤ6)部分基因克隆与…     

各型病毒性肝炎TTV DNA检测结果

各型肝炎中及献血者中ＴＴＶ合并感染情况。设计特异性引物,采用半套式ＰＣＲ法,对辽沈地区２０例散发性非甲－非庚型肝炎,２０例慢性乙型肝炎,２０例慢性丙型肝炎及４０例重型肝炎与５０例献血者血清进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测。非甲－非庚型肝炎血清阳性１例（５％）;重型肝炎阳性９例（２２．５％）;慢性乙肝阳性５例（２５％）;慢性丙肝阳性３例（１５％）;献血者未查出ＴＴＶ ＤＮＡ阳性者。二株ＴＴＶ ＤＮＡ扩增产物的     

非甲～庚型肝炎患者血清中TTV的检测及序列分析

我们采用套式ＰＣＲ技术对 5 0例非甲～庚型肝炎患者进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测 ,并对ＴＴＶ ＤＮＡ序列进行比较。　　对象与方法1.对象 :5 0例血清样本采自传染科诊断为急慢性非甲～庚型肝炎患者 ,血清病毒标志经ＥＬＩＳＡ和 (或 )ＰＣＲ法检测排除甲～庚型肝炎病毒、ＥＢ病毒及ＣＭＶ感染 ,并排除药物性、酒精性、自身免疫性肝炎及脂肪肝 ,无输血及血制品史。男性 41例 ,女性 9例 ,年龄 ( 30± 13)岁。2 .方法 :ＴＴＶ ＤＮＡ检测 :ＴＴＶ引物位于ＯＲＦ1区 ,外引物按ＮｉｓｈｉｚａｗａＴ报道序列合成 ,引物序列为 :正义链 (Ｐ1)ＡＣ ＣＧ…     

非甲～庚型肝炎患者中TTV感染的研究

检测了ＴＴＶ－ＤＮＡ在非甲－庚型肝炎病人中的感染状况。方法采用巢式聚合酶反应检测３８例非甲－庚型肝炎病人血清中ＴＴＶ－ＤＮＡ并观察与肝功能的关系。结果３８例非甲－庚型肝炎病人中１６例ＴＴＶ－ＤＮＡ阳性,占４２．１％,     

山东地区部分人群中TTV感染调查及TTV山东株部分基因序列分析

了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲～庚型病例中肝炎ＴＴＶ感染及基因变异的状况。应用套式ＰＣＲ方法检测 4 1例输血后丙型肝炎和 16例非甲～庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ ,并对扩增的产物直接克隆测序 ,分析其基因变异的情况。结果表明 ,4 1例输血后丙型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ阳性检出率为 19.5% ( 8/41) ,而 16例非甲～庚型肝炎患者血清中阳性检出率为 31.3% ( 5/16)。ＴＴＶ山东第一株序列与山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本株和中国第一株相比较分别为 94 %和 91% ;山东ＴＴＶ的两株序列间同源性均为 91%。研究证实山…     

一种新型肝炎相关性病毒的分子生物学研究

目的 了解南京地区ＴＴＶ病毒感染情况，重叠ＴＴＶ感染对慢性乙型肝炎病变和蔼和ＨＢＶ复制的影响。方法 采用巢式ＰＣＲ方法检测血清标本中ＴＴＶ－ＤＮＡ。结果 ４６９ 血清标本中，ＴＴＶＤＮＡ总检出率为２１．１％。其中健康人群、献血员、血透患者、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎、庚型肝炎、非甲－非庚型肝炎检出率分别是９．４％、３３．３％、３０．８％、１１．６％、１９．９％、１５．４％、８．７％、９     

慢性非甲—戊型肝炎患者血清中庚型肝炎病毒核酸的检测及部分核苷…

目的 了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在慢性非甲－戊型肝炎发病中的作用，并测定其非结构基因５（ＮＳ５）区部分核苷酸序列，方法 以逆转录－套式－聚合酶链反应法检测ＨＧＶＲＮＡ，并对阳性者血清中扩增出的９９４ｂｐ长的ｃＤＮＡ直接测序。结果 ３５例慢性非甲－戊型肝炎患者中１例血清ＨＧＶＲＮＡ阳性（２．９％）。该患者ＨＧＶＮＳ５区部分核苷酸序列与美国株ＰＮＦ２１６１及Ｒ１０２９１的同源性分别为８７．９５％及８９     

上海地区血液透析患者与供血者中输血传播病毒DNA检测及部分核苷酸序列分析

目的　了解上海地区暴露于血及血制品的血透患者中输血传播病毒（ＴＴＶ）感染率。方法　采用套式ＰＣＲ技术,检测了 ６例血透患者和 ４９例供血员血清中 ＴＴＶ ＤＮＡ,并对其中各 １例 ＰＣＲ产物（２７２ｂｐ）测］３。结果血透患者ＴＴＶ ＤＮＡ的检出率为 ３２．８％（２０／６１）,供血员的检出率为 ２４． ５％（１２／４９）。 ２０例 ＴＴＶＤＮＡ阳性血透患者中,６例为单纯ＴＴＶ感染,６例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染,４例为ＴＴＶ、ＨＣＶ和４例为ＴＴＶ、ＨＧＶ重叠感染。在所有ＴＴＶ感染者中,仅发现１例血清ＡＬＴ升高,该病例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染。对ＰＣＲ阳性扩增产物２７２ｂｐ测序结果显示,上海株（ＳＨＰ、ＳＨＤ）核苷酸的同源性为９９．６％,与深圳株、２株日本株核着酸的同源性分别为９７．４％、９８．７％和９８．７％,表明ＴＴＶ上海株与深圳株及日本株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）属同一亚型,首次证实了上海地区的ＴＴＶ感染。结论ＴＴＶ感染可经血传播。其致病性较弱,对ＴＴＶ的研究尚属开始,ＴＴＶ的病原学、流行病学及临床意义等问题还有待进一步探索和阐明。     

陕西地区输血传播病毒的感染状况及部分基因序列分析

目的分析陕西地区不同人群中TVV(Transfusion transmitted virus,TTV)的感染情况及基因型。方法根据TTV ORFl区设计引物,建立巢式聚合酶链反应,检测不同人群中TTV-DNA。并对PCR阳性产物进行克隆、测序分析和同源性比较。结果 30例健康人群中,50例肝炎病人,40例非甲～非庚肝炎TTV-DNA阳性率分别为6.0％,22.5％,52.5％。对其中三组人群各任取1例(TTVSJ1、TTVSG2、TTVSF3进行PCR产物直接测序,其序列与日本株N22同源性分别为97.5％、97.8％和97.8％。结论陕西地区不同人群中均可有TTV感染存在;非甲～非庚型肝炎TTV-DNA阳性率占有较大比例;陕西地区TTV与日本株N22属同一亚型。     

山东地区输血传播病毒(TTV)检测及部分基因克隆和序列测定

目的 了解TTV山东分离株感染状况及基因变异的情况。方法应用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测26例山东地区非甲-庚型肝炎和12例肝细胞癌患者血清中TTV DNA,并对阳性扩增的产物利用PCR技术直接克隆和测序,分析其基因变异的情况。结果26例非甲-庚型肝炎中11例TTV DNA阳性(42％)。对其中两株(TTVSD4、TTVSD5)部分基因克隆测序,并与日本株(ABOO8394)相比较,其核苷酸旬同源性为99.9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTV DNA阳性(25％),对其中一株(TTVSD6)部分基因克隆与测序,与日本株(ABOO8394)相比较,其核苷酸序列同源性为99％;TTV山东株三株间核苷核同源性均为99％。结论本研究证实山东地区非甲-庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染,TTV感染可能具有嗜肝性,而且可能与肝功能损害有关,是引起非甲-庚型肝炎的重要病原。     

输血传播性病毒的流行病学及临床研究

目的:观察分析不同人群中TTV(transfusion transmitted virus)感染状况及相关临床意义。方法:在TTVORF1设计引物,建立巢式聚合酶链反应,检测不同人群中血清TTV DNA,并对比观察肝炎病人的临床表现。结果:29例健康人群,27例职业献血员,56例乙型肝炎,31例丙型肝炎和47例非甲～非庚型肝炎患者中,TTV DNA阳性率分别为6.9％、3.7％、23.2％、25.8％和42.6％。3种肝炎病人中,TTV DNA阳性和阴性组间4项主要临床指标无显著差异。结论:健康人群和职业献血员存在TTV健康携带者。非甲～非庚型肝炎患者TTV感染率最高。乙型和丙型肝炎患者重叠TTV感染较常见。3种肝炎病人中,合并TTV感染组与非感染组临床表现无明显差异。TTV的致病性尚待深入研究。     

TTV在非甲～庚型肝炎患者中的检测及序列分析

目的研究TTV在非甲-庚型肝炎患者中的感染状况及临床意义。方法 采用套式PCR法检测50例非甲-庚型肝炎患者血清标本中TTV DNA,并对其中一株TTV的部分基因序列进行了测定。结果 在50例肝炎患者中,TTV DNA阳性检出率为28.0％(14/50)。TTV序列分析与日本株的同源性为98％。结论TTV感染可能是非甲-庚型肝炎的病因之一。     

山东泰安地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

目的 探讨山东非甲-庚肝炎和肝癌患者输血传播病毒(TTV)感染状况和基因变异情况。方法 应用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测26例山东泰安地区非甲-庚型肝炎和12例肝细胞癌(HCC)患者血清中TTVDNA，并对阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序，分析其基因变异的情况。结果 26例非甲-庚型肝炎中11例TTVDNA阳性(42．3％)。对其中两株(TTVSD4、TTVSD5)部分基因克隆测序，并与日本株(AB008394)相比较，其核苷酸序列同源性分别为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性(25．0％)，对其中一株(TTVSD6)部分基因克隆与测序，与日本株(AB008394)相比较，其核苷酸序列同源性为99％；TTV山东泰安三株问核苷酸同源性均为99％。结论 研究证实山东泰安地区非甲～庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染，TTV感染可能具有嗜肝性，而且可能与肝功能损害有关，是引起非甲～庚型肝炎的重要病原。     

长春地区TT病毒的基因分型及其临床意义

为调查各种急、慢性肝炎中TT病毒的感染状况及临床意义,并检测TTV基因的分型。利用半套式PCR（semi-nested PCR）方法检测了TTV-DNA。利用邻近丁（neighbor-joining）法画出系统树。TTV-DNA的阳性率在非甲非乙非丙型急性肝炎中为42.3%,在非乙非丙型慢性肝炎中为45.5%。基因型可分为1a、1b、2a、2b等型。TTV-DNA在非甲非乙非丙型急性非乙非丙型慢性肝炎中的感染率最高;在TT病毒与乙型、丙型肝炎病毒混合感染的慢性肝炎中,TT病毒干涉乙型及丙型肝炎病毒造成的肝细胞损伤的可能性很小。     

TTV与其它肝炎病混合感染及其基因型的研究

研究TTV与其它肝炎病混合感染对肝脏病变的影响及本地区TTVDNA的基因型。选TTV ORF1的保守序列作内外引物,采用微板核酸杂交－ELISA方法检测患者血清TTVDNA并对检测结果和临床资料进行统计学分析。选取异源性大于50％的序列作显色探针Ⅰ和显色探针Ⅱ,进行分型研究。学生、非甲－非戊型肝炎、慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清TTV阳性率分别为3．3％、14．3％、12％、16％。TTV阳性和TTV阴性的慢性乙型肝炎及肝硬化患者,在年龄、性别、ALT和TBil之间无显著差异（P＞0．05）。本地区流行的TTV可分为两个主要的基因型,即I型（66．75）、Ⅱ型（25％）,部分存在混合感染（8．3％）。TTV可能与HBV、HCV有类似的传播途径,故常重叠感染。TTV与乙型肝炎及肝硬化混合感染后不影响两者的肝脏病变。TTV不是本地区非甲－非戊型肝炎的主要病因。     

山东泰安地区部分人群中TTV感染调查及TTV山东株部分基因序列分析

目的 了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲～庚型肝炎病例中TTV感染及基因变异的状况。方法应用套式PCR方法检测41例输血后丙型肝炎和16例非甲～庚型肝炎患者血清中TTV DNA,并对其中阳性的2例扩增产物直接克隆测序,分析其基因变异的情况。结果 41例输血后丙型肝炎患者血消中TTVDNA阳性检出率为19.5％(8/41),而16例非甲～庚型肝炎患者血清中阳性检出率为31.3％(5/16)。TTV山东第一株序列和山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本株和中国第一株相比较分别为94％和91％;山东TTV的两株序列间同源性为91％。结论 本项研究证实山东地区输血后丙型肝炎和非甲～庚型肝炎患者中存在较高TTV感染,输血可能为传播TTV感染途径之一,是否该地区存在着不同的TTV亚型还有待于进一步调查证实。     

TT病毒感染的肝炎患者外周血单个核细胞中TT病毒复制的研究及克隆测序

目的 了解TTV阳性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)TTV DNA存在及复制情况。方法 采用巢式PCR技术和绿豆芽核酸酶消化方法研究其存在及复制情况,并克隆测序分析证实。结果 16例TTV阳性肝炎患者PBMC中有14例TTV DNA阳性,并同时用绿豆芽核酸酶消化所提取的PBMC DNA,有2例为TTV DNA阳性。这3个序列与日本株和中国株相应位置核苷酸序列同源性大于95％以上(95～98％)。结论 我们在国内外首次报道TTVDNA可在TTV阳性肝炎患者PBMC中存在及复制,表明肝细胞并非为TTV感染和复制的唯一场所。