毛细管电泳法测定黄芪注射液中的酚酸

目的:建立了毛细管电泳-紫外检测法同时测定黄芪注射液中香草酸、阿魏酸、绿原酸含量的方法。方法:以30 mmol/L硼砂缓冲溶液(pH9.24)为电泳介质,检测波长为285 nm,分离电压为15 kV,进样时间20 s,峰面积定量。结果:香草酸、阿魏酸和绿原酸分别在0.4μg/ml~130.0μg/ml(R=0.9997)、0.8μg/ml~130.0μg/ml(R=0.9991)和1.0μg/ml~240.0μg/ml(R=0.9989)范围内呈良好的线性关系,检出限分别为0.12μg/ml、0.28μg/ml和0.31μg/ml,加标回收率均在95%以上。结论:该方法样品预处理简单,无需预富集,分离效果好,可用于实际样品的分析。     

不同产地蒙古扁桃仁中苦杏仁苷的含量比较

目的建立蒙古扁桃仁中苦杏仁苷含量测定的方法,并对不同产地蒙古扁桃仁中苦杏仁苷的含量进行比较。方法采用高效液相色谱法,检测条件为:Shim-Pack VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(12∶88,V/V);柱温:30℃;流速:1.0 ml/min;检测波长:208 nm;进样量:20μl。结果苦杏仁苷在9.9μg/ml~118.8μg/ml浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均加样回收率为99.3%,RSD为1.61%(n=9)。所测样品中苦杏仁苷的含量在13.8 mg/g~48.0 mg/g,其中,河北张家口的含量最高,内蒙古固阳爬榆树的含量最低。结论本实验采用高效液相色谱法测定了不同出产地蒙古扁桃仁中苦杏仁苷的含量。该方法准确、可靠、快捷,可作为蒙古扁桃药材质量评价的指标及资源开发的依据。     

高效液相色谱法(HPLC)测定护肝片中绿原酸含量的研究

目的探讨运用高效液相色谱法(HPLC)测定护肝片中绿原酸含量的可行性。方法采用高效液相色谱法(HPLC)对护肝片中的绿原酸进行含量测定。结果绿原酸对照溶液在8.11-162.2μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9999),回收率试验的平均回收率为99.68%,RSD为0.5%(n=5),三批次样品测得的绿原酸含量分别为0.8055、0.8104、0.8093(单位mg/g)。结论应用高效液相色谱法(HPLC)测定护肝片绿原酸含量操作简便,结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定不同产地甘草中甘草苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定不同产地甘草中甘草苷的含量。方法色谱柱为Waters C18(4.6mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(35∶65);流速0.8 ml/min;柱温为室温,检测波长为270 nm,采用外标法定量测定。结果该方法测定甘草苷在0.48～4.80μg范围内有良好的线性关系,r=0.999 5。结论该方法简便可靠、快速、重现性好,可用于甘草中甘草苷含量的测定。     

超高效液相色谱法测定水中的2,4-二氨基甲苯和2,6-二氨基甲苯

目的建立水中2,4-二氨基甲苯、2,6-二氨基甲苯的超高效液相色谱(UPLC)测定法。方法水样直接过滤或稀释后,用Agilent RRHD SB-C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm)超高效液相色谱柱,二极管阵列检测器,以甲醇-0.020 mol/L乙酸铵溶液为流动相,检测波长为210 nm,参比波长为360 nm进样,测定二氨基甲苯的含量。结果 2,6-二氨基甲苯和2,4-二氨基甲苯在0μg/ml~10.0μg/ml时,线性关系良好(r=0.999 9),方法检出限分别为0.010μg/ml和0.015μg/ml。水中2,6-二氨基甲苯的测定值为为0.20μg/ml~5.00μg/ml,RSD为0.29%~1.6%;2,4-二氨基甲苯的测定值0.20μg/ml~5.00μg/ml,RSD为1.5%~3.1%;样品加标量为0.50μg/ml~5.00μg/ml,回收率为94.0%~105%。结论采用超高效液相色谱法测定水中2,6-二氨基甲苯、2,4-二氨基甲苯的含量,简便、快速、经济、环保、灵敏、精密、准确,适合基层检测单位推广和使用。     

泸州引种金银花与济银花中4种活性成分的含量对比研究

目的对比泸州引种金银花及山东金银花中4种活性成分(绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A及异绿原酸C)的含量,评价引种金银花质量。方法采用HPLC法,Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈和0.1%磷酸水溶液进行梯度洗脱,分段变波长检测,柱温30℃,流速:1.0 ml/min;结果泸州引种金银花中4种活性成分含量略低于山东金银花,但均高于药典规定。结论泸州引种金银花含量符合药典要求,可大面积栽培。     

HPLC法同时测定地锦草中芦丁、异槲皮苷、紫云英苷的含量

目的建立同时测定地锦草药材中芦丁、异槲皮苷和紫云英苷含量的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定方法。方法色谱柱:Kromasil C18(5μm,250×4.6 mm);流动相:乙腈-水-冰醋酸(20:80:0.15);流速为1.0 ml/min,检测波长:360 nm,柱温:30℃。结果芦丁、异槲皮苷、紫云英苷三种成分的相对保留时间分别约为8.1、10.5、16.1 min,能够达到基线分离,分离度分别为2.8、4.1、3.8;回收率分别为100.43%、100.34%、100.32%;线性范围分别为0.660~21.200、0.486~15.560、0.480~15.200μg。结论 HPLC测定法简便准确,重复性好,为地锦草的质量控制提供了依据。     

胶束增敏荧光法测定银杏叶片剂中总黄酮醇苷

以槲皮素为对照品用荧光法测定药物银杏叶片制剂中总黄酮醇苷的含量。实验表明：Al（Ⅲ）与槲皮素作用可产生强的荧光,加入十二烷基硫酸钠（SDS）后,荧光强度进一步增强。槲皮素在0.068～6.76μg/ml范围内与其荧光强度呈良好的线性关系,其线性回归方程为Y=5.8658X＋5.3925,相关系数r=0.9936,检出限为0.036μg/ml。本方法用于银杏叶片制剂中总黄酮醇苷含量的测定,其回收率为99.2%～100.8%,结果较为理想。     

HPLC法同时测定保健食品中番泻苷A和番泻苷B的含量

目的建立高效液相色谱法测定保健食品中番泻苷A和番泻苷B含量的方法。方法样品经超声提取后,采用高效液相色谱-紫外检测技术进行检测,以Synergi Hydro-RP(250mm×4.6mm,4μm)为色谱柱,乙腈∶1.0%冰乙酸水溶液(17∶83)为流动相,检测波长270nm,外标法计算含量。结果番泻苷A和番泻苷B分别在1.40～28.0μg/ml和1.45～29.0μg/ml浓度范围内具有良好线性关系;番泻苷A和番泻苷B的平均加标回收率分别为85.2%～97.2%和86.1%～96.2%;相对标准偏差分别为7.5%和6.8%;检出限分别为0.8和0.6mg/kg;定量限分别为2.1和2.0 mg/kg。结论该方法简单、准确,可用于含有番泻苷的保健食品的质量控制。     

甘肃省不同产地党参中党参炔苷的含量分析

目的比较甘肃不同产地党参中党参炔苷的含量,为甘肃道地药材党参的适宜栽培区域研究提供资料。方法采用HPLC法,色谱条件为CAPCELL PAK C18-MGⅡ柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-水(28:72,V/V)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃;检测波长为268 nm,对甘肃不同产地党参中炔苷含量进行测定。结果白条党参不同产地间差异无统计学意义(P0.05)。纹党产地中文县党参炔苷含量显著高于武都纹党党参炔苷含量;纹党党参炔苷含量显著高于白条党党参炔苷含量。结论本试验结果为甘肃道地药材党参的质量标准的制定奠定了理论基础,并对中药企业采购药材提供了指导。     

甘宝胶囊中绿原酸含量测定方法的建立

目的:建立甘宝胶囊中绿原酸的含量测定方法。方法:采用HPLC测定绿原酸含量,Agilent C18色谱柱(250×4.6 mm,4 um),流动相乙腈-0.2%磷酸(13∶87),流速1.0 ml/min,柱温室温,检测波长:327 nm。结果:绿原酸的线性范围为0.0628~0.4484μg,平均回收率为99.57%(RSD2.47%),样品中绿原酸平均含量为5.0 mg/g,总含量2.04 mg/粒。结论:建立的方法简单易行、重复性良好,适用于甘宝胶囊的质量评价。     

儿童尿液中3种邻苯二甲酸酯代谢产物的GC-MS检测方法研究

目的建立儿童尿液中邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单乙酯(MEP)、邻苯二甲酸(2-乙基己基)单酯(MEHP)的气相色谱-质谱测定法。方法尿液中的被测物经正己烷萃取气相色谱-质谱法检测。以保留时间和选择离子定性,选择特征离子进行定量分析。结果 MBP、MEP在2μg/ml~10μg/ml时、MEHP在0.02μg/ml~0.10μg/ml时,线性关系良好,相关系数(r)≥0.993;MBP、MEP、MEHP的检出限分别为0.101μg/ml、0.0 99μg/ml、9.837 ng/ml。样品加标回收率为78.1%~108.1%,RSD为0.67%~5.43%。结论本法回收率高,操作简单,实用性强,适合于儿童尿液中3种邻苯二甲酸酯代谢产物的检测。     

保健食品中总黄酮醇苷测定方法研究

目的建立保健食品中总黄酮醇苷的酸水解-高效液相色谱测定方法。方法采用甲醇回流提取总黄酮醇苷,酸水解法水解为槲皮素、山柰素和异鼠李素3种苷元,用高效液相色谱仪测定3种苷元含量,计算总黄酮醇苷含量。结果甲醇-25%盐酸(4∶1)在85℃水浴中回流提取0.5 h能使样品完全水解。最佳色谱条件:ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.6%磷酸溶液(47∶53),柱温:35℃,检测波长:360 nm。槲皮素在4.766~95.52μg/m L、山柰素在5.052~101.0μg/m L、异鼠李素在2.027~48.66μg/m L的浓度范围内,线性关系良好(r=0.999 1、0.999 4、0.999 4);测定样品的相对标准偏差(RSD)为0.57%;平均加标回收率分别为98.25%、99.81%和101.8%,回收率试验的RSD分别为3.82%、3.31%和4.86%;槲皮素、山柰素检出限为0.50μg,异鼠李素为0.80μg,总黄酮醇苷为4.52μg。同一份样品采用本方法测定的总黄酮醇苷含量低于采用《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中方法测定的总黄酮含量。结论本方法简便、结果稳定、重复性强,可应用于保健食品中总黄酮醇苷的含量测定。     

二维液相色谱法测定保健食品中V_A、V_(D3)、V_E的含量

目的建立了二维液相色谱法测定保健食品中VA、VD3、VE含量的方法。方法采用甲醇与乙醇超声直接提取样品,以Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为一维色谱柱,流速为0.5 ml/min;以poroshell 120(4.6 mm×100 mm,2.7μm)为二维色谱柱,流速为1.0 ml/min;采用波长切换方式检测(VA:325 nm;VD3:264 nm;VE:296 nm),以乙腈-甲醇-水为流动相,梯度洗脱,柱温为35℃。结果维生素A在0.21μg/ml~8.38μg/ml、维生素D3在0.04μg/ml~1.73μg/ml、维生素E在2.05μg/ml~81.84μg/ml线性关系良好,相关系数r均为1.000 0,平均回收率为95.6%~102.7%。结论本方法快速、准确、重现性好,适用于保健食品复合维生素片或软胶囊中VA、VD3、VE的测定。     

高效液相色谱法测定口腔护理双氯芬酸含漱液中双氯芬酸的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定双氯芬酸含漱液中双氯芬酸的含量方法。方法采用Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为A(0.1%甲酸),B(乙腈);0 min~6 min,30%~50%B;6 min~12 min,50%~70%B。流速为1.0 ml/min,检测波长为278 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果双氯芬酸的浓度为0.1 g/ml~50 g/ml时,与峰面积的线性关系良好(r=0.997 6),最低检出限为0.1 g/ml。精密度RSD为0.24%,稳定性RSD为0.89%,平均回收率为98.32%。结论该法操作简便、快速,可用于双氯芬酸含漱液的质量控制。     

超高效液相色谱-质谱联用定性定量测定硫酸阿托品片

目的建立超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)法对硫酸阿托品片进行定性检测,并用内标法和外标法测定硫酸阿托品含量。方法采用超高效液相色谱串联四级杆质谱仪,色谱条件:Shim-pack XR-ODSⅡ(2.0 mm×75 mm,2.2μm)色谱柱,柱温为35℃,以乙腈-0.25%甲酸溶液为流动相梯度洗脱。质谱条件:ESI源,多反应监测(MRM),检测离子对(m/z):硫酸阿托品(290.2→124.2,290.2→93.1)。以保留时间和定性离子对之间的相对丰度定性,以定量离子对峰面积定量。内标法以氢溴酸东莨菪碱为内标。结果内标法和外标法均在0.104μg/ml～3.114μg/ml浓度内呈现良好的线性关系(r0.999)。内标法测定时,平均加样回收率为99.81%,重复性试验RSD为0.66%;外标法测定时平均加样回收率为96.79%,重复性试验RSD为0.98%。2种方法含量测定结果相似,均能满足检测要求。结论 UPLC-MS测定硫酸阿托品的方法简便、快速、准确,可有效控制硫酸阿托品片的质量。     

高效液相色谱法测定大枣中齐墩果酸、熊果酸、环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷

目的建立大枣中齐墩果酸、熊果酸、环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷测定的高效液相色谱法。方法试样经乙腈-水在60℃超声提取,过滤后用Waters Symmetry ShieldTMRP18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果齐墩果酸线性范围为1.2μg/ml~90.0μg/ml,熊果酸线性范围为1.0μg/ml~75.0μg/ml,环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷线性范围为1.0μg/ml~100.0μg/ml,相关系数均0.999,定量限为1.0μg/ml~1.2μg/ml。平均回收率为85%~115%;日内和日间相对标准偏差(RSD)均≤5.470%。结论本方法简便、快速、准确,适用于大枣中齐墩果酸、熊果酸、环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的测定。     

反相高效液相色谱法测定蒲地蓝消炎口服液中绿原酸和咖啡酸的含量

目的建立同时测定蒲地蓝消炎口服液中绿原酸和咖啡酸含量的反相高效液相色谱法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为岛津Inertsil ODS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04%磷酸水溶液(15∶85,V/V),流速为1.0 ml/min,柱温为35℃,检测波长为327 nm。结果绿原酸与咖啡酸的质量浓度为4.0 g/ml~19.0 g/ml时,与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程分别为y=37 434.0x-45 435.1(r=0.999 6)、y=111 260x-152 136(r=0.999 8)。绿原酸与咖啡酸的平均回收率分别为99.0%(RSD=1.65%)和100.1%(RSD=1.78%)。结论方法简便、快速、准确,可用于蒲地蓝消炎口服液中绿原酸和咖啡酸含量的同时测定。     

胶束电动毛细管电泳法快速测定调味品中山梨酸和苯甲酸

目的本文建立了胶束电动毛细管电泳法(MEKC)测定调味品中山梨酸和苯甲酸含量的方法,实验考察了检测波长、缓冲液的选择、缓冲液p H值、分离电压和柱温等因素对分离的影响。方法在最佳条件70 mmol/L的硼砂盐缓冲液体系p H=8.3为电解质溶液,分离电压14 k V,柱温25℃,于214 nm波长处进行紫外检测,并且在30 min内基质样品中山梨酸和苯甲酸达到完全分离。结果在最佳实验条件下采用外标法定量,山梨酸和苯甲酸在0.6μg/ml~240μg/ml时与其对应的校正峰面积呈线性关系,回归方程相关系数分别为0.999 2和0.999 0,检出限分别为0.13μg/ml和0.14μg/ml,苯甲酸和山梨酸峰迁移时间的相对标准偏差(RSD)分别为0.17%和0.11%,峰面积的RSD分别为1.88%和1.99%,对实际样品测定,样品回收率为91.5%~120.3%。结论实验表明,HPCE适用于调味品中苯甲酸和山梨酸含量的测定。     

5-氟尿嘧啶对人类绒癌JAR细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对人类绒毛膜癌JAR细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测5-FU对JAR细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测5-FU对JAR细胞DNA含量的改变;倒置显微镜及荧光显微镜下观察JAR细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变。结果:MTT抑制实验得出5-FU对JAR细胞的增殖具有一定程度的抑制作用,且抑制作用呈时间、剂量依赖性;5-FU0μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml处理JAR细胞24h,通过倒置光学显微镜可观察到JAR细胞的形态变化,可见随着5-FU浓度的增加,JAR细胞逐渐缩小、变圆、分散,细胞核减少;用流式细胞仪检测5-FU对JAR细胞DNA含量的改变发现:12h均未诱导出凋亡,直到24h5-FU处理组才诱导出凋亡,48h由于JAR细胞耐酸性低,出现自溶现象,干扰实验结果,因此只选择24h为实验时间点。0μg/ml(对照组)、20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml5-FU处理JAR细胞24h后,流式细胞术检测发现5-FU处理组可诱导绒癌细胞凋亡。5-FU在0μg/ml~40μg/ml范围内可以呈剂量依赖性促进JAR细胞凋亡,在40μg/ml~80μg/ml范围内,凋亡反而降低。40μg/ml、60μg/ml5-FU处理组凋亡率与对照组相比差异有统计学意义。在0μg/ml~80μg/ml范围内5-FU处理组细胞坏死增加,呈剂量依赖性。坏死率高于不加5-FU的对照组,差异具有统计学意义;Ho-echst33342/PI荧光染色结果显示,典型的细胞凋亡形态学改变,可见典型的凋亡小体,表现为核染色质聚集、核固缩、核碎裂。20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml各处理组的凋亡率均显著高于对照组(P<0.01),80μg/ml处理组的坏死率也显著高于对照组。结论:5-FU对JAR细胞的增殖具有一定程度的抑制作用,5-FU对绒毛膜癌JAR细胞有凋亡诱导作用。