根霉PE-8菌株淀粉降解酶类的研究菌株的选育及其酶解淀粉产物的鉴定(I)

从淀粉厂土样等样品中分离筛选到一支产淀粉降解酶的根霉菌株P78,经紫外线及Co60辐射诱变和自然分离,获得一支突变菌株PE-8,在麸曲培养基上,46～48℃、固态培养22～24h,酶活力达3000U/g（干）。经高压液相色谱和纸层析分析证明,其分泌的淀粉降解酶类作用于适当液化的玉米淀粉产物中麦芽三糖至麦芽八糖的比例达77.6％、葡萄糖含量仅为3.03％,属于麦芽低聚糖,说明根霉PE-8菌株分泌的淀粉降解酶类不同于葡萄糖淀粉酶或α-淀粉酶,属于低聚糖酶。     

一株高产生淀粉糖化酶菌株的筛选与研究

通过分离和筛选,得到一株分解小麦生淀粉能力较强的黑曲霉,其生产淀粉糖化酶活力为１７１．５ｕ／ｇ,α－淀粉酶活力为６．３４７ｕ／ｇ。产酶条件的研究,发现尿素是较好的氨源,麦芽糖是理想的碳源,最适产酶初始ＰＨ值为４,最佳产酶时间为２．５－３天,该菌株对四种生淀粉的降解顺序为：糖为淀粉〉高梁淀粉〉玉米淀粉〉马铃薯淀粉。     

响应面试验优化挤出酶解复合法改性玉米淀粉工艺

利用挤出酶解对玉米淀粉进行改性,采用响应面法对影响改性工艺的主要因素耐高温α-淀粉酶添加量、挤出温度、玉米淀粉含量进行优化,通过高效液相色谱、扫描电子显微镜、X-射线衍射以及差示扫描量热仪对玉米淀粉挤出酶解复合改性前后的低聚糖组成、表观结构、结晶度以及热力学性质的变化进行分析。结果表明：当耐高温α-淀粉酶添加量40 U/g、挤出温度140 ℃、玉米淀粉含量70%时,挤出改性玉米淀粉葡萄糖当量值为19.55%。高效液相色谱分析表明挤出物低聚糖的组分能够得到较好的分离,低聚糖样品中各组分葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖的质量比为1.0∶3.4∶7.5∶6.0∶1.8。玉米淀粉经挤出酶解复合改性后颗粒表面出现孔洞,结晶度下降。     

甘薯生淀粉糖化酶菌株的分离与诱变育种

以红薯淀粉作唯一碳源的察氏培养基,从腐烂甘薯分离筛选出1株产甘薯生淀粉糖化酶能力较强的黑曲霉菌株,出发菌株发酵液粗酶的生淀粉降解酶活力为55.10 U/mL.通过紫外线诱变,突变株的粗酶活提高36.70%.再经亚硝基胍诱变,生淀粉酶活达116.84 U/mL,进一步提高34.30%.     

麦芽四糖生产工艺试验

麦芽四糖是一种新型麦芽低聚糖．试验中采用麦芽四糖淀粉酶和普鲁兰酶协同水解预处理过的淀粉,通过单因素试验和响应面曲线（ＲＳＡ）法确定了较好的酶解工艺条件．所得产品中麦芽四糖占总糖比例达８４％以上,转化率为７７％左右     

海洋低温α-淀粉酶酶解豌豆淀粉及其生物活性

豌豆淀粉是一种广泛用于食品加工的重要的食品原料,采用研制的新型海洋低温α-淀粉酶,结合单因素试验和正交试验优化了α-淀粉酶酶解豌豆淀粉的工艺参数,并对酶解产物的生物活性进行了研究。结果表明,低温α-淀粉酶酶解豌豆淀粉工艺条件为加酶量35 U/g,时间165 min,温度35℃,豌豆淀粉浓度4%,pH6.5。经高效液相色谱(HPLC)分析,酶解产物中麦芽三糖、麦芽四糖和麦芽五糖的总和达到65.88%。酶解产物对羟自由基和DPPH自由基均有清除作用,对DPPH自由基的清除效果好于对羟自由基的清除效果。为豌豆淀粉的深入加工提供了参考。     

与生产功能性低聚糖相关的酶(下)

介绍了与乳果糖、异麦芽低聚糖、低聚壳聚糖相关的酶及生产。乳果糖又称乳蔗糖，是在蔗糖分子的葡萄糖残基上接一个半乳糖残基构成的三糖，是在蔗糖、乳糖共存下，由节杆菌K-1乳糖苷酶的果糖基转移反应所生产的；异麦芽低聚糖是指含有异麦芽糖、异麦芽三糖、异麦芽四糖和泮糖等具有α～1，6键的分支低聚麦芽糖的混合物，异麦芽低聚糖是以淀粉为原料，经α-淀粉酶、β-淀粉酶或真菌α-淀粉酶的糖化作用生成麦芽糖后，在α-葡萄糖苷酶的转移反应下生成的；壳聚糖是甲壳动物和真菌细胞壁中的甲壳素（几丁质）经碱处理脱乙酰基而成的链状阳离子型多糖，壳寡糖是用壳聚糖酶水解而成的。     

响应面试验优化玉米淀粉挤出-酶解复合法糖化工艺

以经过挤出-酶解复合法液化后的玉米淀粉为原料,利用葡萄糖淀粉酶为糖化酶,采用挤出-酶解复合法糖化玉米淀粉挤出酶解物。以葡萄糖(dextrose equivalent,DE)值为考察指标,在单因素试验的基础上,利用响应面法对糖化工艺参数进行优化,确定最佳挤出工艺。响应面分析结果表明,最优工艺为葡萄糖淀粉酶添加量140 U/g、原料质量分数70%、挤出温度85℃,由此工艺得到的淀粉糖DE值为42.12%。利用高效液相色谱法检测得出DE38产品葡萄糖含量26.17%、麦芽糖含量25.29%、麦芽三糖含量14.86%,DE42产品葡萄糖含量29.57%、麦芽糖含量33.40%、麦芽三糖含量17.23%。红外图谱显示挤出物中含有葡萄糖等低聚糖特征峰,扫面电镜图显示原料经挤出后表面生成多孔状结构,X-射线衍射图显示有新的晶型结构生成,Brabender黏度曲线表明挤出物中含有小分子可溶性糖,黏度降低。     

木薯淀粉生产异麦芽低聚糖粉的工艺研究

:研究了木薯淀粉工业化生产异麦芽低聚糖粉的工艺条件、工艺控制和产品特性。分析结果显示 ,异麦芽低聚糖粉产品中异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖三种糖含量达到 35 %以上 ,分支低聚糖总量达 5 7.5 % ,葡萄糖含量则相对较低 ,从而大大改善了产品的喷雾干燥性能。     

玉米淀粉浓度对酶法制备直链麦芽低聚糖的影响

为研究浓度对玉米淀粉酶解过程和产物的影响,以直链麦芽低聚糖含量和产率为指标,探究了直链麦芽低聚糖生成酶(Bst-MFA酶)对不同浓度(质量分数)玉米淀粉的酶解过程,并对相关机理进行了分析。结果表明,玉米淀粉质量分数由10%提高至50%时,酶解24 h后直链麦芽低聚糖和主产物麦芽五糖、麦芽六糖的含量均呈现逐渐升高的趋势,且二者均在45%的底物质量分数时达到最大值,分别为344. 47和192. 33 mg/g;而直链麦芽低聚糖的产率逐渐降低。其主要原因可能是:随底物浓度的增加,液化和糖化过程中体系黏度增大,水分子运动性降低,体系中自由水明显减少,且酶在不同浓度玉米淀粉中的作用模式存在差异,使得高浓度条件下其对玉米淀粉的水解作用不够充分,直链麦芽低聚糖的产率呈下降趋势。该研究可为工业生产中直链麦芽低聚糖的酶法制备提供参考依据。     

木薯淀粉生产异麦芽低聚糖粉的工艺研究

研究了木薯淀粉工业区化生产异麦芽低聚糖粉的工艺条件、工艺控制和产品特性。分析结果显示,异麦芽低聚糖粉产品中异麦芽糖、异麦芽三糖、潘糖三种糖含量达到３５％以上,分支低聚糖总量达５７．５％,葡萄糖含量则相对较低,从而大大改善了产品的喷雾干燥性能。     

Geobacillus sp.A27的分离筛选及其淀粉酶酶学性质研究

用淀粉平板透明圈法,从分离自腾冲热泉的高温菌中筛选到一株产胞外淀粉酶的菌株,经16sRNA序列比对,在Genbank中与Geobacillus sp.sbs4s有99%同源性,定名为Geobacillus sp.A27。该菌最适生长温度为60～65℃,在LB培养基上不生长,但能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长,并能将来自植物种子、根茎的淀粉质底物水解为以麦芽二糖为主的麦芽寡糖。Geobacillus sp.A27菌株产生的胞外α-淀粉酶最适pH5.6,最适温度70℃。金属离子Fe3+、Cu2+、EDTA对酶活有显著抑制作用,推测AmyA27可能属于金属酶。粗酶液经饱和硫酸胺沉淀、无水乙醇沉淀、8%分离胶的SDS-PAGE电泳和蛋白质复性,确定该淀粉酶分子量为67kD。     

利用酶制剂降解烤烟烟叶中淀粉和蛋白质的研究

为探索外加酶制剂施于调制后原烟发酵过程的效果,设计了不同加酶量、作用时间、相对湿度和温度处理的方法来降解烤烟烟叶中的淀粉和蛋白质的试验。结果表明,单一施用中性蛋白酶对烤烟蛋白质的降解率不理想,综合使用α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶针对不同的部位均有不同的相对最佳处理组合。在各等级相对最佳条件下施加α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶后再喷施中性蛋白酶发酵烟叶后针对3个等级烟叶的淀粉和蛋白质有所降解,氨基酸含量均有显著提高,但还原糖含量、总氮和烟碱含量变化不明显。     

烟草中淀粉降解菌的筛选、鉴定及发酵工艺优化

从河南初烤烟叶表面分离筛选得到一株淀粉降解菌HX-6,并对菌株产酶培养基和烟叶发酵工艺进行优化。结果表明:淀粉降解菌HX-6为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其最佳产酶培养基配方为:可溶性淀粉与红薯淀粉(m可溶性淀粉∶m红薯淀粉=1∶1)17.0 g/L,蛋白胨与酵母粉(m蛋白胨∶m酵母粉=1∶1)21.89 g/L,KNO 32.58 g/L,菌株经最佳产酶培养基培养后,其菌株酶活力提高了71.51%;烟叶发酵最优工艺为:HX-6菌株粗酶液添加量4%、发酵温度35℃、发酵时间27 h,发酵后淀粉降解率达31.75%,总糖和还原糖含量分别增加了18.8%,20.2%,感官品质显著提升(P<0.05),香气质变好,香气量增加。     

以淀粉废水、麦芽根制备生物材举——短梗霉多糖

短梗霉多糖是一种具有重要应用价值的微生物胞外多糖，淀粉废水是加工淀粉过程中不可避免的一种副产物，营养丰富；麦芽根为麦芽制造过程中的副产物，含有丰富的淀粉酶、麦芽酶、果酸酶及蛋白酶，富含B族维生素，并含有大量未知生长因子。因此，利用麦芽根所含有的丰富酶系和生长因子来酶解淀粉工业废水，便于出芽短梗霉菌的生长代谢。实验表明，具有一定的可行性。控制培养基初始pH为6．5、发酵温度为28-30℃、转速为180r／min、发酵时间120h的发酵工艺，较适合于出芽短梗霉菌利用麦芽根与淀粉废水的混合培养液进行代谢,出产短梗霉名糖.     

烤烟中残留淀粉的酶降解研究

向烟叶中施加α－淀粉酶和糖化酶可使烟叶中的淀粉降解为水溶性糖，有效地改善烟叶的质量。实验得出α－淀粉酶、糖化酶的最佳用量分别为８ｕ／ｇ，８０ｕ／ｇ；最佳作用条件为：烟叶水分２５％，作用时间６ｈ，作用温度３０℃，降解后烟叶中水溶性糖可增加２１．４％左右，在真空破膜条件下，效果更为明显。     

一株蜡状芽孢杆菌α-淀粉酶产生菌株的分离鉴定及酶学性质研究

从土壤中筛选出一株淀粉酶分泌能力较强的菌株,通过形态学观察、生理生化试验、16S rDNA测序分析等方法对该菌株进行了鉴定,并对其分泌的淀粉酶的酶学性质进行了研究。经鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌。酶学性质研究表明,该酶的最适温度为40℃,最适pH值为5.0~6.0,在40℃保温20min,酶活力下降70%左右。Ca2+对酶的活性和热稳定性没有激活作用。非变性蛋白电泳和淀粉酶活性染色结果显示,该菌仅产生一种淀粉酶。通过高效液相色谱分析,该酶对可溶性淀粉的主要水解产物为糊精、寡聚糖和少量葡萄糖,表明该酶为α-淀粉酶。     

烘烤过程中不同成熟度烟叶淀粉的降解动态

以烤烟品种红花大金元和K326的中部叶为材料,研究了不同成熟度烟叶烘烤过程中淀粉酶和淀粉磷酸化酶活性动态及对烤烟淀粉降解的影响。结果表明:淀粉的降解是淀粉酶和淀粉磷酸化酶综合作用的结果。烘烤过程中烟叶淀粉酶活性出现两次高峰,分别在烘烤的36h和72h;在鲜烟叶中淀粉磷酸化酶活性较高,随着烘烤过程的推进,至24h时达第1次高峰,之后降低,48h时出现低谷,随后又于72h达第2次高峰。不同成熟度的烟叶中淀粉酶和淀粉磷酸化酶活性相比较,均以适熟叶中两种酶的活性较高,淀粉降解较快,烤后烟叶淀粉含量较低,水溶性糖和还原糖含量较高,总体化学成分较协调。     

用一种新的热稳定性酶生产海藻糖的方法

从Ｓ ｕｌｆｏｌｂｕｓ ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ ＡＴＣＣ３３９０９中提取的麦芽寡糖海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶这两种热稳定性酶从淀粉中生产海藻糖，讨论了从Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｍｙｌｏｄｅｒａｍｏｓａ提取出来的脱支酶的最佳反应条件，最适ＰＨ为５．５，最适温度为５５－５６℃，在糖化过程中加入ＣＧＴａｓｅ酶到反应混合筘，导致了海糖的增加和麦芽糖及麦芽三糖的下降。异淀粉酶作为脱支酶比普     

真菌α淀粉酶生产菌株的筛选

在工业上,真菌α-淀粉酶通常是指一类由米曲霉生产的α-淀粉酶,它兼有液化和糖化能力。虽然它也是从淀粉分子内部切开α-1,4糖苷键,将淀粉转化为糊精和还原糖的酶类,但耐热性较细菌α-淀粉酶差,水解产物含有多量的麦芽糖和麦芽三糖,而葡萄糖的产量则很少。由于真菌α-淀粉酶具有特殊的性质,使它在淀粉糖工业和面包工业中有重要的应用价值。在淀粉糖工业中可以利用真菌α-淀粉酶代替大麦芽或β-淀粉酶作为糖化剂来制造麦芽糖含量达50～60%的高麦芽糖浆。在面包工