消毒剂杀灭淋球菌的试验方法研究

淋球菌对营养要求特殊,普通培养基上生长较慢。为科学评价化学消毒剂对淋球菌的杀灭效果,采用平板浸润接种法对不同培养基进行比较,以评价杀菌效果的差异。结果,淋球菌在普通营养琼脂和酵母浸膏琼脂上生长的菌落均小于2 mm;在酵母浸膏血琼脂和巧克力琼脂上生长的菌落为2~3 mm,计数回收率高出26%。而平板涂布法的回收菌数低于平板浸润法,其标准差大于平板浸润法。进行悬液定量杀菌试验时,采用酵母浸膏血平板浸润接种方法。观察临床分离的淋球菌和标准菌株对化学消毒剂的抗力,选择抗力较高的标准菌株作有机干扰物试验。用大白兔作为淋球菌感染部位和感染量的试验动物。结果表明,用酵母浸膏血琼脂替代巧克力琼脂培养淋球菌无统计学差异,淋球菌用平板浸润法接种比平板涂布法好。临床分离菌株对化学消毒剂的抗力略低于标准菌株。在30 g/L牛血清白蛋白的存在下,达到消毒要求的消毒剂浓度是PBS菌悬液的消毒剂浓度的5~6倍。淋球菌可通过皮肤、角膜感染大白兔的泌尿系统,可感染角膜菌量为80 cfu。故建议在30 g/L牛血清白蛋白的条件下,淋球菌经消毒剂处理后,下降5个对数值,作为消毒合格标准较可靠。     

不同培养基对枯草杆菌黑色变种芽孢抗力影响的研究

目的研究不同培养基对枯草杆菌黑色变种芽孢抗力的影响。方法采用悬液定量和载体定量杀菌试验方法,对不同培养基培养出的枯草杆菌黑色变种芽孢抗力进行比较。结果相同培养条件下,胰蛋白胨大豆琼脂培养基与普通营养琼脂培养基培养制备出的20 ml芽孢悬液的浓度分别为4.52×109cfu/ml和2.15×109cfu/ml。湿热100℃作用20 min、干热160℃作用10 min、5 000 mg/L的邻苯二甲醛溶液作用40 min、2 000 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用15 min,对两种培养基培养的枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭率均为99.99%。结论两种培养基培养的枯草杆菌黑色变种芽孢的抗力无明显差异。     

蒸馏水中检出绿脓杆菌

<正> 今年以来,沈阳某医院先后发生几起输液反应。经反复查找原因,竟从配制输液药物用的蒸馏水中检出绿脓杆菌。调查时,将水样接种于普通琼脂平板、血平板和普通肉汤管各一。常规培养后,在两种平板培养基上的菌落均产生蓝绿色色素。菌落湿润、大而扁平,边缘不整齐,并在血平板上形成溶血环。打开平皿盖时可闻到较浓的芳香气味。在肉汤管的液面上有菌     

用Rambach琼脂和4-甲基伞形酮辛酸盐荧光试验鉴定沙门氏菌

由于沙门氏菌分布广泛,感染发病率高,为世界性的公共卫生问题。该菌快速、简易检测和鉴定对预防和控制该病都是重要的。目前使用培养基均不能产生独特的颜色,以区别该菌的菌落,必需检测多种生化特征,尚无一种生化试验能满意地鉴别该菌。Rambach琼脂和4-甲基伞形酮辛酸盐(4-methylum-bellifery caprylate.MUCAP)荧光试验可快速检出沙门氏菌,其成份每升含:蛋白陈5g、酵母浸膏2g、牛肉膏1g、氯化钠5g、去氧胆酸钠1g、产色原混合物1.5g、丙二醇10.5g、琼脂15g。煮沸1分钟,冷至50℃时,摇匀倾注平皿。接种后37℃孵育24～48小时,在菌落上加1滴4-甲基伞形酮辛酸盐试剂,在半暗处用wood’s紫外线灯观察,菌落在5分钟内显荧光为阳性。     

平板菌落自动识别计数方法的研究

为判定平板菌落自动识别计数软件的功能及其影响因素,用不同菌悬液进行了活菌计数实验。结果,采取平板涂抹接种且菌落数＜３００．用该软件的程序自动计数结果,与人肉眼计数相差≤７ｃｆｕ／平板。３次自动计数结果完全一样,３人次肉眼计数结果则多不吻合。在定量杀菌试验中,当杀灭率≥７４．７６％时,用２种计数计算的结果基本一致,小于该杀灭率时两者亦相近。该自动计数法受不同微生物菌落形态、大小的影响不明显,但受琼脂倾注法接种的影响。现有程序仅适用于平板涂抹法接种所长出的菌落。     

葡萄球菌的溶血活性与红细胞的“游动”现象

在1.5%肉汤琼脂培养基表面上,加入0.15毫升枸椽酸盐抗凝血液,轻轻左右摇动,再将煮沸过的直径0.5cm,长4.5-5cm,中间插入同样长度铝丝的橡皮管,用镊子钳放在琼脂表面上,从平皿一端推移到另一端,使血液均匀分布成一薄层。移去胶管,将平血水平放置在室温或恒温器内。待血液干后,用接种环或针点种培养物,每一平皿可同时接种6-8份培养物。置培养箱18-20小时后观察结果。葡萄球菌在血平板上溶解红细胞的活性越强,红细胞“游动”现象越明显,并可见沿大菌落伸展出小菌落的链状物。当血平板上不出现溶血时,则无     

比较倾注法与涂布法接种培养菌数的差异

摘要 目的 〖HT5"SS〗比较倾注法与涂布法接种培养菌数的差异。方法 采用倾注接种法和涂布接种法进行活菌计数培养,观察平板上菌落形态和菌落数的差异。结果 倾注接种法培养的平板上部分在培养基深层的菌落形态变异或显小;而涂布接种法培养的平板上菌落形态一致,易辨认。倾注接种法和涂布接种法培养的平板上菌落数之间无差异。结论 倾注法和涂布法接种培养细菌数无差异,但涂布法对人员接种技术要求高。     

用单一平板(Macba)作尿培养

本文介绍的培养平板,一半是由血琼脂,另一半是由麦康盖(Mac Conkey)氏琼脂(以下称麦氏琼脂)合并在一个平皿内组成的.制备方法是:将平皿斜放台上,皿的一半加入马血琼脂,每皿约9ml.待凝固时将皿放平,另一半注入适量麦氏琼脂.所用的标准接种环内径4mm.接种时将环垂直浸入尿液并垂直取出,呈"Z"字形连续横跨皿内两种培养基上划线.然后再将环取水平位置浸入尿中,取较多尿液于两部分琼脂交界上近血琼脂侧划一直线.取4种不同药敏纸片,放在血琼脂近中线上.收到尿液后须迅速接种于平皿上,而药敏纸片     

葡萄球菌DNA酶活性测定法

在评定葡萄球菌致病性菌株的试验中,重点是研究破坏DNA酶。在实际化验中,广泛应用(?)改良的Jeffris法测定细菌DNA酶活性,即将含有DNA的琼脂在水浴中溶化,再加0.1ml 10%灭菌KCl溶液,倾注于平皿中稍为有点干的营养琼脂层上,重新使其稍稍有点干燥。根据被检菌菌落周围的明亮区判断结果。 DNA工作液的制备是,将核酸剂量按10mg/ml计算,混悬于蒸馏水中,每20ml水添加1ml 0.8%NaOH溶液,然后在水浴中加热至完全溶解。向冷却至50℃的(?)氏琼脂中(按1mg/ml)添加     

微生物抗溶菌酶活性测定法

根据抗溶菌酶的微生物可以纯化溶菌酶的特点,作者利用下述方法测定了1296株归9个属的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗溶菌酶活性。用生理盐水将溶菌酶制备成10-250μg/ml的溶液,以不同浓度的溶茵酶溶液0.5ml与热溶化并冷却到45℃的琼脂培养基4.5ml混合,倒入平皿使之成均匀的一层,这时制备成的各平皿中琼脂含溶菌酶浓度是1—25μg/ml(浓度间隔是1μg/ml)。在上述凝固的琼脂表面放上小块被检菌的琼脂培养物或是一杯肉汤培养物(含菌为10~9/ml),37℃孵育18—24小时后,用三氯甲烷蒸汽熏蒸30分钟,以杀死生成的被检菌菌落,再用0.7%的琼脂培养基3ml(含指示菌—藤黄微球菌2665株10~9个菌)在     

微菌落技术用于细菌培养计数初探

对微菌落方法，以聚碳酸酯微孔滤膜作载体，结合显微计数，用于活菌培养计数。该法于３７℃培养３５～５０ｈ检测的结果与常规琼脂倾注平板法培养２４～４８ｈ的结果无显著性差异     

层流手术室空气细菌浓度监测结果

目的观察层流手术室空气洁净质量,加强洁净手术室空气管理。方法采用平板沉降法,对该医院洁净手术室空气中细菌浓度进行了监测和评价。结果 2011年度该医院洁净手术室空气中细菌浓度最低为0 cfu/30min.Ф90 mm皿,最高为4 cfu/30 min.Ф90 mm皿。手术室空气细菌浓度合格率与洁净系统设备使用时间呈负相关(r=-0.79)。结论该医院洁净手术室空气中细菌浓度基本不超标,随着洁净系统设备使用时间的延长,对空气净化效果减弱。     

橡子酚抗菌洗剂对淋病奈瑟菌和解脲支原体的抑菌效果

目的研究以橡子酚为主要成分的抗菌洗剂对淋病奈瑟菌和解脲支原体的体外抑菌效果。方法采用琼脂扩散法和肉汤稀释法分别对淋病奈瑟双球菌和解脲支原体的抑菌效果进行了观察。结果该抗菌洗剂对含菌量为107cfu/ml的淋病奈瑟菌的最小抑菌浓度为5mg/L橡子酚;该抗菌洗剂对含菌量为105cfu/ml解脲支原体的最小抑菌浓度为10mg/L橡子酚。结论该橡子酚抗菌洗剂在试验条件下对淋病奈瑟菌和解脲支原体有显著的抑菌效果。     

医疗操作中手污染程度及洗手方法应用的调查

目的了解医院医疗操作中医护人员手污染程度及洗手方法的应用情况。方法采用现场涂抹采样方法和活菌数检验方法进行了检测。结果该医院医护人员在医疗操作前,手上平均带菌数平均为51cfu/cm2;在诊疗操作过程中手上带菌数平均为32cfu/cm2。用普通肥皂洗手后,手上带菌数平均为24cfu/cm2;用含异丙醇的快速手消毒液擦手后,手上带菌数平均为4cfu/cm2。结论医院医护人员手在没有经过清洗或消毒的情况下,手上带菌数超标明显;用普通肥皂洗手对菌数降低不明显,用快速手消毒剂擦手消毒效果较好。     

进口培养基对卡他布拉汉菌分离鉴定的评价

目的了解呼吸道感染病人痰中卡他布拉汉菌的分离率方法采用法国生物梅里埃公司生产的哥伦比亚琼脂和DNA酶琼脂分离痰中的卡他布拉汉菌和做关键性的生化反应,鉴定结果与APINH试条进行对照。同时用国产培养基做对比试验结果卡他布拉汉菌在哥伦比亚琼脂配制的血平板上菌落明显大于国产血平板,与非致病性奈瑟氏菌有显著差别。关键性的生化反应在DNA酶琼脂平板上均显示阳性。鉴定结果的准确性与APINH试条完全相同。国产的DNA酶微量生化管仅4．4％为阳性。结论哥伦比亚琼脂和DNA酶琼脂是分离鉴定痰中卡他布拉汉菌良好的试剂。结合痰涂片镜检见到大量脓细胞吞噬G-双球菌的现象,我科在98年409例痰中共分离出45例卡他布拉汉菌,分离率为11％。占痰中各类病原菌的第4位。     

空气消毒试验方法的研究

在 16m3气雾室中 ,采用Devibiss气溶胶发生器 ,在 0 0 3～ 0 0 4MPa压力下 ,以 0 8m3/h流量喷含 1 0 %蛋白胨的白色葡萄球菌菌悬液形成气溶胶。结果 ,直径 <4 7μm的气溶胶粒子平均占 82 57%。在室温 2 0～ 2 5℃ ,相对湿度为 55%～ 70 %条件下 ,4 0min内其自然衰亡率不超过 38 0 0 % ,能维持试验菌数为 5× 10 4 ～ 5× 10 5cfu/m3。自然菌试验表明 ,采空气自然菌的平板 ,培养 72h比 4 8h为好。     

常规定量杀菌试验方法的缺陷及其改进

采用悬液与载体试验方法，对定量杀菌试验中的接种量对结果的影响，进行了试验观察。结果，以本试验所用消毒剂及其浓度，作用至规定时间，按常规取０．５０ ｍｌ菌药混合液加 ４．５０ ｍｌ中和剂中和后，取 ０．５０ ｍｌ接种（相当菌药混合液 ０．０５ｍｌ），培养结果无菌，杀灭率为１００％；将０．５０ ｍｌ菌药混合液与４．５０ ｍｌ中和剂混匀后全量接种，或将菌药混合液全部（５．１０ ｍｌ）接种，则消毒后残留菌数为 ６～２３ｃｆｕ／ｍｌ，杀灭率为９９．９９７％～９９．９９９％。在载体定量杀菌试验中，经消毒液作用后的菌片用 ５．０ ｍｌ中和剂洗下菌片上菌，按常规取０．５ ｍｌ洗脱液接种，杀灭率均为１００％；将洗脱液全量接种，则消毒后残留菌数为９０～１００ｃｆｕ／片，杀灭率为９９．９９６％～９９．９９８％。因此，在定量杀菌试验报告杀灭率为 １００％时，宜根据增量接种所得结果。