用琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶

作者鉴于目前分离乳酸脱氢酶((?))同工酶(琼脂、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶),大多是在室温条件下采用低压电泳分离,所需时间长达2～2(1/2)小时。鉴于阴极和阳极的缓冲液pH改变和热蒸发引起电泳图象变形,从而提出一种改良的琼脂糖电泳分离法和(?)同工酶的定量测定法。试剂①巴比妥钠-巴比妥缓冲液:pH8.6,离子强度0.08(巴比妥钠13.73克,巴比妥2.45克,蒸馏水1000毫升)。②2%琼脂糖溶液。③1%琼脂糖溶液:离子强度0.04,将2%琼脂糖溶液按1∶1稀释,分装于小烧瓶内,用时再置水浴中溶解。④0.45M乳酸钠溶液:在有100毫升刻度的烧瓶内加入     

微生物抗溶菌酶活性测定法

根据抗溶菌酶的微生物可以纯化溶菌酶的特点,作者利用下述方法测定了1296株归9个属的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗溶菌酶活性。用生理盐水将溶菌酶制备成10-250μg/ml的溶液,以不同浓度的溶茵酶溶液0.5ml与热溶化并冷却到45℃的琼脂培养基4.5ml混合,倒入平皿使之成均匀的一层,这时制备成的各平皿中琼脂含溶菌酶浓度是1—25μg/ml(浓度间隔是1μg/ml)。在上述凝固的琼脂表面放上小块被检菌的琼脂培养物或是一杯肉汤培养物(含菌为10~9/ml),37℃孵育18—24小时后,用三氯甲烷蒸汽熏蒸30分钟,以杀死生成的被检菌菌落,再用0.7%的琼脂培养基3ml(含指示菌—藤黄微球菌2665株10~9个菌)在     

氨苄青霉素钠静脉滴注要合理选择稀释液

临床中经常用氨(?)青霉素钠静脉给药,成人患者4～8g,习惯采用,5～10％葡萄糖500ml或更多的液体稀释;患儿1～2g,多数采用10％葡萄糖150～300ml稀释。按照常规滴法,成人40～60滴/分,小儿8～20滴/分,在时间上从配伍至滴注完需3h以上,患儿滴注的时间就更长了。另外按常规稀释要求2mg/ml,实际应用都高于此浓度。上述存在的问题,应该引起     

二氧化氯对小球藻杀灭效果的试验观察

为了解二氧化氯消毒剂对水中小球藻的杀灭效果,进行了悬液定量杀菌试验和模拟现场水杀藻试验。结果,以含二氧化氯1mg/L溶液对悬液中小球藻作用10min,杀灭率为98.32%;以含二氧化氯10mg/L溶液对小球藻作用1min,或以含二氧化氯5mg/L溶液作用10min,杀灭率均达100%。含5mg/L的二氧化氯溶液作用10min或以含二氧化氯10mg/L溶液作用1min,可使污染水样中的小球藻下降至0/100ml。结果表明,二氧化氯对水中小球藻具有很好的杀灭效果。     

耵聍内糖含量与糖尿病关系初探

作者采用萄萄糖氧化酶法测定耵聍内糖含量。取耵聍6～20mg溶解于0.5mmol/L NaOH液0.5ml中,加入5%硫酸锌溶液0.5ml,混匀5分钟后,离心,取上清液0.4ml加葡萄糖氧化酶试剂3ml,混匀后37℃水浴20分钟显色。同时作标准管(内含     

改良麦康凯琼脂鉴定斯徒氏普罗威登斯菌

斯徒氏普氏菌(Providenaa.Stuartii)是医院感染的重要菌株,在医院的老年监护病房及神经科等病房广泛存在,它可对常用消毒剂有耐性且可出现多重耐药。该菌具有磷酸酶,可与摩根氏菌以外的革兰氏阴性杆菌相区分。测磷酸酶应用MGP培基,即将底物二磷酸酚酞(PDP)2mg/ml 和甲基绿50mg/ml 加入融化的胰蛋白(?)磷酸盐琼脂中,     

血友病治疗药口服化的研究

按Abuchweki等人的方法,使用氯化氰尿活性化的甲氧聚乙烯二醇(PEG)处理Ⅷ和Ⅸ因子,其制备方法是:将Ⅷ因子制剂(500U/瓶)和Ⅸ因子制剂(400U/瓶)在20ml的0.05M磷酸缓冲液(pH7.2)中溶解,添加抑肽酶(在各凝血因子800U中加1.66U),再在各溶液中添加PEG100mg,溶解后置于0度环境中反应3小时,在0.05M磷酸缓冲液中1小时,生理盐水中30分钟,透析后使其冻结干燥即得。     

阴道加德纳菌分离培养及快速鉴定

细菌性阴道病(bacterial vaginnosis,BV),也称非特异性阴道炎,临床表现为阴道分泌物增加并伴有典型的腥臭味,呈灰白色,均匀一致,稀薄,黏度很低。该病主要病原体之一是阴道加德纳菌(Gardnerrela vaginalis,Gv)本文报告阴道加德纳菌分离培养及快速鉴定方法。1材料与方法1．1标本来源妇科门诊细菌性阴道病疑似病人136例。用无菌棉拭子采集阴道分泌物。1．2改良人血哥伦比亚选择培养基用哥伦比亚琼脂19．5 g,添加多蛋白胨2．5 g,10g/L酵母浸膏溶于蒸馏水450 ml,加热溶解调整pH为7．0-7．4。高压灭菌,冷却至50℃左右无菌手续添加人血30 ml、组合抑菌剂1瓶(购于Oxoid公司,含庆大霉素2．0 mg、二性霉素B 1．0 mg、奈啶酮酸15．0 mg)混匀,倾注平板。     

火箭免疫电泳法检测血清前清蛋白

我们建立火箭免疫电泳法,检测血清前清蛋白(PA)取得满意结果.一、材料1.抗PA 血清(批号8702)及PA 参考血清(批号8401,含量264.8mg/L):购自上海生物制品研究所.2.电泳缓冲液:pH8.6Tris-巴比妥缓冲液.3.20g/L 琼脂:日本产琼脂粉,以缓冲液配制.二、方法1.制板:Tris-巴比妥缓冲液5.7ml 加抗PA血清0.3ml,于56℃水浴预温,再与等量冷至56℃的     

刚果红-草酸镁琼脂培养基检测致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌

已描述可靠的小肠结肠炎耶尔森氏菌(简称耶氏菌)的毒力物质是40～50巨道尔赖的质粒,这种菌具有自家凝集、钙依赖和刚果红吸收的性质。著者报告修改的草酸盐琼脂的刚果红-草酸镁琼脂(CRMOX)更易检测小肠结肠炎耶氏菌致病性,其方法如下:CRMOX 培养基:肤蛋白酶大豆琼脂40g,加825ml 蒸馏水,混合,高压121℃15分钟。溶化后,冷却至55℃,加入以下溶液:0.25M草酸钠80ml,0.25M 氧化镁80ml,20%D-半乳糖10ml 和1%刚果红5ml。半乳糖溶液高压115℃10分钟灭菌,其     

消毒液细菌污染情况的调查

<正> 为了解我院消毒液使用过程中的污染情况,特采样进行了检测。检测时,吸取中层消毒液1 ml,加至装有9ml含有相应中和剂的试管内。中和后,吸取混合液滴种于营养琼脂平板上,每平板滴10滴,每滴20μl。经在37℃培养72小时观察结果。细菌总数超过250 cfu/ml者为不合格。调查结果,总不合格率为40.91％(45/110)。其中,2.5％来苏儿溶液的不合格率为61.90％(13/21),最高;其次为75％乙醇     

介绍一种改良血小板稀释液

一、试剂1.复方草酸铵试剂按原配方。2.改良试剂配方:尿素(AR)10g,草酸铵(AR)0.8g,EDTA-Na2150mg,甲醛0.1ml,1%结晶紫溶液0.1ml,蒸馏水稀至100ml。两种试剂均按常规法计数。二、实验结果: 1.两种试剂30例病人血样的比较。复方法=     

地塞米松联合咪达唑仑抑制芬太尼咳嗽反射效果观察

目的观察地塞米松联合咪达唑仑预注抑制芬太尼咳嗽反射的有效性。方法选择ASAⅠ~Ⅱ级全身麻醉患者160例,随机分为四组:Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组,每组40例。Ⅰ组静脉注射地塞米松10 mg(以0.9%氯化钠溶液稀释至10 ml);Ⅱ组静脉注射咪达唑仑0.05 mg/kg(以0.9%氯化钠溶液稀释至10 ml);Ⅲ组静脉注射地塞米松10 mg和咪达唑仑0.05 mg/kg(以0.9%氯化钠溶液稀释至10 ml);Ⅳ组为对照组静脉注射0.9%氯化钠溶液10ml,在10 s内注射完毕,5 min后静脉注射芬太尼3μg/kg,在5 s内注射完毕。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组咳嗽发生率分别达30.0%、17.5%、10.0%和62.5%,IV组显著高于其他3组(P<0.05或P<0.01)。结论预注地塞米松及咪达唑仑可有效抑制芬太尼引起的咳嗽反射。     

缺铁性贫血患儿尿中铁的测定

试剂(全用双蒸水配制)①pH4.5醋酸盐缓冲液:取醋酸钠(CH_3COONa·3H_2O)68克溶于蒸馏水中,加入冰醋酸60ml,并加蒸馏水至1000ml。②储存铁标准液(1ml(?)100μg铁):取莫尔氏盐(NH_4)_2·Fe(SO_4)_2·6H_2O 0.7032克溶于蒸馏水中,加入0.1N硫酸1ml使之酸化,加蒸馏水至1000ml。③应用铁标准液(1ml(?)2μg铁):取储存铁标准液2ml,加蒸馏水至100m1。④10%抗坏血酸。⑤分析纯氯磺酸(HSO_3Cl,分子量116.52)。⑥邻二氮杂菲溶液:在100毫克4,7-二苯-1,10-邻二氮杂菲中加入0.5ml氯磺酸,在通气柜中煮沸30秒,迅速冷却,逐滴加入蒸馏水10ml,仔细混匀,置沸水浴中5分钟以溶解沉淀,将溶液转入200ml容量瓶中,加醋酸盐缓冲液至刻度。此试剂可保存、应用一年。     

骶管冲击治疗腰椎间盘突出症218例疗效观察

将2005年3月1日～2012年12月30日我科治疗的218例腰椎间盘突出症患者按治疗方法分成两组,治疗组112例采用曲安奈德40mg和1%利多卡因5ml,用生理盐水稀释至50ml配合成复方液体,与注射用鹿瓜多肽16mg混合后骶管硬膜外腔注射。对照组106例采用静脉滴注20%甘露醇250ml,2次/d,10%葡萄糖溶液500ml加入地塞米松10mg进行静脉滴注,1次/d。对比两组疗效。结果治疗组优率为66.07%,对照组为49.06%,治疗组显著优于对照组（P〈0.05）,差异具有统计学意义（P〈0.05）。骶管冲击治疗腰椎间盘突出症疗效显著,操作方便、安全,值得推广。     

感染性恶性溃疡的细菌学

从70例伴有感染性溃疡的癌症病人中,采取溃疡伤口棉拭标本或坏死组织标本共70份,血液标本70份,立即接种于适当培养基[如分离厌氧菌用疱肉基、血琼脂、含新霉素(100μg/ml)血琼脂、含卡那霉素(75μg/ml)、万古霉素(2.5μg/ml)的BM琼脂;分离需氧菌用血琼脂、MacConKey琼脂、甘露醇高盐琼脂及结晶紫血琼脂;血培养用脑心浸汤及硫乙醇酸盐肉汤]上,在需氧(空气中加入10%CO_2)及厌氧(90%H_2、10%CO_2)环境中,置37℃孵育1—7天,并将分离细菌进行鉴定。70例并发感染性溃疡的癌症病人,包括乳癌30     

用硝基—PAPS和微孔板测定血清锌

作者利用氰化钾与血清中的锌和其他干扰离子结合成氰化物,再用水合氯醛使锌离子首先游离出来,与硝基—PAPS 反应呈色。仪器微板读数仪(双波长分光光度计,干涉滤光片577nm 和650nm,半峰宽为7和12nm)MPRA4i 型。微量混合器。微孔板(扁平底、8或16孔)。试剂(1)Tris 缓冲液(0.4mol/L,pH8.1)。(2)KEN 溶液(0.5mol/L)。(3)GT 溶液(pH8.1):盐酸胍基67g,加Tris 缓冲液90ml 液解后,用3mol/L NaOH 或3mol/L HCl 调节至pH8.1,然后用Tris 缓冲液补足至100ml。贮于塑料瓶中,室温至少可稳定一个月。(4)GTAC 溶液:L-抗坏血酸钠盐20mg 溶解于10ml GT 溶液中,加KCN 溶液0.1     

组织中利什曼原虫的简易定量法

本文作者将血琼脂培养基改进为液体培养基，从而使组织中利什曼原虫的培养更访易且可定量。培养基为完全Schneider培基。每100ml内含85．4ml，Schneider培基（Sigma，St．Louis，MO；S－9895）；10ml加热灭活的胎牛血清（Sigma，F－2442）；2ml新鲜除菌人尿；0．5ml1MHEPES溶液，pH7．3；1ml酚红溶液（每毫升含0．5ing酚红，Sig－ma，P-5530）；抗生素：1ml青霉素／链霉素溶液及0．1ml庆大霉素溶液（每毫升含庆大霉素50mg）。接种及培养待检材料经处理（Titusetal.1985）后置96孔板内，每个相同的浓度加10个孔。用上述完全Schneide…     

用手工操作和日立726自动分析仪—邻苯三酚红-钼酸盐法测定尿蛋白

测定尿蛋白的方法已有很多报道,然而,这些方法的线性范围和重复性不完全令人满意.本文作者对Fujita等应用邻苯三酚红——钼酸盐与蛋白质显色反应的方法进行了改良.本法是根据颜料与蛋白质在pH2.5条件下相结合,光谱吸收峰由460nm改变为600nm.试剂:①PR溶液(1.5mmol/L):邻苯三酚红(PR)60mg溶于100ml甲醇中.⑦钼酸盐溶液(10mmol/L):钼酸钠(2H_2O)0.24g溶于100ml蒸馏水中.③PR—钼酸盐试剂:丁二酸5.9g,草酸钠0.14g,苯甲酸钠0.5g,溶于900ml重蒸馏水中,加PR溶液40ml,钼酸盐溶液4ml,用0.1mol/LHCl调节pH至2.5.最后用蒸馏水稀释至1000ml.操作:手工操作,分别取尿液标本或1g/L白蛋     

草药鸡脑王对痢疾杆菌作用的观察

民间草药鸡脑王对细菌性痢疾有良好的疗效,我们从细菌学和免疫学两方面对其进行实验研究,现报告如下. 1 材料与方法 1．1 细菌学实验 1．1．1 药物 取已提纯的鸡脑王总碱1g,溶于1mol盐酸溶液中,加蒸馏水至100ml,使最终浓度为1000mg／dl,高压灭菌备用. 1．1．2 试验菌 福氏痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌,由本院微生物教研组供给. 1．1．3 培养基 由浙江省军区后勤检疫所提供. 1．1．4 方法 1．1．4．1 海绵碟法 在pH7．4的营养琼脂平板上分别划线,接种经37℃孵育6～8小时的试验菌肉汤培养液.同时将浸有不同浓度的鸡脑王总碱(10mg／ml、5mg／ml、…