水蛭提取液对凝血酶诱导血管内皮细胞释放TFPI及表达TF的影响

目的：探讨水蛭提取液对凝血酶诱导血管内皮细胞（VEC）释放组织因子途径抑制物（TFPI）及表达组织因子（TF）的影响。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）随机分为5组,分别给予不同处理,培养12 h后,取上清液测定 TFPI活性,取细胞冻融液测定TF活性。结果凝血酶可促进血管内皮细胞表达TF,较空白对照组明显增高（P〈0.01）,水蛭各剂量组与凝血酶刺激组比较血管内皮细胞表达TF明显降低（P〈0.01）。与空白对照组比较,凝血酶刺激组可抑制血管内皮细胞释放 TFPI（P〈0.01）,水蛭各剂量组与凝血酶刺激组比较能明显促进血管内皮细胞释放 TFPI（P〈0.01）。结论水蛭提取液能抑制凝血酶诱导血管内皮细胞表达TF,并对抗凝血酶抑制VEC释放TFPI,其作用机制可能与水蛭抗凝、抗血栓形成以及对心脑血管疾病的治疗作用有关。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体对2型糖尿病大鼠内皮依赖性血管舒张功能的影响

目的 观察TNF相关的凋亡诱导配体（TRAIL）对T2DM大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响及其可能的机制. 方法 选取4周龄雄性SD大鼠,分为正常对照组（NC,n=10）与模型组（n=40）,随机将模型组分为T2DM亚组（n=10）与TRAIL亚组（TRAIL,n=10）.TRAIL干预6周后,检测各组FPG及FIns水平,计算ISI.检测NC组与TRAIL亚组血清TRAIL水平.观察大鼠离体主动脉内皮依赖性血管舒张反应,并检测主动脉一氧化氮（NO）含量、内皮型一氧化氮合酶活性（eNOS）.结果 与NC组比较,T2DM亚组FPG、FIns水平升高（P＜0.01）,ISI降低（P＜0.01）,血清TRAIL水平降低（P＜0.01）;血管内皮功能失调,乙酰胆碱（Ach）引起的血管最大舒张率降低（P＜0.01）,血管中NO含量及eNOS阳性表达降低（P＜0.01或P＜0.01）.TRAIL亚组血管Ach的舒张反应改善（P＜0.01）;血管中NO含量增加且eNOS阳性表达上调（P＜0.05或P＜0.01）;FPG、FIns降低,ISI提高（P＜0.01）. 结论 TRAIL改善T2DM大鼠内皮依赖性血管舒张功能的同时,可促进具有血管保护作用的NO生成.     

连续性血液净化对多器官功能障碍综合征患者凝血功能的影响

目的：观察连续性血液净化治疗多器官功能障碍综合征（MODS）患者过程中血浆组织因子（TF）、组织因子途径抑制物（TFPI）的变化，并分析影响其变化的相关因素。方法：16例MODS患者随机分为两组，一组给予无肝素连续性静脉-静脉血液透析滤过（CVVHDF）治疗，另一组给予普通肝素抗凝的CVVHDF治疗。观察患者行CVVHDF治疗8h过程中的变化，在治疗0、15min、1h．2h．8h时检测血浆TF及TFPI水平，同时测定血清肿瘤坏死因子（TNF-α、IL-1β水平，并分析影响TF、TFPI水平变化的相关因素。结果：MODS患者TF、TFPI水平较正常对照组明显升高（P〈0．01），TFPL／TF水平较正常对照组显著降低（P〈0．01）。CBP治疗过程中，两组患者血浆TF呈下降趋势，而TFPI呈上升趋势。TFPL／TF水平随着CBP时间的延长呈上升趋势。肝素组TFPL／TF上升幅度更为明显，与无肝素组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。无肝素组CBP治疗MODS患者不同时间点血清TNF-α、IL-1β与血浆TF均呈正相关（P〈0．05）而在肝素组无明显相关（P〉0．05）。结论：MODS患者分泌TF、TFPI增加，TFPL／TF降低，CBP可部分改善TFPL／TF比例，与CBP清除TNF-α与IL-1β相平行。肝素可增加TFPI的分泌。     

重型颅脑外伤并脓毒血症患者的血清TF、TFPI、hs-CRP变化及意义

目的 探讨重型颅脑外伤并脓毒血症患者的血清组织因子途径抑制物（TFPI）、组织因子（TF）和高敏C反应蛋白（hs-CRP）变化及临床意义.方法 选择重型颅脑外伤并脓毒血症患者33例（观察组）,同期健康献血员15例（对照组）,采用ELISA法检测观察组感染早期（外伤后3d内）、中晚期（外伤后3～7d）血清TFPI、TF、hs-CRP,对照组在查体时检测上述指标.结果 与对照组比较,观察组感染早期TFPI、TF及hs-CRP明显升高,感染中晚期TF、hs-CRP升高（P均＜0.01）;与感染早期比较,感染中晚期TF、hs-CRP升高,TFPI降低（P均＜0.05）.结论 重型颅脑外伤并脓毒血症患者血清TF、TFPI及hs-CRP动态变化可作为脓毒血症病情变化的监测指标.     

全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞释放NO＼TFPI及表达TF的影响

目的探讨全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞释放一氧化氮（N0）、组织因子途径抑制物（TFPI）及表达组织因子（TF）的影响。方法对传代培养的人脐静脉细胞（HUVEC）（2代～3代）分别给予不同的处理,取上清液测定N0、TFPI,取细胞冻融液测TF活性。结果与空白对照组比较,凝血酶组能明显抑制血管内皮细胞释放TFPI（P〈0．01）,与凝血酶纽比较,全蝎纯化液各剂量组能拮抗TFPI的降低（P〈0．05）。凝血酶促进血管内皮细胞表达TF,较对照组明显增高（P〈0．01）,全蝎纯化各剂量组较凝血酶组则明显降低（P〈0．01）。全蝎纯化液各剂量组促进血管内皮细胞释放N0,较对照组、凝血酶组明显增高（P〈0．01）。结论全蝎纯化液能抑制凝血酶诱导血管内皮细胞表达TF,可拮抗凝血酶抑制TFPI释放,促进血管内皮细胞释放N0,提示全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞的损伤具有保护作用。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响

目的观察2型糖尿病（T2DM）大鼠胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能和一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（eNOS）的变化及罗格列酮（RSG）治疗对其内皮功能的影响。方法SD大鼠经高糖高脂喂养6周后予小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型，糖尿病大鼠又分为对照（DM）组和RSG治疗组，RSG组用RSG干预8周，另选正常大鼠为正常对照（NC）组。实验终止时用正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率（GIR）评价胰岛素抵抗，观察大鼠离体主动脉内皮依赖性血管舒张反应和主动脉NO、eNOS的变化。结果T2DM大鼠GIR、胸主动脉内皮依赖性血管舒张反应、主动脉NO含量及eNOS阳性表达较NC组显著降低（P〈0、01），RSG治疗后上述指标均显著升高（P〈0．05）。结论T2DM大鼠存在内皮依赖性血管舒张功能紊乱，RSG治疗可改善内皮功能，增强NO水平和eNOS的活性。     

组织因子及其抑制物在急性冠脉综合征中的作用研究

探讨急性冠脉综合征发生中血浆组织因子 (TF)及其抑制物 (TFPI)含量的动态变化及其血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)captopril干预治疗的作用。用ELISA方法检测急性心肌梗塞 (AMI)不稳定心绞痛(UA)患者入院后即刻、第 1天、2天、3天、1周、2周、3周不同时间点血浆TF及TFPI的含量。 1 50例AMI患者中 ,AMI用ACEI干预治疗 (AMI +ACEI组 ) 2 5例 ,常规治疗组 (AMI组 ) 2 5例 ,UA组 2 8例 ,血浆TF、TFPI水平均明显高于正常对照组 (P <0 0 0 1)。AMI+ACEI组血浆TF水平发病后第 3天开始下降 ,于 2周时间点明显下降 ,同AMI组及UA组比较有显著的差异 (P <0 0 0 1)而较对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5) ,AMI +ACEI组TFPI含量无明显下降 ,持续稳定在较高水平。 2 TF与TFPI呈正相关 (P <0 .0 1) (r=0 549)。组织因子及其抑制物在急性冠脉综合征中起重要作用。ACEI药物降低血浆TF水平对TFPI无影响 ,降低TF/TFPI比值     

血清瘦素与早发冠心病及血浆组织因子的关系

目的:探讨血清瘦素与早发冠心病及血浆组织因子的关系。方法:根据冠状动脉造影结果将200例患者分为早发冠心病组(120例)和对照组(80例)。应用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测患者血清瘦素、血浆组织因子(TF)及组织因子途径抑制物(TFPI)水平。结果:早发冠心病组血清瘦素、血浆TF、TFPI及TF/TFPI值均高于对照组(均P<0.01);Pearson相关分析显示,血清瘦素水平与早发冠心病患者血浆TF、TFPI、TF/TFPI均呈正相关(均P<0.01);多元逐步回归显示,血清瘦素和早发冠心病患者血浆TF水平呈独立正相关(P<0.01)。结论:早发冠心病患者表现为高瘦素血症,高瘦素水平与TF的表达及早发冠心病的发生有关。     

维生素E对组织因子及其抑制物在冠心病中的干预作用

目的 :探讨冠心病 (CHD)的不同类型中血浆组织因子 (TF)及其抑制物 (TFPI)含量的差异变化及维生素E对急性心肌梗死 (AMI)干预作用。方法 :用ELISA方法检测CHD患者 [包括稳定型心绞痛 (SAP)、不稳定型心绞痛 (UAP)、AMI]入院时及治疗 2周时血浆TF、TFPI含量。结果 :①SAP组血浆TF、TFPI水平及TF/TF PI比值均高于正常对照组 ,但差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,且治疗前后无明显变化 (P >0 .0 5 )。②UAP组、AMI组血浆TF、TFPI水平及TF/TFPI比值明显高于正常对照组 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,但两组常规治疗前后差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。③AMI加维生素E组干预治疗后TF值显著下降 (P <0 .0 1) ,与正常对照组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,TFPI干预治疗后无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,而TF/TFPI比值明显降低 (P <0 .0 1)。④各组TF与TFPI呈明显正相关 (P<0 .0 5 ,r=0 .4 32 )。结论 :TF及TFPI在CHD尤其是急性冠状动脉综合征的发生中起重要作用 ,维生素E的干预显著降低患者血浆TF水平 ,降低TF/TFPI比值而对TFPI无影响。     

急性心肌梗死发作期间组织因子途径变化的观察

目的：观察急性心肌梗死（AMI）发作期间组织因子途径的变化。方法：69列临床确诊的AMI患和30例健康中老年人（作对照）被纳入研究对象。血浆中的组织因子（TF）和组织因子途径抑制物（TFPI）的活性测定采用发色底物法,TF和TFPI抗原采用ELISA法。激活的凝血因子Ⅶa采用重组可溶性TF法。凝血因子Ⅶ促凝活性采用活性测定法。结果：与对照组相比,AMI患血浆中TF、TFPI的活性均显增加[分别为5．67（1．77－54．95）mU/ml vs2.36(1.13-6.42)mU/ml,P＜0．01;224．85（86．65－512．12）％vs 138．75（51．72－297．2）％,P＜0．01]。同时TF、TFPI的抗原、凝血因子Ⅶa的活性亦有明显升高,但凝血因子Ⅶ促凝活性无显变化。结论：AMI发作期间体内组织因子途径被启动,血液呈现高凝状态。     

急性冠状动脉综合征患者组织因子途径抑制物基因V264M的多态性

目的探讨在中国人群中组织因子途径抑制物基因第9外显子874G→A(V264M)多态性与急性冠状动脉综合征的关系,以及各基因型对血浆游离组织因子途径抑制物水平和冠状动脉病变严重程度的影响。方法选取经冠状动脉造影检查的136例急性冠状动脉综合征患者和106例健康对照者,用聚合酶链反应和限制片长多态性方法分析组织因子途径抑制物(V264M)基因型。利用酶联免疫吸附试验检测部分患者血浆游离组织因子途径抑制物水平。结果急性冠状动脉综合征组血浆游离组织因子途径抑制物水平明显高于正常组(P<0.05),两组的V264M基因型和等位基因的分布趋势相同,差异无显著性(P>0.05)。A等位基因携带者的游离组织因子途径抑制物水平低于GG基因型者(6.9±5.1比14.3±9.5),而冠状动脉病变程度不受V264M基因多态性的影响(χ2=0.413,P>0.05)。结论中国人群中存在V264M多态性,它对血浆游离组织因子途径抑制物水平可能有影响,但未发现V264M多态性与急性冠状动脉综合征发病存在相关性。     

切应力对内皮细胞组织因子表达上调的影响及其作用机制

研究切应力对内皮细胞组织因子表达的影响及其作用机制。利用原位杂交和免疫组织化学观察组织因子基因、Sp1和Egr 1的mRNA转录及蛋白表达。切应力作用采用平行板流动腔系统给予。结果发现 ,在静置培养内皮细胞中 ,组织因子基因mRNA及蛋白表达极低 ,促凝活性也低。Sp1蛋白表达在胞核较高 ,Sp1mRNA表达在胞浆较高。Egr 1在胞核和胞浆均无表达或表达极低。在切应力 (1.2、2 .4及 4 .8Pa)作用后 ,内皮细胞胞浆组织因子基因mRNA转录和蛋白合成及组织因子促凝活性升高 ,与对照组比较均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。Sp1和Egr 1基因mRNA转录和蛋白合成均有增加 (P <0 .0 5 ) ,但以Egr 1增加更显著 (P <0 .0 5 ) ,其变化趋势与组织因子基因mRNA转录、组织因子基因蛋白合成、组织因子促凝活性的变化趋势相同。结果提示 ,切应力是内皮细胞组织因子基因表达上调的触发因素之一 ,其触发机制与转录因子Egr 1和Sp1介导有关。     

Viral myocarditis and coagulopathy: increased tissue factor expression and plasma thrombogenicity

We investigated the effects of viral infection on Tissue Factor (TF) expression and activity in mice within the myocardium to understand increased thrombosis during myocarditis. Mice were infected with coxsackie virus B3 (CVB3) and the hearts were collected at day 4, 8 and 28 post infection (p.i.). Myocardial TF expression and cellular activity as well as plasma activity were analyzed from CVB3 infected mice by Western blot, chromogenic Factor Xa generation assay, in situ staining for active TF and immunohistochemistry. In addition to TF expression, hemodynamic parameters were measured during the time course of infection. Furthermore, we analyzed myocardial tissues from patients with suspected inflammatory cardiomyopathy. TF protein expression was maximally 5-fold elevated 8 days p.i. in mice and remained increased on day 28 p.i. (P < 0.001 vs. non-infected controls). Alterations in TF expression were associated with fibrin deposits within the myocardium. The TF pathway inhibitor protein expression in the myocardium was not altered during myocarditis. Active cellular TF co-localized with CD3 positive cells and VCAM-1 positive endothelial cells in the myocardium. The TF expression was positively correlated with the amount of infiltrating CD3 and Mac3 positive cells (Spearman-Rho ρ = 0.749 P < 0.0001 for CD3⁺ and ρ = 0.775 P < 0.0001 for Mac3⁺; N = 35). Increased myocardial TF expression was associated with a 2-fold elevated plasma activity (P < 0.05 vs. non-infected controls). In the human hearts, the TF expression correlated postively with an endothelial cell activation marker (ρ = 0.523 P < 0.0001 for CD62E; N = 54). Viral myocarditis is a hypercoagulative state which is associated with increased myocardial TF expression and activity. Upregulation of TF contributes to a systemic activation of the coagulation cascade.     

不同剂量辛伐他汀对急性冠状动脉综合征患者组织因子和组织因子途径抑制物的影响

目的观察不同剂量的辛伐他汀对急性冠状动脉综合征患者血浆组织因子和组织因子途径抑制物的影响。方法将88例急性冠状动脉综合征患者分为对照组28例、辛伐他汀20 mg组29例和辛伐他汀40 mg组31例,在入院第2天和在平均治疗8天以后清晨空腹采血,用酶联免疫吸附法测定血浆中的组织因子活性和组织因子途径抑制物的水平。结果辛伐他汀治疗的两个组组织因子活性较治疗前明显降低,分别从0.47±0.58 IU/L下降到0.20±0.30 IU/L和从0.59±0.77 IU/L下降到0.36±0.55 IU/L(P<0.05),对照组组织因子活性无变化;辛伐他汀40 mg组组织因子途径抑制物的水平增高,从263±203μg/L增加到369±279μg/L(P<0.05),但其他两组组织因子途径抑制物水平在治疗前后无差异。结论20 mg和40 mg辛伐他汀短期治疗急性冠状动脉综合征患者均能使组织因子活性降低,40 mg辛伐他汀治疗时使组织因子途径抑制物水平增高,提示他汀对组织因子和组织因子途径抑制物的作用可能是其抗栓机理之一。     

Von willebrand factor antigen in assessment of vasculitis in patients with connective tissue diseases

Summary Von Willebrand factor antigen (vWF:Ag) is synthesized and secreted by endothelial cells. In the present study we tried to assess the relationship between plasma level of vWF:Ag and vascular damage in patients with vasculitis. The study was carried out on 59 patients with connective tissue diseases. Vasculitis was diagnosed by biopsies of the skin. The patients with vasculitis had a significantly elevated level of vWF: Ag; however, no significant correlation between the amount of plasma vWF:Ag and the degree of vasculitis was found. The obtained results show that the plasma level of vWF: Ag may reflect the presence of vascular, especially endothelial, damage in patients with connective tissue diseases.     

阿托伐他汀对动脉粥样硬化兔肿瘤坏死因子α和组织因子水平的影响

目的 研究阿托伐他汀对动脉粥样硬化兔血浆和外周血单核细胞表达肿瘤坏死因子α和组织因子水平的影响.方法 采用高胆固醇饮食法建立动脉粥样硬化兔模型(n=12),随机给予阿托伐他汀或淀粉4周,同时6只兔以普通饲料喂养.12周后,取各组兔主动脉测定斑块内膜面积,分离外周血单核细胞培养24 h.采用酶联免疫吸附法检测血浆和细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α及细胞膜组织因子水平.结果 阿托伐他汀能降低主动脉斑块面积百分数、血浆和外周血单核细胞肿瘤坏死因子α及组织因子水平(均P<0.01);主动脉斑块面积百分数、血浆及外周血单核细胞肿瘤坏死因子α和组织因子水平两两之间呈正相关(均P<0.01).结论 阿托伐他汀在降低胆固醇同时,还可通过降低肿瘤坏死因子α和组织因子水平发挥抗动脉粥样硬化作用.     

血小板CD40配体对内皮细胞表达组织因子的影响

目的探讨活化血小板CD40配体对内皮细胞表达组织因子、组织因子抑制物的影响及其分子机制。方法建立活化血小板与人脐静脉内皮细胞的共孵育体系(细胞比例10∶1),观察内皮细胞组织因子及其抑制物表达的变化,以及阻断CD40-CD40配体相互作用对上述效应的影响。结果活化血小板与脐静脉内皮细胞共育8 h后,内皮细胞组织因子mRNA及蛋白表达显著增高,而应用抗CD40配体的抗体和抗CD40抗体可分别抑制其表达(P<0.05)。但是组织因子抑制物mRNA无明显变化。结论活化血小板可通过其表达的CD40配体分子诱导内皮细胞产生组织因子,但并不能增强内皮细胞组织因子抑制物的表达,此效应对不稳定性斑块的形成可能具有促进作用。     

非小细胞肺癌患者血浆组织因子和血管内皮生长因子水平的检测及临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌患者血浆组织因子(TF)及血管内皮生长因子(VEGF)水平与临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组化方法,检测127例非小细胞肺癌患者血浆TF和VEGF水平,将检测结果与临床病理指标进行统计学分析。结果:非小细胞肺癌组血浆TF和VEGF水平显著高于肺部良性肿块组和对照组(P<0．01)。不同性别、组织类型和分化程度的非小细胞肺癌患者血浆TF和VEGF水平差异无统计学意义, TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者TF和VEGF水平较Ⅰ、Ⅱ期水平显著增高(P<0．01),显示VEGF、TF水平随肺癌TNM分期增加而升高。非小细胞肺癌患者血浆TF和VEGF水平具有显著的正相关(r=0．402,P<0．01)。结论:TF和VEGF在非小细胞肺癌的肿瘤侵袭和转移中起重要作用,其血浆水平可作为预后的参考指标。进一步研究TF和VEGF相互作用机制对于阐明肿瘤进展和恶化的实质,寻找有效的干预途径具有重要意义。     

Cocaine unbalances endothelial tissue factor and tissue factor pathway inhibitor expression

Cocaine consumption can lead to myocardial infarction. Tissue factor (TF) has been implicated in acute coronary syndromes, and the balance of TF and tissue factor pathway inhibitor (TFPI) determines initiation of thrombus formation. This study was designed to investigate the effect of cocaine on endothelial TF and TFPI expression. Cocaine (10(-8)-10(-5) mol/l) increased thrombin-induced TF expression by 24% at 10(-7) mol/l (P < 0.001) without affecting basal TF expression. In contrast, cocaine reduced endothelial TFPI expression by 47% at 10(-7) mol/l (P < 0.01). Moreover, thrombin impaired endothelial TFPI expression, and cocaine (10(-8) mol/l) further reduced TFPI expression by 33% as compared to thrombin (P < 0.02). These effects occur at cocaine concentrations usually present in plasma of consumers. Given the importance of TF in the pathogenesis of acute coronary syndromes, TF induction in conjunction with TFPI suppression may be relevant for the increased frequency of myocardial infarction observed in cocaine consumers.     

结缔组织生长因子与血管钙化

结缔组织生长因子是一种近十年来研究较多的新的细胞因子,其在与血管钙化密切相关的动脉粥样硬化、慢性肾脏疾病和糖尿病肾病等疾病的病变区域中表达增加,本文对结缔组织生长因子在血管钙化的发生发展中所起的作用作一综述。