骨髓基质干细胞移植对脑损伤大鼠神经行为学和血管再生的影响

目的探索移植骨髓基质干细胞(BMSCs)对局灶性脑损伤大鼠的神经功能修复的作用及血管再生的影响,探讨BMSCs移植促进大鼠脑损伤修复的机制。方法 30只大鼠制备大鼠局灶性脑损伤动物模型,随机分为假手术组、脑损伤组和BMSCs移植组,每组10只大鼠。取供体鼠BMSCs,体外扩增,DAPI荧光标记。在脑立体定向仪引导下将BMSCs移植到脑损伤大鼠局部损伤灶边缘,于3d、7d及14d通过观察大鼠神经行为能力的变化,评价移植细胞后大鼠神经功能的修复情况;14d后取脑组织荧光显微镜观察移植细胞存活的情况,采用免疫组化法检测脑组织微血管密度(MVD)来评估血管再生情况、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(Flt-1、Flk-1)的蛋白表达情况。结果脑损伤组和BMSCs移植组于移植后3d时神经行为学评分差异无统计学意义(P>0.05),而在移植后7d、14d,BMSCs移植组与脑损伤组在神经行为学评分指标上差异有统计学意义(P<0.05)。BMSCs移植组与脑损伤组比较,脑组织微血管密度明显增加,VEGF和Flt-1、Flk-1表达明显增加。结论骨髓基质干细胞移植后可促进脑损伤大鼠神经功能的恢复,其机制可能与其增加VEGF和Flt-1、Flk-1表达促进血管再生有关。     

重组人粒细胞集落刺激因子对脑缺血再灌注大鼠的神经保护和血管再生作用

目的利用局灶性脑缺血再灌注模型,观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对脑缺血大鼠的神经保护和血管再生作用。方法健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组,生理盐水对照组,rhG-CSF治疗组。线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,模型缺血90min时再灌注,治疗组予rhG-CSF 50μg/(kg·d),连续5d。每只大鼠均于治疗结束后分别进行神经功能缺损评分。采用免疫组化法检测CD105、VEGF的表达。结果 (1)病死率:对照组病死率为53.85%,rhGCSF治疗组为25%,差别有统计学意义(P0.05)。(2)神经功能评分:治疗后24h,对照组和治疗组较假手术组评分均明显上升,有显著性差异(P0.05)。治疗后7d和14d,治疗组较对照组神经功能恢复较好(P0.05)。(3)免疫组化结果:对照组及治疗组大鼠的CD105、VEGF阳性表达高于假手术组,治疗组的CD105、VEGF阳性表达要高于假手术组和对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 rhG-CSF具有神经保护作用,能促进缺血区脑组织血管再生,其神经保护作用可能与促进血管再生有关。     

活性氧在脑缺血-再灌注损伤后动态表达

目的观察活性氧(ROS)在大鼠脑缺血—再灌注损伤不同时间缺血灶周区皮质的动态表达。方法健康成年SD雄性大鼠(n=55),随机分成假手术组(n=5)和模型组(n=50),模型组按再灌注时间分为10个组,即脑缺血—再灌注1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d、14d和28d组,每组5只大鼠。通过阻塞大脑中动脉(MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血—再灌注损伤模型,采用改良神经功能严重性评分(m NSS)对不同时间点大鼠的神经功能进行评价,采用流式细胞术检测缺血灶周区ROS和血管内皮生长因子(VEGF)动态时空表达。结果假手术组未见神经功能损伤,评分为0。脑缺血—再灌注1h大鼠出现神经损伤,3h~1d时症状加重,3~7d时症状有所改善,14~28d症状明显好转。假手术组有少量ROS和VEGF表达,脑缺血再灌注损伤后1h缺血灶周区ROS急剧上升,3~6h有所下降,但仍远高于假手术组,后逐渐下降,3d时降到最低,与假手术组相仿,随后迅速上升,5d时已超过6h数值,7d时接近1h高度,后ROS表达呈平台期,VEGF表达趋势与其相仿,ROS表达与神经功能评分呈负相关。结论 ROS可能在脑缺血损伤中起双相作用,在超早期参与脑损伤过程,后期可能参与脑修复作用。     

美卡素对急性脑缺血再灌注大鼠海马CA1区PPARγ的影响

目的探讨美卡素对急性脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用。方法将72只雄性SD大鼠分为4组:A组(正常组)、B组(假手术组)、C组(模型组)、D组(干预组)。大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型利用改良Zea Longa线栓法制备,免疫组化染色检测PPARγ表达变化,采用Zea Longa 5分制标准进行大鼠神经行为学评分。结果 A、B组海马CA1区PPARγ均有表达,神经行为学评分0分,差异无统计学意义(P>0.05)。C组PPARγ表达减少,神经行为学评分明显增高,与A、B组相比差异有统计学意义(P<0.05)。D组与C组相比PPARγ表达增多,神经行为学评分降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论美卡素可以增加急性缺血再灌注大鼠脑内PPARγ的表达,降低神经行为学评分,具有脑保护作用。     

银杏内酯和白果内酯对大鼠脑缺血再灌注损伤后VEGF的表达的影响

目的研究银杏内酯(ginkgolides,GK)和白果内酯(bilobalide,BB)对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨GK和BB能否通过影响血管生成实现神经保护作用。方法制备Wistar大鼠大脑中动脉缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血2 h后再灌注12 h。将实验动物随机分为4组:假手术组(Sham组)、MCAO+盐水对照组(Saline组)、MCAO+白果内酯组(10 mg/kg,BB组)和MCAO+银杏内酯组(10 mg/kg,GK组)。缺血2 h再灌注12 h后,对大鼠神经功能缺损评分。通过TTC染色观察脑梗死体积变化,应用免疫组化及Western blot检测各组大鼠缺血侧脑皮质区VEGF及其受体VEGFR-1的表达。结果与Saline组相比,GK组和BB组动物神经行为学评分明显降低(P<0.05),脑梗死体积明显减小(P<0.05);与Saline组相比,GK组和BB组VEGF阳性细胞表达数目及蛋白表达均明显增高(P<0.05),而VEGFR-1阳性细胞数表达数目增多,其蛋白表达量未见明显变化。结论银杏内酯和白果内酯对脑缺血/再灌注损伤的保护作用可能与促进VEGF的表达有关。     

高压氧对大鼠脊髓损伤后血管内皮生长因子表达的影响

目的通过观察高压氧对成年大鼠脊髓损伤后不同时期血管内皮生长因子（VEGF）表达变化的影响,探讨高压氧对脊髓损伤的治疗作用机制。方法雌性SD大鼠55只,体质量250-300g。随机分为脊髓损伤组（对照组）、脊髓损伤＋高压氧治疗组各25只（n=5）,假手术组5只。采用改良A llen＇s法制作T8脊髓打击伤动物模型,各组分别于伤后1 d、1 w、2 w、4 w和8 w进行行为学观察,运动功能评分方法（BBB）评分后损伤部位取材,免疫组化染色及图像分析检测组织中VEGF的表达。结果假手术组的评分21分,治疗组和对照组与假手术组比较在各时间点评分明显降低,治疗组在各时间段BBB评分明显高于对照组（P〈0.05）。假手术组显示除脊髓中央管周围可见到极少量VEGF表达外,其它部位几乎不表达;对照组脊髓损伤1 d VEGF在大鼠脊髓损伤区及损伤周边区高表达,主要出现在软脊膜和脊髓灰、白质血管壁上的血管内皮细胞胞浆内,脊髓灰、白质内的神经胶质细胞和巨噬细胞胞浆内也出现表达,一般脊髓白质中更为多见,1 w后下调,而治疗组1 d至2 wVEGF的表达较对照组明显增加,差异有显著性（P〈0.05）,4 w、8 w时各组比较无统计学差异。结论急性脊髓损伤可上调VEGF在脊髓血管内皮细胞、胶质细胞和巨噬细胞内的表达,高压氧可能通过促进VEGF表达,促进血管内皮细胞生长从而对脊髓损伤起到治疗作用。     

贝伐单抗对放射性脑损伤大鼠的治疗作用

目的通过建立大鼠放射性脑损伤模型,研究贝伐单抗对放射性脑损伤的治疗作用及其机制。方法将20只SD大鼠随机分成实验组(n=10)和对照组(n=10),均采用大剂量伽玛射线照射,在1个月内建立放射性脑损伤模型。建模后,实验组大鼠采用贝伐单抗干预,对照组采用生理盐水干预。通过对大鼠体质量、行为学评分、MRI检查和脑组织免疫组化检测,进而评估贝伐单抗对放射性脑损伤大鼠的治疗作用。结果实验组体质量较对照组有升高,行为学评分增加(P0.05)。MRI检查显示:对照组可见大鼠全脑弥漫性肿胀,实验组可见脑室系统增大,水肿带消退。对照组大鼠脑组织可见血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及CD34过量表达,实验组VEGF、CD34无表达,VEGFR2有少量表达。结论大剂量伽玛射线照射可在短期内迅速建立弥漫放射性脑损伤模型,证实贝伐单抗可通过拮抗VEGF的生物学效应来治疗放射性脑损伤。     

可乐定对永久性脑梗死大鼠的神经保护作用及对神经干细胞增生的影响

目的研究可乐定对永久性脑梗死大鼠的神经保护作用和对神经再生相关因子含量及神经干细胞增生的影响。方法成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为假手术组、缺血对照组、可乐定治疗组,制作大鼠永久性大脑中动脉栓塞模型,治疗组于术后3 h腹腔注射可乐定50μg/kg、100μg/kg(每天一次,连续5 d,或至实验终点);缺血对照组给予等剂量的生理盐水,通过神经行为学评分、尼氏染色、脑梗死体积测定、ELISA、BrdU/nestin免疫荧光双标等方法,分别观察可乐定治疗对大鼠神经损伤、功能恢复、神经再生相关因子表达水平、脑内相关部位神经干细胞增生的影响。结果与缺血对照组相比,可乐定治疗能改善大鼠神经行为学评分、减少损伤侧脑组织神经细胞丢失、缩小脑梗死体积、使得增生的神经干细胞数目及神经再生相关因子的含量进一步增加。结论可乐定对永久性脑梗死大鼠脑组织具有神经保护作用,且能促进神经再生相关因子在脑组织中的表达、诱导神经干细胞的增生,从而促进大鼠缺血脑损伤后的神经功能恢复。     

鼠神经生长因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经修复的作用

目的 探讨鼠神经生长因子(NGF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经修复的作用.方法 新生7日龄(SD)大鼠72只随机分成假手术组、模型组、治疗组,模型组腹腔注射生理盐水,治疗组腹腔注射NGF,采用免疫组化检测术后不同时间点(3 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d)血管内皮生长因子(VEGF)及神经丝蛋白(NFP)的表达.结果 假手术组VEGF呈持续的低程度表达,HIBD后治疗组各时间点VEGF的表达均高于模型组,3 h～3 d治疗组的VEGF阳性区平均积分光密度(IOD)值大于模型组(P<0.05),且高峰提前至3 h,2组间7 d及14 d VEGF表达无统计学差异.HIBD后,3 h～1 d模型组和治疗组的NFP阳性区平均IOD值均显著低于假手术组(P<0.01),3 d、7 d及14 d治疗组NFP阳性区平均IOD值显著高于模型组(P<0.01).结论 NGF对 HIBD的神经修复机制之一,可能是通过上调VEGF及NFP的表达而实现.     

外源性血管内皮生长因子对大鼠脑血肿周围血管新生及神经功能恢复的影响

目的 研究外源性血管内皮生长因子(VEGF)对大鼠脑出血后血肿周围区新生血管、GAP - 43表达及神经功能恢复的影响,探讨外源性VEGF对脑出血的保护机制.方法 采用二步自体血脑内注入法建立脑出血动物模型.36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组.治疗组于术后8-15 d连续经腹腔给予外源性VEGF,给药后15d和30 d分别采用免疫组化法检测CD34、GAP -43的表达.用CD34的表达来反映血管新生情况,用GAP - 43、Longa神经功能评分反映神经损伤及修复情况.结果 治疗组CD34阳性微血管密度及血管场面积在15 d和30 d均高于模型组及假手术组(P＜0.01).治疗组15 d及30 d的GAP - 43阳性细胞表达率及阳性颗粒所占的面积比上调,与模型组、假手术组比较差异有统计学意义(P＜0.01),Longa评分提示治疗组神经功能恢复提前于模型组(P＜0.01).结论 外源性VEGF可促进新生血管生长,提高受损中枢神经系统GAP- 43表达,加快神经功能的恢复.     

特异性抑制JAK2/STAT3信号通路对大鼠急性脑缺血再灌注损伤后COX-2和VEGF表达水平的影响

目的 探讨特异性抑制蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与激活子3(JAK2/STAT3)信号通路对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法 采用线栓法制备大鼠急性大脑中动脉闭塞再灌注模型; 大鼠随机分为假手术组、模型组和给药组; 给药组大鼠于再灌注前5 min腹腔注射JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490(1 mg/kg),其余2组给予等量生理盐水; 再灌注24 h后各组行神经功能缺损评分,用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测大鼠脑梗死体积,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脑组织中JAK2、STAT3、环氧合酶2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA相对表达水平,用蛋白印迹(Western blot)检测脑组织磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、COX-2和VEGF的蛋白相对表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、JAK2和STAT3的mRNA,p-JAK2和p-STAT3蛋白、COX-2的mRNA和蛋白相对表达水平均显著升高(P<0.05),VEGF的mRNA和蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05); 与模型组比较,给药组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、JAK2和STAT3的mRNA、p-JAK2和p-STAT3蛋白、COX-2的mRNA和蛋白相对表达水平均显著降低(P<0.05),VEGF的mRNA和蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05)。结论 特异性抑制JAK2/STAT3信号通路可能通过降低脑组织中COX-2表达和促进VEGF表达来保护大鼠急性脑缺血再灌注损伤。     

注射用丹参多酚酸对脑缺血大鼠VEGF、IL-10的影响

目的观察丹参多酚酸注射液对脑缺血大鼠VEGF、IL-10表达的影响,探讨丹参多酚酸的脑保护作用及机制。方法采用线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉梗死模型,SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(MCAO组)、丹参多酚酸治疗组(治疗组),按缺血时间分为4个亚组(6 h、12 h、24 h、48 h),采用Longa法评估大鼠神经行为学,ELISA法测定血清VEGF、IL-10的含量,HE染色法观察神经元形态,免疫组化法、Western blot法检测大鼠脑组织VEGF、IL-10的表达。结果 (1)Sham组神经行为学评分为0;治疗组与MCAO组相比,丹参多酚酸可以明显降低大鼠神经行为学评分(P0.05)。(2)与Sham组相比,MCAO组与治疗组血清VEGF、IL-10含量均升高(P0.05),但治疗组升高更显著(P0.05)。(3)MCAO组、治疗组缺血半暗区皮质神经元均较Sham组少,治疗组较MCAO组神经元数目明显增多;Sham组可见少量VEGF、IL-10表达,治疗组在各个时间点VEGF、IL-10的表达均较MCAO组增多(P均0.05)。结论丹参多酚酸增强大鼠脑缺血后VEGF、IL-10的表达,可能是其保护脑细胞机制之一。     

腺苷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑内Wnt1表达的影响

目的探讨腺苷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠内源性神经干细胞增殖的机制。方法制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型。224只SD大鼠随机分为4组:假手术组(F组)、腺苷预处理后假手术组(AF组)、缺血再灌注组(IR组)、腺苷预处理组(AP组),根据再灌注时间随机又分为1 d、3 d、7 d、14 d、21 d 5个亚组。对各组不同再灌注时间点大鼠进行神经功能缺失行为学评分,利用Western blotting检测海马Wnt1蛋白的表达情况及腺苷预处理对其的干预。结果 (1)神经缺损症状及功能评分:F、AF组大鼠均无神经功能缺损症状,IR、AP组大鼠均有不同程度神经功能缺失症状,AP组大鼠相应时间点的神经功能评分均较IR组低(P<0.05);(2)Western blotting:F、AF组Wnt1的表达几乎检测不到;IR、AP组Wnt1随着缺血再灌注时间的延长,表达均逐渐增加,7 d时达到最高峰。AP组比IR组表达增强(P<0.05)。结论 (1)腺苷预处理能显著效改善再灌注损伤引起的神经功能缺损症状;(2)腺苷可能通过激活Wnt信号通路从而促进内源性神经干细胞增殖。     

促红细胞生成素对大鼠激光脑损伤神经保护作用的实验研究

目的探讨外源性促红细胞生成素（EPO）对大鼠激光脑损伤的神经保护作用,为激光脑损伤的治疗提供新思路。方法80只健康雄性SD大鼠制作激光脑损伤模型,随机分为假手术（A）组、模型（B）组、EPO治疗（C）组、生理盐水对照（D）组,每组20只。对术后大鼠进行运动神经功能评分,采用免疫组织化学方法检测大鼠脑中热休克蛋白70（HSP70）的表达。结果激光损伤后24h,C组神经功能评分显著改善。A组HSP70表达较弱,B组HSP70表达增加,C组HSP70表达显著升高（P〈0.01）,D组HSP70表达增加。结论促红细胞生成素对大鼠激光脑损伤神经保护作用可能与HSP70表达有关。     

人脐带沃顿胶间充质干细胞移植对创伤性脑损伤大鼠脑损伤区微循环的影响

目的 探讨人脐带沃顿胶间充质干细胞(WJCs)对脑创伤区周围微循环的影响. 方法 72只健康SD大鼠采用随机数字表法分为4组:(1)假手术组;(2)移植对照组;(3)WJCs移植组;(4)正常组.每组18只.移植对照组和WJCs移植组采用Feeney自由落体硬脑膜外撞击法建立中度创伤性颅脑损伤模型,再分别注射0.3 mL的生理盐水和WJCs混悬液;假手术组颅骨钻孔后不损伤脑组织不移植细胞;正常组不做任何处理.分别于移植后3d及7d进行大鼠行为学评分;取移植后ld、3d、7d和2周的脑组织切片行免疫组织化学检测,检测大鼠损伤灶周围血管内皮生长因子(VEGF)及CD34的表达;实时定量PCR(RT-PCR)检测的VEGF mRNA表达;测定微血管面密度(MVD);移植后2周和4周行免疫组化观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)蛋白表达水平. 结果 移植后7d,WJCs移植组大鼠mNSS评分明显高于移植对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).WJCs移植组移植后3d、7d和2周损伤灶周围皮层脑组织VEGF和CD34的表达均高于移植对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).移植后2周和4周WJCs移植组损伤区免疫组织化学染色均发现GFAP和NSE阳性细胞,其他3组均未发现.RT-PCR检测到WJCs组VEGF mRNA的表达量高于移植对照组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 WJCs移植后可增加损伤区脑组织VEGF及CD34阳性表达,参与调控损伤区微血管的变化,改善损伤区的微循环,促进大鼠神经功能的恢复.     

弥漫性脑损伤后代谢型谷氨酸受体亚型4及其激动剂L-AP 4的作用

目的　研究弥漫性脑损伤 (DBI)后大鼠脑皮质代谢型谷氨酸受体亚型 4 (mGluR 4 )及其激动剂L 2 氨基 4 膦酰基丁酸(L AP 4 )的变化及意义。方法　 16 1只SD大鼠随机分为两组。A组包括正常对照组、假手术组及DBI组。用Marmarou弥漫性脑损伤模型 ,制成DBI模型 ,于伤后不同时间进行mGluR 4mRNA原位杂交。B组包括单纯、DBI后生理盐水治疗及DBI后L AP 4治疗组。所有DBI动物伤前进行行为学训练。伤后 1h、12h脑室内分别给予L AP 4 (10 0mM ,10 μl)或生理盐水。大鼠在伤后 1、3、7、14d分批处死前进行运动和行为学检查 ,处死后检测神经元损伤数。结果　与正常对照组相比 ,假手术组阳性神经元数无改变 (P >0 .0 5 ) ;与假手术组相比 ,单纯DBI组mGluR 4mRNA表达于脑损伤后 1h即有明显增加(P <0 .0 1) ,在 6h达到高峰。与DBI后生理盐水治疗组比较 ,DBI后L AP 4治疗组神经元损伤数减少 ,神经功能检查指数增高。结论　mGluR 4参与了DBI的病理生理过程 ,具有神经保护作用。     

电针治疗对大鼠局灶性脑缺血ERK磷酸化的调节作用

目的探讨电针对局灶性脑缺血大鼠顶叶皮质细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白磷酸化的影响。方法采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,将90只雄性SD大鼠随机分为3组,即对照组、实验组、治疗组;治疗组以韩氏穴位神经刺激仪电针"百会""水沟"穴,每日1次,留针30min,治疗15d;治疗结束后用神经行为学评分标准评定大鼠的神经功能;应用实时定量PCR、Western Blotting和图像分析方法检测缺血侧顶叶皮质ERK1和ERK2的表达水平。结果经电针治疗后脑缺血大鼠损伤的神经行为学评分得到不同程度的改善。ERK1/2表达在大鼠局灶性缺血脑组织中显著升高。结论电针对大鼠局灶性脑缺血的ERK磷酸化起着重要的调节作用,并对缺血性脑损伤有一定保护作用。     

高渗氯化钠羟乙基淀粉40对大鼠脑缺血再灌注损伤后MMP-9和层粘连蛋白表达的影响

目的探讨高渗氯化钠羟乙基淀粉40(HSH)对大鼠脑缺血-再灌注(I/R)损伤后神经功能行为学评分,脑水肿情况,脑梗死体积以及脑组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和层粘连蛋白(Laminin)表达的影响。方法48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、实验1组、实验2组。大鼠局灶性脑I/R损伤模型制备成功后120 min,假手术组和模型组静脉输注0.9%生理盐水,实验1组和2组分别静脉输注HSH 4 ml/kg和8 ml/kg。再灌注24 h后,行神经功能行为学评分,观察脑水肿情况,TTC染色测算脑梗死体积,用免疫印迹方法检测缺血区脑组织MMP-9和Laminin的表达。结果与假手术组比较,模型组神经功能行为学评分升高(P0.001);脑水肿加重;脑梗死体积增加(P0.001);MMP-9蛋白表达升高(P0.05);Laminin蛋白表达降低(P0.01)。与模型组比较,实验1组和2组神经功能行为学评分降低(P0.001);脑水肿缓解;脑梗死体积减少(P0.001);实验1组MMP-9蛋白表达减少(P0.01),Laminin蛋白表达升高(P0.05);实验2组MMP-9蛋白和Laminin蛋白表达均无明显变化。结论用HSH治疗大鼠脑I/R损伤后,大鼠神经功能行为学评分改善,脑水肿减轻,脑梗死体积减小,血脑屏障通透性降低,其机制可能与降低MMP-9和增加Laminin蛋白的表达有关。且保护作用以4 ml/kg剂量效果更佳。     

依达拉奉对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡及caspase-3蛋白表达的影响

目的 探讨依达拉奉对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经功能损伤、细胞凋亡及caspasc-3蛋白表达的影响.方法 雄性SD大鼠24只采用随机数字表法分为假手术组、脑缺血再灌注组、生理盐水治疗组、依达拉奉治疗组,每组6只.除假手术组外,其余3组均采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型.依达拉奉治疗组于脑缺血开始时及再灌注后12 h分别腹腔注射依达拉奉3 mg/kg,生理盐水治疗组同时间注射等量生理盐水;假手术组同样过程造模,但不插入尼龙线造成缺血.造模后24 h后进行大鼠神经行为学评分;应用免疫组织化学及Western blot检测caspase-3蛋白表达水平的变化;利用原位缺口末端标记法(TUNEL法)研究神经细胞凋亡的变化.结果 与脑缺血再灌注组及生理盐水治疗组相比,依达拉奉治疗组大鼠神经行为学评分明显减少,caspase-3免疫阳性细胞及蛋白表达明显减少,凋亡细胞也减少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 依达拉奉能有效减轻脑缺血灌注损伤后神经细胞凋亡.改善神经功能缺损症状,推测其机制与抑制caspase-3蛋白表达有关.     

表达hVEGF165重组腺相关病毒对脊髓损伤的作用

血管内皮细胞因子曾经被认为是具有促血管生成作用的血管生长因子,如今,更多的研究将其应用于神经细胞缺血损伤的保护中。然而,一些研究却认为VEGF的应用使得脊髓损伤后脊髓的二次打击更加严重。为了探讨VEGF是否能够有效保护损伤的脊髓,我们在大鼠脊髓损伤模型中应用了表达hVEGF165的重组腺相关病毒。我们将大鼠随机分为假手术组,单纯脊髓损伤对照组,AAV-GFP组及AAV-VEGF 组。在相应时间点评估完神经功能后,我们将脊髓组织迅速取出。我们通过透射电子显微镜观察及TUNEl凋亡组织学染色观察在形态学角度评估凋亡的发生。应用免疫组化及Western blot评估凋亡蛋白Bax 和Bcl-2的表达。通过水通道蛋白-4（AQP-4）的免疫组化染色观察VEGF表达与脊髓损伤的相关性。实验结果显示,AAV-VEGF 组神经功能较对照组及AAV-GFP组有显著差异。(P < 0.05). VEGF能够明显抑制神经细胞的凋亡,减少运动神经元的损伤和丢失,减少细胞凋亡率。VEGF治疗组BAX蛋白表达减弱,Bcl-2蛋白表达加强,AQP-4表达减弱。所有结果表明VEGF具有对脊髓损伤神经的保护效应。