假狂犬病毒示踪大鼠脑瘫状态下腰段和颈段脊髓神经元间联系的研究

目的：应用假狂犬病毒（PRV）示踪腰段和颈段脊髓神经元之间的联系。方法：雄性脑瘫模型SD大鼠30只．左侧坐骨神经注射PRV，4天后灌注取材，之后行PRV免疫组化染色。结果：腰段脊髓左侧灰质前角中可见PRV感染细胞，而颈段脊髓中未见到PRV感染细胞。结论：腰段脊髓和颈段脊髓神经元之间没有直接的神经纤维联系。     

鞘内注射吗啡对坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠腰段脊髓后角神经元中c-fos蛋白表达的影响

目的 坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)可以引起腰段脊髓后角中c-fos的表达.μ-阿片受体长期以来被认为与脊髓中的镇痛机制有关,而吗啡作为μ-阿片受体激动剂被应用于病理性疼痛的治疗中.本实验通过给坐骨神经CCI大鼠模型鞘内注射吗啡,观察其对脊髓后角中c-fos表达的影响.方法 23只Sprague-Dawley大鼠随机分为三组.其中B、C两组大鼠接受右侧坐骨神经外周结扎手术,而A组为假手术组.9 d后,A、C两组大鼠接受鞘内注射吗啡同时给B组大鼠鞘内注射生理盐水.注射后6 d,解剖三组大鼠并取出L3～L5节段的脊髓制成40μm的冰冻切片.标本在室温下进行荧光免疫染色后制成玻片.使用激光共焦点显微镜下观察各脊髓切片标本双侧c-fos的染色情况.结果 三组大鼠手术侧同侧的脊髓后角中c-fos阳性神经元较对侧明显增多.但是c组大鼠脊髓后角同侧的c-fos阳性神经元较B组少.结论 μ-阿片受体激动剂能明显减少CCI大鼠腰段脊髓后角中c-fos的表达.     

血管内皮生长因子对脊髓神经组织保护作用及c-fos基因的影响

目的：探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)对脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因的影响及保护机制。方法：将85只同龄Wistar大鼠，采用Auens的weight dropping(WD)法挫伤大鼠T11节段脊髓，于术后0，15min，1，2，4，8，12，24h经蛛网膜下腔导管各注入VEGF溶液15μL(含VEGF20μg)，并与生理盐水组和正常对照组作对照。采用原位末端标记法(TUNEL法)检测脊髓损伤前后发生凋亡的脊髓神经元。采用免疫组化和原位杂交方法检测脊髓损伤前后c-fos基因的变化。结果：正常组脊髓前角中未发现凋亡细胞，生理盐水组于伤后2h始出现凋亡神经元。VEGF组与生理盐水组相比较，凋亡神经元明显减少(P&;lt;0．01，t=24．25)。c-fos基因表达在正常脊髓组织中呈弱阳性，在生理盐水组中表达明显增加，VEGF组c-fos基因表达比生理盐水组明显减少(P&;lt;0．01，t=12．03)。结论：脊髓损伤后脊髓神经元凋亡增多和c-fos基因表达显著增多，VEGF能抑制脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因表达，从而保护损伤的神经组织。     

血管内皮生长因子对脊髓神经组织保护作用及c-fos基因的影响

目的探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)对脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因的影响及保护机制。方法将85只同龄Wistar大鼠,采用Allens的weightdropping(WD)法挫伤大鼠T11节段脊髓,于术后0,15min,1,2,4,8,12,24h经蛛网膜下腔导管各注入VEGF溶液15μL(含VEGF20μg),并与生理盐水组和正常对照组作对照。采用原位末端标记法(TUNEL法)检测脊髓损伤前后发生凋亡的脊髓神经元。采用免疫组化和原位杂交方法检测脊髓损伤前后c-fos基因的变化。结果正常组脊髓前角中未发现凋亡细胞,生理盐水组于伤后2h始出现凋亡神经元。VEGF组与生理盐水组相比较,凋亡神经元明显减少(P<0.01,t=24.25)。c-fos基因表达在正常脊髓组织中呈弱阳性,在生理盐水组中表达明显增加,VEGF组c-fos基因表达比生理盐水组明显减少(P<0.01,t=12.03)。结论脊髓损伤后脊髓神经元凋亡增多和c-fos基因表达显著增多,VEGF能抑制脊髓损伤后脊髓神经元凋亡和c-fos基因表达,从而保护损伤的神经组织。     

脑外伤后大鼠脊髓内去甲肾上腺素能神经元变化的研究

目的观察脑外伤应激对大鼠脊髓内去甲肾上腺素（NA）能神经元的表达变化。方法成年Wistar大鼠70只,随机分为正常对照组（n=10）和闭合性脑外伤组（n=60）。采用Feeney′s法制备大鼠闭合性脑外伤模型。于伤后3、6、12、24、48和72h取出大鼠颈、胸、腰脊髓组织,分别用免疫组化和半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测多巴胺-β-羟化酶（DBH）的表达变化。结果免疫组化显示,正常脊髓颈、腰膨大前角内可见少量DBH阳性神经元胞体;脑外伤后各时间点大鼠脊髓各个节段的前角、后角和胸腰段侧角均出现大量深染的DBH阳性神经元,其数量和染色较正常对照组差异均有显著性（P〈0.05或P〈0.01）。RT-PCR检测结果显示,脑外伤后各时间点脊髓内DBH mRNA表达明显强于正常对照组（P〈0.05或P〈0.01）。结论大鼠脑外伤后脊髓NA能神经元明显增多,NA能神经元DBH mRNA表达增加,说明NA合成增多,提示NA在脑外伤应激过程中起重要作用。     

许旺细胞源神经营养因子对脊神经根性撕脱所致神经元死亡的干预

背景：许旺细胞源神经营养因子是从许旺细胞胞浆中分离纯化出的一种相对分子质量为58000的神经营养物质，具有明显的神经营养活性，能对抗一氧化氮神经毒性物质。 目的：建立根性撕脱伤动物模型，观察许旺细胞源神经营养因子对脊神经根性撕脱所致脊髓前角运动神经元死亡的保护作用。 设计：重复观察测量。 单位：深圳市第二人民医院骨三科，中山大学附属第一医院显微外科。 材料：实验于2003—03／05在中山大学医学院实验动物中心完成。选用清洁级3-4月龄SD大鼠20只，随机分为许旺细胞源神经营养因子组、生理盐水对照组，各10只。两组动物均以左侧为正常侧，右侧为损伤侧。 方法：①两组大鼠均建立颈6、7神经根性撕脱伤动物模型。②许旺细胞源神经营养因子组将一小块预浸有质量浓度为1g/L的许旺细胞源神经营养因子40μL的明胶海绵覆盖于损伤侧硬膜囊表面，生理盐水对照组将一小块预浸有等量生理盐水的明胶海绵覆盖于损伤侧硬膜囊表面。③明胶海绵表面置硅胶管，硅胶管一端与明胶海绵缝扎，另一端用凡士林封闭固定于皮下，关闭切口后伤口局部肌肉注射青霉素预防感染。术后两组动物分别通过硅胶管定期注射许旺细胞源神经营养因子或生理盐水20μL，1次／周，3周后取材。 ④切取颈6.7脊髓节段，观察损伤侧脊髓前角运动神经元的存活率和形态学变化以及一氧化氮合酶的表达。 主要观察指标：①脊髓运动神经元存活情况和形态学变化。②脊髓运动神经元一氧化氮合酶表达的变化。 结果：实验选用20只大鼠，全部进入结果分析。①脊髓运动神经元存活情况和形态学变化：颈6.7神经根性撕脱术后3周，生理盐水对照组损伤侧68.6％的运动神经元死亡，存活率31．4％，明显低于正常侧（P〈0．01），且存活的神经元胞体严重萎缩；许旺细胞源神经营养因子组损伤侧脊髓运动神经元的死亡率较生理盐水对照组减少35％（P〈0．01），存活率为66．4％，且存活的神经元胞体代偿性增大，基本与正常侧相似（P〉0．05）。②脊髓运动神经元一氧化氮合酶表达的变化：正常情况下，脊髓中的一氧化氮合酶阳性神经元主要见于后角浅层，中央导水管周围、中间外侧柱和脊髓背根神经节中的内脏传入神经元，前角运动神经元不表达一氧化氮合酶。颈。神经根性撕脱术后3周，生理盐水对照组损伤侧脊髓运动神经元一氧化氮合酶表达明显增多，而其正常侧和许旺细胞源神经营养因子组损伤侧脊髓运动神经元均未见一氧化氮合酶表达增加。 结论：脊神经根性撕脱可引起脊髓前角运动神经元的死亡和一氧化氮合酶表达，许旺细胞源神经营养因子则对受损的神经元有明显的保护作用和抑制一氧化氮合酶表达。提示许旺细胞源神经营养因子的神经元保护作用可能是通过改变神经元的一些细胞分子例如一氧化氮合酶而实现的。     

神经前体细胞在成年小鼠脊髓颈段的分布特征

目的观察和分析在成年动物脊髓颈段的神经前体细胞（NPCs）分布特征。方法采用巢蛋白第二内含子增强子控制的LacZ启动子转基因小鼠和LacZ染色及阳性细胞量化技术，观察分析脊髓颈段的NPCs分布特征。结果NPCs在成年小鼠的整个脊髓颈段都可见，但是在不同区其数量和密度不同，在后角最多，其次是中央管，前角和侧角最少。在脊髓后角区NPCs主要分布在胶状质，在中央管NPCs主要分布在室管膜带，在脊髓髓质（白质）区很少，灰质明显比白质多，左右两边无明显差别。结论在NPCs的分布可能与临床疾病脊髓的损伤和修复有相关性，NPCs分布少的区易于损伤且难于修复，像前角和侧角。在后角、中央管和神经胶质细胞分布最多，则难于损伤，较易修复。     

实验性颈交感神经切除对血管源性头痛痛觉传导的影响

目的:通过电刺激大鼠上矢状窦区硬脑膜,观察颈上交感神经节摘除术前后延髓和上颈段三叉神经脊束核FOS阳性神经元数目的变化,以探讨交感神经系统在血管源性头痛如偏头痛伤害性信息传递中的作用.方法:以雄性SD大鼠(体重为220～250g)为实验对象,行颈上交感神经节(SCG)摘除术后再手术暴露其上矢状窦(SSS),电刺激SSS区硬脑膜,应用免疫组织化学染色技术,观察延髓和上颈段三叉神经脊束核c-fos蛋白(FOS)表达的变化.结果:FOS免疫反应阳性神经元主要分布在三叉神经脊束核和上颈段脊髓的第Ⅰ、Ⅱ板层,双侧对称.SCG摘除组FOS阳性神经元数目较假手术组明显增加.结论:颈交感神经系统参与了头部血管源性疼痛如偏头痛中伤害性感觉信息的产生、传导及调节过程.     

坐骨神经损伤后脊髓前角细胞脑源性生长因子的表达及针刺治疗的作用

目的：探讨坐骨神经不完全性损伤后脊髓前角细胞脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)表达水平变化及针刺对BDNF表达的影响。方法：采用钳夹法制作大鼠左侧坐骨神经损伤模型，分为针刺组和对照组。用原位杂交、免疫组化技术检测相应节段脊髓前角细胞BDNF、的表达水平，观察各组在1，7，4，21及28d的变化。用计算机图像自动处理系统进行定量分析研究。结果：对用原位杂交方法测得的坐骨神经损伤后大鼠脊髓前角BDNFmRNA阳性细胞计数进行分析，组间和不同时间点比较差异均的非常显著性意义(P&;lt;O．01)；计算用免疫组化方法测得的坐骨神经损伤后大鼠脊髓前角BDNFmRNA阳性神经元光密度值，组间和不同时间点比较差异均的非常显著性意义(P&;lt;0．01)；坐骨神经损伤后损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平在最初的3周内逐渐下降，然后开始恢复，但至第4周[(45．38&;#177;1．56)个]尚未恢复到健侧[(62．88&;#177;1．23)个]的水平。针刺组损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平除1,7d组外其余均高于对照组(P&;lt;0．01)；而健侧BDNF表达水平在各时间点间相比较无明显差异。结论：在正常情况下，BDNF在脊髓前角细胞中能够表达。坐骨神经损伤后，BDNF的表达下降。针刺能促进损伤侧脊髓前角细胞中BDNF表达水平的增加；而对健侧BDNF表达水平无明显作用。     

参麦注射液对缺血性脑损伤大鼠海马c-fos基因表达的影响

背景：c-fos基因为神经元细胞最常见的基因，其表达情况可作为受损神经细胞活性和反映性的标志物之一。目的：从分子水平探讨缺血性脑损伤大鼠海马c-fos基因表达情况和参麦注射液的保护作用。设计：随机对照实验。单位：泸州医学院组织学与胚胎学教研室。材料：实验于2002—01／03在泸州医学院组织学与胚胎学实验室完成。选择雄性Wistar大鼠30只，随机分为对照组、缺血组和治疗组，每组10只。方法：缺血组和治疗组大鼠夹闭双侧颈总动脉30min后再灌注1h，建立缺血性脑损伤模型；治疗组在缺血30min前腹腔注射参麦注射液2mL／kg（由红参、麦冬等中药组成）；缺血组不给药；对照组做假手术，不夹闭颈总动脉，也不给药。取大鼠脑海马组织制备石蜡切片，每只大鼠取1张切片，每组共随机统计100个神经元胞核。根据神经元胞核着色情况观察各组大鼠海马神经元c-for基因的表达（＋＋＋为着色深，呈深棕色。＋＋为着色较深，呈棕色者。＋为着色较浅，呈浅棕色者。一为未着色）。主要观察指标：各组大鼠海马神经元c-fos表达。结果：30只大鼠全部进入结果分析。缺血组大鼠海马内神经元c-fos基因的表达明显多于对照组[＋＋＋：24，7个／视野，P〈0．05]，而治疗组明显少于缺血组[＋＋＋：13，24个／视野，P〈0．05]。结论：参麦注射液可减少缺血性脑损伤人鼠海马神经元c-fos基因的表达，具有对缺血性脑损伤组织神经细胞的保护作用。     

Correlation of functional activation in the rat spinal cord with neuronal activation detected by immunohistochemistry

The relationship between neuronal activity in the rat cervical and lumbar spinal cord was examined using functional magnetic resonance imaging (fMRI) and immunohistochemistry. Neuronal activity determined by c-fos staining was greatest between L4 and L6, and C5 to C7 spinal cord segments during noxious electrical stimulation of the rat hindpaw and forepaw, respectively. Areas of activity determined by fMRI are consistent with spinal cord physiology, and are predominantly found in regions of the spinal cord associated with pain, namely the dorsal horn. Activity in the ventral region of the cord was also observed, as expected. Combined results from repeated experiments demonstrated consistent areas of activity in response to stimulation, and show a high degree of reproducibility. Good correspondence was observed between functional MRI and sites of neuronal activity determined by c-fos labeling.     

Comparison of functional activity in the rat cervical spinal cord during alpha-chloralose and halothane anesthesia

Alpha-chloralose is commonly used during animal fMRI studies for anesthesia, however, recovery of animals is difficult, limiting experimental design. The use of a less invasive anesthetic would enable chronic experiments. The present study compares functional activity in the spinal cord of the alpha-chloralose and halothane-anesthetized rat. Functional MRI of the rat cervical spinal cord was performed on 6 alpha-chloralose and 6 halothane-anesthetized rats in a Bruker 7 T MR system during electrical stimulation of the right forepaw. Following imaging, four animals from each group were perfused and spinal cords removed for immunohistochemical analysis. Areas of c-fos expression were identified with immunofluorescent labeling to confirm the presence of neuronal activity. Functional activity and c-fos expression were observed predominantly between the fifth and seventh cervical spinal cord segments. Areas of fMRI activation in the spinal cord correspond well with spinal cord physiology. Areas of c-fos expression confirmed that neuronal activity was present in the regions of fMRI activity. The regions and amount of fMRI activity observed were similar for both anesthetics. Functional magnetic resonance imaging of the spinal cord can be achieved using both alpha-chloralose and halothane anesthesia in rats. We therefore suggest that halothane may be used as an anesthetic agent for chronic fMRI studies of the spinal cord.     

颈椎前路减压并发脊髓损伤的高危因素回顾分析

目的探讨颈椎前路减压加重脊髓损伤的危险因素.方法对颈椎前路减压并发脊髓损伤加重11例回顾分析.结果所有病例颈椎椎管、椎体矢径比值均＜0.7,椎管横断面狭窄率在C4～5、C5～6间隙＞40%.结论一旦脊髓损伤加重,早期后路扩大半椎板减压是一种可选择的治疗方法.     

Gunshot wounds to the spinal cord.

A series of 59 patients with gunshot wounds to the spinal cord is presented. Seventeen injuries were cervical, 30 were thoracic, 11 were lumbar, and one was sacral. Twenty-nine patients had immediate complete sensorimotor loss of function, 18 had sensory or motor sparing below the cord lesions, and 12 had injury of the cauda equina. Thirty-nine patients were treated with decompressive laminectomy, four with local wound debridement only, three with cervical traction and subsequent anterior cervical fusion; 13 had only conservative therapy. Eleven patients had return to normal function and 20 patients had some degree of improvement. There was no significant difference in the outcome between patients operated on and those treated conservatively.     

脊髓损伤患者自主神经功能障碍的临床分析

目的探讨脊髓损伤患者心脏节律变异性（HRV）和血浆D-二聚体水平改变的意义。方法采用回顾性分析的方法,分析本院2005年7月至2007年8月收治的60脊髓损伤患者临床资料,根据脊髓损伤部位的不同,分为颈髓损伤组（31例）、胸髓损伤组（20例）、腰髓损伤组（9例）,同时选取35例健康体检者为对照组。结果颈髓、胸髓组代表交感和迷走神经张力的低频检测结果为（299．28±310．25）ms^2、（254．16±221．71）ms^2,明显低于对照组的（560．32±320．14）ms^2,差异有统计学意义（P〈0．01）;脊髓各段（颈髓、胸髓、腰髓）损伤患者血浆D-二聚体水平均较对照组显著增高（P〈0．05）,同时各组脊髓损伤患者血浆D-二聚体水平随着治疗时间的延长,逐渐降低（P〈0．05）。结论HRV和血浆D-二聚体水平的联合检测可以作为脊髓损伤部位诊断及损伤程度的参考指标。     

脊髓血管母细胞瘤MRI诊断

目的:探讨脊髓血管母细胞瘤磁共振成像(MRI)影像学特征。方法:回顾性分析经手术病理证实12例脊髓血管母细胞瘤的MRI表现。结果:在12例中,病灶位于颈髓7例,胸髓3例,颈胸段、胸腰段水平各1例。其中3例为多发灶,1例合并脑内血管母细胞瘤。MRI表现:受侵脊髓局限性增粗,与正常脊髓信号相比,T1WI呈等低信号结节性肿块,其中1例伴斑片状高信号(因出血);T2WI为混杂高信号;增强扫描,肿瘤结节显著强化,边界清晰。在T2WI或增强扫描上,见特征性瘤内或瘤周迂曲的畸形血管流空信号9例,肿瘤上下继发性脊髓空洞或囊肿10例。结论:MRI检查是诊断脊髓血管母细胞瘤的有效手段,有助于诊断和鉴别诊断。     

Acute muscle inflammation enhances the monosynaptic reflexes and c-fos expression in the feline spinal cord.

The aim of this research was to study the changes of the motor reflex activity (monosynaptic reflex (MSR) of the flexor and extensor muscles) and Fos immunoreactivity in lumbo-sacral spinal cord after acute induced myositis of m. gastrocnemius-soleus (GS). The experiments were carried out on ischaemic decerebrated, spinalized in C1 cats. After infiltration of the GS muscle with carrageenan (2%) MSRs of flexors and extensors showed a significant increase in amplitude +127+/-24.5% and +155+/-28.5%, respectively, p<0.05. The exposed effect was initiated within 30 min and achieved a maximum 2.8h after the intramuscular injections of carrageenan. After analysis of dynamics of the MSRs, animals were perfused and c-fos expression in the spinal segments L6-S1 was evaluated. In comparison to sham-operated animals, the number of Fos-immunoreactive (Fos-ir) cells was noticeably increased in the lumbar cord of cats with carrageenan-induced myositis. The labeled cells were concentrated in the ipsilateral laminae I/II, neck of the dorsal horn (V/VI) and intermediate zone (VII), however, clear predominance of their concentration was found in the deep laminae. The effect of muscle inflammation was also expressed as a significant decline in the number of NADPH-d-reactive cells (p<0.05) in ipsilateral laminae I/II of L6/L7. The results show that the input from acutely inflamed muscles may induce an increase of the reflex responsiveness of flexors and extensors which is not mediated via the gamma-spindle-loop and which coincides with a significant increase in c-fos expression in the deep laminae of the lumbar spinal cord.     

外伤性颈椎间盘突出型脊髓损伤的治疗

目的:评价外伤性颈椎间盘突出型脊髓损伤手术治疗效果.方法:回顾性分析38例外伤性颈椎间盘突出型脊髓损伤患者作为手术组,均采用颈椎前路椎间盘摘除、椎体间植骨、钛板内固定术、依据Frankel分级情况及JOA改善率,并以因为各种原因出现外伤性颈椎盘突出型脊髓损伤但未手术治疗者35例作为对照组,进行组内和组间对比,评价治疗效果.结果:手术组术后Frankel分级恢复1～4个等级.术后2个月JOA改善率为59.92％,对照组Frankel分级恢复1～2个等级,术后2月JOA改善率为35.70％.组间对比显示手术组患者脊髓功能恢复程度优于保守治疗组.结论:颈椎间盘突出是无骨折脱位型颈脊髓损伤的重要病理基础,合理的前路手术能获得较理想的脊髓功能恢复效果.     

MRI对脊髓结核球的诊断价值

目的探讨脊髓结核球MRI表现,提高对该病的影像认识。方法回顾性分析20例脊髓结核球的MRI影像资料,观察指标为病灶的数量、分布、大小、形态、信号特点及伴随征象。结果 20例患者共检出结核球病灶47个,位于颈段脊髓13个、胸段脊髓内16个,腰段脊髓及马尾神经区18个,好发部位为颈膨大、腰膨大区(P值分别为0.001和0.008);病灶大小0.2～3.5cm,平均最大径1.1cm;病灶分圆形、类圆形、不规则形。脊髓结核球MRI表现分未成熟结核结节和成熟结核结节两种类型,未成熟结节32个,成熟结节15个,未成熟结节全结节呈较均匀一致强化,成熟结核结节病灶中心出现坏死,增强扫描为环状强化。结论 MRI平扫和增强扫描可准确、清晰地显示脊髓结核球的形态特征,可为临床治疗及判断预后提供可靠的影像学参考。