慢性心肌缺血模型小型猪的证候特点及左室重构的机制研究

目的探讨慢性心肌缺血模型小型猪的舌象特点及心脏的结构和功能变化。方法采用动物左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血模型。小型猪随机分为假手术组和模型组。术后4周、8周从动物的一般状态、舌象等方面观察中医证候的特点，应用心脏超声心动图测定心功能，用放免法测定血中TNF-α的浓度，免疫印迹法观察MMP-2、TIMP-2蛋白的表达变化。结果小型猪慢性心肌缺血后，血中TNF-α浓度，心肌组织MMP-2、TIMP-2蛋白表达水平与同期假手术组相比都发生了明显变化。结论术后4～8周为该疾病模型动物出现血瘀证的时间点，其病理学表现为心肌间质胶原网络被破坏、心脏结构发生改变，但未影响到心脏的功能。     

慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪TXB2、6-K-PGF1α与心功能的变化及其相关性研究

目的:探讨慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血中血栓素B2(Thromboxane B2,TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α,6-K-PGF1α)、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)浓度与心功能等指标的变化及其相关性.方法:采用病证结合的方法即动物左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血血瘀证模型.小型猪随机分为假手术组、模型组.应用心脏超声心动图测定心功能和心室重构;应用放免法测定血中血栓素TXB2、6-K-PGF1和TNF-α的浓度.结果:小型猪慢性心肌缺血后,血中TXB2、6-K-PGF1α、TNF-α浓度与假手术组相比都发生了明显变化.结论:TXB2与EDV呈负相关、与TNF-α呈正相关,TNF-α表达水平与EDV、ESV均呈负相关,随心功能的恶化,其表达量增高.说明血小板的激活程度与心功能有关,心功能越差,血小板的活性越高,血栓形成的危险性就越大,尤其易造成微血栓.     

慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α与心功能的变化及其相关性研究

目的:探讨慢性心肌缺血血瘀证模型小型猪血中血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α、TNF-α浓度与心功能等指标的变化及其相关性。方法:采用病证结合的方法即动物左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血血瘀证模型。小型猪随机分为假手术组、模型组。应用心脏超声心动图测定心功能和心室重构;应用放免法测定血中血栓素B2(ThromboxaneB2,TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α,6-K-PGF1α)和TNF-α的浓度。结果:小型猪慢性心肌缺血后,血中TXB2、6-K-PGF1α、TNF-α浓度与假手术组相比都发生了明显变化。结论:TXB2与EDV呈负相关、与TNF-α呈正相关,TNF-α表达水平与EDV、ESV均呈负相关,随心功能的恶化,其表达量增高。说明血小板的激活程度与心功能有关,心功能越差,血小板的活性越高,血栓形成的危险性就越大,尤其易造成微血栓。     

通脉养心丸对小型猪心肌缺血再灌注损伤后期气阴两虚证的干预作用

目的观察通脉养心丸对小型猪心肌缺血再灌注损伤后期气阴两虚证的干预作用。方法将24只小型猪随机分为假手术组、心肌缺血气阴两虚证模型组、通脉养心丸(0.36 g/kg)组和生脉胶囊(0.14 g/kg)组,每组6只。除假手术组外,其他各组采用介入技术球囊封堵冠状动脉左前降支30 min后撤出球囊进行再灌注损伤。术后给药4周,检测各组动物无创血流动力学改变;根据症状分级评分方法,分析各组动物冠心病气阴两虚证舌象和脉象评分的变化;数码拍照方法检测各组动物舌面色泽变化;采用伊文思蓝和TTC染色分析心肌缺血和梗死面积。结果与假手术组比较,模型组小型猪心脏缺血区和梗死区的面积明显增加,心输出量(CO)、每搏输出量(SV)均明显降低,而血管外周阻力(SVR)和左室做功(LCW)上升,同时舌面色泽出现异常,相应的舌象和脉象评分明显增加(P0.05、0.01);与模型组比较,通脉养心丸和生脉胶囊可明显降低小型猪心肌梗死和缺血面积,增加CO和LCW,同时舌面色泽变化接近正常,相应的舌象和脉象评分明显降低;通脉养心丸还可降低SVR(P0.01)。结论小型猪心肌缺血再灌注损伤后期表现出部分气阴两虚证的特点,通脉养心丸能够改善冠心病气阴两虚证小型猪舌和脉象的变化,保护心肌组织,恢复心脏血流动力学的异常状态。     

益气活血方对心梗后左室重构大鼠心肌基质金属蛋白酶-2、肿瘤坏死因子-α的影响

目的:通过观察该方对心梗后左室重构(Left Ventricular Remodeling,LVRM)大鼠心梗边缘区心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨益气活血方防治心梗后左室重构的作用机理。方法:结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,术后24 h存活大鼠分为益气活血方大剂量组(简称大剂量组)、益气活血方小剂量组(简称小剂量组)、卡托普利组(简称西药组)、模型组,另设假手术组。分别以相应药物灌胃6周。6周末检测各组大鼠左心室质量指数(LVMI),梗死边缘区心肌MMP-2、TIMP-2蛋白的表达及血清TNF-α的含量。结果:与假手术组比较,模型组6周末大鼠MMP-2、TIMP-2蛋白的表达明显增加,左心室质量指数增加;药物干预组,尤以大剂量组为优,可显著降低心肌梗死后心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/TIMP-2比值,降低左心室质量指数,降低血清TNF-α的含量。结论:益气活血方可抑制心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/TIMP-2,这可能是益气活血方抑制左室重构,防治心梗后心衰的作用机制之一,且存在量效关系。其抑制心肌MMP-2、增加心肌TIMP-2蛋白表达的作用可能跟降低血清TNF-α含量有关。     

益气活血方对心肌梗塞后左室重构大鼠心肌基质金属蛋白酶-2、白细胞介素-1β的影响

目的 通过观察益气活血方对心肌梗塞后左室重构大鼠心肌梗塞边缘区心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)及血清白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨益气活血方防治心肌梗塞后左室重构的作用机理.方法 结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗塞模型,术后24h存活大鼠分为益气活血方大剂量组(简称大剂量组)、益气活血方小剂量组(简称小剂量组)、卡托普利组(简称西药组),模型组.另设假手术组.分别以相应药物灌胃6周.6周末检测各组大鼠左心室质量指数,梗塞边缘区心肌MMP-2、TIMP-2蛋白的表达及血清IL-1β的含量.结果 与假手术组比较,模型组6周末大鼠MMP-2、TIMP-2蛋白的表达明显增加,左心室质量指数增加;药物干预组,尤以大剂量组为优,可显著降低心肌梗塞后心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/ TIMP-2比值,降低左心室质量指数,降低血清IL-1β的含量.结论 益气活血方可抑制心肌MMP-2蛋白表达,增加心肌TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2/TIMP-2,这可能是益气活血方抑制左室重构,防治心梗后心衰的作用机制之一,且存在量效关系.其抑制心肌MMP-2、增加心肌TIMP-2蛋白表达的作用可能跟降低血清IL-1β含量有关.     

芪参益气滴丸干预大鼠心肌梗塞后蛋白表达的动态观察

目的探讨心肌梗塞后大鼠心肌肿瘤坏死因子α表达、基质金属蛋白酶(MMPs)及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)及转化生长因子(TGF)蛋白表达。方法结扎大鼠冠状动脉前降支复制心肌梗塞模型,为心肌梗塞组。同时设假手术组,分别于术后3 d、2周、4周、8周对梗塞区心肌组织采用Western-blot法检测TNF、明胶酶(MMP-9)、TGF及TIMP-1蛋白表达。结果心肌梗塞组不同时相心肌较同期非治疗组肿瘤坏死因子α蛋白表达显著增加,呈时间依赖性;MMP-9、TIMP-1蛋白表达及TGF均较同期非治疗组明显增加。结论肿瘤坏死因子α基因过度表达与MMPs、TGF蛋白表达增加及其活性增强变化相一致,心肌肿瘤坏死因子α表达增加可能是心肌梗塞后心肌间质重塑和心力衰竭发生发展的重要机制之一。     

小型猪血瘀证模型炎症因子与心功能

目的:观察血瘀证(慢性心肌缺血)小型猪血浆白细胞(WBC)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)浓度与心功能变化及其相关性,以探讨炎症、心功能与血瘀证之间的关系。方法:采用左冠状动脉前降支远端放置Ameroid缩窄环的方法复制慢性心肌缺血模型。动物随机分为假手术组及模型组。动态观察血瘀证稳定时间窗内(4-8周)各主要炎症因子与心功能的变化。应用超声心动测定心功能;全自动生化分析仪进行WBC计数,应用放免法测定血中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的浓度。结果:模型术后4周,根据宏观体征结合血流变指标可诊断为冠心病(慢性心肌缺血)血瘀证。模型组血浆WBC、IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α水平与假手术组相比有高度统计学意义(P<0.01),心指数与假手术组比较无统计学意义;术后8周,血浆WBC、IL-1、IL-6、IL-8均恢复至正常水平,而TNF-α水平仍持续高水平(P<0.05),超声显示8周心肌肥大、心室重构及心指数进一步恶化,与假手术组比较有统计学意义(P<0.01),其恶化程度与TNF-α成明显正相关。结论:同为血瘀...     

cTnT与慢性心肌缺血血瘀证模型心功能相关性的实验研究

目的:观察肌钙蛋白T(cTnT)与小型猪血瘀证(慢性心肌缺血)模型后期心功能(心肌肥厚与重构)的相关性。方法:采用中华小型猪左冠状动脉前降支第一间隔支起始部远端放置Ameroid缩窄环的方法制备慢性心肌缺血血瘀证模型。小型猪随机分为假手术组和模型组。动态观察模型动物心肌缺血(0～8周)情况,采用超声心动测定心功能与心肌缺血的程度,冠脉造影观测冠脉狭窄程度;应用放免法测定血中cTnT的浓度。结果:心电图、B超、冠脉造影结果显示该模型术后4～8周冠心病(心肌缺血)血瘀证病证模型稳定。心功能(LVEF)下降30%,左室收缩末期容量(ESV)增加27.6%,左室舒张末内径(LVEDd)、左室舒张末容积(EDV)、左室收缩末容积(ESV)分别增大14.41%、22.54%和64.96%。而8周心腔扩大,心肌重构,心指数进一步恶化,与对照组比较差异非常显著(P<0.01)。cTnT的浓度随心功能的下降而升高,呈强烈负相关。结论:冠心病(心肌缺血)血瘀证的发生发展尤其心功能与心腔结构的变化与cTnT密切相关,其浓度水平随缺血严重程度而增高,可用于临床冠心病(慢性心肌缺血)判断预后的参考指标与中药复方药物治疗的干预环节之一。     

扶正化瘀胶囊对心肌梗死后心肌纤维化大鼠细胞外基质代谢的影响

目的探讨扶正化瘀胶囊治疗心肌梗死后心肌纤维化的可能作用机制。方法 24只大鼠随机分为模型组、扶正化瘀组、卡托普利组、假手术组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左冠状动脉前降支结扎术制备大鼠心肌梗死模型。造模后扶正化瘀组给予扶正化瘀胶囊0.4 g/(kg·d)灌胃,卡托普利组给予卡托普利2.25 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组均给予等体积的去离子水灌胃,各组均每日1次,连续8周。采用天狼星红染色检测心肌胶原分数(CVF),免疫组化、实时荧光定量PCR法分别检测Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)蛋白及mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠CVF、MMP-2/TIMP-2及Ⅰ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,扶正化瘀胶囊组、卡托普利组CVF、MMP-2/TIMP-2及Ⅰ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白及mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。与卡托普利组比较,扶正化瘀组CVF、TIMP-1蛋白表达升高,TIMP-1 mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论扶正化瘀胶囊能改善大鼠心肌梗死后心肌纤维化,其机制可能与调控MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白和mRNA表达及MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1有关。     

康心饮对缺血性心肌病大鼠心肌MMP-2、MMP-9及TIMP-2表达的影响

目的:观察康心饮对缺血性心肌病(ischemic cardiomyopathy,ICM)大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的影响,探讨其对慢性心肌缺血的作用及可能机制。方法:制备ICM大鼠模型,造模成功后随机分为假手术组、模型组、卡托普利组和康心饮组,HE染色和Masson染色及免疫组化法检测MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表达。结果:HE染色显示,与模型组比较,康心饮组心肌细胞排列比较规则,细胞坏死、变性水肿、炎性细胞浸润明显减少;Masson染色显示,康心饮组胶原纤维明显比模型组减少;免疫组化显示,与模型组比较,康心饮组MMP-2、MMP-9表达有显著减少(P0.01),TIMP-2表达显著增多(P0.05),与卡托普利组相似。结论:康心饮能改善ICM大鼠心肌纤维化,其机制可能是下调MMP-2、MMP-9和上调TIMP-2的表达。     

抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌基质金属蛋白酶-2及其抑制剂-2表达的影响

目的 观察抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响.方法 喂饲大鼠呋喃唑酮8周建立扩张型心肌病动物模型,随机分组后药物干预8周,检测心肌MMP-2及TIMP-2的表达.结果 与模型组比较,中西药联用组、中药大剂量组和卡托普利组均明显下调MMP-2表达(P均<0.05),上调TIMP-2蛋白表达(P均<0.05).中药小剂量组也能够下调MMP-2表达(P<0.05),但TIMP-2蛋白表达与模型组无差异(P>0.05).结论 抗纤益心方能够减轻扩张型心肌病大鼠心肌组织纤维化,其机制与下调MMP-2表达、上调TIMP-2表达有关.     

小型猪痰瘀互结证冠心病证侯诊断研究

目的：研究小型猪痰瘀互结证冠心病中医证侯诊断指标及方法。方法：小型猪随机分为正常对照组和模型对照组,分别用普通饲料和高脂饲料喂养14周,2周时采用介入技术球囊损伤左冠状动脉前降支,制备小型猪冠心病模型。测定30点体表心电图、体重指数、采集舌象以及无创血流动力学指标,采集股动脉脉搏图像,分别对胸痹心痛的主症、兼症、舌象及舌下脉络和脉象进行标准化评分,分析舌象RGB及HIS数值变化,对脉搏图进行分析。结果：与正常对照组比较,模型对照组动物的主症、兼症、舌象和脉象均有明显的改变,此评价方法具有较好的稳定性;模型组舌象图像R分量下降,红色饱和度降低;模型组动物在实验2周时表现出脉搏图h3/h1改变。结论：证候客观化评分方法在实验小型猪冠心病痰瘀互结证研究中有较好的稳定性,规范化的舌象图像采集有助于评价疾病变化,而脉搏图评价复合因素造模实验动物的脉象的方法还需探索。     

基于双向凝胶电泳-质谱技术的小型猪心肌缺血气虚血瘀证血浆特征蛋白质研究

目的 采用双向凝胶电泳-质谱技术,探讨小型猪心肌缺血气虚血瘀证的特征性血浆蛋白质表达谱,筛选证候特征性生物学标志物、证候主要表征的相关蛋白质.方法 心肌缺血气虚血瘀证小型猪和假手术对照组各6只.数码相机拍照并分析舌象r、g、b值,心脏超声检测左室射血分数.动物血浆采用24cm、PH3-11NL的胶条和13%聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,考马斯亮蓝染色、扫描后,采用Imagemaster 2D Platinum 6.0软件进行凝胶蛋白点检测及匹配,以实验组与对照组的vol%比值＞2或＜0.5作为可能的差异蛋白点.采用基质辅助激光解吸附的时间飞行质谱对差异蛋白点进行鉴定.结果 与对照组相比,心肌缺血气虚血瘀证小型猪血浆中检测到18种下调蛋白,6种上调蛋白.质谱鉴定获得阳性结果的下调蛋白为动力蛋白重链6和视黄醇结合蛋白4,均与能量代谢有关.左室射血分数与差异蛋白Spot 22线性相关,值分别与Spot20、Spot 6、Spot 20呈线性相关.结论 能量代谢异常可能是心肌缺血气虚血瘀证的特征性病生理进程之一.蛋白质组学研究提示的差异血浆蛋白有可能成为证候诊断的标志物,也可能作为宏观表征的有效替代指征.     

丹酚酸B盐对心肌肥厚大鼠心肌基膜型胶原酶活性及其调节因子的影响

目的:探讨丹酚酸B盐(SA-B)影响纤维化心脏基膜型基质金属蛋白酶及其抑制物的抗心肌纤维化作用机制.方法:腹主动脉不完全结扎法制备大鼠心肌肥厚模型.大鼠随机分为假手术组、模型组、丹酚酸B盐低、中、高剂量组( 10,20,40mg· kg-1·d-1)和卡托普利组(40 mg· kg-1·d-1).HE和天狼星红胶原染色法观察左心室组织病理和胶原沉积改变;Western印迹法分析心肌组织Ⅳ型胶原,MMP-2/9及TIMP-2蛋白表达;明胶酶谱法测定MMP-2/9活性.结果:SA-B干预组较模型组大鼠心肌炎性减轻,胶原沉积减少,心肌组织Hyp含量显著下降,纤维化程度明显减轻;模型大鼠心肌组织Ⅳ型胶原,MMP-2/9,TIMP-2蛋白表达以及MMP-2活性明显升高,SA-B干预组降低Ⅳ型胶原,MMP-2/9和TIMP-2蛋白表达,降低MMP-2活性,中、高剂量组作用更为明显.结论:SA-B抗心肌纤维化的作用机制之一是抑制TIMP-2的表达,降低基底膜胶原酶的表达及活性,减轻正常基底膜胶原的破坏.     

基于ERK表达探讨针刺干预大型实验动物猪心肌缺血效应的初步观察

目的：观察埋置电针对慢性心肌缺血模型猪心肌ERK表达的影响,探讨针刺应用于干预大型实验动物猪心肌缺血的方法可行性。方法：实验采用普通级巴马小型猪,分为三组：正常对照组、慢性心肌缺血模型 组、针刺组,造模方法为于中华小型猪左冠状动脉左前降支放置Ameroid缩窄环,造模术后4周进行穴位埋针2 周并加2次20分钟的电针治疗。术后六周后心脏取材,进行ERK表达及电镜检测。结果：针刺组与模型组比 较,ERK1/2的表达均显著增强（**P < 0.01）;模型组和针刺组比较心肌细胞线粒体损伤评分没有显著性差异; 模型组与正常组比较心肌细胞线粒体损伤评分升高（**P < 0.01）。结论：手术放置蛋白缩窄环于左前降支制备 大型实验动物猪心肌缺血模型方法可行,针刺可能通过调节ERK通路发挥增强机体保护细胞缺血损伤的能力。     

扩散编辑实验分析慢性心肌缺血血瘀证模型血清脂类代谢变化

目的:研究Ameriod环所致冠心病(慢性心肌缺血)小型猪的血清脂类代谢物谱群的变化,并通过对冠心病心肌缺血模型动物代谢物组的共性分析和特异表达物的探索,寻找血瘀证可能的生物学基础。方法:采用左冠状动脉前降支近端放置Ameroid缩窄环的方法建立慢性心肌缺血模型。术后0-12周对动物采集包括舌象在内的详细四诊信息,并结合血液流变学等方法确立中医血瘀证证候,用Varian UnityInova 600 M超导傅立叶变化核磁共振(NMR)波谱仪检测血清。扩散编辑实验(LED)分析脂类代谢变化情况,自由感应衰减信号经过32k傅立叶变换转为一维NMR谱图。图谱进行分段积分,每段为0.01ppm,将积分数据归一化后,利用Simca-P 11.5软件包进行模式识别主成份(PCA)分析。结果:该方法制备的模型4周确立为稳定的慢性心肌缺血血瘀证模型。基于模式识别技术的主成份分析(PCA)清晰的把模型组与假手术组动物分别开来,LED图谱的主成分分析、动物代谢谱各不相同。其中脂类代谢产物甘油(Glycerol)、低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)、胆碱以及糖代谢葡萄糖、乳酸浓度上升,高密度脂蛋白(HDL)等含量降低。结论:在血瘀证早期葡萄糖代谢紊乱和脂类代谢障碍相互影响,最终加重并恶化了冠心病血瘀证的进程,代谢组学结合模式识别技术能有效判别证候之间的差异,为中医证候规范化提供新的研究方法。     

补阳还五汤对缺氧心脏成纤维细胞旁分泌MMP-2/9、TIMP-1、TNF-α的影响

[目的]探讨补阳还五汤对缺氧诱导心脏成纤维细胞旁分泌基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,并从基因和蛋白水平探讨其保护心肌细胞、预防心肌纤维化的机制。[方法]培养小鼠乳鼠心脏成纤维细胞,将其分为对照组、模型组、补阳还五汤组。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法和酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测各组成纤维细胞和细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TNF-αm RNA表达和蛋白分泌。[结果]与对照组比较,模型组MMP-2、MMP-9及TNF-αm RNA表达上调,蛋白旁分泌增加,TIMP-1表达下调(P0.05);与模型组比较,补阳还五汤组MMP-2、MMP-9 m RNA表达下调,蛋白旁分泌减少,TIMP-1则上调(P0.05),而TNF-α仅有下调趋势,无统计学差异(P0.05)。[结论]补阳还五汤可保护缺氧心肌,预防心肌纤维化。其机制可能与抑制缺氧成纤维细胞的旁分泌,调节MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达平衡有关。     

小型猪慢性心肌缺血模型四诊信息采集的方法探索

目的：探讨中华实验小型猪慢性心肌缺血模型构建方法以及探讨其四诊信息采集方法。方法：采用中国农业大学育种健康中华小型猪，体重（25&#177;4）kg，月龄6～10个月，雌雄不限，动物在麻醉、无茵条件下开胸，分离前降支，在第一对角支远端的前降支主干放置Ameroid缩窄环，关胸。并通过心电图、超声心动图及冠脉造影评价小型猪慢性心肌缺血模型构建成功与否。在造模过程中，参照中医的四诊信息采集办法，并参考中兽医在大动物辨证方面的经验，制定出小型猪证候观察量表，在实际操作中通过望、闻、问、切四诊方法对模型动物宏观体征进行动态观察，并借助心电图、数码照相等现代手段间接地获得四诊信息。结果：模型动物在冠脉环缩术后1—8周内，精神状态、舌象、饮食、饮水等方面均有明显变化。数码相机所拍舌象经Adobe Photoshop8．0分析所得R、G、B值与假手术组相比有显著性差异。结论：对小型猪的四诊信息采集是可行的、客观的，但更需不断发掘、完善，制定出量化标准。     

芪参益气滴丸对Ameroid缩窄环致心功能不全小型猪心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:观察芪参益气滴丸对Ameroid缩窄环致心功能不全小型猪心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法:巴马小型猪22只,采用左冠状动脉前降支放置缩窄环的方式制备小型猪慢性心肌缺血心功能不全模型,随机分为模型组、地高辛组、芪参益气滴丸组,每组6只,另制备假手术动物4只。于术后第4周开始口服给药,地高辛组每日1次,每次0.0125mg·kg-1,芪参益气滴丸组每日3次,每次0.025g·kg-1,持续8周。于给药后8周末取材,采用TUNEL法进行心肌组织细胞凋亡率检测,采用Western-blot法检测TNF1、TNFR、Active Caspase-3及Caspase-8表达情况。结果:TUNEL结果显示,模型组心肌组织细胞凋亡率与假手术组比较显著升高,芪参益气滴丸组心肌组织细胞凋亡率与模型组比较显著降低。Western-blot结果显示,模型组梗死边缘区心肌组织TNF-α、Active Caspase-3含量显著升高,芪参益气滴丸组TNF-α、Active Caspase-3含量显著下降。结论:芪参益气滴丸能够显著抑制Ameroid缩窄环致心功能不全小型猪心肌细胞凋亡,其作用机制可能与抑制TNF-α和active Caspase-3表达有关。