顶体酶活性对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的:探讨精子顶体酶活性对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法:选择909对在本院生殖中心就诊的不孕夫妇,其中女方检查为正常或仅为输卵管因素不孕。采用改良巴氏法染色和Na-苯甲酰-DL-精胺酸-P-硝酰基苯胺(BAPNA)法分别对丈夫的精液进行精子形态学分析和精子顶体酶活性测定。结果:顶体酶异常组中各项精液参数,包括正常形态精子百分率、精子活动率、活动力、快速前向运动精子百分率及精子密度均显著低于顶体酶正常组(P<0.01);顶体酶活性与精液常规分析上述各参数之间存在非常显著的正相关(P<0.01);两组间取卵数、卵裂率、优质胚胎率、胚胎冷冻率、无可移植胚胎周期百分率、胚胎移植数和流产率均无显著性差异(P>0.05);顶体酶正常组的受精率、仅一个胚胎移植的周期百分率、着床率及临床妊娠率均明显高于顶体酶异常组(P<0.01)。结论:顶体酶活性异常与精液常规分析各主要参数的异常密切相关,可导致体外受精率显著下降。顶体酶活性检测在IVF结局预测中起着重要作用。     

精子顶体酶检测对不明原因不孕夫妇助孕治疗方案选择的临床意义

目的:探讨精子顶体酶检测对不明原因不孕(UI)夫妇选择助孕治疗方案的临床意义。方法:回顾性分析2013年1月至2015年12月诊断为UI,并经3次宫腔内人工授精(IUI)治疗失败改行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的49对夫妇共49个周期的临床资料,并对比分析同期因输卵管阻塞因素行常规IVF治疗的95对夫妇的131个周期的临床资料,比较两组实验室数据、临床结局和顶体酶活性差异;进一步根据UI夫妇男方精子顶体酶活性将UI组分成2个亚组:36 IU/106精子组共20个周期,≥36 IU/106精子组共29个周期,比较两亚组之间受精率的差异。结果:1行IVF-ET治疗的UI夫妇,比同期因输卵管阻塞行常规IVF的夫妇受精率显著下降(67.0%vs 76.4%,P0.05),补救性卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)率高于输卵管因素组(20.4%vs 6.1%,P0.05);成熟卵母细胞比例(MII卵率)、可利用胚胎率、优胚率、种植率、临床妊娠率两组差异无统计学意义(P0.05)。2UI组中位精子顶体酶活性低于输卵管因素组(36.03 IU/106精子vs 61.98 IU/106精子,P0.01),UI组中顶体酶活性36 IU/106精子亚组的受精率明显低于顶体酶活性≥36 IU/106精子亚组的受精率(47.7%vs80.3%,P0.01)。结论:1UI夫妇男方精子顶体酶活性低下导致的受精率低,可能是造成女性不孕的主要原因和潜在因素。2鉴于UI夫妇男方精子顶体酶活性36 IU/106精子时受精率较低,建议不采用IUI治疗,可选择IVF+短时受精联合早期补救ICSI治疗。     

特发性少、弱精子症患者精液质量指标及辅助生殖妊娠结局相关性研究

目的通过分析特发性少、弱精子症患者精液质量及其精子功能、体外受精/胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)妊娠结局以及后代情况,探讨其对精液质量、精子功能、辅助生殖妊娠结局以及出生后代的影响。方法 132例特发性少、弱精子症患者作为实验组,50例正常生育男性纳入对照组。对比两组精子质量、精子功能指标以及妊娠结局和出生后代指标差别有无统计学意义。结果实验组与对照组一般资料的比较,男、女方患者的平均年龄、不育年限、窦卵泡数、女方激素水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。实验组患者精液质量、顶体酶活性、精子-透明质酸结合率小于对照组,DNA碎片、核蛋白组型大于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,实验组IVF治疗者的受精率、着床率,优质胚胎率和临床妊娠率降低,流产率升高,差异有统计学意义(P0.05)。ICSI治疗者,两组患者的受精率、着床率、优质胚胎率、临床妊娠率和流产率无明显差异。实验组对子代影响指标(诸如早产率、出生体质量、双胎妊娠率、男婴比例、出生缺陷率等)与对照组相比,差异亦无统计学意义(P0.05)。结论在IVF/ICSI助孕的患者中,特发性少、弱精子症患者可伴有精子受精能力降低。对于IVF治疗结局不良的特发性少、弱精子症患者,ICSI受精可能会改善其助孕治疗结局。     

维生素E和B12对冷冻精子活力和DNA的保护作用

目的探讨维生素E(Vit E)和Vit B12对冷冻精子活力和DNA的保护作用。方法收集在我院生殖医学中心就诊的32例正常男性精液标本,按照添加维生素的不同分为3组:对照组:精液中只添加常规冷冻保护剂;Vit E组:添加常规冷冻保护剂和5mM的VitE;Vit B12组:添加常规冷冻保护剂和0.5%的Vit B12。比较3组精子复苏后的精子活动力、存活率、顶体酶活性、精子DNA碎片率(SDF)等指标。结果经液氮冷冻72h复苏后,Vit E组活动力(a+b)级的精子数、精子存活率均显著高于对照组(P0.01);顶体酶活性在各组间比较无显著性差异(P0.05);Vit E组和Vit B12组的SDF[分别为(12.16±0.50)%、(13.02±0.48)%]均显著低于对照组的(15.18±0.78)%(P0.01);Vit E组的精子DNA平均晕轮直径[(6.76±0.14)μm]显著高于对照组[(6.09±0.18)μm](P0.01),Vit B12组与对照组比较无显著性差异(P0.05)。结论精子冷冻保护剂中添加适当浓度的Vit E可以缓解冻融过程对精子造成的伤害,在一定程度上提高冻融后精子活动力、存活率及精子DNA完整性。     

精浆弹性蛋白酶水平与精液主要参数和精子功能的相关性分析

目的:探讨精浆弹性蛋白酶与精液主要参数和指标的关系。方法:用酶联免疫吸附法(ELISA)检测精浆中的弹性蛋白酶,按照WHO人类精液实验室手册要求进行精液常规分析、精子形态分析,检测精子顶体酶活性、精浆抗体(AsAb)、解脲支原体等,分析弹性蛋白酶与男性不育相关因素的关系。结果:209例男性不育患者中,43例患者精浆弹性蛋白酶≥290ng/ml,设为炎症组;166例患者精浆弹性蛋白酶<290ng/ml,设为非炎症组。炎症组的精子密度、精子活动率、a+b级活力精子率、精子顶体酶阳性率均低于非炎症组(P<0.05);而精子畸形率、精浆抗体(AsAb)、解脲支原体阳性率均高于非炎症组(P<0.05)。两组的精液量、PH值和液化时间差异无统计学意义。结论:精浆弹性蛋白酶水平与精液质量有密切的关系,生殖道感染是导致男性不育的重要原因。     

高、低生育力捐精者复苏精液功能指标的比较性研究(附40例报告)

目的:探讨可以全面有效评估捐精者生育力的精子功能指标,运用于复苏精液标本的筛选,旨在提高辅助生殖技术成功率。方法:根据捐精者精液使用的妊娠结局,收集上海市人类精子库高、低生育力捐精者的冷冻精液标本各20例,比较两组精液标本复苏后的精子浓度、活力、正常形态率、顶体完整率、DNA完整性以及线粒体膜电位。结果:高、低生育力组精液复苏经系列评估后,正常形态率分别为(18.50±6.10)%、(14.42±6.44)%;顶体完整率分别为(86.17±4.49)%、(80.04±7.52)%;精子DNA碎片率分别为(9.21±3.22)%、(15.72±8.20)%,以上指标经统计学分析两组之间具有显著性差异(P0.05)。但线粒体膜电位高生育力组[(56.75±18.80)%]与低生育力组[(52.23±18.86)%]之间无显著性差异(P0.05)。精子线粒体膜电位与精子活力呈显著正相关(r=0.760,P0.05),其他功能指标与精子浓度、活力无显著相关。结论:精子浓度、活力与正常形态率、顶体完整率以及DNA完整性可以有效评估捐精者复苏精液生育能力。     

精子DNA冷冻损伤易感性与精子活动力相关性

目的研究不同活动力精子其核DNA对冷冻损伤的易感性。方法选取来本中心行精液常规分析,精子浓度5×106/ml、精子正常形态率4%者63例为研究对象。精子冷冻前后均采用染色质扩散(SCD)实验分析核DNA完整性,分别比较高活力组(d级30%,n=28)及低活力组(d级≥30%,n=35)精子在冷冻前后DNA完整性的差异。结果精液标本(n=63)经冷冻后,精子DNA碎片指数(SDF)较冷冻前显著升高[(23.1±12.5)%vs.(19.9±11.6)%,P0.05],其中代表精子DNA完整性较好的大晕轮精子比例显著降低[(71.9±13.3)%vs.(75.8±12.2)%,P0.05],而小晕轮精子比例则显著升高[(10.2±5.7)%vs.(8.2±3.9)%,P0.05]。在低活力组,精子SDF及大晕轮、小晕轮精子比例在冷冻前后亦差异显著(P0.05);而在高活力组,冷冻后仅小晕轮精子比例较冷冻前显著升高[(8.3±3.4)%vs.(6.8±3.0)%,P0.05],SDF及大晕轮、中晕轮、无晕轮的精子比例在冷冻前后均无显著差异(P0.05)。结论相比高活力组精子,低活力组精子核DNA冷冻耐受力较差,更易受损。     

精子DNA完整性对体外授精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的 探讨精子DNA完整性对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床结局的影响。方法 采用染色质扩散实验(SCD)对接受203个周期IVF-ET治疗的男方精液进行精子DNA完整性检测。因女方卵巢反应差取消10个周期,剩余193个周期。根据精子DNA碎片指数(DFI)是否超过30%和是否药物治疗分为3组:DFI异常组55例(DFI30%),DFI正常组(DFI30%)78例和DFI治疗组60例,其中DFI治疗组指患者DFI30%,经药物治疗3个月,降至30%以下。比较DFI与受精率、2PN受精率、卵裂率及优胚率的相关性;比较3组间的种植率、妊娠率和流产率。结果 精子DFI与受精率、2PN受精率及卵裂率均无显著相关性(P0.05),与优胚率具有显著负相关(P0.05)。DFI正常组和DFI治疗组(治疗后DFI30%)的种植率及妊娠率均高于DFI异常组,差异有统计学意义(P0.05)。DFI正常组与DFI治疗组的种植率及妊娠率差异均无统计学统计(P0.05)。3组流产率表现相当,差异均无统计学意义(P0.05)。结论 精子DNA完整性对受精率、2PN受精率及卵裂率无影响,对优胚率、种植率及妊娠率有负面影响,药物改善精子DNA完整性后可提高优胚率、种植率及妊娠率。     

男性年龄与精子顶体酶活性及精子DNA碎片指数的相关性分析

目的探讨男性年龄与精子顶体酶活性、精子DNA碎片指数(DFI)的相关性。方法选取2016年1~8月在我院生殖医学中心就诊的436例不育症男性患者为研究对象,所有患者均行精液常规检查、精子顶体酶活性检查和(或)精子DFI分析。将患者按年龄分为<30岁、30~39岁、≥40岁3组,分析各组的精液常规、顶体酶活性及精子核DFI的差异及其相关性。结果不同年龄段患者的体重指数(BMI)、禁欲天数、精液量无显著性差异(P>0.05);年龄≥40岁组患者的前向运动精子百分率、活动精子百分率及精子顶体酶活性显著低于<30岁和30~39岁组(P<0.05);≥40岁组患者的精子DFI显著高于<30岁和30~39岁组(P<0.05)。年龄与前向运动精子百分率及活动精子百分率之间呈负相关(P<0.05),但是相关性较弱。精子顶体酶活性与精子正常形态率、前向运动精子百分率、非前向运动精子百分率、活动精子百分率呈正相关(P<0.05);精子DFI与年龄、禁欲天数、前向运动精子百分率呈正相关(P<0.01),与精液量、精子浓度、活动精子百分率呈负相关(P<0.05);精子顶体酶活性和DFI之间无相关性(P>0.05)。结论年龄增长会导致精液前向运动精子百分率、活动精子百分率、精子顶体酶活性、DFI等参数改变,直接或间接影响男性生育力。说明年龄对男性不育的影响是多方面的,建议有生育需求的大龄(≥40岁)男性尽早进行生育咨询与评估。     

精子形态率、顶体酶活性对IVF受精失败的影响

目的 探讨精液中精子形态率及顶体酶活性与IVF受精失败的关系.方法 回顾性分析2014年在本中心行IVF新鲜周期的982个周期患者,根据精子形态分析结果,将正常精子形态百分率(x)分为5组,包括:1组:x≥4％,2组:x＜1％,3组:1％≤x＜2％,4组:2％≤x＜3％,5组:3％≤x＜4％.根据顶体酶活性分为正常组及异常组.结果 IVF受精失败组(受精率＜30％)与正常组比较,正常精子形态率及顶体酶活性差异有统计学意义(P＜0.01).精子形态率比较,2、3、4组与1组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).5组与1组比较,差异无明显统计学意义(P＞0.05).顶体酶活性正常组与异常组比较,受精失败率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 精子形态率及顶体酶活性异常可导致IVF受精失败率升高.     

精子畸形程度对常规体外受精-胚胎移植治疗的影响

目的 探讨精子畸形程度对常规体外受精(IVF)-胚胎移植治疗的影响. 方法 2007-2008年接受常规体外受精-胚胎移植105对夫妇男方精液进行分析,按精子正常形态百分率分为3组,正常精子形态组(精子正常形态≥15%)54例、轻度畸形精子组(精子正常形态10%～15%)26例、中度畸形精子组(精子正常形态5%～10%)25例,观察精子畸形程度对IVF受精率、卵裂率、优质胚胎率、着床率、妊娠率及流产率的影响. 结果①精子形态正常组与轻度畸形组受精率(79.4%与78.3%)、卵裂率(104.6%与98.6%)、优质胚胎率(58.1%与53.9%)、植入率(31.7%与30.8%)、妊娠率(48.1%与42.3%)及流产率(13.0%与18.2%)比较差异均无统计学意义(P>0.05).②精子形态正常组与中度畸形组受精率(63.9%)、优质胚胎率(48.2%)、植入率(16.7%)、妊娠率(24.0%)比较差异有统计学意义(P<0.05).而卵裂率(102.9%)、流产率(28.6%)比较差异无统计学意义(P>0.05).③轻度畸形组与中度畸形组受精率、优质胚胎率比较差异有统计学意义(P<0.05),植入率(30.8%与16.7%)、妊娠率(42.3%与24.0%)、卵裂率(98.6%与102.9%)、流产率(18.2%与28.6%)比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 中度畸形精子患者常规IVF受精率、优质胚胎率、植入率和妊娠率有一定影响;轻度畸形精子对常规IVF影响不大.     

长方案添加HMG时机对供精体外受精-胚胎移植结局的影响

目的比较长方案添加人绝经期促性腺激素(HMG)时机对供精体外受精-胚胎移植(IVF-D)结局的影响。方法回顾性分析2010年1月至2016年1月在本院生殖中心就诊进行IVF-D助孕的371例不育患者资料。所有患者均采取长方案进行控制性促排卵(COH),按照添加HMG时机分为两组:卵泡14mm时添加HMG为A组(227个周期),与rFSH同时添加HMG为B组(144个周期)。比较两组Gn总量及天数、HCG日E_2和P、获卵数、2PN率、成胚数、优胚率、胚胎着床率、临床妊娠率、流产率和活产率,并以年龄进行亚组分析。结果与B组相比,A组Gn总量和天数、HCG日的孕酮(P)水平以及优胚率均显著性降低,差异有统计学意义(P0.05);两组间HCG日E_2、获卵数、2PN率、成胚数、胚胎着床率的差异均无统计学意义,A组临床妊娠率和活产率均高于B组,流产率低于B组,但差异无统计学意义;35岁的患者中,A组比B组的Gn总量和天数少,差异有统计学意义(P0.05);≥35岁的患者中,B组的优胚率比A组多,差异有统计学意义(P0.05)。结论长方案促排卵于卵泡晚期添加HMG在不影响妊娠结局的情况下,可以减少Gn用量,降低费用。     

体外受精-胚胎移植术中使用冷冻供精及夫精的临床效果观察

目的 观察比较IVF-ET中使用冷冻供精及夫精的临床效果,了解正常精液经冷冻保存后使用是否影响IVF-ET的效果。方法 回顾本院常规IVF-ET中使用新鲜夫精172周期(夫精组)及采用冷冻供精47个周期(供精组)资料,对两组的精液情况、受精率、卵裂率以及临床妊娠率进行分析比较。结果 冷冻供精组在精子密度、精子总活动率、前向运动精子率3项指标均低于新鲜夫精组(P<0.01),而受精率、卵裂率、临床妊娠率两组比较无显著性差异(P>0.05)。结论 正常精液经冷冻保存后,尽管精液各项参数有一定改变,但对IVF-ET中受精率、卵裂率及临床妊娠率无明显影响。     

男性不育患者精液质量与精子顶体酶活性关系分析

目的:分析男性不育患者精液参数与精子顶体酶活性变化,探讨精液质量与顶体酶活性的关系。方法:对214例男性不育患者的精液作精子顶体酶活性、弹性蛋白酶、果糖、α葡糖苷酶、锌、酸性磷酸酶、精子尾部低渗肿胀试验检测,同时精子质量检测仪作精液分析。以检出精子顶体酶活性正常的(48.2~218.7μIU/106精子)111例作为对照组,与顶体酶活性异常(<48.2μIU/106精子)的103例精液参数作对比分析。结果:两组精液参数的精子密度、精子活动率、a+b级精子百分率、精子尾部低渗肿胀试验差异均有非常显著性(P<0.001)。弹性蛋白酶差异有显著性(P<0.05)。果糖、α葡糖苷酶差异亦有显著性(P<0.05)。精液量、锌、酸性磷酸酶差异无显著性(P>0.05)。结论:精子顶体酶活性与精液质量关系密切,精子顶体酶活性是反映精液质量的一项可靠指标。     

Morphology of seminal and swim-up spermatozoa and the outcome of in vitro fertilization and embryo transfer

Tubal infertility was treated by in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET) in 112 couples. Twenty-eight pregnancies were obtained in 140 treatment cycles. Couples are accepted for treatment in our IVF-ET programme if previous semen samples fulfil the inclusion criteria: ejaculate volume greater than 1.5 ml, concentration of spermatozoa greater than 15 x 10(6) ml-1, greater than 40% motile spermatozoa, and greater than 25% spermatozoa with normal morphology. In order to determine to which extent IVF-ET treatment results are influenced by sperm morphology, within this selected group of patients, we have retrospectively analysed the data from both original semen samples and swim-up preparations. The sperm morphology was not related to the outcome of treatment in terms of fertilization (ovum cleavage rate), early embryo development, or pregnancy. Nor was any relationship detected between early embryo development or pregnancy and the degree of improvement in morphology resulting from the swim-up procedure. However, if improvement in morphology by swim-up was high, ovum cleavage rate was low. Sperm morphology within the limits set by our inclusion criteria could not predict the outcome of IVF-ET treatment. It is further concluded that the presence of abnormal spermatozoa at the site of fertilization may be without harm if only the number of normal sperms is high enough.     

Comparison between in vitro fertilization outcome of two motile sperm separation methods

Objective: To evaluate the efficiency of Percoll density gradient and swim-up methods for motile sperm isolation for in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) program. Methods: The fertilization rate, cleavage rate, embryo developing status and pregnancy outcome of 362 IVF cycles using sperm obtained by the two methods were studied. Results: There was no significant difference in fertilization rate and cleavage rate between the Percoll and swim-up groups. Although the two groups showed no significant difference in the embryo cell number, the percentage of embryos with<20% debris was significantly higher in the Percoll group (77.6%) than in swim-up group (65.9%). The pregnancy rate and the life birth rate were also significantly higher (P<0.01) in the Percoll group (43.7% and 70.3%, respectively) than in the swim-up group (36.6 % and 60.7 %, respectively). Conclusion: The efficiency of the Percoll density gradient method is superior to the swim-up method in motile sperm separation for the IVF-E     

AIH治疗失败后行IVF-ET患者卵泡液中抗精子抗体和抗心磷脂抗体表达情况及妊娠结局

目的探讨夫精人工授精(AIH)治疗失败后行IVF-ET患者,卵泡液中抗精子抗体(AsAb)和抗心磷脂抗体(AcAb)表达情况及妊娠结局。方法回顾性分析2014年1月~10月在我院生殖中心AIH≥3次失败后行IVF-ET的79个周期,其中30个周期行IVF-ET后无优质胚胎移植或未妊娠者纳入A组,49个周期行IVF-ET后成功妊娠者作为对照B组,比较两组临床资料、获卵、受精及优质胚胎情况;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测两组卵泡液中AsAb和AcAb的表达。结果两组年龄、不孕年限、体重指数(BMI)、激素等临床资料比较,差异均无统计学意义(P0.05)。A组受精率和优质胚胎数显著低于B组(P0.01);A组平均获卵数和卵裂率低于B组,但差异无统计学意义(P0.05)。卵泡液中AsAb和AcAb在A组阳性率均显著高于B组(P0.01)。结论AIH≥3次未妊娠后行IVF-ET卵泡液中AsAb和AcAb阳性表达,可能影响受精、优质胚胎形成和胚胎种植生殖环节。     

不育患者精浆α-1,4糖苷酶活性与精液参数的关系

目的　探讨精浆 α-1 ,4糖苷酶活性与精液参数之间的关系。　方法　分光光度比色法测定精浆 α-1 ,4糖苷酶活性及进行精液常规分析。　结果　 2 90 2例男性不育者精浆α-1 ,4糖苷酶活性异常率为 3 8.87%。该酶活性与精子密度、精子活率、a,b级精子活力和顶体酶活性呈显著正相关 ( r分别为 0 .460、0 .1 2 2、0 .0 86和 0 .2 3 0 ,P均 <0 .0 0 1 ) ,而与精液量、精液 p H、液化时间和畸形精子率无显著相关 ( P>0 .0 5)。 α-1 ,4糖苷酶活性正常组精子密度、活率、a,b级精子活力和精子顶体酶活性均明显高于 α-1 ,4糖苷酶活性异常组 ( P<0 .0 0 1 )。以常规精液分析法 ( RSA)主要参数正常与否分成的两组间α-1 ,4糖苷酶活性差异有显著性 ( P<0 .0 0 1 )。　结论　α-1 ,4糖苷酶活性对精子密度、活率、a,b级精子活力和顶体酶活性均有明显影响 ,对精液量、精液 p H、液化时间和畸形精子率无显著影响