UGT1A6、UGT1A9基因多态性对汉族癫痫患者丙戊酸血药浓度的影响

目的:考察尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)1A6和1A9基因多态性对汉族癫痫患者丙戊酸血药浓度的影响。方法:选取2014年1月—2015年4月于我院门诊就诊的汉族癫痫患者107例,均使用丙戊酸单药治疗,治疗时间为3个月~6年。采用酶放大免疫法测定患者体内丙戊酸稳态血药浓度,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法检测其UGT1A6(rs2070959、rs6759892)和UGT1A9(rs13418420、rs2741045、rs2741049、rs6731242、rs72551330)基因型,并考察基因多态性与丙戊酸标准化血药浓度(CDR)的相关性。结果:未检出UGT1A9 rs72551330突变型,其余6个位点基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。UGT1A6 rs2070959、rs6759892突变基因携带(AG+GG或TG+GG型)者丙戊酸CDR值显著低于其野生纯合子携带(AA或TT型)者,差异均有统计学意义(P<0.05);而携带UGT1A9 rs13418420、rs2741045、rs2741049和rs6731242野生纯合子和突变基因的患者丙戊酸CDR值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:汉族癫痫患者UGT1A6 rs2070959、rs6759892基因多态性与丙戊酸血药浓度有关,且UGT1A6 rs2070959、rs6759892突变基因携带者可能需要更高的丙戊酸剂量。     

汉族癫痫患者UGT1A6基因多态性对丙戊酸血药浓度的影响

摘 要 目的:检测尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶（UGT）1A6 A541G基因多态性在黑龙江汉族癫痫患者中的分布频率,探讨UGT1A6基因多态性对丙戊酸血药浓度的影响。方法: 应用荧光偏振免疫法（FPIA）测定患者丙戊酸钠的血药浓度,PCR-RFLP技术检测患者UGT1A6 541位点的基因多态性,PCR扩增产物进行测序验证方法的可靠性。结果:97例汉族癫痫患者中有28名（28.9%）携带突变型UGT1A6基因,其中服用单位剂量（mg·kg^-1）引起的血药浓度AA基因型患者为（3.06±0.80）μg·ml^-1,AG基因型患者为（2.21±0.66）μg·ml^-1,两者差异有统计学意义（P<0.05）。结论:UGT1A6基因多态性对丙戊酸血药浓度有影响,临床上对于含突变型UGT1A6基因的患者服用丙戊酸时应较常规减少用药减量。     

葡萄糖醛酸转移酶UGT2B7-A268G基因多态性对癫痫儿童丙戊酸血药浓度的影响

目的：在丙戊酸（VPA）单药治疗的癫痫儿童中评估葡萄糖醛酸转移酶UGT2B7-A268G位点的遗传基因多态性对VPA血清浓度的影响。方法：本研究纳入200例癫痫患儿的丙戊酸血药浓度,测定VPA稳态血清浓度。对UGT2B7编码区的A268G采用聚合酶链反应（RPLF）扩增进行基因鉴定分型。根据UGT2B7基因多态性分析VPA血清药物浓度与基因多态性的关系。结果：携带变异UGT2B7-268G一个基因型或纯合基因患儿的VPA血清药物浓度显著高于携带AA基因的患儿。由于儿童个体差异较大,根据年龄、体质量调整VPA浓度后与基因多态性仍然显著关联（P<0.05）。UGT2B7-A268G的基因多态性与Hardy-Weinberg平衡一致（P>0.05）,其中UGT2B7-268A>G等位基因频率分布的是30.00%,而G突变的基因分布频率为70.00%。结论：癫痫患儿UGT2B7基因的A268G突变可能改变丙戊酸的药物代谢动力学过程,并且不受年龄、体质量等因素干扰。UGT2B7的基因多态性对儿童丙戊酸血药浓度产生影响,测定其基因型对于获得适当的丙戊酸稳态浓度和设定起始用药剂量有积极意义     

SCN1A、SCN2A基因多态性对癫痫儿童丙戊酸钠治疗效果的影响研究

目的：分析SCN1A、SCN2A基因多态性对丙戊酸钠治疗癫痫患儿的疗效影响。方法：采用PCR和Sanger测序法检测128例丙戊酸钠规范治疗的癫痫患儿（有效组76例、无效组52例）外周血SCN1A（rs10188577、rs2298771、rs3812718、rs1813502）、SCN2A（rs2304016、rs17183814）多态性。采用非条件Logistic回归分析基因型、等位基因频率与丙戊酸钠疗效的关系,分析不同基因型患者丙戊酸钠血药浓度的差异。结果：SCN1A基因rs3812718位点多态性与丙戊酸钠治疗效果有关。携带GA和AA基因型的患者用丙戊酸钠治疗有效（GG vs GA：OR=1.186,95%CI 0.965~2.304,P=0.015;GG vs AA：OR=1.252,95%CI 1.007~3.254,P=0.002）。有效组SCN1A基因rs3812718位点A等位基因频率明显高于无效组（OR=1.452,95%CI 1.052~2.695,P=0.010）。其余基因位点组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：SCN1A基因rs3812718位点多态性可能与丙戊酸钠抗癫痫效应有关。     

基因多态性对丙戊酸钠及代谢物血药浓度的影响及其与不良反应的相关性研究

目的：研究细胞色素P450 2C9（CYP2C9）、尿苷葡萄糖醛酸转移酶（UGTs）、氨甲酰磷酸合酶1（CPS1）、线粒体聚合酶（POLG）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶2（SOD2）基因多态性与丙戊酸钠(VPA)及其代谢物2-丙基-4-戊烯酸（４-ene-VPA）、2-丙基-2-戊烯酸（2-ene-VPA）的关系,探索代谢物浓度与肝功能损伤的相关性,为临床治疗提供依据。方法：收集99例癫痫患者共144份血液样本,记录患者肝功能指标,采用LC-MS/MS法检测VPA及其代谢物血药浓度,采用Snapshot技术检测UGT2B7（rs12233719、rs7668258）、UGT1A6（rs2070959、rs1105879、rs89910）、CAT rs1001179、SOD2 rs4880、CPS1 rs1047891、POLG rs3087374、CYP2C9 rs1057910基因型,比较不同基因型患者的VPA、４-ene-VPA及2-ene-VPA校正血药浓度差异,探索血药浓度与肝功能指标间的相关性。结果：UGT1A6 rs89910 CT型患者VPA、2-ene-VPA校正血药浓度高于CC型患者（P ＜ 0.05）;UGT2B7 rs7668258 TT型患者2-ene-VPA校正血药浓度低于CC/CT型（P ＜ 0.05）。同时发现VPA与4-ene-VPA血药浓度与肝功能指标相关,而CPS1 rs1047891 CC型患者丙氨酸氨基转移酶与碱性磷酸酶均低于AA/AC型患者（P ＜ 0.05）。结论：UGT1A6 rs89910、UGT2B7 rs7668258基因多态性与2-ene-VPA校正血药浓度相关。VPA及其代谢物４-ene-VPA可以引起肝功能损伤,CPS1 rs1047891 CC型患者比AA/AC型患者服用VPA后肝脏解毒能力更强。     

多药耐药基因单倍体对中国癫痫患者丙戊酸钠血药浓度的影响

目的：探讨多药耐药基因（MDR1）C1236T、C3435T、G26677T/A 3个SNP位点单倍型对中国汉族癫痫患者丙戊酸钠血药浓度的影响。方法：实验选择单药服用丙戊酸钠的汉族癫痫患者143例,根据临床资料分为耐药组（n=68）和控制组（n=75）,应用Pyrosequencing法测定MDR1基因C1236T、C3435T、G26677T/A多态性,同时应用荧光偏振免疫法（FPIA）测定耐药组和控制组患者丙戊酸钠的血药浓度。结果：耐药组C3435T位点CC型发生率（66.18%）高于控制组（26.03%）（P〈0.01）,而CT型发生率（19.12%）则低于控制组（60.27%）（P〈0.05）,耐药组C1236T CT型（23.53%）低于控制组（45.33%）（P〈0.05）;单倍体分析结果表明,丙戊酸钠耐药组单倍型CGC（18.38%）高于控制组（9.33%）（P〈0.05）;单倍型TTT（10.29%）低于控制组（17.33%）（P〈0.05）;血药浓度检测结果表明：CGC型的血药浓度高于控制组,两组资料间血药浓度均值的差别有统计学意义（P〈0.05）。结论：MDR1基因CGC单倍型影响癫痫患者丙戊酸钠血药浓度,可能是引起丙戊酸钠耐药的影响因素。     

丙戊酸诱发癫痫患儿高血氨的影响因素研究

目的：研究影响丙戊酸诱发高血氨的遗传及非遗传因素。方法：将260例服用丙戊酸的癫痫患儿（年龄<16岁）按血氨水平分为高血氨组130例、对照组130例。记录各组患儿人口学信息（包括性别、身高、体质量、年龄）、肝功能指标和用药信息（日剂量、合并用药等）,同时测定相关代谢酶CYP2C9,UGT1A6,UGT2B7,UGT1A4,转录因子AhR及尿素循环酶CPS1基因多态性,通过多因素Logistic回归分析遗传及非遗传因素对丙戊酸诱发高血氨的影响。结果：高血氨组肝功能指标GGT、丙戊酸的剂量、合并托吡酯的比例及合并服用其他抗癫痫药的数量均明显高于对照组。2组间CPS1,AhR和UGT2B7的基因型分布存在差异。CPS1 rs1047891 CA和AA型（P<0.001）以及AhR rs2066853 AG和AA型（P<0.001）是丙戊酸导致血氨升高的危险因素。结论：丙戊酸诱发的高血氨与多种遗传和非遗传风险因素相关,在癫痫儿童应用丙戊酸进行治疗时,建议定期监测体内血氨浓度,避免高血氨的发生。     

细胞色素P450 2A6与2B6基因多态性影响丙戊酸血药浓度的系统评价

目的 评价细胞色素P450 2A6、2B6(CYP2A6、CYP2B6)基因多态性对癫痫患者丙戊酸浓度剂量比(C/D)的影响。方法 检索Pub Med、EMBase、中国知网、维普与万方数据库,系统评价CYP2A6、CYP2B6基因多态性对癫痫患者丙戊酸C/D影响的临床研究。结果 共纳入5篇文献,CYP2A6*1/*1基因型患者的丙戊酸C/D显著低于*1/*4+*4/*4基因型患者(P<0.05);CYP2B6*1/*1基因型患者的丙戊酸C/D显著低于*1/*6+*6/*6基因型患者(P<0.05)。结论 CYP2A6*4与CYP2B6*6基因多态性对丙戊酸的血药浓度预测具有一定的临床指导价值。     

CYP2C9与CYP2C19基因多态性与癫痫患者丙戊酸血药浓度关系研究

目的:探讨细胞色素氧化酶P450 2C9(CYP2C9)和CYP2C19基因型对癫痫患者丙戊酸血药浓度的影响.方法:对40例癫痫患者应用限制性酶切片段多态性技术分析中国人常见的1个CYP2C9和2个CYP2C19等位基因变异,应用荧光偏振免疫法测定患者丙戊酸的血药浓度,在进行标准化以排除剂量和体重对血药浓度的影响后,分析CYP2C9、CYP2C19基因型和丙戊酸血药浓度的关系.结果:根据携带CYP2C9和CYP2C19突变等位基因的数量,将患者分为基因型CYP2C911合并CYP2C1911的野生型纯合子强代谢者(EM).基因型为CYP2C913或CYP2C1912或CYP2C1913的杂合中等代谢者(IM),基因型为CYP2C933或CYP2C913合并CYP2C1913或CYP2C1922的突变型纯合子弱代谢者(PM).三组频率分别为47.5%、25%和27.5%.并且突变基因携带数量与标准化血药浓度呈正相关.PM患者服用等剂量丙戊酸时血药浓度比EM患者高(P<0.05).结论:丙戊酸代谢受CYP2C9和CYP2C19基因调控.检测患者CYP2C9和CYP2C19基因型可以预测患者药物浓度,有利于临床选择适宜的丙戊酸初始剂量.     

UGT2B7 C802T和G211T基因多态性对癫痫患者丙戊酸代谢的影响

目的:检测尿苷二磷酸葡糖醛酰转移酶UGT2B7 C802T和G211T等位基因在癫痫患者中的分布和突变频率,探讨UGT2B7 C802T和G211T基因型对癫痫患者丙戊酸代谢的影响。方法:直接化学发光法测定丙戊酸血药浓度,PCR-RFLP技术检测UGT2B7 C802T和G211T基因多态性,PCR扩增产物直接测序验证基因型检测方法的可靠性。结果:102例癫痫患者中UGT2B7 C802T位点野生型CC14例,杂合突变型和纯合突变型CT、TT分别为46例和42例;UGT2B7 G211T位点的野生型GG78例,突变型GT、TT分别为23例和1例;位点802CC野生基因型患者服用单位剂量(mg·kg^-1)后的血药浓度为(3.02±1.32) μg·kg·ml^-1·mg^-1,CT基因型患者为(2.11±1.26) μg·kg·ml^-1·mg^-1,TT基因型患者为(2.31±1.25) μg·kg·ml^-1·mg^-1,CT、TT患者血药浓度较CC患者明显偏低,差异有统计学意义。位点211GG基因型患者服用单位剂量(mg·kg^-1)引起的血药浓度为(2.28±1.32) μg·kg·ml^-1·mg^-1,GT基因型患者为(2.30±1.38) μg·kg·ml^-1·mg^-1,GG型与GT型患者间无统计学差异。结论:UGT2B7 C802T基因多态性与丙戊酸的血药浓度有显著相关性,UGT2B7 G211T位点基因多态性与丙戊酸的血药浓度无显著相关性。临床上个体血药浓度的差异可能与UGT2B7 C802T基因多态性有关。     

UGT1A1基因多态性与伊立替康治疗晚期结直肠癌毒性和疗效的关系

目的：探讨UGT1A1＊28/＊6基因多态性与伊立替康治疗晚期结直肠癌的毒性和疗效的关系。方法：选取2011年6月–2013年6月在我科治疗的晚期结直肠癌患者,共计102例,对其进行UGT1A1＊28/＊6基因检测,随访记录患者行伊立替康化疗后的不良反应和近期疗效,比较不同基因型患者之间有无差异。结果：不同UGT1A1＊28/＊6基因型患者中3~4级中性粒细胞减少和迟发性腹泻发生率无显著差异。联合UGT1A1＊28和＊6两位点分析,野生型、单点变异型和双点变异型患者中3~4级中性粒细胞减少发生率逐渐升高,三者有显著差异且升高趋势有统计学意义（4.3%、17.4%、57.1%,P=0.005,趋势检验P=0.002）。UGT1A1＊28基因型对治疗有效率（RR）和疾病控制率（DCR）无显著影响,但UGT1A1＊6基因突变者较野生型者RR、DCR均明显降低（P=0.023,P=0.032）。联合两位点分析,野生型、单点变异型和双点变异型患者RR、DCR均有显著差异（P=0.002,P=0.008）,且DCR降低趋势有统计学意义（95.7%、73.9%、42.9%,趋势检验P=0.001）。结论：在预测伊立替康毒性及疗效时,联合检测UGT1A1＊28/＊6两位点基因较单独检测一个位点更有价值。     

PXR基因多态性与心脏移植术后稳定期环孢素血药浓度的相关性

目的：探讨心脏移植患者术后口服免疫抑制剂环孢素的血药浓度与PXR基因多态性的相关性。方法：应用飞行时间质谱技术对59例心脏移植术后稳定期患者的PXR基因型进行检测,全自动化学免疫分析仪测定环孢素的血药浓度,并通过统计学分析PXR各单核苷酸多态性（SNP）位点基因型对环孢素血药浓度的影响。结果：PXR基因筛选出的8个Tag SNP位点次要等位基因频率（MAF）与NCBI的dbSNP数据库中中国人的数据相近。对于59名稳定期心脏移植患者PXR基因8个Tag SNP中,仅携带PXR rs1523127（C 24381 A）位点AA型基因的患者血药浓度及校正血药浓度明显低于CA型,CA型又低于CC型患者,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。其他7个Tag SNP rs3814056T＞G、rs7643645A＞G、rs11917714C＞T、rs2276705C＞A、rs2472681T＞C、rs2472682C＞A、rs4440154C＞T各基因型组间环孢素血药浓度的差异均无统计学意义。结论：PXR rs1523127（C 24381 A）基因型与心脏移植稳定期患者环孢素血药浓度显著相关,提示该SNP可能会在环孢素个体化用药中发挥重要作用。     

β1肾上腺素受体与CYP2D6基因多态性对美托洛尔抗高血压治疗的影响

目的:探讨β1肾上腺素受体与CYP2D6基因多态性对美托洛尔抗高血压治疗的影响.方法:将2008年10月至2009年10月在安徽省皖南地区收集的120例原发性高血压患者进行岛肾上腺素能受体(β1-AR)和代谢酶细胞色素2136(CYP2D6)基因多态性检测,将β1-AR 389位携带Arg的118例患者按照CYP2D6...     

丙戊酸钠血药浓度与抗癫痫疗效及不良反应关系研究

目的：研究丙戊酸钠血药浓度与其抗癫痫疗效及不良反应的关系,为临床合理应用抗癫痫药丙戊酸钠提供参考,同时也为制订个体化给药方案提供依据。方法：采用回顾性分析方法,查阅我院2010—-2012年服用丙戊酸钠的癫痫患者的病历,收集整理资料,对丙戊酸钠血药浓度、抗癫痫疗效和各个系统出现的不良反应进行统计和分析。结果：研究共收集114例患者监测结果,丙戊酸钠血药浓度在正常范围内的（50—100μg/ml）有72例,其中显效和有效的有50例（占69．44％）,疗效不足或疗效差与无效的有22例（占30．56％）;丙戊酸钠血药浓度〈50μg／ml的有35例,其中显效和有效的有21例（占60．00％）,疗效不足或疗效差与无效的有14例（占40．00％）;丙戊酸钠血药浓度〉100μg／ml的有7例。服用丙戊酸钠,出现肝功能异常者4例、肾功能异常者2例、血液系统异常者4例、消化系统不良反应者3例、神经系统不良反应者5例及皮肤不良反应者3例。结论：丙戊酸钠血药浓度在有效浓度范围内有较好的疗效,但存在个体差异。丙戊酸钠在有效浓度范围内,出现了血液系统、消化系统等不良反应,因此在临床上使用时应监测其血药浓度和不良反应。     

Influence of UDP-glucuronosyltransferase polymorphisms on valproic acid pharmacokinetics in Chinese epilepsy patients

Purpose

The aim of this study was to investigate the genetic polymorphisms of UGT1A3, UGT1A6, and UGT2B7 in Chinese epilepsy patients and their potential influence on the pharmacokinetics of valproic acid (VPA).

Methods

The genetic architectures of UGT1A3, UGT1A6, and UGT2B7 in 242 epilepsy patients were detected by DNA sequencing and PCR-restriction fragment length polymorphism. Steady-state plasma concentrations of VPA in 225 patients who had received VPA (approx. 250–1,000?mg/day) for at least 2 weeks were determined and associated with UGT polymorphisms.

Results

The allelic distribution of UGT1A3 in our Chinese epilepsy patients was significantly different from that in healthy subjects based on reference data. The standardized trough plasma concentration (C_S) of VPA was much lower in our patients with the UGT1A3*5 variant than in the wild type carriers (3.24?±?1.05 vs. 4.68?±?1.24?μg·kg·mL^-1·mg^-1, P?Conclusion Our results suggest that UGT1A3*5 may be an important determinant of individual variability in the pharmacokinetics of VPA and that it may be necessary to increase VPA dose for UGT1A3*5 carriers to ensure its therapeutic range of 50–100?μg/mL.     

用NONMEM法建立癫痫患者丙戊酸群体药代动力学模型

目的建立丙戊酸（VPA）在癫痫患者中的群体药代动力学（PPK）模型,考察固定效应因素对VPA清除率（CL/F）的影响。方法回顾性收集贵州省人民医院111名癫痫患者VPA稳态血药浓度数据及相应的人口学、合并用药及CYP2A6基因型等资料,随机将患者分成建模组（74名）及验证组（37名）,使用建模组数据通过非线性混合效应模型（NONMEM）程序建立VPA的PPK模型。使用验证组数据来验证模型的准确度和精密度,比较基础模型和最终模型的平均预测误差（MPE）、平均绝对误差（MAE）、平均根方差（RMSE）。结果建立的最终模型包含了日用药剂量（DDO）及CYP2A6基因型,模型方程为：CL/F=0.363.DDO0.525.1.29GENECYP2A6。最终模型有更好的精密度及准确度,基础模型MPE、MAE、RMSE值为-10.631、4.40、22.55,最终模型相应值为-6.11、9.06、14.17。结论本研究初步建立癫痫患者VPA的PPK模型,VPA清除率随日给药剂量的增大而增大,CYP2A6野生型（CYP2A6＊1/＊1）组患者较CYP2A6突变型（CYP2A6＊1/＊4、CYP2A6＊4/＊4）组患者有更高的VPA清除率。     

无肝状态下丙泊酚代谢相关UGT1A6在大鼠肝外器官的基因表达

目的:研究无肝期前、后与丙泊酚代谢相关的代谢酶UGT1A6在大鼠小肠、肾、肺、脑器官组织中基因表达的变化,以期初步阐释丙泊酚无肝期肝外代谢特点形成的原因。方法:15只大鼠单次注射丙泊酚后随机分为3组(n=5),A组为对照组,B组阻断肝门30min,C组阻断肝门60min,截取各组大鼠小肠、肾、肺、脑器官组织,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,检测各组UGT1A6mRNA的表达。结果:大鼠各受检器官组织中UGT1A6的基因表达水平B、C组明显高于A组(P<0.01);B组与C组相比,没有显著性差异(P>0.05)。结论:大鼠受检组织中UGT1A6基因表达在无肝期比无肝期前增多,系可能促进丙泊酚无肝期肝外代谢增强的原因。     

癫痫患者CYP2D6~* 10基因多态性分析

目的:通过比较本地区健康人与癫痫患者CYP2D6*10基因多态性的差异,探索CYP2D6*10基因多态性与癫痫易感的关系。方法:应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测健康人和癫痫患者CYP2D6*10的基因型分布及等位基因频率,通过χ2检验来比较健康人和癫痫患者的基因型分布差异和等位基因频率差异。结果:健康人和癫痫患者的基因型分布及等位基因频率差异有显著性和高度显著性(P<0.05和P<0.01)。结论:癫痫病的发生与CYP2D6*10的碱基变异具有相关性。     

CYP3A5基因多态性对汉族癫痫患者卡马西平稳态血药浓度及疗效的影响

目的:考察CYP3A5基因多态性对汉族癫痫患者卡马西平(CBZ)稳态血药浓度及疗效的影响。方法:选取确诊为癫痫并使用CBZ治疗的患者40例,用聚合酶链反应-限制性内切片段长度多态性法检测CYP3A5基因型并分组,用高效液相色谱法测定卡马西平的稳态血药浓度,同时观察疗效和不良反应。结果:40例患者中CYP3A5*1/*1基因型(A组)27例,CYP3A5*3/*3基因型(B组)13例。两组患者CBZ剂量校正浓度分别为(12.39±4.13)和(16.54±3.89)μg/ml,标准化浓度分别为(0.21±0.08)和(0.30±0.11)μg/ml,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者疗效(P=0.726)和不良反应(P=0.617)比较差异均无统计学意义。结论:CYP3A5基因多态性可能影响汉族癫痫患者CBZ的稳态血药浓度,而对疗效和不良反应的影响尚不明确。