荔枝核黄酮体外抗单纯疱疹病毒的作用

目的:探讨荔枝核黄酮类提取物(FLC)体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法:以阿昔洛韦为阳性药物对照,以不同剂量的荔枝核黄酮类提取物分别作用于HSV-1病毒复制周期的各个环节分成3个实验组,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞存活率(MTT法)作为评价指标,判断的FLC抗病毒效果。结果:FLC对HEp-2细胞的半数细胞毒浓度(TC50)为239.25 mg/L,FLC对HSV-1病毒有直接杀伤作用和抗HSV-1生物合成作用,其直接杀伤HSV-1的半数有效浓度(IC50)为32.76 mg/L,治疗指数(TI)为7.30,抗HSV-1生物合成作用的半数有效浓度(IC50)为12.72 mg/L,治疗指数(TI)为18.81。结论:荔枝核黄酮类化合物在HEp-2细胞中对单纯疱疹病毒1型有明显抑制作用。     

重组集成干扰素α体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的药效学研究

目的探讨重组集成干扰素α(IFN-Conα)在体外对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)和Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的抑制作用.方法应用细胞病变抑制法,观察不同浓度的重组集成干扰素α对HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ型病毒感染Vero细胞的抑制作用.结果IFN-Con α对Vero细胞无明显细胞毒作用,其中度毒性浓度(TC50)＞3μg/ml.对HSV-Ⅰ型和HSV-Ⅱ型的50%的抑制浓度(IC50)分别是(1.8×10-4±0.3×10-4)μg/ml和(3.5×10-4±1.5×10-4)μg/ml.其结果显著优于阳性对照药物阿昔洛韦和干扰素α(IFN-α),其IC50阿昔洛韦对HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ分别为(6.4×10-1±0.6×10-1)μg/ml和(19.1±2.42)μg/ml;IFN-α则分别为(1.6×10-2±1.0×10-2)μg/ml和(3.7×10-2±7.04×10-3)μg/ml.结论IFN-Con α抗HSV-Ⅰ型和HSV-Ⅱ型的有效剂量明显低于阳性对照药阿昔洛韦和干扰素α(P＜0.01).     

纳米级二氧化硅N-1、N-2抗疱疹病毒2型效果的实验观察

目的观察二氧化硅(SiO2)N-1、N-2抗疱疹病毒2型(HSV-2)作用.方法根据实验病毒感染细胞致病和药物特性,先测定HSV-2的毒力,测算出病毒对细胞的半数感染量(TCID50).再测定药物对细胞毒性,找出药物最大无毒浓度TCDo,最后测定药物SiO2 N-1、N-2对病变细胞(CPE)作用的半数有效剂量.结果SiO2 N-1、N-2对病变细胞(CPE)作用的半数有效剂量,SiO2 N-1 IC50为1/3200,SiO2N-2 IC50为Cm/4即1/8.结论SiO2(N-1、N-2)具有一定的抗疱疹病毒(HSV-2)作用.     

几种重组干扰素单独及联用阿霉素对骨肉瘤细胞的毒性研究

目的体外评价几种国产干扰素联合阿霉素的抗骨肉瘤活性及其协同效应。方法采用MTT比色法,体外对比检测阿霉素及几种国内临床常用重组干扰素（rhIFNα2a、rhIFNα1b、rhIFNα1c、rhIFNβ和rhIFNγ）的抗骨肉瘤细胞增殖活性。分别将几种干扰素与阿霉素联合用药,对比检测其抗骨肉瘤的协同作用。结果rhIFNα2a为5×104IU/L、rhIFNα1b为3.75×105IU／L、thIFNalc为1.25×105IU／L、rhIFNβ为5×105IU／L时,细胞生长抑制率均达到50％：rhIFNγ对0S732细胞生长无明显抑制作用;rhIFNα1c与ADM合用时有明显的协同增强效应。结论rhIFNα2a、rhIFNa1b、rhIFNβ、rhIFNαlc对骨肉瘤细胞的生长有明显的抑制作用,其中以rhIFNα2a和rhIFNα1c作用最为明显;上述4种IFNs与阿霉素合用均呈协同增强效应;rhIFNγ在体外对骨肉瘤细胞无明显抑制作用。     

穿心莲水提取物的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒作用

目的观察穿心莲水提取物体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)的作用。方法以无环鸟苷(ACV)为阳性对照,将不同稀释浓度的穿心莲水提取物在兔肾细胞上进行治疗、预防及中和实验,通过观察细胞病变(CPE),观察穿心莲水提取物抗HSV-Ⅰ的作用效果。结果穿心莲水提取物半数毒性浓度(TC50)为2.50g/L,有效抑制浓度为0.63g/L,对Ⅰ型疱疹病毒的感染有抑制病毒生长和对病毒颗粒有直接杀伤作用。结论穿心莲水提取物体外有明显的抗Ⅰ型疱疹病毒的作用。     

大鼠生精细胞体外培养条件的研究

目的:寻找一个最适合生精细胞体外培养的培养体系,为进一步培养人类生精细胞提供技术基础.方法:用单一酶-研磨-Percoll法制备15 d龄雄性大鼠生精细胞混悬液用于体外培养.①设计两种不同的培养条件:DMEM/F12和改良人类输卵管液(HTF)作为基础培养液,分为两组.每组根据添加不同浓度的激素分为6小组.添加的睾酮(T)和FSH浓度分别为:对照组H0(T 1 μmol/L,FSH 0 IU/L)、H1组(T 1 μmol/L,FSH 10 IU/L)、 H2组(T 1 μmol/L,FSH 25 IU/L)、H3组(T 1 μmol/L,FSH 50 IU/L)、H4组(T 1 μmol/L,FSH 100 IU/L)、H5组(T 0 μmol/L,FSH 50 IU/L). ②通过BRDU标记和流式细胞仪检测所有实验的生精细胞倍体的变化来判断其发育,进一步确认本研究使用培养条件的可靠性.结果:在生精细胞与支持细胞共培养过程中以改良人类输卵管液作为基础培养液,添加T 1 μmol/L ,FSH 50 IU/L或100 IU/L都适宜生精细胞体外培养;另通过BRDU标记及流式细胞仪检测均表明,在本研究条件下体外培养生精细胞能从初级精母细胞阶段分化到精子细胞阶段.结论:改良人类输卵管液作为基础培养液,添加浓度为50 IU/L或100 IU/L的FSH及T 1 μmol/L,最适合生精细胞的体外成熟培养.     

藏药甘青乌头生物碱抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用

目的探讨藏药甘青乌头脂溶性生物碱（ALA）和水溶性生物碱（AWA）抗单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的作用和机制。方法四甲基偶氮唑蓝法测定细胞毒性,细胞病变作用法和蚀斑法测定甘青乌头生物碱体外抗HSV-2活性,以半数有效浓度和治疗指数为评价指标;荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和蚀斑法考察ALA和AWA体外抗HSV-2作用机制。用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对AWA体内抗HSV-2的活性进行评价。结果 ALA和AWA对Vero细胞的半数中毒浓度分别为3.57和7.87mg/mL。ALA和AWA半数有效质量浓度分别为4.99和2.81 mg/mL,治疗指数分别为0.72和2.80。ALA和AWA均能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性。ALA对吸附到非洲绿猴肾细胞的HSV-2没有抑制作用,能微弱抑制HSV-2大分子的增殖,对HSV-2 DNA的复制没有作用。AWA能够抑制HSV-2吸附,抑制HSV-2大分子的增殖,抑制HSV-2 DNA的合成,抑制倍数达10~2。AWA对小鼠的半数中毒质量浓度为0.28mg/kg。AWA延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率。结论 AWA抗HSV-2的活性大于ALA,ALA主要通过直接灭活HSV-2,AWA通过抑制HSV-2复制循环的各个环节起作用。     

猪脾干扰素的制备及其与人α—干扰素的抗病毒活性比较

以猪脾为原料,用新城疫病毒F素(NDV-F)诱导制备猪脾干扰素(PorsIFN),并与人α-干扰素(HuIFN-α)进行了抗病毒活性的比较,结果PorsIFN在人二倍体细胞(2BS)上抗水泡性口腔炎病毒(VSV)的活性是在猪肾细胞(PK15))上的1.25倍,而HuIFN-α在PK15上的抗VSV活性比在2BS上低1/2,但单纯疱疹病毒1型(HSV-1)对HuIFN-α的敏感性高于PorsIFN。     

纳米雄黄对单纯疱疹病毒Ⅱ型的体外抗病毒活性

目的：探讨纳米雄黄对单纯疱疹病毒II型(herpes simplex virus Type II,HSV-2)的体外抗病毒活性。方法： 以阿昔洛韦作为阳性对照,采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法观察 不同浓度(200.00,150.00,100.00,50.00,25.00,12.50,6.25,3.13,1.54,0.78,0.39和0 mg/L)纳米雄黄对正常非洲 绿源猴肾细胞(Vero细胞)作用48 h的细胞毒性;空斑法测定病毒滴度,建立病毒感染细胞模型,并采用细胞病变观 察和MTT结合的方法对不同浓度(20.00,10.00,5.00,2.50,1.25,0.63,0.31,0.15,0.08,0.04和0 mg/L)纳米雄黄在 预防、治疗及直接灭活病毒3种给药方式下的抗HSV-2活性进行评价。结果：纳米雄黄对正常Vero细胞的半数细胞毒 性浓度为37.15 mg/L,HSV-2病毒滴度为7.30 log PFUs/mL,纳米雄黄在预防、治疗和直接灭活病毒3种给药方式下对 HSV-2感染细胞的半数有效浓度分别为0.13,1.80和0.52 mg/L,对应的治疗指数分别为285.77,20.64和71.44,纳米雄 黄在预防给药下的治疗指数高于其治疗和直接灭活给药。结论：纳米雄黄在3种给药方式下均具有良好的抗HSV-2活 性,且预防给药的疗效较好。     

用中性红释放试验研究NK细胞在体外杀伤HSV-1感染的靶细胞的作用

本文报道用中性红释放试验检测自然杀伤细胞(NK细胞)体外杀伤单纯疱疹病毒-Ⅰ型(HSV-1)感染的靶细胞,并同时与~(51)Cr释放试验作比较。结果表明,中性红释放试验检测NK细胞的最适条件:以0.1％中性红标志L929细胞(1×105个/ml);4个空斑形成单位(PFU)PISV-1(KOS株)体外感染L929细胞2h,可得到较好结果。每项实验均同时进行常规的~(51)Cr标志释放试验。结果显示两法具有较好一致性。     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制.方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTY法检测LSE对柯萨奇B3病毒(Cox B3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨.结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制Cox B3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC<,50>值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL.该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用.LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51%.ISE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性.结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现.     

盐酸阿比朵尔抗腺病毒7型的实验研究

目的:明确抗病毒新药盐酸阿比朵尔体外抗腺病毒7型(ADV-7)的作用方式。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性、病毒滴定3种方法从药物抗病毒生物合成、药物直接杀伤病毒以及药物抗病毒吸附3方面检测盐酸阿比朵尔的作用方式。结果:盐酸阿比朵尔对ADV-7无直接杀伤作用,也不能阻止ADV-7的吸附和穿入,各用药组均出现典型的CPE,但盐酸阿比朵尔能明显抑制ADV-7的生物合成作用,对细胞的半数毒性浓度(CC50)为85.37 mg/L,对ADV-7的半数有效浓度(IC50)为15.39 mg/L,治疗指数(TI)为5.55,且随着药物浓度的增加,病毒所致的CPE效应逐渐减弱,培养液中的病毒滴度也逐渐降低,而病毒抑制率则明显升高。结论:盐酸阿比朵尔在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗ADV-7的作用,其具体作用机制有待进一步研究。     

抗病毒药物筛选中两种方法的比较

目的：比较四甲基偶氮唑盐（MTT）法与细胞病变效应（CPE）在筛选抗病毒药物中的异同。方法：在体外用两种方法检测阿昔洛韦（ACV）对细胞毒性作用和抗单纯疱疹病毒1型（HSV-1）的作用。结果：MTT法较CPE法敏感、客观、准确。结论：MTT法是一种快速、敏感、客观和准确的筛选和评价抗病毒药物的方法。     

4-苯乙烯磺酸马来酸酐共聚物抑制HSV-2感染研究

目的:探索4-苯乙烯磺酸马来酸酐共聚物(PSM)对单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染细胞或小鼠的抑制作用。方法:建立Vero-ICP10细胞系,通过Luciferase检测不同浓度PSM对感染细胞中HSV-2的抑制作用,并通过In cell western技术检测HSV-2 gD蛋白表达,确定不同PSM浓度对HSV-2 gD蛋白表达的抑制作用;建立HSV-2阴道感染小鼠模型,观察PSM对HSV-2经生殖道感染小鼠的抑制作用。结果:Luciferase实验和In cell western实验结果均表明PSM具有抗HSV-2感染细胞的作用;小鼠模型中,5%的PSM能有效防止小鼠感染HSV-2(P<0.001)。结论:PSM在体内和体外模型中均可以抑制HSV-2感染。     

抗生素S_(632)A_3在体外抗肠道病毒及单纯疱疹病毒I型(HSV-1)作用的初步研究

目的 :体外测定抗生素S632A3 抗肠道病毒及单纯疱疹病毒I型的作用 ,为筛选新型抗病毒药物提供参考依据。方法 :用不同稀释度的抗生素S632A3 抑制3种肠道病毒及单纯疱疹病毒I型对Vero细胞的感染作用 ,48h后观察细胞病变效应 ,并用MTT法测定细胞活性。结果 :抗生素S632A3 能明显抑制肠道病毒及疱疹病毒对Vero细胞的致病变作用 ,使细胞存活率升高。结论 :该药物有较显著的抗肠道病毒及单纯疱疹病毒I型的作用 ,且对细胞的毒性很低 ,是一种具有潜在开发前景的药物。     

一株红树林真菌抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的研究

目的 对分离自海南红树林真菌菌株PH1018的胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS)抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)活性进行研究.方法 收集纯化菌株PH1018产生的EPS,体外采用细胞病变观察EPS的细胞毒性和抗HSV-2作用.为观察EPS对HSV-2体内感染的治疗效果,小鼠颅内注射0.02 ml滴度为100 LD50/0.1 ml-1的HSV-2,24 h后以不同浓度EPS灌胃,持续7d,14d后计算小鼠存活率和存活时间.菌株分类采用形态学观察和ITS序列分析.结果 EPS可抑制HSV-2病毒活性,病毒感染的细胞病变的半抑制浓度(Inhibited concentration,IC50)为313 μg/ml,SI为11.43.EPS 25 mg·kg-1·d-1灌胃后,小鼠存活率为40.0％,存活时间为(9.82±1.87)d,相比模型组实验动物存活时间和存活率均有提高.菌株初步鉴定为杂色曲霉.结论 从海南红树林分离一株杂色曲霉,其产生的EPS具有抗HSV-2活性,值得进一步研究.     

Comparison of nested-polymerase chain reaction and virus culture for the diagnosis of genital herpes simplex virus infection

INTRODUCTION: This study was performed to compare nested-polymerase chain reaction (PCR) with viral culture as a diagnostic tool for genital herpes simplex virus (HSV) infection in a sexually transmitted infection (STI) clinic in Singapore. METHODS: 103 consecutive patients presenting with clinical features suggestive of genital herpes were enrolled in the study. Two swabs were obtained from each patient. On one swab, cell culture and typing was performed, and on the second swab, nested-PCR was performed and the infecting viral type was determined by using type-specific primers. RESULTS: 63 patients (61.2 percent) had a positive PCR test for HSV. Of these, 13 patients (20.6 percent) had HSV type 1 (HSV-1), 50 patients (79.4 percent) had HSV type 2 (HSV-2). HSV-1 and HSV-2 were detected by viral culture in only six patients and 24 patients, respectively. The sensitivity of cell culture compared to PCR was 46.1 percent for HSV-1 infection and 48 percent for HSV-2 infection. PCR further detected an additional 52.4 percent of HSV cases. The specificity of PCR was 100 percent. CONCLUSION: Nested-PCR has been shown in this study to be an effective diagnostic and typing method for HSV infection in a STI clinic in Singapore with its higher sensitivity and specificity to routine viral isolation in cell culture.     

邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的活性研究

摘要：目的研究邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白（3-Hydroxyphthalic anhydride-modified ovalbumin, HP-OVA）体外对抗单纯
疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的活性。方法采用化学修饰的方法将3-羟基-邻苯二甲酸酐（HP）修饰卵清蛋白（OVA）,合成酸酐
修饰蛋白HP-OVA;选用HSV-2 333病毒株及非洲绿猴肾细胞（Vero 细胞）靶细胞,采用MTT比色法检测HP-OVA的体外
抗HSV-2病毒活性及其对Vero细胞的体外细胞毒性;镜检观察HP-OVA对17株阴道收集的乳酸杆菌的抑菌作用。结果
酸酐修饰卵清蛋白HP-OVA对HSV-2病毒具有明显抑制作用,其IC50为23.56±8.33 μg/ml,且其对病毒作用靶细胞毒性较
低,CC50>1 mg/ml,对17株阴道乳酸杆菌均无明显抑制作用,MIC>1 mg/ml。结论酸酐修饰蛋白HP-OVA体外有较好的
抗HSV-2病毒的活性,有望被开发为预防性传播性疾病的候选杀微生物剂。