增强型纤维蛋白胶组织工程支架修复关节软骨缺损的组织学评估

目的 探讨以增强型纤维蛋白胶(FG)为支架构建组织工程化软骨修复兔关节软骨缺损的可行性.方法 ①通过在FG中引入抑肽酶和氨甲环酸,构建细胞标准FG支架复合物和细胞增强FG支架复合物.②将6月龄新西兰兔32只(体重2～2.5 kg)分成A组13只、B组13只、C组6只.复合物体外培养后植入动物模型体内,按缺损内分别植入细胞标准FG复合物和细胞增强FG复合物作为A,B组,C组为空白对照.术后第6,12和18 周取材(n=8),对新生软骨进行大体、光镜观察及组织学评分.结果 A组术后18周,软骨细胞分化良好,表面较平整,但软骨细胞修复层较薄,未形成典型的束状排列.B组术后18周,修复软骨与正常软骨厚度一致,细胞排列进一步趋于规则,富含阿利欣蓝染色阳性基质.C组术后6,12,18 周缺损区均主要由纤维瘢痕充填.细胞增强FG支架组新生软骨组织在组织学特性上与正常软骨组织相似,组织学评分优于标准组,两者统计学上差异有显著性(P＜0.05).结论 在纤维蛋白胶中加入抑肽酶和氨甲环酸,可显著地减缓纤维蛋白胶的降解速度,使FG降解速度与软骨细胞基质形成速度同步,提高了软骨修复质量.     

骨形态形成蛋白用于大面积关节软骨缺损修复的实验研究

目的：将骨形态形成蛋白用于大面积关节软骨缺损的修复，探讨应用方法，观察修复效果。方法：在51只成年兔股骨的髌髁关节面上制造5mm×10mm的骨软骨缺损，深3～5mm。缺损内分别填充骨形态形成蛋白和纤维蛋白粘合剂复合物（BMP／FS）、BMP、FS，植入物均用自体游离骨膜覆盖。术后2、4、8、12周对缺损修复情况行大体和组织学观察。结果：BMP／FS组，8周时软骨下骨再生已完成，12周表层新生软骨组织结构接近正常，修复效果明显优于其它组。结论：骨膜覆盖固定BMP／FS，是修复大面积关节软骨缺损的较好方法。     

壳聚糖/磷酸甘油复合自体间充质干细胞修复关节软骨缺损的实验研究

目的探讨壳聚糖/磷酸甘油(C/GP)复合自体间充质干细胞(MSCs)对兔关节软骨缺损的修复作用。方法选择3个月龄新西兰大耳白兔18只,双下肢髁关节面上共制作3个直径3mm、深3mm的全层软骨缺损,自左到右为:C/GP复合自体MSCs组(A组),C/GP组(B组),空白对照组(C组)。分别于术后4、8、12周各处死6只,应用大体观察、组织学观察及组织学评分评估缺损软骨的修复情况。结果A组术后12周,组织切片显示新生组织中可见大量类透明软骨细胞出现,修复组织和周围软骨整合良好。A组各个时间点组织学评分均高于其他2组(P<0.05)。结论C/GP复合自体MSCs可促进对兔关节软骨缺损的修复。     

注射性C/GP复合自体MSCs修复兔关节软骨的实验研究

目的 探讨可注射性壳聚糖/磷酸甘油(C/GP)复合自体骨髓间充质干细胞(MSCs)对兔关节软骨缺损修复的作用.方法 将54只3个月新西兰大耳白兔双下肢髁关节面上制作2个直径 3 mm、深3 mm的全层软骨缺损, 随机分成A,B,C 3组,每组18只.术后1周,A组注入壳聚糖/磷酸甘油(C/GP)复合自体MSCs混悬液1 mL;B组注入C/GP混合液1 mL;C组注入生理盐水1 mL,3组分别术后4、8、12周各处死大耳白兔6只,应用大体观察、组织学观察及组织学Wakitani评分评估各组大耳白兔缺损软骨的修复情况.结果 大体观察:术后12周A组修复区与正常组织难以区别,B组修复区与正常组织接近但仍可区分;C组缺损明显,可见肉芽组织部分充填缺损.组织学观察:A组术后12周组织切片显示新生组织中见细胞体积较大,数量较多,与周围正常软骨组织相近;B组术后12周见短小卷曲的胶原纤维和软骨陷窝样组织;C组术后12周见纤维组织颠充部分缺损.组织学评分:A组4、8、12周组织学评分明显低于B、C组(P<0.01);B组4、12周组织学评分低于C组(P<0.01).结论 可注射性C/GP复合自体MSCs提高了对兔关节软骨缺损的修复效果.     

骨髓基质细胞修复猪膝关节非负重区软骨与骨复合缺损的实验研究

目的 探讨猪骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)复合聚羟基乙酸／聚乳酸(PGA／PIA)支架修复关节软骨与骨复合缺损的可行性。方法 杂交猪18只,抽取股骨骨髓,体外培养、扩增BMSC并分别经地塞米松诱导(A组)或地塞米松与转化生长因子β1(TGFβ1)联合诱导(B组),以免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其软骨分化表型。其中有2只猪部分BMSC经绿色荧光蛋白(GFP)基因转染标记。诱导后的细胞分别接种到PGA／PLA支架,体外培养1周后植入猪自体股骨下端非负重面软骨及骨复合缺损处,单纯支架植入(C组)及空白不处理(D组)作为对照。上述动物分别于3(6只)、6(10只)个月时取材,进行大体观察、修复结果分级、组织学检查、葡糖氨基聚糖(GAG)含量测定及生物力学测定。含GFP标记细胞的2只猪7个月时取材,共聚焦显微镜观察植入细胞的分布。结果 诱导后BMSC均能表达软骨特征性的Ⅱ型胶原与聚集蛋白聚糖(aggrecan),两组细胞均与支架材料黏附良好。术后大体观察与组织学检查显示：A组缺损以不完全修复为主,多数缺损软骨修复不良,而骨缺损基本修复,组织学主要为纤维性软骨及松质骨;B组缺损以完全修复为主,组织学表现为透明软骨及松质骨,少部分标本修复组织中含有纤维性软骨;两对照组缺损主要由纤维性组织修复或无明显新生组织,软骨与骨缺损均明显存在。3个月时,A、B组软骨修复组织弹性模量分别达到正常关节软骨的30．37％及43．82％,6个月时达到正常的62．69％及80．27％。6个月时,A组软骨修复组织GAG含量达到正常的78．03％,B组与正常组间差异无显著意义。含GFP标记细胞的修复标本经共聚焦显微镜观察可见：新生的软骨陷窝及松质骨小梁内均含有荧光标记的细胞。结论BMSC在关节缺损内可分别向软骨细胞与成骨细胞分化,同时修复软骨与骨复合缺损,恢复关节正常结构;TGFβ1与地塞米松联合诱导可促进BMSC向软骨细胞分化,改善其修复关节缺损的效果。     

鸡胫骨平台骨折不同程度复位对关节软骨修复影响的实验研究

目的:研究胫骨平台骨折关节面塌陷移位后,骨折端不同程度复位对损伤关节软骨修复的影响。方法:将所有动物随机分为A、B、C、D4组,每组9只,制成一型胫骨平台骨折移位模型,然后进行不同程度复位。以胫骨平台全层关节软骨厚度为标准,A组完全复位,B组3/4复位,C组1/2复位,D组全层错位。并将复位骨折块行直径1.0mm克氏针内固定,最后以克氏针纵行贯穿膝关节,代替石膏外固定。制动膝关节4周。于术后4周,8周,12周于每组中随机选择3只进行大体观察,测量膝关节活动范围及修复组织厚度,X光片观察骨折愈合情况,组织学光镜观察和组织学电镜观察。结果:A组与B组软骨修复效果较满意,A组12周更接近正常软骨。结论:膝关节胫骨平台骨折不同程度复位与关节软骨的修复有关,精确复位对软骨的修复有促进作用;其复位标准至少应在1/2复位以上,若能达到3/4复位以上修复更佳。     

骨髓间充质干细胞复合脱钙骨基质修复兔膝关节全层软骨缺损的实验

目的:研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)复合脱钙骨基质(deminerized bone matrix, DBM)修复兔膝关节全层软骨缺损的疗效. 方法:MSCs取自4～6 mo龄2.5～3.5 kg的青紫兰兔,体外分离培养后种植于DBM支架上体外培养,再移植于兔膝关节全层软骨缺损模型处. 实验动物选用健康的青紫兰兔36只,随机分成A, B, C 3个处理组各12只,A处理组(MSCs/DBM)双侧股骨髁间窝软骨缺损处植入DBM吸附体外分离培养的自体MSCs复合物;B处理组(DBM)单纯植入DBM;C处理组(对照)不作任何植入. 分别于术后4, 8和12 wk各处死4只兔子,取材进行大体、组织学及免疫组化染色观察,根据关节软骨组织学计分标准进行评分,数据输入SPSS 10.0软件统计分析,比较各组的评分差异是否具有统计学意义. 结果:MSCs复合DBM所修复组织为透明软骨样修复;而单纯DBM移植组和对照组为纤维性修复. 对术后12 wk大体及组织学形态进行评分. 按完全随机设计进行方差分析和SNK-q检验,结果显示,SMCs/DBM组明显优于DBM植入组和对照组(P<0.05);DBM组优于对照组(P<0.05). 结论:运用软骨组织工程的原理,以DBM为支架材料的自体MSCs移植是一种修复软骨缺损的行之有效的方法.     

骨形态发生蛋白/碱性成纤维细胞生长因子复合材料修复关节软骨缺损的实验研究

目的探讨骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,bFGF)复合材料在关节软骨缺损修复过程中的作用,为内源性修复关节软骨缺损提供实验基础。方法选用兔作为实验动物造成双侧股骨髁间窝全层软骨缺损,分别采用不同的材料(rhBMP2/PVP组、bFGF/PVP组、rhBMP2/bFGF/PVP组、PVP组)进行缺损修复,光镜及电镜下观察修复效果。结果术后8周rhBMP2/bFGF/PVP组软骨缺损已基本修复,12周时软骨修复更加光滑、完整。其余组软骨缺损修复效果不如rhBMP2/bFGF/PVP组。结论BMP具有诱导形成软骨的活性,与bFGF的复合物能增强软骨细胞增生,较单独应用BMP效果好,是生物学修复关节软骨缺损的良好材料。     

兔自体游离骨膜移植修复关节软骨缺损的远期效果观察

目的　评价自体游离骨膜移植修复关节软骨缺损的远期效果。方法　用中国白兔 2 0只 ,在股髁骨关节面制造 6mm× 8mm全层软骨缺损 ,实施自体游离骨膜移植术。术后 13个月取材做组织学及电镜观察 ,并进行评估。结果　 (1)骨膜移植组优势修复组织为透明软骨 ,对照组为纤维组织。 (2 )修复组织厚度 :骨膜移植组与毗邻软骨厚度无显著性差异 ,对照组为缺损状。 (3)修复组织覆盖缺损的面积 :骨膜移植组明显大于对照组。结论　自体游离骨膜移植对关节软骨缺损修复的远期效果良好 ,能长期适应关节的生理运动和功能负重     

兔关节软骨缺损修复的实验研究

目的观察自制猪耳廓的脱细胞软骨基质(Extracellular Cartilage Matrix ECM)复合自体软骨细胞对兔膝关节软骨5mm的缺损的修复作用。方法新西兰大白兔60只,随机分为3组,均制备股骨下端滑车处直径为5mm、深4mm的软骨缺损。实验组(A组)：用自制ECM复合自体培养的软骨细胞修复兔关节软骨缺损,实验组(B组)：单纯自制ECM修复兔关节软骨缺损,于4、8、12、24周后分别与空白对照组(C组)相比较,通过大体形态学观察、组织学检查、胶原含量的测定,观察EcM修复软骨缺损的能力。结果第12、24周时,A组修复效果最好,修复组织填充于软骨缺损处,与正常组织连接紧密,分界较为平滑;B组修复效果次之;C组最差,各阶段缺损少量的新生软骨,修复组织多为纤维组织。结论自制的ECM与自体软骨细胞复合具有较强的软骨生成能力,可作为异体软骨移植的一种替代物。     

天麻素对氯化钾诱导的培养神经细胞释放谷氨酸的影响

目的　考察天麻素对由氯化钾诱导的神经细胞释放谷氨酸的影响。方法　通过高效液相 (HPLC)测定人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞系培养液中谷氨酸的含量。结果　当细胞外液中有钙离子时 ,随着氯化钾浓度的增加 (10～ 30mmol/L) ,释放到培养液中的谷氨酸的含量也相应增加 ;当培养液中去除钙离子时 ,细胞外液中谷氨酸的浓度不随氯化钾浓度的变化而改变。在含钙培养液中加入 4mg/ml的天麻素 ,再加入 10～ 5 0mmol/L氯化钾 ,未见细胞外液中的谷氨酸含量增高。结论　氯化钾诱导的SH SY5Y细胞谷氨酸的释放增多与细胞外液钙离子内流有关 ;天麻素可以颉颃由氯化钾诱导的神经细胞谷氨酸释放增加的作用。     

精索静脉曲张不育症睾丸的糖原浸润（超微结构观察）

目的 探讨精索静脉曲张不育症的发生机理。方法 ２１例患者睾丸活检组织进行了电镜观察。结果 睾丸生精障碍以中晚期最著，支持细胞常有不同程度的糖原浸润，严重者形成糖原池。支持细胞有时水肿，崩溃，并可见再生现象。结论 鉴于支持细胞在睾丸组织碳水化合物代谢中的重要作用，其糖原浸润反映有碳水化合物代谢障碍存在，后者可能是不育症发生的关键环节。     

大剂量干扰素治疗慢性丙型肝炎50例临床观察

目的：探讨使用大剂量干扰素（ＩＦＮα）治疗慢性丙型肝炎（ＣＡＨ）的效果。方法：使用大剂量ＩＦＮα,每天６００万Ｕ,连续投药３周,以后每周３次间断投药２１周,共计２４周,治疗ＣＡＨ５０例。观察治疗前后血清ＨＣＶＲＮＡ与ＡＬＴ的变化,以此作为ＩＦＮ疗效的判定指标。结果：ＩＦＮ治疗ＣＡＨ有效率为６８％,停药６个月后有３４％复发。结论：ＩＦＮ的疗效与ＣＡＨ的基因亚型有关（Ⅲ型疗效显著,Ⅱ型较差）,与ＩＦＮ的剂量无明显关系。     

黄芪多糖对糖尿病大鼠微血管病变的作用及机制的研究

目的：探讨黄芪多糖（APS）对糖尿病大鼠微血管病变的影响以及对糖尿病的治疗作用及机制。方法：成年,健康SD大鼠40只,雌雄不限,分成四组：正常对照组,糖尿病组（腹腔注射四氧嘧啶200mg/kg),APS组（造模成功后用APS治疗）,优降糖组（造模成功后用优降糖治疗）。治疗两周时测一次血糖,四周后,测血糖;颈动脉取血测定血清胰素水平,NO和MDA含量。应用形态定量的方法比较各组的心肌病理变化。结果：腹腔注射alloxan(200mg/kg)后的SD大鼠血糖浓度显升高,血清NO,MDA,胰岛素水平明显改变。APS治疗四周后,血糖浓度明显下降,与优降糖治疗组无明显差异,血清NO较未治疗组明显升高（P＜0．01）,血清MDA较未治疗组明显减少（P＜0．01）,血清胰岛素水平升高（P＜0．05）,光镜下观察,糖尿病大鼠的心肌毛细血管数量减少,基底膜增厚,微血管与心肌纤维的比率显减低,这些改变都可被APS改善.结论：APS有降低血糖和保护血管内皮细胞的作用,这可能与APS减轻氧自由基的损伤,影响NO的产生以及促进胰岛B细胞的损伤的恢复有关。     

牛至浸膏对肠道运动及解热镇痛作用的实验研究

牛至浸膏对小鼠有显的镇痛作用,能松弛肠道平滑肌,减缓大黄的泻下作用,抑制离体兔甩平滑肌的活动,对抗乙酰胆碱,组胺对肠的收缩作用,对酵母所致大鼠体温升高有解热作用,能抑制二甲苯等引起的鼠耳肿胀,抗炎作用显。     

地尔硫卓对失血性休克犬肾脏的保护作用

目的：探讨地尔硫卓（Ｄｉｌｔｉａｚｅｍ,Ｄｉｌ）对失血性休克犬肾脏的保护作用及机理。方法：动脉放血,使血压降低至５３３～６６７ｋＰａ（４０～５０ｍｍＨｇ）,维持９０ｍｉｎ后回输血液进行复苏。在休克３０ｍｉｎ时,分别给动物输注盐水和（或）Ｄｉｌ。结果：Ｄｉｌ能明显提高失血性休克动物的平均动脉压（ＭＡＰ）;降低肾脏组织中的丙二醛（ＭＤＡ）含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性;保护肾脏组织的超微结构。结论：Ｄｉｌ对失血性休克犬的肾脏具有保护作用。     

鼻腔及鼻咽外侧壁的应用解剖学

目的为鼻内窥镜的入路及观察定位和手术操作提供形态学依据。方法选用６７侧正中矢状切的头部标本，观测各鼻甲、鼻道及中鼻道外侧壁结构的形态和大小，并测量前鼻棘至各解剖部位的距离。结果鼻腔外侧壁的形态呈梯形，其上、下径为４．９２±０．４４ｃｍ，在鼻腔底部的前、后径为４．５７±０．２６ｃｍ。中鼻道前端较宽大，１２％（８／６７）的半月裂孔狭窄。鼻咽顶壁的高度位于中鼻甲下缘的平面上。结论半月裂孔的大小随钩突或筛泡的形态而改变，老年人鼻腔及鼻道因粘膜萎缩而变宽大。     

高三尖杉酯碱对人眼球后成纤维细胞增殖的影响

为探讨高三尖杉酯碱对人眼球后成纤维细胞 (HROF) )增殖的影响 ,采用体外培养人眼球后成纤维细胞 ,用 MTT比色法测定人眼球后成纤维细胞的增殖程度 ,并观察高三尖杉酯碱对 HROFb生长和增殖的影响。结果显示 :MTT比色法能精确反映 HROFb的增殖程度 ,所测光吸收值与细胞数目成正相关 (r=0 .996 ,P<0 .0 0 1 )。高三尖杉酯碱可抑制 HROFb的增殖 ,细胞抑制率与高三尖杉酯碱浓度呈显著正相关 (r=0 .6 932 ,P<0 .0 0 1 )     

内皮素在低氧性肺动脉高压大鼠肺内的分布及变化研究

为研究低氧性肺动脉高压时大鼠肺内内皮素的分布和变化,以及其与低氧性肺动脉高压的关系,用免疫组织化学染色法确定ET-1在肺内的分布,用放免法测定ET-1浓度.结果:ET-1阳性反应部位主要位于内皮细胞,而在内皮与平滑肌连接处浓度更高.缺氧2小时,ET-1浓度无明显变化,缺氧24小时后,ET-1水平呈升高趋势,并随着缺氧时间的延长而维持在较高水平.缺氧3周大鼠血浆ET-1浓度与平均肺动脉压呈正相关,与动脉血氧分压呈负相关.低氧性肺动脉高压大鼠肺组织匀浆中ET-1水平也明显升高.上述结果表明,慢性缺氧可引起大鼠血浆和肺组织匀浆中内皮素水平显著升高,其原因可能是由于低氧直接刺激了肺血管内皮细胞,以及支气管上皮细胞内皮素的产生增多.     

熊胆粉对豚鼠肝脂肪变性的预防

目的 探讨熊但粉对高指饮食豚产肝脂肪变性的预防及其作用机理。方法 ８０只豚鼠随机分４组,为空白组、高脂组、熊胆粉组、熊去氧但酸（ＵＤＣＡ）组,分别检测胆汁生化和肝脏病理。结果 熊胆粉能降低胆汁胆固醇深度,提高胆汁胆汁酸浓度,缓解肝脂肪变性。结论 熊胆粉能有效缓解高脂高热量饮食引起的肝脂肪变性,且无明显的不良反应。