心脏营养素-1对失神经骨骼肌的营养和保护作用

目的探讨心脏营养素-1（Cardiotrophin-1，CT-1）及其受体在失神经骨骼肌中的表达规律，观察外源性CT-1对失神经骨骼肌的营养和保护作用。方法选用11组Swiss小鼠，每组10只，切断其右侧胫神经，分别于术后不同时间点完整切取失神经腓肠肌，用Northern blot法测定肌肉中CT-1及其受体亚基LIFR-β，gp130的mRNA含量，探讨三者的表达规律。另取Swiss小鼠30只，同样方法切断其胫神经后，连续腹腔注射CT-1（100μg／kg／d），于7、14和28d后检测失神经腓肠肌的湿重、肌纤维横截面积和肌肉总蛋白含量，观察超微结构的变化，分别与对照组比较。结果CT-1及其受体在正常骨骼肌中均有表达。胫神经切断后，腓肠肌中CT-1的表达进行性下降；而LIFR-β和gp130在早期均有一个表达增高的过程，前者的表达高峰出现在失神经支配后24h，后者在神经切断后1周表达最高。连续应用外源性CT-12周，有效地维持了失神经腓肠肌的湿重、肌纤维横截面积和总蛋白含量，减轻了肌浆网的扩张程度。用药4周后，这种效果更加明显。结论内源性CT-1表达不足，是失神经骨骼肌早期萎缩的一个重要因素。受体gp130／LIFR-β的表达上调，提高了肌肉对其配体CT-1的敏感性，及时应用外源性CT-1，可对失神经骨骼肌产生营养和保护作用，能有效地延缓失神经骨骼肌的萎缩。     

川芎嗪对失神经骨骼肌萎缩大鼠FoXO3a、MAFbx以及MuRF1表达的影响

目的研究川芎嗪对失神经骨骼肌萎缩中FoXO3a、MAFbx及MuRF1表达的影响。方法 8周龄雌性SD大鼠54只,体重(200±10)g。随机分为3组,即正常对照组(A组,n=6)、失神经对照组(B组,n=24)、干预组(C组,n=24)。B、C组实验动物制备右下肢失神经腓肠肌动物模型,C组于模型制备后每日腹腔注射川芎嗪注射液80 mg/(kg.d),B组每日腹腔注射等剂量生理盐水;A组实验动物不作任何处理。取A组实验动物以及造模后2、7、14、28 d B、C组实验动物各6只,处死取其双侧腓肠肌称湿重,计算腓肠肌肌湿重比;另取右侧肌组织采用RT-PCR及Western blot检测各时间点FoXO3a、MAFbx、MuRF1 mRNA和蛋白表达水平。结果与A组比较,随着大鼠失神经时间延长,B、C组腓肠肌肌湿重比逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05);造模后7、14、28 d,C组腓肠肌肌湿重比高于B组,且差异有统计学意义(P<0.05)。B、C组造模后7、14、28 d,FoXO3a、MAFbx、MuRF1 mRNA和蛋白表达水平均较A组高,C组各时间点均较B组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论川芎嗪可能通过降低FoXO3a、MAFbx以及MuRF1 mRNA和蛋白表达水平进而延缓失神经骨骼肌萎缩。     

雄激素对糖皮质激素致大鼠不同类型骨骼肌萎缩的拮抗作用研究

目的:探讨地塞米松对不同类型骨骼肌的致萎缩作用以及睾酮的拮抗效果.方法:雌性SD大鼠160只,随机分为4组(n=40):①对照组:前肢皮下注射芝麻油1 ml·kg-1·d-1,连续3 d后同时腹腔注射生理盐水1 ml·kg-1·d-1,每日1次;②地塞米松组:注射地塞米松1 mg·kg-1·d-1(代替生理盐水)和芝麻...     

胰岛素样生长因子Ⅰ对臂丛神经损伤后骨骼肌细胞凋亡的影响

目的研究胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)抑制臂丛神经损伤后失神经肱二头肌萎缩及其对骨骼肌细胞凋亡的影响.方法采用成年Wister大鼠,建立右侧臂丛神经损伤的动物模型,IGF-Ⅰ治疗组术后于右侧肱二头肌内注射rhIGF-Ⅰ,用量为200mg/kg-1·3d-1,对照组术后于右侧肱二头肌内注射生理盐水.5周后观察比较肱二头肌湿重,采用TUNEL法检测肱二头肌肌细胞的凋亡率.结果IGF-Ⅰ治疗组骨骼肌湿重为(509.4±92.3)mg,肌细胞凋亡率为(28.4±9.5)%;对照组骨骼肌湿重为(461.8±48.1)mg,肌细胞凋亡率为(54.5±12.1)%.经统计学分析均具有非常显著的差异.结论臂丛神经损伤后肱二头肌内局部注射rhIGF-Ⅰ能够有效地减缓其萎缩.rhIGF-Ⅰ抑制失神经肌细胞凋亡是原因之一.     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾小管-间质细胞转分化的影响

目的探讨白芍总苷（TGP）对糖尿病大鼠肾小管-间质细胞转分化的影响。方法建立链脲佐菌素（STZ）诱导的大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分对照组、模型组、TGP给药组（50、100、200mg·kg-1·d-1灌胃）,8w后观察肾小管-间质损伤指数（TII）的变化,应用免疫组化方法检测肾组织E-钙黏蛋白（E-cadherin,E-cad）、α平滑肌肌动蛋白（a-smooth muscleactin,α-SMA）以及波形蛋白（Vim—entin,Vh）的表达。结果TGP给药呈剂量依赖性降低糖尿病大鼠24h尿白蛋白排泄率。模型组TⅡ明显高于对照组,TGP给药组（100mg·kg-1·d-1与200mg·kg-1·d-1）TII明显低于模型组。模型组肾小管-间质E-cad表达明显低于对照组（P〈0．05）,TGP50、100、200mg·kg-1·d-1给药组E-cad表达明显高于模型组（P〈0．01）。模型组肾小管-间质α—SMA与Vim蛋白表达明显高于对照组（P〈0．叭）,TGP50、100、200mg·kg-1·d-1给药组肾小管-间质α-SMA与Vim蛋白表达明显低于模型组（P〈0．01）。结论TGP可降低肾小管-间质α—SMA和vim的表达,增加E—cad的表达,抑制肾小管-间质细胞转分化。     

细胞外三磷腺苷对失神经大鼠腓肠肌细胞中FoxO3a通路的影响

目的 探讨细胞外三磷腺苷(ATP)对失神经大鼠腓肠肌细胞中FoxO3a/MAFbx通路的影响.方法 雌性成年Wistar大鼠54只随机分为3组:失神经对照组,ATP治疗组,健康对照组.其中失神经对照组和ATP治疗组在右侧梨状肌下缘切断坐骨神经,制作失神经动物模型.术后ATP治疗组于右侧腓肠肌内注射ATP0.1mg/d,左侧腓肠肌内注射等量生理盐水;失神经对照组双下肢注射等量的生理盐水;健康对照组不做任何处理.在术后0、2、7、14、28d分别处死一组大鼠,取其两侧腓肠肌,称肌湿重,计算肌失重比(右侧/左侧),采用实时荧光定量PCR和Western Blot检测大鼠腓肠肌FoxO3a和MAFbx的mRNA和蛋白表达水平以及253位磷酸化的FoxO3a(p-FoxO3a)蛋白表达.结果 ATP治疗组肌湿重比高于失神经对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);ATP治疗组FoxO3a的mRNA和蛋白表达略低于失神经对照组,差异无统计学意义(P＞0.05);MAFbx的mRNA和蛋白表达低于失神经对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);p-FoxO3a的蛋白表达量较对照组明显增加,不同时段差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 细胞外ATP可能通过磷酸化FoxO3a进而抑制MAFbx蛋白的表达来延缓大鼠骨骼肌失神经萎缩.     

吡咯烷二硫代氨基甲酸酯延缓失神经肌萎缩的实验研究

目的研究NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)延缓失神经肌萎缩的效果及其机制。方法健康成年Wistar大鼠30只,雌雄不限,体重(200±10)g。实验动物随机分为3组,即正常对照组(A组,n=6)、失神经对照组(B组,n=12)和PDTC治疗组(C组,n=12)。A组仅暴露右侧坐骨神经并不切断;B、C组切断右侧坐骨神经0.7～1.0 cm,建立右下肢腓肠肌失神经支配模型后,C组采用PDTC 100 mg/(kg?d)腹腔注射,B组以等量生理盐水腹腔注射。A组术后当天和B、C组术后14、28 d,完整分离双侧腓肠肌检测肌肉湿重维持率,采用Western blot检测腓肠肌NF-κB p65表达水平,激光共聚焦扫描显微镜观察线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)开放情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果 A组腓肠肌湿重维持率为1.039±0.115;与A组比较,B、C组各时间点腓肠肌湿重维持率均明显下降,且C组腓肠肌湿重维持率明显高于同期B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组NF-κB p65表达为0.224±0.041;与A组比较,B、C组各时间点NF-κB p65表达明显升高,且C组NF-κB p65表达明显低于同期B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组MPTP荧光强度为31.582±1.754;与A组比较,B、C组各时间点MPTP荧光强度均降低,且C组MPTP荧光强度明显高于同期B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组有少量细胞凋亡,细胞凋亡率为4.542%±0.722%;与A组比较,B、C组各时间点细胞凋亡率均明显增加,且C组细胞凋亡率明显低于同期B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PDTC可有效延缓失神经肌萎缩,其作用机制与抑制NF-κB表达、降低骨骼肌细胞MPTP开放及抑制骨骼肌细胞凋亡有关。     

肝移植后他克莫司的用量及血药浓度的变化规律

目的　探讨肝移植后口服他克莫司 (FK5 0 6 )剂量与其全血浓度谷值的关系及浓度随时间而变化的规律。方法　回顾性分析肝移植后存活超过 1年、以FK5 0 6和糖皮质激素预防排斥反应的 2 0例患者的临床资料。结果　FK5 0 6初始口服剂量为 0 .15mg·kg-1·d-1时 ,术后第 1周内有5 3.4 %的血FK5 0 6浓度谷值高于理想治疗窗的 15 μg/L ,2 3.3%在 10～ 15 μg/L的理想范围内 ,2 3.3%低于 10 μg/L ;术后FK5 0 6的浓度 /剂量比值逐渐增高 ,第 2个月为高峰 (2 17.2± 136 .6 ) ,与第3、4、5、6、7、8和 11个月相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,全组患者的浓度 /剂量比值总平均数为 190 .3±75 .4 ;维持术后第 1周内FK5 0 6浓度谷值在 10～ 15 μg/L的理想治疗范围内需要的剂量为(0 .10 137± 0 .0 2 6 10 )mg·kg-1·d-1,至 1年时维持浓度谷值为 5～ 7μg/L时需要的剂量为 (0 .0 6 4 6 6± 0 .0 2 797)mg·kg-1·d-1。结论　我国人肝移植后FK5 0 6口服剂量宜从 0 .1mg·kg-1·d-1左右开始 ,术后前 2个月内的血FK5 0 6浓度 /剂量比值高于其后各月的平均值。     

左归丸对庆大霉素诱导的肾损伤大鼠MKK4、MKK7、JNK的影响

目的:探讨左归丸对庆大霉素诱导的肾损伤大鼠MKK4、MKK7、JNK的影响.方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、SP600125组、左归丸组,对照组给予腹腔注射0.9%生理盐水2.5 ml·kg-1·d-1,模型组腹腔注射硫酸庆大霉素100 ml·kg-1·d-1,SP600125组左侧腹腔注射硫酸庆大霉素100 ml·kg-1·d-1,2 h后右侧腹腔注射SP600125 15 ml·kg-1·d-1,左归丸组腹腔注射硫酸庆大霉素100 ml·kg-1·d-1和灌胃左归丸水溶液2 g·200 g-1·d-1,4组大鼠连续给药10 d.第11天测量各组大鼠尿NAG酶、血Scr、血BUN等生化指标;HE染色观察各种大鼠肾脏病理状况;以免疫组化技术检测各组大鼠肾脏MKK4、MKK7、JNK的表达,并采用Image pro-Plus6.0图像分析软件半定量分析;以Western blot方法检测各组大鼠肾脏MKK4、MKK7、JNK蛋白的表达.结果:生化指标结果显示:与对照组比较,模型组的大鼠尿NAG酶、血Scr、血BUN值显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,SP600125组与左归丸组生化指标得到改善,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).免疫组化结果显示:与对照组比较,模型组MKK4、MKK7、JNK在肾小管大量表达,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,SP600125组与左归丸组表达少量,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).Western blot方法结果显示:模型组MKK4、MKK7、JNK蛋白灰度值较对照组明显升高(P<0.01),SP600125组与左归丸组较模型组灰度值下降(P<0.05).结论:左归丸对庆大霉素诱导肾损伤大鼠的保护作用可能与抑制MKK4、MKK7、JNK的表达有关.     

重组慢病毒介导心脏营养素-1基因转染延缓小鼠失神经骨骼肌萎缩

目的 探讨重组慢病毒介导的心脏营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)基因转染延缓小鼠失神经骨骼肌萎缩的疗效.方法 将36只Swiss小鼠,随机分为实验组和对照组,每组18只,切断胫神经,建立右下失神经支配肌萎缩模型.于实验组和对照组失神经腓肠肌分别转染重组慢病毒载体Lenti-GFP-CT-1和Lenti-GFP溶液20μl(108TU/ml),转染后2、4周,每个时间点分别取3只小鼠,于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达、Western blot检测CT-1的表达;取6只小鼠行单次收缩力、强直收缩力的检测,测定肌湿重、肌纤维横截面积,并观察肌纤维超微结构的变化.结果 慢病毒转染2,4周,两组腓肠肌中均可见大量GFP表达.Western blot检测显示实验组失神经腓肠肌中有明显的CT-1表达(P均<0.01).转染2周,实验组肌肉单次收缩力恢复率、强直收缩力恢复率、肌湿重维持率和肌纤维横截面积分别为[(47.61±6.25)%,x-±s,下同]、(56.08±5.47)%、(63.02±5.23)%、(1372.42±149.73)μm2,均明显高于对照组,后者分别为(27.23±5.06)%、(30.78±4.67)%、(52.41±4.98)%、(1147.28±128.67)μm2(P均<0.01);4周时,实验组上述各项指标分别为(33.13±4.76)%、(36.59±5.67)%、(51.46±5.36)%、(1209.12±142.57)μm2,仍明显高于对照组,后者分别为(16.40±5.48)%、(15.35±4.08)%、(39.15±6.12)%、(989.45±136.12)μm2(P均<0.01).此外,实验组肌浆网的扩张程度明显减轻.结论 慢病毒介导的基因治疗有较高的转染效率,其介导的CT-1基因转染能有效延缓小鼠失神经骨骼肌的萎缩,其疗效至少可以维持4周.     

Tumors with EWSR1-CREB1 and EWSR1-ATF1 fusions: the current status

EWSR1-CREB1 and EWSR1-ATF1 are gene fusions of which one or both have now been consistently described in 5 histopathologically and behaviorally diverse neoplasms: angiomatoid fibrous histiocytoma, conventional clear cell sarcoma (of tendons and aponeuroses), clear cell sarcoma-like tumor of the gastrointestinal tract, hyalinizing clear cell carcinoma of the salivary gland, and primary pulmonary myxoid sarcoma. Some of the tumors in this group have been described only recently, and others have been the subject of recent genetic insights contributing to their characterization. These neoplasms are all rare; yet, the increasing frequency with which EWSR1-CREB1 and EWSR1-ATF1 fusions are being described in separate entities is noteworthy. The additional molecular mechanisms by which tumors with such variable morphologic, immunohistochemical, and clinical phenotypes are generated are yet to be understood. We review the clinicopathologic and molecular features of this group of neoplasms unified by the presence of EWSR1-CREB1 and EWSR1-ATF1 genetic fusions.     

重症急性胰腺炎治疗的发展

重症急性胰腺炎治疗的发展大体可以分为三个阶段。１　重症急性胰腺炎主治科别的讨论第一个阶段为重症急性胰腺炎的主治科别的讨论,即以内科治疗为好,还是以外科医治为好。这个阶段起始于１８８９年,Ｆｉｔｚ首先系统地描写了重症急性胰腺炎,在这阶段,出现两次反复,主治科由外科到内科,然后又由内科到外科,直到１９３８年,Ｎｏｒｄｍａｎｎ在德国外科大会上对重症急性胰腺炎作了总结报告,认为外科手术对重症急性胰腺炎有害无益。这样,重症急性胰腺炎进入了全面的内科保守治疗的时代,一直延续了３０年。到６０年代后期,由于Ｗａ…     

Genetic polymorphisms of CYP1A1, CYP2E1, GSTM1, and GSTT1 associated with head and neck cancer

BACKGROUND: Alcohol intake and tobacco smoke, in addition to other environmental and genetic factors, have been associated with head and neck cancer. We evaluated the role of metabolic enzyme polymorphisms on the risk of head and neck cancer in a hospital-based case-control study. METHODS: CYP1A1MspI, CYP2E1PstI, GSTM1, and GSTT1polymorphisms were evaluated in 103 histologically confirmed head and neck cancer cases and 102 controls by means of polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism methods. RESULTS: GSTM1null increased the risk of head and neck cancer (odds ratio [OR], 2.2; 95% confidence interval [95% CI], 1.24-3.79), oral cancer (OR, 2.8; 95% CI, 1.28-5.98), and pharyngeal cancer (OR, 2.2; 95% CI, 1.08-4.63). CYP2E1PstI polymorphism indicated a risk for oral cancer (OR, 3.6; 95% CI, 1.29-11.56). The joint effect of GSTM1 null and CYP1A1 polymorphism increased the risk of head and neck cancer (OR, 2.4; 95% CI, 1.13-5.10). CONCLUSIONS: GSTM1 null alone or associated with CYP1A1 increased the risk of head and neck cancer; the CYP2E1PstI mutated allele increased the risk for only oral cancer.     

Plasma glutathione S-transferase pi 1-1 AND alpha 1-1 levels in patients with bladder cancer

PURPOSE: Transitional cell carcinomas of the human bladder and many gastrointestinal tumors often contain high amounts of the detoxification enzyme glutathione S-transferase pi (GSTP1-1). Elevated levels of GSTP1-1 have been found in serum and plasma from patients with gastrointestinal, lung or head and neck cancer. GSTP1-1 and glutathione S-transferase alpha (GSTA1-1) have been reported to be increased in 10 of 15 patients (67%) with bladder cancer. We evaluate the role of GSTP1-1 and GSTA1-1 as plasma tumor markers in 50 patients with bladder cancer before and after treatment. MATERIALS AND METHODS: Blood from patients with bladder cancer was sampled in ethylenediaminetetraacetic acid tubes. Plasma GSTA1-1 and GSTP1-1 were measured using the sensitive and specific sandwich enzyme-linked immunosorbent assay. RESULTS: Respective plasma GSTA1-1 and GSTP1-1 levels were above the upper normal reference limit in 2 (4%) and 14 (28%) of the 50 patients with bladder cancer. No significant decrease in plasma GSTA1-1 or GSTP1-1 was noted in matched pairs of plasma samples collected before and after treatment. CONCLUSIONS: In contrast to earlier reports, only a limited number of patients with bladder cancer had increased plasma GSTA1-1 or GSTP1-1, which did not decrease after tumor resection. These findings argue against the use of GSTP1-1 or GSTA1-1 as plasma markers for bladder cancer.     

Alpha1-antitrypsin deficiency. 1: epidemiology of alpha1-antitrypsin deficiency

The protein and molecular characteristics of variants of the alpha1-antitrypsin (AAT) gene are described, and available data on the genetic epidemiology of AAT deficiency are presented.     

手术创伤中腹膜组织Sp1、COL1A1和TIMP-1的表达

目的　探讨人手术创伤腹膜组织中核转录因子Sp1激活 ,COL1A1和TIMP 1表达变化与腹膜纤维化之间的关系。方法　采用凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)检测手术创伤后不同时间的腹膜组织核转录因子Sp1的表达水平 ,WesternBlot检测COL1A1和TIMP 1蛋白表达 ,Masson染色观察腹膜组织中胶原纤维的变化。结果　Sp1在手术创伤后 0 .5h被活化 ,随着手术时间延长Sp1活性逐渐增强 ,至创伤后 4h时达高峰 ,同时创伤腹膜组织中的COL1A1和TIMP 1蛋白表达水平逐渐升高 ,存在差异显著性 (P <0 .0 1)。在手术创伤期内随手术时间的延长腹膜组织中胶原纤维增加。结论　核转录因子Sp1活化导致Ⅰ型胶原合成增加 ,细胞外基质降解减少 ,从而启动腹膜纤维化进程。