青稞和小麦醇溶蛋白和谷蛋白结构性质的比较研究

采用Osbron法分别提取青稞和小麦中的醇溶蛋白和谷蛋白,对这4 种蛋白质进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）分析和红外光谱分析,并测定其表面疏水性、热稳定性、总巯基和二硫键含量。结果表明：醇溶蛋白在青稞蛋白质中的含量为16.96%,低于其在小麦蛋白质中的含量;谷蛋白在青稞蛋白质中的含量为47.83%,高于其在小麦蛋白质中的含量,但经SDSPAGE分析发现青稞中高分子质量谷蛋白亚基（high molecular weight glutenin subunit,HMW-GS）含量远低于小麦中的。青稞醇溶蛋白和谷蛋白中的二硫键和总巯基含量均低于小麦中的。4 种蛋白的表面疏水性差异不大。青稞谷蛋白的热稳定性高于小麦谷蛋白,不利于其吸收水分和部分展开。红外光谱分析发现小麦醇溶蛋白和青稞醇溶蛋白的二级结构主要由β-转角和β-折叠组成,而小麦醇溶蛋白中的β-转角所占比例更高;青稞谷蛋白和小麦谷蛋白的二级结构主要以β-折叠为主。     

面条冷冻过程中蛋白质组分和二硫键的变化研究

研究不同冷冻时间下面条的品质变化,如清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、SDS可溶麦谷蛋白、麦谷蛋白大聚体等蛋白质组分的含量变化,并采用Ellman's试剂比色法研究了蛋白和麦谷蛋白大聚体中巯基和二硫键的含量变化.结果表明:随着冷冻时间的增加面条的硬度有显著下降,回复性变化不明显,拉伸力和拉伸距离呈减小趋势;清蛋白、球蛋白、SDS可溶麦谷蛋白的含量呈上升趋势,醇溶蛋白、麦谷蛋白大聚体的含量呈下降趋势;蛋白质分子中巯基和二硫键发生了相互转化,单位质量麦谷蛋白大聚体中二硫键的含量呈增大趋势.     

脱脂小麦胚芽蛋白分类及其氨基酸组成分析

对脱脂小麦胚芽蛋白进行Osboren分类研究,进一步研究了各蛋白组分的亚基分子质量分布、氨基酸组成和营养价值.试验结果表明,球蛋白和清蛋白是小麦胚芽蛋白的主要组分.SDS-PACE分析中,清蛋白主要亚基分子质量为15 000、17 400、20 500、29 000、33 400～37 100和54 900 u.球蛋白主要亚基分子质量为12 300、20 000、23 500、36 000～40 100和47 000～55 200 u,谷蛋白的主要亚基分子质量为55 000、41 800和＜27 000 u.同时,试验结果也表明,清蛋白的氨基酸评分最高,其次分别为谷蛋白、球蛋白和醇溶蛋白;清蛋白具有最高的蛋白质效率比(PER)和体外消化率(IVPD),醇溶蛋白和谷蛋白的PER和IVPD较小;清蛋白的蛋白质消化率校正的氨基酸记分法(PDCAAS)最高,球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的PDCAAS较小.因此,与FAO/WHO模式相比,清蛋白具有较好的氨基酸组成和PDCAAS,是一种优质蛋白质.     

冀紫439黑小麦与济麦22普麦蛋白及加工品质的比较

为研究冀紫439黑小麦的蛋白特性与加工品质间的关系,以济麦22普通小麦为对照,测定济麦22与冀紫439小麦粉4种蛋白组分及亚基组成,面筋蛋白的二级结构、分子间作用力、巯基及二硫键含量,并对面筋及流变学指标、面团的微结构及馒头的品质进行分析。结果表明,冀紫439小麦粉清蛋白、谷蛋白含量、谷蛋白与醇溶蛋白比例显著高于济麦22小麦粉,球蛋白含量显著低于济麦22小麦粉;冀紫439含有高分子量黑小麦醇溶蛋白亚基,且高分子量谷蛋白亚基条带少,不利于面团的黏弹性;冀紫439面筋蛋白二级结构中β-折叠含量、氢键与二硫键含量显著低于济麦22,不利于面筋网络的形成,故拉伸特性中延伸性随时间的延长而降低,面团微观结构蛋白与淀粉包裹致密,相较于济麦22气孔更紧密,馒头的嚼劲增大,但回复性减小。综合分析,冀紫439黑小麦为中弱筋特色小麦品种,可结合蛋白特性进一步改善馒头品质。     

小麦胚乳中蛋白质、淀粉组分分布及各性状关系的研究

以小麦品种为9023的各系统面粉样品为试验材料，测定各样品蛋白质及组分含量、湿面筋含量、面筋指数、淀粉及其组分含量．研究小麦胚乳中蛋白质与淀粉及组分分布情况，并对蛋白质和淀粉及各性状间的关系进行初步研究。结果表明：小麦胚乳由内向外．蛋白质含量及球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白含量呈现递增的分布趋势．而淀粉和直链淀粉含量则逐渐减小：球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白含量两两呈现显著或极显著正相关．且与粗蛋白含量显著正相关；湿面筋含量与蛋白质含量、醇溶蛋白和麦谷蛋白含量均呈现极显著正相关关系：直链淀粉含量与总淀粉含量显著正相关，与支链淀粉含量负相关：直链淀粉含量与粗蛋白含量、球蛋白和醇溶蛋白含量均呈显著负相关，支链淀粉含量与谷蛋白含量、湿面筋含量显著正相关。     

小麦胚乳中蛋白质、淀粉组分分布及各性状关系的研究

以小麦品种为9023的各系统面粉样品为试验材料,测定各样品蛋白质及组分含量、湿面筋含量、面筋指数、淀粉及其组分含量,研究小麦胚乳中蛋白质与淀粉及组分分布情况,并对蛋白质和淀粉及各性状间的关系进行初步研究.结果表明:小麦胚乳由内向外,蛋白质含量及球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白含量呈现递增的分布趋势,而淀粉和直链淀粉含量则逐渐减小;球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白含量两两呈现显著或极显著正相关,且与粗蛋白含量显著正相关;湿面筋含量与蛋白质含量、醇溶蛋白和麦谷蛋白含量均呈现极显著正相关关系;直链淀粉含量与总淀粉含量显著正相关,与支链淀粉含量负相关;直链淀粉含量与粗蛋白含量、球蛋白和醇溶蛋白含量均呈显著负相关,支链淀粉含量与谷蛋白含量、湿面筋含量显著正相关.     

小米蛋白提取、测定以及SDS-PAGE电泳

依照Osborne法对小米清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白进行分离提取,通过单因素试验确定小米蛋白提取时的最佳条件,并通过SDS-PAGE对小米蛋白组分进行了亚基分析。结果表明,小米清蛋白提取的最佳温度为40℃,球蛋白提取的最佳氯化钠质量分数为2%,醇溶蛋白提取的最佳醇体积分数为80%,谷蛋白提取的最佳氢氧化钠浓度为0.05 mol/L。小米蛋白各组分SDS-PAGE凝胶电泳图谱显示,小米清蛋白的亚基主要分布在(97.4~22)ku范围内且含有二硫键;小米球蛋白的亚基主要分布在(66.2~10)ku范围内;小米醇溶蛋白的亚基条带分布广泛且含有二硫键;小米谷蛋白的亚基条带分布在(66.2~10)ku范围内。不同提取条件不仅会影响提取率,同时也会影响蛋白组分的亚基组成。     

小米蛋白的分子组成及结构特性

利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、扫描电子显微镜、差示扫描量热法以及傅里叶红外光谱（Fourier transform infrared spectrometer,FTIR）对小米中4 种蛋白组分进行结构特性分析。研究表明,醇溶蛋白是由低分子质量亚基（11～25 kDa）构成,而清蛋白、球蛋白和谷蛋白亚基分布较广（11～180 kDa）,其中清蛋白所含亚基数目最多,醇溶蛋白、清蛋白以及球蛋白分子之间连接紧密,以聚集状态存在,而谷蛋白分子连接松散,表面光滑。球蛋白在71.33 ℃条件下发生变性;醇溶蛋白的变性温度最高,达到110.67 ℃。FTIR研究表明,醇溶蛋白、谷蛋白和球蛋白的二级结构主要由β-折叠构成,其含量分别为37.72%、43.39%、42.23%;β-转角以及β-反平行折叠结构含量最丰富的是醇溶蛋白,分别为16.64%和12.73%。4 种蛋白组分结构含量差异显著（P＜0.05）。     

蛋白组分与面包感官评分及TPA指标的相关性

测定了8种面包专用粉蛋白质组分、亚基组成,并对其制作的面包进行了感官评定和质构测定,分析了面包专用粉蛋白质组分、亚基组成与面包感官评分与TPA指标的相关性,结果表明:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和剩余蛋白含量增加对面包感官品质有不利影响,麦谷蛋白含量、高分子质量麦谷蛋白含量和低分子质量麦谷蛋白含量的增加有利于提高面包的感官品质;谷蛋白含量增加有利于降低面包质地的硬度和胶着性,有利于提高面包质地的弹性和回复性等;亚基2、Glu-D1位点2+12亚基组存在对面包的感官品质不利,亚基7、lu-B1位点7+8亚基组的存在对面包的感官品质较为有利。     

即食小米粥贮藏过程中蛋白组分变化规律的研究

采用Osborne法对小米及即食小米粥中的清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白进行提取,运用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对小米以及贮藏不同时间的即食小米粥中的4种蛋白质进行亚基分析。通过对比小米和即食小米粥蛋白组分发现,即食小米粥中4种蛋白组分的含量都有不同程度的减少,其中醇溶蛋白降幅最大,其次是清蛋白、球蛋白;由电泳图谱可知,即食小米粥加工工序对小米中清蛋白、球蛋白的影响最大,清蛋白和球蛋白的部分亚基随废水排出而损失,剩余亚基通过二硫键形成新的蛋白组分,并以高分子聚集体的形式保存在即食小米粥中。随贮藏时间的延长,即食小米粥中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白含量及亚基数量均有不同程度的减少,到贮藏12 d时,清蛋白、球蛋白和谷蛋白的亚基条带几乎全部消失。     

玉米蛋白组分分离及其构相研究

采用Osborne分级提取法,分离玉米清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,测定4种蛋白的氨基酸组成、亚基分子量、蛋白变性温度和微观结构。结果表明,清蛋白赖氨酸含量最高,为5.581 g/100 g,醇溶蛋白和谷蛋白含有较多谷氨酸和亮氨酸。SDS-PAGE图中清蛋白有7条谱带,分子量范围在20~80 k Da,球蛋白有4条谱带,分子量范围在20~70 k Da,醇溶蛋白的分子量分布在两个区域,即14~25 k Da和30~50 k Da,谷蛋白分子量分布在30~50 k Da。清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白热变性温度分别为95.96℃,78.85℃,99.53℃和104.33℃。扫描电镜观测发现清蛋白呈薄片状,表面平整光滑;球蛋白呈现蜂窝状,表面孔洞均匀微小;醇溶蛋白呈大小不一球状,表面有凹陷;谷蛋白呈现鳞片状,表面孔洞大小不一。     

不同花生品种籽仁发育过程中蛋白质组分分析

采用蛋白质组分的连续累进提取法提取4个花生品种籽仁的清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对各蛋白组分的亚基组成进行分析。结果表明,花生籽仁发育过程中,清蛋白始终占绝对优势,占花生蛋白质总量的70%以上,最高达95%;球蛋白含量较低,仅占花生蛋白质总量的3%~5%,谷蛋白含量最低,其不足3%,醇溶蛋白痕量;在4种组分中,品种之间球蛋白含量差异最大。SDS-PAGE图谱显示,染色后清蛋白、球蛋白条带清晰可见,谷蛋白条带较为模糊,清蛋白含量高,清蛋白和球蛋白成分较丰富。花生蛋白亚基分子质量在14.4~97.4 ku之间,清蛋白有10~12个亚基,球蛋白有9~10个亚基。采用连续累进提取法可将花生蛋白组分分离,利用SDS-PAGE方法可以得到花生籽仁清蛋白、球蛋白的清晰条带且多态性高,而谷蛋白条带模糊。     

燕麦蛋白组分分离提取及其SDS-PAGE电泳分析

通过单因素实验对燕麦蛋白组分的分离提取工艺进行了优化,并通过SDS-PAGE电泳对燕麦蛋白组分进行亚基分析。结果表明:燕麦清蛋白提取的最佳温度为40℃,球蛋白提取最佳盐浓度为7%,醇溶蛋白提取的最佳乙醇浓度为75%,谷蛋白提取的最佳碱浓度为0.05 mol/L,蛋白质提取率为83.1%。SDS-PAGE实验结果显示:燕麦清蛋白在10~100 kD范围内均有分布,燕麦球蛋白由2个亚基组成,分子量分别在97.4~100 kD和43~66.2 kD范围内,燕麦醇溶蛋白亚基大部分集中在18.39~40.72kD之间,燕麦谷蛋白部分亚基分布在20.67~26.66kD与43.29~50.80 kD之间。     

小米中四种蛋白的分级提取及结构表征

利用扫描电子显微镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、粒径和Zeta电位、傅里叶红外光谱、紫外光谱、荧光光谱以及表面疏水性对小米四种蛋白组分进行结构表征。结果表明：微观状态下的清蛋白和球蛋白存在簇状结构,有聚集成块的趋势,醇溶蛋白和谷蛋白形状完好,没有融合,但堆积程度高,醇溶蛋白亚基带分布明显清晰,亚基分子质量小且不杂乱,清蛋白、球蛋白和谷蛋白亚基带分布广泛,球蛋白的粒径分布区间小,强度高,谷蛋白的Zeta-电位高,其稳定性最好。二级结构表明四种蛋白在各个结构都有分布,但醇溶蛋白的有序结构相比其他三种蛋白最少。三级结构发现四种蛋白在紫外光的照射下均出现不同波长下的特征吸收峰,清蛋白的表面疏水性最低,溶解特性更好,醇溶蛋白疏水性高,溶解性低。     

不同储藏温湿度对玉米中蛋白质的影响

以"郑单958"品种玉米为对象,模拟中国蒙新、华北、华中和华南储粮微环境条件(15℃,50%RH;20℃,65%RH;28℃,75%RH和35℃,85%RH),以研究储藏期间玉米蛋白质的变化规律,结果表明储藏时间对玉米的总蛋白含量几乎无影响(p0.05);随着储藏时间延长,玉米中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和巯基含量呈下降趋势(p0.05),而谷蛋白和二硫键含量则呈现上升趋势;储藏微环境对蛋白组分以及巯基和二硫键含量的变化影响显著(p0.05)。与低温低湿条件(15℃,50%RH)相比,高温高湿条件(35℃,85%RH)下,玉米中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和巯基含量分别减少了0.24、0.13、0.26 g/100 g和1.19μmol/g,谷蛋白和二硫键含量分别增加了0.74 g/100 g和2.05μmol/g。因此,低温低湿环境(15℃,50%RH)更利于玉米安全储藏。     

小麦粉蛋白质对馒头品质的影响

以10种小麦粉样品为材料,探讨小麦粉蛋白质含量、质量与馒头品质之间的关系。试验表明,小麦粉蛋白质含量与馒头品质中的比容、弹韧性、总评分存在相关性。蛋白质质量分数在10.5%~12.5%时,馒头比容评分较高,弹韧性评分较高,总评分相对较高。制作馒头时应选用具有中等蛋白质含量(10.5%~12.5%)的小麦粉,蛋白质含量偏低或偏高均会影响馒头的品质。当蛋白质质量分数在7.8%~11.8%时,蛋白质含量与比容评分呈正相关,与弹韧性评分呈显著正相关,与总评分之间呈极显著正相关。在11.8%~14%时,蛋白质含量与比容呈显著负相关,与弹韧性、总评分呈负相关。醇溶蛋白含量与馒头的硬度呈极显著负相关,醇溶蛋白含量越高,馒头的硬度越低。谷蛋白含量与硬度呈显著负相关。醇溶蛋白、谷蛋白含量对馒头比容没有显著相关性。     

苦荞蛋白质的低消化性研究Ⅰ——热处理、还原二硫键及添加芦丁对其体外消化率的影响

采用Osborne分级分离的方法从苦荞粉中制备得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。体外消化率测定结果表明,四种蛋白组分的消化率均低于对照-小麦胚分离蛋白和大豆分离蛋白,并且四种组分的体外消化率也存在不同程度的差别:清蛋白最高,谷蛋白最低。热处理可以明显提高苦荞粉四种蛋白组分的体外消化率。添加芦丁不但没有降低四种蛋白组分的体外消化率,反而均有一定程度的提高。二硫键的破坏,除醇溶蛋白得以提高之外,对于其它三种组分只是提高了初始水解速度,最终体外消化率没有明显提高。体外消化实验后,四种蛋白组分所剩的残渣蛋白SDS-PAGE分析结果表明:这些残渣蛋白的谱带存在相似之处:在20kDa处有一条很窄的谱带,在14～10kDa处的谱带较宽。     

传统高温炒制工艺对裸燕麦醇溶蛋白和谷蛋白特性的影响

通过扫描电子显微镜观察炒制裸燕麦醇溶蛋白和谷蛋白的形貌特征,并测定其理化特性及消化特性。结果表明,与未炒制裸燕麦醇溶蛋白和谷蛋白相比,炒制裸燕麦醇溶蛋白和谷蛋白颗粒变大,蛋白质分子间连接紧密;在碱性条件下,其黏度较高;高温炒制工艺导致裸燕麦醇溶蛋白乳化性、吸油性和持水性显著提高,裸燕麦谷蛋白持水性显著提高,然而对其醇溶蛋白和谷蛋白消化特性均没有影响,也没有改变其非牛顿流体本质。     

蛋白质组分分析方法比较研究

采用蛋白质连续累进提取法与组分快速提取法测定了21个小麦面粉样品的蛋白质组分，以比较两种蛋白质组分分析方法的特点。连续累进提取法将小麦蛋白质分离成清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白；快速提取法将小麦蛋白质分离成单体蛋白、可溶性谷蛋白和不溶性谷蛋白。结果表明：单体蛋白与清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白含量及清蛋白、球蛋白、谷蛋白之和均无关系；可溶性谷蛋白含量与清蛋白、弱化度呈负相关，与醇溶蛋白、谷蛋白、沉淀值呈极显著或显著正相关；不溶性谷蛋白与醇溶蛋白、谷蛋白、沉淀值、稳定时间、评价值、弱化度呈极显著或显著相关。连续累进提取法适合于小麦品质常规检测，快速提取法适用于小麦早代材料品质检测。两种方法对于预测小麦的加工品质有着相同的重要作用，应根据样品量及检测精度进行选择。     

水飞蓟蛋白组分的理化特性研究

以水飞蓟籽仁脱脂粉为原料,采用Osboren法分级提取4种蛋白组分,研究各蛋白组分的理化特性.结果显示:水飞蓟各蛋白组分主要以中、低分子质量蛋白为主,电泳条带主要集中分布在32.4～44.5 ku和14.5～24.8 ku两个区域,缺乏高分子质量蛋白,容易消化吸收;水飞蓟各蛋白组分的氨基酸组成合理,种类齐全,富含谷氨酸.其中球蛋白的氨基酸评分最高为83,醇溶蛋白的最低为53;谷蛋白的蛋白质效率比最高,清蛋白的体外消化率和蛋白质消化率校正的氨基酸分数最高,分别达到92.55％和0.73;各蛋白组分中清蛋白的溶解性、起泡性和乳化性最好,谷蛋白的持油性最高,醇溶蛋白的功能特性最差.