脂欣康对ApoE基因敲除小鼠海马形态学及胆碱乙酰转移酶和突触素表达的影响

目的研究脂欣康对ApoE基因敲除（ApoEKO）小鼠海马形态学及脑胆碱乙酰转移酶（ChAT）和突触素（P38）表达的影响。方法以ApoEKO小鼠为研究对象,随机分为ApoEKO组、脂欣康组、联合干预组,分别给予生理盐水、脂欣康、脂欣康＋维生素E灌胃,每日一次,连续灌胃60d,以同龄C57BL/6J小鼠作为正常对照组,之后将所有小鼠断头处死,采用HE染色观察各组小鼠海马神经元组织形态学改变,采用免疫组化技术与计算机图像分析技术检测ApoEKO小鼠海马内ChAT和P38的表达。结果与C57BL/6J小鼠相比,ApoEKO组小鼠海马区神经细胞结构破坏,ChAT阳性神经细胞数目与P38阳性染色颗粒明显减少,染色变浅,ChAT与P38平均灰度值明显增高（P〈0.05）。干预组的反应结果介于两者之间,联合干预组表达优于脂欣康组。结论脂欣康能够减轻ApoEKO小鼠海马区神经损害,增强ChAT与P38的表达,与维生素E间有协同作用。     

Balb/c和129/S1小鼠的抑郁与气虚证共易感差异性及越鞠丸干预作用的分子研究＊

目的 比较Balb/c和129/S1两品系小鼠在不同抑郁症模型造模后的证候差异,以及越鞠丸对慢性不可预知温和刺激造模后两品系小鼠抑郁证候表型和相关信号通路的影响。方法 分别在Balb/c、129/S1两个近交品系小鼠上用社交挫败应激与慢性不可预知应激两种方法造模。用糖水偏爱、陌生环境摄食、强迫游泳等测试的指标用于评判小鼠的抑郁/焦虑样状况,并对小鼠前肢抓力、掌纹血色度和负重游泳进行检测,评判其气虚样证候。将慢性不可预知应激抑郁造模后的两品系小鼠分为模型组、越鞠丸组和氟西汀组,给药一周后进行一系列行为学检测,评判越鞠丸对抑郁症及气虚证候的改善作用,采用蛋白免疫印迹法检测小鼠海马与肌肉PKA-CREB信号通路蛋白表达。结果 雄性Balb/c和129/S1小鼠在两种模型下均表现出糖水偏好显著降低,强迫游泳时间显著延长或社会交互时间显著缩短等抑郁样行为,而Balb/c小鼠在抓力及掌纹血色表型上都显示气虚样证候,129/S1小鼠则未表现出类似证候。越鞠丸可逆转两品系小鼠在慢性不可预知应激造模后的抑郁表型,但无法逆转造模后Balb/c小鼠的抓力、掌纹血色度和负重游泳时长的气虚样表型;与模型组相比,两品系小鼠越鞠丸组海马和肌肉PKA、CREB磷酸化蛋白表达均明显上调。结论 社交挫败应激与慢性不可预知应激造模后,Balb/c与129/S1两品系鼠均表现出抑郁样行为,只有Balb/c小鼠出现气虚样证候。越鞠丸均能逆转两品系小鼠的抑郁样行为,对Balb/c小鼠的气虚样证候没有影响,其抗抑郁作用与激活PKA-CREB信号通路有关。     

多巴丝肼片对MTPT诱导C57BL/6J小鼠帕金森病模型的影响

[目的]建立MTPT诱导C57BL/6J小鼠帕金森病模型,探讨多巴丝肼片对MTPT诱导C57BL/6J小鼠帕金森病模型行为学变化的影响。[方法]选用纯系C57BL/6J雄性小鼠30只,按体重随机分为空白对照组、模型对照组及多巴丝肼片对照组,采用腹腔注射MTPT诱导C57BL小鼠帕金森病模型,使用多巴丝肼片灌胃进行预防给药,观察小鼠爬杆实验时间与悬挂实验评分的变化。[结果]经统计学处理数据表明,与模型对照组相比,多巴丝肼片可以明显降低小鼠爬杆实验时间(P<0.01)与明显提高悬挂实验评分(P<0.05)。[结论]多巴丝肼片对MTPT诱导C57BL/6J小鼠帕金森病模型有预保护防作用。以上结果为多巴丝肼片临床应用防治帕金森病提供了部分药效学实验依据。     

4种小鼠的寒、热体质研究

目的研究4种品系小鼠的寒、热体质。方法8～9周龄昆明、BALB/c、C57BL/6J、ICR小鼠,以及4～5周龄昆明小鼠,同步系统检测其生物学特性,然后以统一的评价标准评价4种品系小鼠的寒、热体质。并对BALB/c小鼠给予参桂理中丸和利血平做药物反证。结果①4～5周龄昆明小鼠与8～9周龄昆明小鼠比较体质明显偏热;②BALB/c小鼠与C57BL/6J小鼠比较体质偏寒;③8～9周龄雄性BALB/c小鼠、雄性和雌性C57BL/6J小鼠与8～9周龄相应性别昆明小鼠比较体质无明显差异;8～9周龄雌性BALB/c小鼠与8～9周龄雌性昆明小鼠比较体质偏寒;④8～9周龄ICR小鼠与8～9周龄BALB/c小鼠、C57BL/6J小鼠比较体质偏热;8～9周龄雄性ICR小鼠与8～9周龄雄性昆明小鼠比较体质偏热。结论4种品系小鼠存在寒、热体质差异。     

中药复方健耳剂对C57BL/ 6J小鼠老年性聋的防护效应

目的观察C57BL/6J小鼠老年性听力下降现象并研究中药复方健耳剂对老年性聋小鼠的保护作用及其可能机制。方法将36只C57BL/6J小鼠分为正常对照组(n=6)、老年性聋对照组(n=12)及高剂量中药健耳剂组(简称中药高剂量组,n=12)及低剂量中药健耳剂组(简称中药低剂量组,n=6)。正常对照组小鼠自断奶后每日饮用自来水直至出生后2个月;老年性聋对照组小鼠自断奶后每日饮用自来水直至出生后7个月;中药高、低剂量组小鼠自断奶后分别每日饮用3.65、0.91 g/(kg·d)的中药复方健耳剂直至出生后7个月。每组6只小鼠在实验终止日应用听性脑干诱发电位仪检测小鼠的听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)阈。中药高剂量组与同期老年性聋对照组6只小鼠在终止实验即刻取出耳蜗、听皮层脑组织及肝脏,采用丙二醛考马斯亮蓝试剂盒,利用紫外分光光度计,检测所取组织中丙二醛含量。结果2月龄正常对照组小鼠在4~48 KHz频率范围的不同短纯音诱发的ABR阈值保持正常。与2月龄正常对照组比较,7月龄老年性聋对照组小鼠ABR阈值明显升高(P0.05),与高剂量中药组在8~48 KHz频率范围ABR阈值比较,差异亦有统计学意义(P0.05)。与7月龄老年性聋对照组比较,高剂量中药组小鼠耳蜗、听皮层、肝脏组织中丙二醛含量明显降低(P0.01)。结论 C57BL/6J小鼠在出生后7个月表现出明显的高频性老年性聋症状。每日饮用高剂量中药健耳剂可显著延缓老年性聋的发生和发展。中药健耳剂保护听觉延缓老年性聋发生的作用,可能与其所含中药的抗氧化效应有关。     

姜黄素抗小鼠黑色素瘤分子机制的初步研究

目的:探究姜黄素抗小鼠B16黑色素瘤生长与Bcl-2、P53、肿瘤细胞内谷胱甘肽的关系。方法:构建C57BL/6 J移植性小鼠B16黑色素瘤模型考察姜黄素对黑色素瘤体生长的影响,MTT法检测姜黄素对B16细胞的增殖活力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2、P53基因的表达,HPLC分析技术检测姜黄素对C57BL/6 J小鼠B16黑色素瘤组织内GSH水平的影响。结果:姜黄素对C57BL/6 J移植性小鼠B16黑色素瘤生长的抑制作用呈剂量及时间依赖性;姜黄素作用B16细胞24h,Bcl-2蛋白表达减弱,P53蛋白表达增强;姜黄素使C57BL/6 J小鼠B16黑色素瘤组织内的GSH含量下降。结论:姜黄素体内抑制小鼠B16黑色素瘤的生长;体外抑制B16细胞的生长,并能诱导部分细胞凋亡,其作用机制可能与其下调Bcl-2蛋白的表达,上调P53蛋白的表达及耗竭肿瘤组织内GSH含量有关。     

调心方对APP/PS1双转基因AD小鼠空间学习记忆能力和海马突触传递长时程增强的影响

目的观察调心方对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠空间学习记忆能力和海马突触传递长时程增强(LTP)的影响,探讨其作用机制。方法将54只3月龄APP/PS1双转基因AD小鼠随机分为模型组、调心方组和阳性药组,以同月龄同性别18只C57BL/6J野生小鼠作为正常组,各给药组给予相应药物灌胃。给药12周后,进行Morris水迷宫行为学检测和离体电生理记录。结果 Morris水迷宫测试结果显示,定位航行实验与模型组比较,调心方组逃避潜伏期时间明显缩短(P0.01);空间探索实验与模型组比较,调心方组小鼠穿越原平台所在象限次数和在原平台所在象限停留时间明显增加(P0.05,P0.01)。在离体海马电生理诱导中,与模型组比较,调心方组海马兴奋性突触后电位斜率明显增强(P0.01),海马双脉冲易化无明显差异(P0.05)。结论调心方可有效改善APP/PS1双转基因AD小鼠空间学习记忆能力和神经突触可塑性,具有认知保护作用。     

C57BL/6和ICR品系小鼠在大脑中动脉栓塞（MCAO）模型中差异的研究＊

目的 探讨C57BL/6与ICR小鼠在大脑中动脉栓塞模型（middle cerebral artery occlusion，MCAO）中的品系间差异。方法 设C57BL/6正常组和ICR正常组为5只，C57BL/6模型组和ICR模型组分别设10只，模型组采用相同的MCAO方法进行造模，观察每组小鼠体重变化率、神经行为学、脑指数、脑含水量、脑梗死面积、生存率。结果 ①C57BL/6与ICR小鼠分别于术前和脑缺血后24 h进行统计，体重变化率具有显著的统计学差异（P<0.01）；②C57BL/6与ICR小鼠的生存率分别为90.91%和72.72%；③C57BL/6与ICR小鼠的神经行为学评分无显著的统计学差异；④C57BL/6与ICR小鼠的脑指数分别为1.91%±1.34%、2.06%±1.76%，两组间的差异具有统计学意义（P<0.05）；⑤C57BL/6与ICR小鼠的脑含水量分别为82.32%±1.34%、85.83%±1.76%，两组间具有显著的统计学差异（P<0.01）；⑥C57BL/6与ICR小鼠的脑梗死面积分别为13.85%±4.32%、28.18%±8.29%，两组间具有显著的统计学差异（P<0.01）。结论 采用相同的MCAO造模方法均可成功制作大脑中动脉栓塞模型，但在C57BL/6与ICR小鼠间存在较为显著的品系间差异。     

丹参有效成分最佳配伍对载脂蛋白E-/-小鼠血管外膜成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨丹参水溶性有效成分最佳配伍（SABP）对载脂蛋白E-/-小鼠体内和体外血管外膜成纤维细胞（VAFs）增殖的干预作用。方法：对原代培养C57BL/6J小鼠、载脂蛋白E-/-小鼠VAFs,体外分别给予正常培养基、SABP、瑞舒伐他汀。将载脂蛋白E-/-小鼠分为模型组、SABP组、瑞舒伐他汀组,C57BL/6J小鼠作正常对照组,原代培养给药后的各组小鼠VAFs,采用CCK-8法检测VAFs的增殖情况。结果：体外和体内结果均显示,SABP和瑞舒伐他汀均明显抑制了载脂蛋白E-/-小鼠VAFs的增殖,且SABP作用更显著。结论：SABP对载脂蛋白E-/-小鼠VAFs的增殖有明显的抑制作用,有望改善血管重构,成为治疗心血管疾病替代药物。     

铁皮石斛多糖促进毛发生长的实验研究

目的：观察铁皮石斛多糖（DCP）促毛发生长的功效并探讨其作用机制,为铁皮石斛的开发利用奠定基础。方法：采用水提醇沉法提取DCP,并用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。取C57BL/6J小鼠30只,用脱毛膏去除其背部毛发建立脱发模型,分为对照组、阳性对照组和DCP组,每日分别涂抹超纯水、米诺地尔酊、DCP（5.0 g·L^-1）l 次,每次 0.2 mL,连续给药21 d,应用小鼠毛发生长情况评分标准对C57BL/6J小鼠给药7,14 d毛发生长情况进行评分,及称量给药21 d C57BL/6J小鼠单位脱毛区域毛发质量评价DCP对C57BL/6J小鼠毛发生长的影响。采用MTT法和RT-PCR法分别评价DCP对人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）增殖和对HaCaT细胞血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达的影响。结果：DCP提取率为29.87%,DCP质量分数为79.65%。DCP组C57BL/6J小鼠的毛发生长平均得分、平均质量均显著优于对照组;DCP组HaCaT细胞生存率和VEGF mRNA的表达水平与对照组比较均显著提高。结论：DCP具有促毛发生长的作用,其机制可能是上调VEGF mRNA的表达。     

基于慢性轻度不可预知性温和型应激的C57BL/6N小鼠抑郁模型的建立与评价

目的：探索慢性轻度不可预知性温和型应激（CUMS）法建立抑郁症C57BL/6N小鼠模型的条件,观察不同时点该模型行为学变化,对该模型进行评价和优化。方法：对C57BL/6N小鼠进行连续8周的CUMS应激来诱导其抑郁状态。分别在造模3、5、8周时通过糖水偏好实验（SPT）、旷场实验（OFT）、强迫游泳实验（FST）、悬尾实验（TST）等行为学实验,观察小鼠抑郁样行为的改变。结果：与对照组相比,发现各时点CUMS组小鼠一般状态均较差,出现毛发脱落、体型瘦小、活动减少等;造模3、5、8周时均出现糖水偏好率下降,FST和TST不动时间的延长,OFT垂直运动次数减少等,提示CUMS组小鼠出现快感缺失、绝望感及探索能力下降;造模8周时出现OFT水平运动总路程缩短、运动速度减慢,提示CUMS组小鼠出现了自发运动能力下降。结论：CUMS应激可以成功建立C57BL/6N小鼠抑郁模型,并且随着应激时间的延长,C57BL/6N小鼠的抑郁表现逐渐加重。     

越菊保和丸的抗抑郁作用研究

目的：研究越菊保和丸抗抑郁作用。方法：选取小鼠强迫游泳实验、小鼠悬尾应激实验、拮抗利血平所致的抑郁症状等实验指标研究越菊保和丸的抗抑郁作用。结果：越菊保和丸使小鼠悬尾不动时间和小鼠强迫游泳不动时间显著缩短（P〈0．05），并有显著拮抗利血平所致的体温下降作用和小鼠眼睑下垂及运动不能的作用（P〈0．05）。结论：越菊保和丸可能有抗抑郁的作用。     

二次免疫诱导C57BL/6J小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的建立

目的:探讨C57BL/6J小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的可能性及其发病特点。方法:使用小鼠脑脊髓匀浆(spinal cord homogenate,SCH)免疫C57BL/6J小鼠,完全福(氏)免疫佐剂为免疫佐剂,并在尾静脉注射百日咳杆菌,建立EAE模型。结果:自制SCH免疫C57BL/6J小鼠可见明显脱髓鞘改变。两次免疫法与一次免疫法相比,发病率较高(P>0.05),神经功能评分较高(P>0.05),发病时间延长(P>0.05)。结论:SCH免疫C57BL/6J小鼠的EAE动物模型,主要表现为急性单相病程,从临床表现和病理学特点来看符合人类MS的病理特点,值得在以后的研究中进一步研究探讨。     

越鞠丸治疗抑郁症随机双盲对照试验的病证结合研究＊

目的 检验越鞠丸的抗抑郁作用以及起效时间的快速性，研究越鞠丸对抑郁症患者中医证候改善的特点。方法 本试验收集精神科门诊就诊的抑郁症患者，将其分为2组，越鞠丸组患者使用中药越鞠丸及艾司西酞普兰安慰剂治疗，艾司西酞普兰组患者使用艾司西酞普兰及越鞠丸安慰剂进行治疗，两组患者治疗28天。使用《汉密尔顿抑郁量表（HAMD-24）》在治疗前及服药后第7、14、28天进行抗抑郁疗效评定。使用《郁证中医辨证分型量表》将患者的证候要素进行分类统计，得出5种证候因子分。结果 HAMD-24评分显示，越鞠丸组与艾司西酞普兰组服药后第7天起，与服药前相比显著下降（P < 0.05），且持续至第28天。服药28天后，越鞠丸组，肝气郁结因子分、气结痰阻因子分、气郁化火因子分显著下降（P < 0.05）；艾司西酞普兰组，肝气郁结因子分、脾肾阳虚因子分、气郁化火因子分显著下降（P < 0.05）。结论 越鞠丸具有与艾司西酞普兰相当的抗抑郁的疗效。一方面，越鞠丸显著改善患者肝气郁结证、气结痰阻证、气郁化火证作用，符合中医理论预期。另一方面，越鞠丸对虚证特征明显患者的抑郁症治疗也有效，提示其具有广泛的治疗抑郁症疾病的作用。     

电针对魏一凯二氏大鼠抑郁模型大鼠海马CA1区突触可塑性及5-羟色胺转运体蛋白的影响

目的：观察电针对WKY(Wistar Kyoto)抑郁大鼠行为学、海马CA1区突触可塑性、5-HTT蛋白表达的影响。方法：本实验选取10 只雄性Wistar 大鼠为正常组（Control）,30 只雄性WKY 大鼠随机分成模型组（Model）、电针组（EA）和假针组（Sham EA）。通过糖水偏好实验（SPT）、旷场实验（OFT）和强迫游泳实验（FST）进行行为学测试。采用电生理场电位实验,检测电针对抑郁模型大鼠海马CA1区LTP的作用,即对突触可塑性的影响。并使用Western blot方法检测大鼠海马CA1区5-HTT蛋白表达。结果：Model组糖水偏好比低于正常组（P < 0.01）,EA组糖水偏好比明显高于Sham EA组（P < 0.05）。OFT中,与正常组相比较,Model组中央运动时间,总运动时间,中央运动距离,总运动距离,垂直站立次数均减少,且差异有统计学意义。与Model组相比,电针EA组的中央运动时间和总运动时间明显增加（P < 0.05）。FST中,与正常组相比较,Model组大鼠的不动时间明显增加（P < 0.05）。与Sham EA组和Model组相比较,EA组的不动时间明显缩短（P < 0.05）。Sham EA和Model组LTP均诱导失败,EA治疗后两个脑区均可成功诱导出LTP。Model组兴奋性突触后场电位（Fieldexcitatory postsynaptic potential, fEPSP）斜率明显低于Control组（P < 0.001）,与Sham EA组相比,EA组fEPSP斜率明显升高（P < 0.001）。与Control组相比,Model组5-HTT蛋白的表达显著增高P < 0.001）。与Sham EA相比较,EA组5-HTT的表达降低（P < 0.001）。结论：电针能够改善WKY大鼠的抑郁样行为,下调海马CA1区5-HTT蛋白的过表达,从而修复受损的海马突触可塑性,这可能是电针治疗抑郁症的机制之一。     

连梅汤对糖尿病模型小鼠血糖和肠道菌群的影响＊

目的 研究连梅汤（Lianmei Decoction，LMT）对2型糖尿病（T2DM）的治疗作用。方法 将C57BL/6J设为空白组、db/db糖尿病小鼠分为对照组，二甲双胍组，连梅汤低、中和高剂量组。收集不同组别小鼠的血清进行肝功能相关指标TC、AST、ALT、HDL-c、LDL-c和TG检测，验证连梅汤对小鼠血糖和血脂的调节作用，最后对实验小鼠粪便进行16SrDNA测序。结果 db/db小鼠与C57BL/6J比较血糖和血脂显著升高，研究模型出现T2DM。实验结果表明，在连梅汤的治疗下，与C57BL/6J小鼠比较，连梅汤对血糖、血清中FFA、血清中INS均有一定的抑制作用。db/db糖尿病小鼠TC、AST、ALT、HDL-c、LDL-c和TG在治疗组都有趋于正常的趋势，且在低剂量治疗组的治疗效果优于阳性药物二甲双胍。HE染色显示连梅汤不同剂量治疗组结肠未见明显病理改变。肠道菌群结果显示，连梅汤能够显著提高拟杆菌和降低厚壁菌门的丰度。虽然连梅汤在属水平降低了肠道微生物的相对丰度，但是却扩大了肠道微生物的总群多样性。结论 该研究证明了连梅汤可能通过影响肠道菌群对db/db糖尿病小鼠的肝脏功能和血糖血脂具有一定的调节作用，为连梅汤的临床治疗提供了一定的理论依据。     

越鞠甘麦大枣汤快速治疗产后抑郁子代抑郁症的探索

目的:应用产后抑郁子代动物模型观察母代产后抑郁对于子代的影响,并研究越鞠甘麦大枣汤对于产后抑郁子代抑郁行为的改善作用。方法:成功建立产后抑郁子代动物模型后,Balb/c子代雄鼠分为正常子代组(CTL-F1,16只),产后抑郁子代组(PPD-F1,8只),产后抑郁子代给予生理盐水组(Veh,8只)及产后抑郁子代给予越鞠甘麦大枣汤组(YG,8只)。Veh按10 m L·kg-1给予生理盐水,YG按8.3 g·kg-1给予越鞠甘麦大枣汤,应用悬尾测试及新奇环境摄食测试观察子代小鼠的抑郁行为。结果:PPD-F1悬尾不动时间显著长于CTL-F1,但单位体重摄食量较后者显著降低。与Veh相比,给予越鞠甘麦大枣汤可使PPD-F1不动时间显著缩短,且摄食量显著增加。结论:产后抑郁子代更易表现出抑郁行为,而越鞠甘麦大枣汤可快速有效地改善该抑郁行为。     

Induction of long-term potentiation at Schaffer collateral-CA1 synapses in mice hippocampus after IMPX977 administration

Objective: To investigate the effects of IMPX977 on long term potentiation(LTP) at Schaffer collateralCA1 synapses in vitro and on methyl Cp G binding protein 2(Mecp2) expression in mice cortex and hippocampus.Methods: Thirty-two C57 BL/6 mice were randomly divided into four groups: control, olive oil(vehicle),IMPX977 low(5 mg/kg) and high(15 mg/kg) groups. Mice were administrated every other day orally for two weeks. Extracellular recording technique in vitro was used to record the effects of IMPX977 on Schaffer collateral-CA1 LTP pathway in acute mice hippocampal slices. The Mecp2 protein expression level was detected by Western blotting.Results: Compared to the control group, vehicle did not alter the synaptic transmission in Schaffer collateral-CA1 synapses, however, IMPX977 at concentrations of 5 mg/kg and 15 mg/kg significantly enhanced f EPSP(field excitatory postsynaptic potential) slope in Schaffer collateral-CA1 pathway to(179.6 ± 17.8)% and(191.4 ± 21.4)%, individually 60 min after HFS, IMPX977 improved LTP induction significantly at Schaffer collateral-CA1 pathway at least. Also, IMPX977 significantly elevated Me CP2 protein level in cortex.Conclusion: The effects of IMPX977 on synaptic transmission and Mecp2 protein expression provided convincing evidence that IMPX977 could be promising new drug candidates for Rett syndrome treatment.     

酸枣仁合欢方抗抑郁有效部位的研究

目的 以药效学方法筛选酸枣仁合欢方的抗抑郁有效部位.方法 采用小鼠强迫游泳实验、小鼠悬尾实验、空场实验和拮抗利血平所致的体温降低实验,比较总皂苷和总黄酮部位的抗抑郁药效.结果 在小鼠悬尾实验和游泳实验中,总皂苷组与模型组比较能显著缩短小鼠不动时间,表现出抗抑郁作用;总黄酮组虽能缩短小鼠不动时间,但无统计学意义(P＞0.05).空场实验表明各组间小鼠自主活动无显著性差异.在利血平拮抗实验中,总皂苷组在4h时可显著拮抗小鼠体温下降(P＜0.05).结论 通过抗抑郁药效学实验结果,初步确定总皂苷为酸枣仁合欢方的有效部位.