尿路上皮性肿瘤组织中多药耐药基因及其相关蛋白的表达

[目的]观察尿路上皮性肿瘤组织中多药耐药基因(MDR1)和多药耐药基因相关蛋白(MRP)的表达情况.[方法]运用RTPCR技术,对75例施行内窥镜检查患者的尿路上皮性肿瘤组织中的MDR1和MRP进行测定.[结果]尿路上皮性肿瘤组织中MDR1的表达率为87%(65/75),其中肾盂癌为100%(11/11),输尿管癌为75%(15/20),膀胱癌为89%(39/44);MRP的阳性表达率为60%(45/75),其中肾盂癌为36%(4/11),输尿管癌为58%(11/19),膀胱癌为68%(30/44).膀胱内肿瘤的MDR1与MRP的表达趋势一致,表达率随发生部位的下移均逐渐升高.[结论]尿路上皮性肿瘤组织中MDR1具有高度表达性;MDR1及MRP表达与尿路上皮性肿瘤的发生部位无关;膀胱内不同部位肿瘤组织中MDR1的表达与肿瘤的发生部位无关.     

原发性肾癌组织中MDR1和MRP基因的表达

①目的　研究肾癌组织中多药耐药 (MDR1)基因和多药耐药相关蛋白 (MRP)基因的mRNA表达及其临床意义。②方法　应用定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,检测 2 0例原发性肾癌组织、10例正常人肾脏组织新鲜标本MDR1和MRP基因的mRNA表达水平。③结果　正常肾脏组织和肾癌组织均有MDR1和MRP基因表达 ,肾癌组织MDR1基因表达水平低于正常肾脏组织 ,MRP基因表达水平高于正常肾脏组织 ,差异有显著性 (t=2 .2 93,2 .96 8,P <0 .0 5 ,0 .0 1)。MDR1和MRP基因的表达与肾癌的病理类型、病理分期和组织学分级无关 ,与肾癌病人的无进展生存期无关 ,正常肾脏组织的MDR1基因和MRP基因的表达呈高度正相关关系 (r =0 .932 ,P<0 .0 1) ;肾癌组织MDR1基因和MRP基因的表达无明显相关关系。④结论　MDR1基因和MRP基因复合表达与肾癌固有的多药耐药现象有关     

食管、贲门癌组织中P-糖蛋白与多药耐药相关蛋白的表达

目的:检测食管癌、贲门癌组织中P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白(MRP)的表达.方法:应用免疫组化方法检测50例食管癌、50例贲门癌及各自相应癌旁正常组织中P-gp和MRP的表达.结果:食管癌与相应癌旁正常组织中P-gp的阳性表达率分别为2%,2%,而MRP为76%和42%;贲门癌与相应癌旁正常组织中P-gp的阳性表达率为54%,30%,而MRP为42%与20%.食管癌组织中MRP的表达、贲门癌组织中P-gp和MRP的表达均高于相应癌旁组织(P＜0.05).MRP与食管癌的分化程度有关,P-gp与MRP与贲门癌的分化程度有关(P均＜0.05).2者与食管癌或贲门癌的浸润深度、淋巴结转移均无关(P＞0.05).食管贲门癌组织中MRP与P-gp的表达无相关性(rs=0.173,P＞0.05).结论:食管癌的多药耐药与MRP有关;而贲门癌的多药耐药则为P-gp和MRP共同参与.P-gp和MRP可反映食管贲门癌的分化程度,但不能反映其浸润和转移等生物学特征.     

四种耐药基因蛋白在喉癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨P-糖蛋白（P-gP）、多药耐药相关蛋白（MRP1）、肺耐药相关蛋白（LRP）和DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）在喉癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化法检测106例喉癌组织中P-gP、MRP1、LRP和Topo-Ⅱ的表达强度和分布.结果 P-gP在喉鳞状细胞癌组织中的阳性表达率最高,显著高于其他3种耐药基因蛋白的阳性表达率（均P〈0.01）,但在不同分化级别鳞癌中的阳性表达率却并无明显差异（P〉0.05）;低分化鳞癌组织中MRP1的阳性表达率明显高于中高分化鳞癌组织（P〈0.05）：LRP及Topo-Ⅱ在不同分化级别鳞癌组织中的阳性表达率均无明显差异（P〉0.05）.在106例喉癌组织中,P-gP在3种类型喉癌组织中的阳性表达率并无明显差异（P〉0.05）;MRP1在未分化癌组织中的阳性表达率明显高于腺癌及鳞状细胞癌组织（均P〈0.05）：LRP和Topo-Ⅱ在3种不同病理类型喉癌组织中的阳性表达率无明显差异（P〉0.05）.存在淋巴结转移的喉癌组织中MRP1的阳性表达率明显高于无淋巴结转移的喉癌组织（P〈0.05）;而P-gP、LRP和Topo-Ⅱ在有淋巴结转移与无淋巴结转移的喉癌组织中的阳性表达率均无明显差异（P〉0.05）.结论 喉癌具有原发耐药性,P-gp在喉癌的多药耐药机制中起主要作用;MRP1的阳性表达率与喉鳞癌分化程度及有无淋巴结转移相关;P-gP、MRP1、LRP和Topo-Ⅱ在喉癌中表达存在差异性,有助于判断预后及化疗个体化方案制定.     

非小细胞肺癌中神经内分泌分化和多药耐药性的关系研究

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中神经内分泌(NE)分化与多药耐药(MDR)的相关性。方法:采用链霉亲和素过氧化酶连接(SP)免疫组化法检测113例NSCLC中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(SYN)和嗜铬素A(CgA)的表达,采用原位分子杂交对同一病例中多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因mRNA的表达进行检测,并对相关数据进行统计学处理。结果:①NSCLC中NSE、SYN、CgA的阳性率分别为53.1%,26.6%和6.2%。至少有2种NE标记物表达者有24例(21.2%),其表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05);②MDR1和MRPmRNA在NSCLC组织中的阳性表达率分别为51.3%,80.5%,二者表达与肿瘤组织类型、分化程度、淋巴结转移、TNM分期等无关,二者在NSCLC中的表达存在明显相关(P<0.01);③2种MDR相关基因mRNA在具有NE分化的NSCLC中的表达均较不伴NE分化者为低(P<0.05)。结论:NE分化可能与NSCLC多药耐药性的产生有密切关系。     

C-erbB-2和MRP1在大肠癌中的表达

目的 研究C-erbB-2和多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein1,MRP1)在大肠癌中的表达及其与临床病理指标的关系.方法 应用免疫组织化学SP法对53例大肠癌患者的癌组织、正常大肠组织进行C-erbB-2和MRP1检测,结果与临床病理指标进行综合分析.结果 C-erbB-2和MRP1主要在细胞膜和(或)细胞浆内表达.C-erbB-2在大肠癌及正常组织的阳性表达率分别为56.6%和24.5%,两者有显著性差异(P<0.01).C-erbB-2在Dukes A+B与Dukes C+D、淋巴结转移与无淋巴结转移、侵及浆膜与未侵及浆膜分组的阳性表达率分别为31.3%和67.6%、70.0%和39.1%、67.6%和36.8%,均有显著性差异(P<0.05).C-erbB-2的表达与年龄、性别、分化程度、生长部位、肿瘤大小等临床病理指标均无关.MRP1在大肠癌及正常组织的阳性表达率分别为49.1%和15.1%,两者有显著性差异(P<0.01).MRP1的表达与大肠癌的临床病理指标均无关.C-erbB-2与MRP1在大肠癌中的表达呈正相关(r＝0.478,P＜0.01).结论 C-erbB-2可能参与了大肠癌的发生、侵袭和转移,可能与预后有关;MRP1可能与大肠癌的发生及原发性多药耐药性有关,可能是独立于病理学特征之外的分子参数; MRP1和C-erbB-2在大肠癌发生、发展中可能有协同作用.     

食管鳞癌中MDR1等基因表达及其意义

目的检测食管癌活检标本中多药耐药基因(MDR1)及编码产物P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白(LRP)、谷胱甘肽S-转移酶(GST-π )、拓扑异构酶(TopoⅡ)表达水平,探讨其与临床分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及病理分型的关系.方法采用免疫组化法检测上述基因的表达水平.结果不同组织学分级的P-gp、GST-π、TopoⅡ表达率不同,高分化的表达率高于中低分化者,但不具有显著性差异.LRP的阳性表达率在不同浸润深度之间有显著性差异.P-gp的阳性表达率在溃疡型食管鳞状细胞癌中明显高于其他两种类型,具有显著性差异,P=0.003.结论食管癌组织中MDR1、 LRP 、GST-π、TopoⅡ基因存在先天性高表达;分化越高,表达率越高;肿瘤浸润越深,LRP阳性表达率越高.开展这些检测对临床化疗药物选择可起指导作用.     

4种耐药基因蛋白在中晚期喉癌放疗前后的表达及临床意义

目的 探讨P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)和谷胱甘肽-S转移酶(GST-π)在中晚期喉鳞状细胞癌患者放疗前后肿瘤组织中表达及放疗对喉癌耐药基因的影响。 方法 收集76例中晚期喉癌患者,其中低分化鳞状细胞癌8例,中高分化鳞状细胞癌68例,采用免疫组织化学法检测在不同类型喉癌组织和放疗前后癌组织中P-gp、MRP1、LRP和GST-π的表达强度和分布,分析其表达情况。 结果 喉鳞状细胞癌具有原发耐药性,P-gp在低分化鳞癌和中高分化鳞癌2种病理类型喉癌组织中呈高强度强阳性表达,与MRP1、LRP和GST-π三种耐药蛋白比较差异有统计学意义(F=8.0839,P=0.0438);MRP1在低分化鳞癌中的表达明显高于中高分化鳞癌中的阳性表达率,其差异有统计学意义(t=9.575,P<0.001);放射治疗后P-gp、MRP1、LRP和GST-π阳性表达率与放射治疗前相比均有增高,其中P-gp在放疗前后表达阳性率分别为(53.26±7.94)%、(79.37±7.73)%,表达差异有统计学意义(t=6.28,P<0.05);MRP1在放疗前后表达阳性率分别为(31.14±8.96)%、(54.76±9.53)%,差异有统计学意义(t=7.35,P<0.05)。 结论 P-gp、MRP1、LRP和GST-π在喉鳞状细胞癌中表达存在差异性;放射治疗可以增加喉鳞状细胞癌耐药基因蛋白过表达,特别是放疗后P-gp和MRP1的过表达影响喉癌化疗方案的制定。      

急性白血病多药耐药基因表达及临床意义

目的研究多药耐药基因(MDR1)在急性白血病(AL)中的表达及与预后的关系.方法采用链亲和素-胶体金原位杂交(ISH-SAG)方法对59例不同病期的AL患者进行MDR1检测.结果(1)ANLLMDR1阳性表达率(50.0%)虽高于ALL阳性表达率(37.5%),但差异无显著意义(P＞0.05).(2)MDR1在复发难治组的阳性表达率明显高于缓解组(P＜0.05).(3)MDR1阳性表达与临床缓解密切相关,MDR1阳性表达者的完全缓解(CR)率(22.2%)明显低于MDR1阴性者的CR率(80.0%)(P＜0.05).(4)MDR1阳性表达作为耐药标准的评价,其敏感率、特异率、准确率分别为77.8%、80.0%、79.0%.结论MDR1阳性表达与临床耐药相关,是影响AL患者预后的一个重要的因素.且其敏感性、特异性均较高.     

MDRI基因表达与大肠癌的相关探讨

38例原发大肠癌切除标本以过氧化酶免疫组化方法检测多药耐药基因 (mdrl)表达物P糖蛋白 (Pgp)。Pgp/mdrl阳性表达率为 6 3 .2 % ,其中直肠癌的阳性率为 6 0 % ,结肠癌 6 9.2 %。 2 2例患者同时检测肿瘤组织及正常大肠粘膜Pgp的表达 ,正常粘膜仅 6例阳性 ,肿瘤组织 18例阳性 ,Pgp在大肠癌标本中阳性表达明显升高 (P <0 .0 5 )。而Pgp/mdrl表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、大小、淋巴结和远处转移无关。     

恶性淋巴瘤mdr1和MRP mRNA及 P-gp表达水平与化疗疗效的相关研究

目的探讨恶性淋巴瘤mdr1、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效的相关性.方法应用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术和流式细胞术(FCM)方法,以8例人正常淋巴结为正常对照,对46例淋巴瘤患者[23例初治(HD1例,NHL22例)及23例复发(HD5例,NHL18例)]的mdr1 mRNA、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效间的关系进行了前瞻性研究.结果复发患者mdr1基因和P-gp表达水平及阳性率均高于初治患者(P<0.001),而MRP基因表达水平及阳性率在复发与初治患者间差异无显著意义(P>0.05).mdr1基因及P-gp表达阳性患者的化疗有效(CR+PR)率(33.33%和26.67%)明显低于mdr1基因及P-gp表达阴性患者(85.71%和83.87%,P<0.001),而MRP基因表达阳性患者与阴性患者的化疗有效率差异无显著意义(P>0.05).相关分析显示,mdr1基因和P-gp表达水平之间有明显相关性(r=0.296 3,P<0.05),而mdr1和MRP之间、MRP与P-gp之间均无明显相关性(r=0.072 3,P>0.05;r=0.081 8,P>0.05).结论 mdr1基因及P-gp表达是恶性淋巴瘤患者多药耐药的主要机制,而MRP基因不是产生耐药的主要机制.mdr1基因及P-gp表达水平的高低与恶性淋巴瘤化疗疗效密切相关,而MRP基因的表达与化疗疗效未见相关.     

非小细胞肺癌多药耐药因子的表达相关性及临床意义

探讨多药耐药因子在肺癌中表达与共表达的相关性及其临床意义。方法:采用免疫组化SP技术检测52例肺癌患者病理组织中P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽S转移酶Ⅱ(GST-Ⅱ)3种多药耐药因子的表达水平。结果: 肺癌组织中P-gp、 MRP、GST-Ⅱ阳性表达率分别为51.9% (27/52)、61.5% (32/52)和78.8%（41/52）;耐药因子在不同病理类型、不同TNM分期和不同分化程度间表达差异无显著性(P＞0.05);P-gp和MRP均阳性40.1%,P-gp和GST-Ⅱ均阳性44.2%,MRP和GST-Ⅱ均阳性50.0%,P-gp、MRP和GST-Ⅱ均阳性21.2%,其中P-gp与MRP间阳性表达率呈正相关关系(r_s=0.632,P<0.01）,P-gp与GST-Ⅱ间阳性表达率呈正相关关系 (r_s=0.521,P<0.01）,MRP与GST-Ⅱ间阳性表达率呈正相关关系(r_s=0.532, P<0.01）。结论: 肺癌的多药耐药现象是由多个耐药因子共同参与作用的结果,肺癌多药耐药的发生与不同的病理组织类型、不同TNM分期、不同分化程度间无关联     

MRP的表达与非小细胞肺癌耐药性的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因和蛋白(MRP)的表达,对比分析非小细胞肺癌的多药耐药性与三种耐药相关基因表达的关系。方法应用肿瘤细胞体外培养和药敏实验法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试,观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂 氟尿嘧啶三种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行MRP基因表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂 氟尿嘧啶耐药。其中,19例(20.9%)对三种用药均敏感,27例(29.8%)对三种用药均耐药,尚不能认为其耐药性与组织学类型和分化程度有关(P>0.05)。MRP在91例非小细胞肺癌中总的阳性表达率为73.6%。鳞癌和腺癌相比MRP的表达差异无统计学意义(P>0.05),而且MRP的表达与对三种化疗用药的耐药性均呈正相关(P<0.05),并且不同表达程度间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论MRP在非小细胞肺癌中均有较高的阳性表达并共同介导参与了非小细胞肺癌固有的多药耐药机制。     

人肝癌多药耐药细胞系BEL-7402/ADM的建立及耐药相关基因表达检测

目的：建立人肝癌多药耐药细胞系,研究其耐药特性及机制。 方法：应用人肝癌细胞株BEL-7402,采用阿霉素（ADM）大剂量间歇诱导法,建立多药耐药细胞系BEL-7402/ADM。相差显微镜观察细胞,用MTT法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的多药耐药性,采用流式细胞术检测该耐药细胞表面多药耐药基因(MDR)的表达产物P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH／GST)的表达情况,应用RT-PCR检测MDR、MRP基因表达水平。 结果：BEL-7402/ADM对多种抗癌药物产生耐药,对ADM的耐药性(半数抑制浓度,IC₅₀)提高了17.31倍。流式细胞仪分析发现（65.5±5.8）%的BEL-7402/ADM细胞表面P-gp 表达阳性,而对照细胞BEL-7402表达仅为（31.3±4.3）%;（32.4±3.5）%的BEL-7402/ADM细胞表面MRP表达阳性,而对照细胞BEL-7402表达仅为（23.4±3.1）%,二者差异有显著性(P<0.01);BEL-7402/ADM和BEL-7402细胞的GSH／GST表达无明显变化（P>0.05）。RT-PCR检测发现BEL-7402/ADM中MDR及MRP mRNA高表达。 结论：BEL-7402/ADM具有明确的多药耐药性,其多药耐药相关基因MDR及MRP mRNA表达升高。     

细胞甩片、点片和涂片法原位杂交检测急性白血病多药耐药基因表达

目的：研究不同取材方法对检测白血病细胞多药耐药（ＭＤＲ１）基因表达的意义。方法：用细胞甩片、点片和涂片三种取材方法做原位杂交，检测了１０例急性白血病ＭＤＲ１基因表达水平。结果：发现１０例中７例表达ＭＤＲ１基因，ＭＤＲ１基因阳性率甩片法和点片法较高，涂片法较低；细胞形态学以甩片和涂片法较好，而点片法较差。结论：三种方法均可用于ＭＤＲ１基因检测，其中甩片法较可靠，涂片和点片法较简便     

实时荧光定量PCR检测乳腺癌5种多药耐药基因的表达强度

目的 :检测 5种多药耐药基因在乳腺癌细胞株 MCF- 7和 MCF- 7/ADR里的表达强度变化 ,为乳腺癌多药耐药逆转研究提供新的思路。方法 :通过实时荧光定量 PCR技术分别检测乳腺癌敏感细胞株 MCF- 7和耐药细胞株 MCF- 7/ADR里的 mdr1、MRP、L RP、GST- π、TOPO α基因表达强度。结果 :MCF- 7/ADR里的 mdr1、MRP、LRP、GST- π基因表达强度分别比它们在 MCF- 7里的表达强度相对增加了 1 2 5 .39、5 5 .5 3、1 .2 4、3.38倍 ,TOPO α则降低了 0 .43倍 ,其中 mdr1、MRP表达强度的相对增加倍数均显著高于 L RP、GST- π、TOPO α的增加 (或降低 )倍数 ( P<0 .0 0 1 )。结论 :除了 mdr1之外 ,MRP也可能在乳腺癌的多药耐药产生机制里起重要作用。因此 MRP基因可以成为乳腺癌耐药逆转研究的新作用靶点     

肺癌MDR1基因表达与临床病理特征的关系

目的 探讨ＭＤＲ１基因表达与肺癌病理特征的关系。方法 应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术对原发性肺癌,癌旁组织及淋巴结中ＭＤＲ１基因的表达进行检测分析。结果 肺癌组织及癌旁组织中ＭＤＲ１阳性率分别为５４％和１０％,两者比较差异显著（Ｐ〈０．００１）;转移淋巴结组织ＭＤＲ１阳性率为５３％,而非转移淋巴结组织未见ＭＤＲ１阳性表达;各病理类型中不同分化程度肿瘤的ＭＤＲ１阳性分布不同,高分化腺癌