响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铁工艺

采用响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽与氯化亚铁进行螯合反应的条件,制备小分子肽螯合铁产品。以pH值、小分子肽与FeCl2的质量比和小分子肽液质量分数3因素的5水平进行二次正交旋转组合试验,建立螯合物得率的二次回归方程。结果表明：最佳螯合工艺条件为胶原蛋白肽与氯化亚铁的质量比4:1、小分子肽液质量分数3.5%、pH7.0。在此条件下,螯合物得率为37.31%,与模型的预测值37.46%接近。红外光谱检测结果显示,亚铁离子与小分子肽中的NH2+和COO－有螯合,是一种新型螯合物。     

波纹巴非蛤生物活性肽的分离与提纯研究

以波纹巴非蛤为原料,根据最佳酶解条件制备酶解液。通过凝胶层析柱(Sephadex G-25)分离水解所得粗品波纹巴非蛤酶解液,并用紫外可见分光光度计测定收集后的各管溶液,然后根据各吸光度值绘制的管数-吸光度曲线图得出第三个峰附近的管数为小分子段。根据标准曲线计算出活性肽的分子量为753.58D,最后通过反相高效液相色谱-质谱联用技术测出活性肽的分子量为679.4D。     

超声波技术在波纹巴非蛤酶解反应中的应用

将超声波技术应用到波纹巴非蛤制备的酶解反应中,在单因素试验的基础上采用响应面分析法对试验条件进行优化。运用Box-Benhnken 的中心组合试验设计原理,选择对短肽产率显著影响的4 个因素：辐照时间、辐照温度、超声功率和固液比,进行四因素五水平的响应面分析试验,确定在超声波条件下波纹巴非蛤的酶解反应最佳工艺条件为辐照时间4h、辐照温度55℃、超声功率140W、固液比1:2(g/mL)。对模型预测结果进行验证,得到短肽产率为样品的5.15%,是无超声波作用下的短肽产率的1.1 倍。     

以波纹巴非蛤为原料制备海洋生物活性肽

目的:以波纹巴非蛤为原料,制备海洋生物活性肽,并确定最佳酶解条件。方法:选用木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶为水解酶,以水解度为考察指标,通过正交试验对酶解实验条件进行优化。结果:木瓜蛋白酶在50℃、酶解时间4h、加酶量4%、pH6.3、料水比1:3时水解度最高为40.83%,总氮回收率为89.85%,平均肽链长度为2.20;菠萝蛋白酶在温度55℃、酶解时间4h、加酶量12%、pH6.3、料水比1:3时水解度最高为34.61%,总氮回收率为89.58%,平均肽链长度为2.58。结论:在本实验条件下,木瓜蛋白酶对以波纹巴非蛤为原料制备海洋生物活性肽效果优于菠萝蛋白酶。     

波纹巴非蛤酶解过程的肽谱变化

以波纹巴非蛤为原料,酶解1～6h制备酶解液。在SDS-PAGE电泳法测定肽谱的基础上,再利用液相色谱-质谱联用测定波纹巴非蛤酶解的肽谱变化。结果表明：酶解前3h时酶解液的肽分子的分子质量大概主要集中在100、50、2kD,酶解液大都是大分子肽或者中分子肽;酶解4、5、6h时酶解液的肽分子的分子质量基本没变化,其分子质量主要集中在400～600D,即为小分子肽,酶解4h时为酶解终点。     

响应面法优化波纹巴非蛤肌肉蛋白酶解工艺条件

波纹巴非蛤广泛分布于我国沿海地区,是一种高蛋白低脂肪的海洋蛋白资源。本研究以水解度、蛋白质回收率和感官评价为指标,选取动物水解蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶,采用单酶酶解和复合酶酶解波纹巴非蛤肌肉蛋白,综合指标筛选出最佳酶种类及酶解方法。并且以时间,液料比,加酶量为单因素,采用响应面优化酶解条件,确定最佳酶解工艺。研究结果表明:动物蛋白酶和风味蛋白酶按1∶1比例同时添加,酶解3 h后,酶解产物的水解度和蛋白质回收率分别达到22.29%±1.02%和79.95%±0.51%,感官评价总分为15.6,与其他酶解方式相比较好。通过单因素以及响应面优化,得到最佳酶解条件:加酶量1700 U/g,酶解时间3.5 h,液料比为3.4∶1。在此条件下,水解度为30.04%±0.64%,蛋白质回收率为81.46%±0.70%,与预测值水解度30.54%±0.137%和蛋白质回收率82.62%±0.092%无显著性差异(p0.05)。感官评价综合得分为15.8,风味较好,研究结果为波纹巴非蛤肌肉蛋白的精深加工利用提供参考。     

波纹巴非蛤在低温保活过程中主要营养成分变化

波纹巴非蛤分别在不同温度下进行有水保活,探讨其存活率以及主要营养成分的变化规律.结果表明,15℃为波纹巴非蛤低温保活的最佳温度,第3天存活率可达92.0%,在不同温度下保活过程中,波纹巴非蛤的粗蛋白、粗脂肪和糖原的含量均呈下降趋势,水分、乳酸呈上升趋势.波纹巴非蛤在15℃条件下保活5 d后,粗蛋白、粗脂肪和糖原含量分别下降了10.5%、20.0%和31.0%,而乳酸含量上升了50.1%.     

柔性固定化木瓜蛋白酶的制备及在酶解波纹巴非蛤中的应用

在壳聚糖膜的表面接上分子链较长的双醛淀粉作为柔性固定化酶的载体,将木瓜蛋白酶固定在该载体上制成柔性固定化木瓜蛋白酶,并应用于酶解波纹巴非蛤制备小分子肽。通过考察温度、pH 值、加酶量和固定化时间等条件对柔性固定化木瓜蛋白酶的酶活、酶活回收率的影响,确定最优固定化条件。结果表明：双醛淀粉用量0.8mg/g 壳聚糖、柔性固定化酶温度25℃、柔性固定化酶时间20h、加酶量40mg/g 壳聚糖、pH8.0 条件下所得的固定化酶酶活最高,酶活回收率63.35%。将该柔性固定化酶在酶解温度40℃、pH7.0、加酶量1.0%、酶解时间4h条件下制备波纹巴非蛤小分子肽,产率为3.4055%。     

基于人工神经网络的酶解波纹巴非蛤制备小分子肽的研究

结合人工神经网络(artificial neural networks,ANNs)的良好特性,利用正交试验获得的数据作为神经网络的训练样本,建立输入为酶解实验条件参数,输出为短肽产率的神经网络模型,并通过随机选取的样本检验了ANNs 模型的准确性。利用ANNs 模型所预测出的数据,再次结合正交试验法,对酶解波纹巴非蛤实验条件进一步优化。实验结果表明：人工神经网络优化结果的小分子肽产率为4.944%,优于正交试验4.670% 的小分子肽产率。将神经网络与正交试验结合用于酶解实验条件优化可以缩短优化实验参数的时间,获得比单纯的正交试验更优化的实验条件。     

波纹巴非蛤氨基多糖的分离纯化及其理化性质的初步研究

以波纹巴非蛤全脏器为原料,经酶解、脱色、离心去蛋白、醇沉、干燥等工序得到氨基多糖粗制品(波纹巴非蛤CPG),CPG再经吸附、透析、CTAB络合等方法进行纯化,得到波纹巴非蛤氨基多糖较纯级分(波纹巴非蛤GAG-2)。成分分析表明:波纹巴非蛤GAG-2含有氨基己糖、己糖醛酸、硫酸基和少量的岩藻糖(Fuc)、半乳糖(Gal)。波纹巴非蛤GAG-2经琼脂糖凝胶电泳可再分为F-1、F-2两个级分;红外光谱与CS-6相似;体外抗肿瘤试验表明:0·5mg/mL波纹巴非蛤CPG对HL-60细胞的抑制率可达32·3%,与抗癌药物5-Fu合用时可使抑瘤率提高到56·7%,具显著增敏作用。     

响应曲面法优化酸法魔芋葡甘露聚糖水解工艺

目的：探讨酸解法制备魔芋葡低甘聚糖工艺。方法：选定时间、水料比和温度作为影响因素,以魔芋葡甘低聚糖的特性黏度作为评价指标。在单因素试验的基础上,通过3因素3水平Box-Behnken组合试验,建立魔芋葡甘低聚糖特性黏度的二次多项式回归方程,经响应面回归分析得到优化组合条件。结果：最佳酸解条件为6mol/L HCl溶液与95%乙醇体积配比为3.8:96.2、反应时间50min、反应温度82℃。在此条件下特性黏度为55.613cm3/g,与理论最佳得率相近。结论：曲线回归方程与结果拟合性好,此模型合理可靠,具有现实意义。     

微波固体酸联合水解棉籽壳制备还原糖的研究

以棉籽壳为原料,采用微波和固体酸协同水解制备还原糖。探讨了微波功率、固体酸用量、反应时间、反应温度、液固比对还原性糖得率的影响。采用响应面法建立二次回归模型,并对水解工艺进行了优化。研究结果表明,当微波功率461.91W,固体酸用量6.46%,反应时间2.99h,反应温度100℃,液固比为18∶1时,还原糖的得率可达到62.49%。     

鸭血小分子肽同步酶解工艺的优化

通过响应面分析,建立中性蛋白酶和风味蛋白酶同步酶解血浆蛋白的数学模型,方差和可信度分析表明该模型拟合度好(Root MSE=0.488768)。运用SAS 软件分析得到最佳工艺参数为：pH7.1,反应温度50.5℃,酶解时间4.8h;在此条件下酶解所得小分子肽无异味,苦味轻,平均粒径为798.5nm,比表面为0.82634m2/g,Zeta 电位为－ 8.63mV,吸水性为0.4388g/g,吸油性为8.323mL/g。     

响应面法优化酸酶结合法水解牡蛎肽工艺

以牡蛎为原料,选用酸酶结合法对其进行深度酶解,以水解度指标,通过单因素实验考察了不同种类酸溶液、酸解pH、酸解温度、酸解时间、酶添加量、酶解pH、酶解温度和酶解时间对牡蛎深度酶解的影响,采用Box-Benhnken试验对牡蛎深度酶解工艺进行优化。结果表明:酸酶结合法水解牡蛎肽的最优工艺参数为:醋酸酸解、酸解pH4.5、酸解温度50℃、酸解5 h后,选择胰蛋白酶与风味蛋白酶(质量比为2:1)酶解、添加量0.75 g/kg、酶解pH10、酶解时间3 h、酶解温度60℃,在此条件下可得到水解度为36.25%±0.63%的牡蛎肽。     

绣球菌低分子量多糖的制备工艺优化及其分子量的测定

为研究绣球菌低分子量多糖的制备工艺,本文考察硫酸浓度、反应时间和料液比对多糖水解度的影响,以绣球菌多糖水解度为响应值,通过二次项数学模型拟合出最优酸解工艺参数,并采用多角度激光光散射仪测定酸解前后多糖的分子量。结果表明:在硫酸浓度0.46 mol/L、反应时间85 min、液料比6:1 mL/,绣球菌多糖水解度为67.06%±0.77%,与预测值接近,模型拟合效果良好。绣球菌多糖含有3个组分,重均分子量分别为3.32×107、1.79×106和3.18×106 Da,酸解后得到一种低分子量绣球菌多糖,含两个组分,重均分子量分别为3.25×105、5.61×105 Da,表明该法成功制备了一种绣球菌低分子量多糖。为后续的绣球菌低分子量多糖分离纯化和分子量-生物活性关系的研究提供了理论基础。     

响应面试验优化微波-超声协同辅助硫酸降解玉米秸秆工艺

研究微波、超声与微波-超声3 种辅助硫酸降解玉米秸秆方法,并采用响应面法对微波-超声协同辅助硫酸降解玉米秸秆的工艺进行优化,建立还原糖得率的五元二次回归数学模型,并进行了模型的有效性分析、单因素效应分析、边际效应分析及因素间的交互作用分析。最佳工艺条件为温度82 ℃、时间153 min、硫酸体积分数3.1%、料液比1∶45（g/mL）和微波功率634 W,在此条件下,还原糖得率最大值为41.24%,实际结果与模型预测值吻合度高,说明该模型切实可行。与在温度120 ℃、硫酸体积分数3%、料液比1∶20（g/mL）、时间2 h条件下水解玉米秸秆还原糖得率相比,含量提高6.6%。并通过离子色谱分析得出阿拉伯糖含量为1.75%,半乳糖含量为0.44%,葡萄糖含量为15.65%,木糖含量为7.98%,果糖含量为15.34%,纤维二糖含量为0.09%。     

响应曲面法优化复合酶水解河蟹工艺

研究木瓜蛋白酶和复合风味酶水解河蟹的工艺条件。在单因素试验基础上,通过SAS数据统计分析软件,运用四因素三水平的响应面设计方法,建立复合酶解蟹肉蛋白的二次多项数学模型,以水解度为响应值作响应面和等高线。结果表明：最适水解工艺为pH5、温度55℃、木瓜蛋白酶加酶量为5500U的条件下水解1.5h后再加入2LAPU的风味蛋白酶水解4.5h(酶解时间6h),此时的水解度预测值为31.19%、实测值30.08%,相对偏差为3.69%。最后,探索将水解液初步制成海鲜调味品。在上述条件下模拟出的酶解液鲜味明显且最后成品风味浓郁、色泽鲜黄、便于调味。     

酸解时间对大米淀粉结构性质的影响

以4种不同直链淀粉含量的大米淀粉(0%的优糯3号、10.90%的稻花灿、21.03%的聚两优、28.46%的华优香占)为原料,酸解处理不同时间,以酸解大米淀粉的酸解率、颗粒形貌、结晶性质、溶解度的变化为指标衡量不同酸解时间对大米淀粉结构及性质的影响。结果表明,不同直链淀粉含量的大米淀粉具有不同的耐酸性,酸解时间对不同直链淀粉含量大米淀粉的结构和性质有着不同的影响。大米淀粉酸解率与直链淀粉含量成反比,优糯3号为50%而华优香占仅为30%;所有淀粉颗粒在酸解后均产生一定程度的破碎,偏光十字变形直至消失,酸解相同时间,直链淀粉含量高的大米淀粉破碎率低;酸解未改变淀粉的晶型,仍为A晶型;随着酸解时间的延长相对结晶度增加;淀粉的溶解度随着酸解时间的增加而增大。     

红曲黄酒糟酶解液美拉德反应增香条件优选

以红曲黄酒糟酶解液为原料,运用美拉德反应增香技术,以氨基酸态氮消耗率、褐变度和感官评分为评价指标,采用二次正交旋转组合试验研究酶解液不同反应条件对美拉德反应增香效果的影响。结果表明,最佳反应条件为底物含量60%、起始pH值6.5、反应温度95 ℃、反应时间40 min,在此优化条件下,处理的酶解液香气鲜美、酱香浓郁、红曲典型性强,感官评分为95分。     

莲花蜂花粉酶解破壁工艺条件优化

为研究莲花蜂花粉的最佳酶解破壁条件,通过单因素试验确定纤维素酶-果胶酶-木聚糖酶-木瓜蛋白酶4种酶制剂的比例,在酶解破壁条件的单因素试验基础上,采用二次回归正交旋转组合设计试验方法对酶解条件进行优化,建立酶解pH值、复合酶加入量、酶解温度、料水比与破壁率之间的经验数学模型。复合酶中各种酶制剂的最适配比为4:2:1:3。莲花蜂花粉酶解破壁的最佳条件为酶解pH4.0、复合酶加入量12‰、酶解温度45℃、料水比1:14(g/mL),破壁率89.21%。