原料压榨制油的预处理方式对核桃多肽功能特性和ACE抑制活性的影响

旨在研究原料压榨制油的预处理方式对核桃多肽性质的影响。对核桃仁分别进行未预处理、去衣、焙烤预处理后,进行压榨提油,以提油后的饼为原料,经正己烷脱脂,碱性蛋白酶酶解制备核桃多肽,测定核桃多肽的功能特性和ACE抑制活性。结果表明：与未预处理、焙烤预处理比较,去衣预处理的核桃多肽的持水性(50℃,5.11 g/g)、吸油性(50℃,3.25 g/g)、乳化性(pH 9.0,62.57%)、乳化稳定性(pH 9.0,84.51%)、起泡性(pH 9.0,117.49%)及ACE抑制率(63.04%)最高。综上,以去衣预处理压榨制油后的核桃饼为原料制备的核桃多肽具有良好的功能特性和ACE抑制活性。     

核桃粕、核桃仁酶解物抗氧化活性的研究

比较核桃粕、核桃粕蛋白提取物、核桃仁、去皮核桃仁、脱脂核桃仁和脱脂去皮核桃仁酶解物的抗氧化活性。结果表明,各样品酶解物还原力大小顺序为：核桃仁〉核桃粕蛋白提取物〉核桃粕﹥脱脂核桃仁〉去皮核桃仁〉脱脂去皮核桃仁。当底物浓度为10 mg/mL时,核桃仁直接酶解物的还原力达到谷胱甘肽的79.74%。ORAC值大小顺序为：核桃仁〉脱脂核桃仁〉核桃粕蛋白提取物〉核桃粕〉去皮核桃仁〉脱脂去皮核桃仁。核桃仁直接酶解物的ORAC值最大,为1560.75 μmol Trolox equivalent/g Peptide,与等质量的谷胱甘肽的ORAC值相当。各样品对H2O2诱导PC12细胞损伤均有保护效果,其中核桃仁直接酶解物的保护效果最好,当底物浓度为0.10 mg/mL、0.25 mg/mL和0.50 mg/mL时,均比其它样品的细胞存活率高,分别为72.64%、90.43%和84.98%;当底物浓度为1.00 mg/mL时,脱脂核桃仁酶解物的保护效果最好,细胞存活率为85.11%。     

酶解法制备核桃谷蛋白-1 ACE抑制肽的工艺优化

为获得优质的核桃蛋白血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的制备原料及优化其制备工艺,采用连续提取法从脱脂核桃粕中依次分离出清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白-1和谷蛋白-2 5种组分蛋白,测定5种组分蛋白的占比及ACE抑制率,以ACE抑制率最大的组分蛋白作为原料采用酶解法制备ACE抑制肽,在筛选出最适酶解用酶基础上,采用单因素试验与响应面试验优化酶解制备核桃蛋白ACE抑制肽的工艺。结果表明：5种组分蛋白中谷蛋白-1占比仅次于谷蛋白-2,且其ACE抑制率最高,以核桃谷蛋白-1为原料,在筛选出胃蛋白酶作为酶解用酶基础上,经工艺优化得到最优的酶解法制备核桃谷蛋白-1 ACE抑制肽的工艺条件为酶解温度46℃、酶解时间6 h、酶用量4.2%(以底物质量计)、酶解pH 1.6,在该条件下所得核桃谷蛋白-1酶解液的ACE抑制率为(50.08±2.34)%。因此,核桃谷蛋白-1经胃蛋白酶酶解可生产ACE抑制活性较高的核桃多肽。     

加工食品对ACE活性的影响

目的:了解不同加工食品对ACE活性的影响,为筛选具有降血压作用的食品提供数据支撑。方法:选择15种饮料、5种坚果及8种其它固体加工食品进行水提取、乙醇提取和胃蛋白酶解,采用高效液相色谱法(HPLC)检测马尿酸含量变化,了解提取物对体外血管紧张素转化酶(ACE)活性的影响。结果:绝大多数食品的乙醇提取物能促进ACE活性,而水提取和酶解产物大多数抑制ACE活性。含牛奶的饮料有显著的ACE抑制作用,其它饮料对ACE的抑制作用较弱。开心果水提物显著促进ACE活性。核桃和火腿肠的酶解产物具有显著的ACE抑制作用,核桃的胃蛋白酶提取液稀释10倍后,显著抑制ACE活性,具有较好的降血压效果。结论:一些加工食品对血压有影响,同种食品中升降血压的物质并存。食用含牛奶的饮料或核桃,可能有利于减缓高血压。     

中药提取物及活性部位抑制血管紧张素转化酶活性的研究

目的筛选抑制血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)活性的中药及活性部位.方法采用体外模型比较8味中药提取物对ACE的抑制作用,并提取纯化抑制ACE作用最大的中药提取物的活性部位.结果 8味中药提取物均能抑制ACE活性.金银花提取物70%甲醇洗脱部位对ACE抑制率为87.3%,主要成分为绿原酸,重结晶纯度80.4%.结论金银花提取物对ACE具有较强的抑制效果,活性部位主要成分为绿原酸.     

核桃蛋白源血管紧张素转化酶抑制剂的分离纯化

从核桃蛋白源的胃蛋白酶水解物中分离纯化出具有高体外血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的抑制剂。利用超滤、凝胶色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化,以体外ACE抑制活性为检测指标,并用N端氨基酸测序鉴定其结构为酪氨酸-谷氨酸-脯氨酸(Tyr-Glu-Pro,YEP),对筛选出的抑制剂进行体外模拟消化稳定性研究。结果表明,胃蛋白酶酶解液通过纯化所得ACE抑制剂的IC50值为0.32μg/mL,该ACE抑制剂在经过体外模拟消化后仍保持良好的ACE抑制活性。     

玉米蛋白制备降血压肽的研究

本实验以我国来源丰富且价格低廉的玉米蛋白为原料,选用嗜热菌蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶等4种酶来水解玉米蛋白制备降血压肽。选用马尿酰-组氨酰-亮氨酸(HHL)为血管紧张素转化酶(ACE)的模拟底物,利用反相高效液相色谱(RHPLC)检测ACE催化反应生成的马尿酸(Hip)的量,确定水解产物的ACE抑制活性从而来对酶进行筛选。研究结果表明,碱性蛋白酶的水解能力最强,碱性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶的水解产物都达到了很好的ACE抑制活性(90%左右)。     

高蛋白脱脂核桃粉生产技术研究

主要对高蛋白脱脂核桃粉生产工艺流程中的去皮、脱脂、磨浆以及喷雾干燥这四个关键的生产步骤进行了研究,结果表明,用0.1%CaCl_2与0.5%NaOH的复合碱液63℃浸泡核桃仁5min,采用高压小流量清水枪喷淋并结合鼓泡式水流冲击与超声波振荡,三效联合冲洗去皮的方法,对核桃仁损伤程度较小,去皮效果最好,去皮率达97%:核桃仁经两级压榨,饼中残油≤16%;压榨后的核桃粕经两次磨浆,蛋白质的总溶出率为87.63%;控制喷雾干燥过程中进风和出风温度分别为200～230℃、85～90℃,制得的核桃粉水溶性可达95.2%.经本工艺可制备核桃味浓郁,蛋白质含量高于35%,脂肪含量小于26%的高蛋白脱脂核桃粉. ,结果表明,用0.1%CaCl_2与0.5%NaOH的复合碱液63℃浸泡核桃仁5min,采用高压小流量清水枪喷淋并结合鼓泡式水流冲击与超声波振荡,三效联合冲洗去皮的方法,对核桃仁损伤程度较小,去皮效果最好,去皮率达97%:核桃仁经两级压榨,饼中残油≤16%;压榨后的核桃粕经两次磨浆,蛋白质的总溶出率为87.63%;控制喷雾干燥过程中进风和出风温度分别为200～230℃、85～90℃,制得的核桃粉水溶性可达95 2%.经本工艺可制备核桃味浓郁,蛋     

脱脂核桃蛋白粉制备工艺优化及其氨基酸组成

为获得最佳的制备脱脂核桃蛋白粉的原料,分别以核桃仁和核桃饼为原料,制备脱脂核桃蛋白粉,利用正交实验优化脱脂核桃蛋白粉的制备工艺条件,并测定了脱脂核桃蛋白粉的氨基酸组成。结果表明：脱脂核桃蛋白粉最佳制备工艺条件为以核桃仁为原料、料液比1∶20、超声功率400 W、超声时间90 min、提取次数2次,在最佳条件下脱脂核桃蛋白粉的脱脂率为99.38%,蛋白质分散指数（PDI）为14.88%;通过与FAO/WHO推荐氨基酸摄入组成比较发现,脱脂核桃蛋白粉能基本满足成人的需求,部分满足2～5岁儿童的需求。以核桃仁为原料,可以得到高脱脂率和高PDI的脱脂核桃蛋白粉,且脱脂核桃蛋白粉是具有较高营养价值的植物蛋白源。     

抑制血管紧张素转化酶的中药及活性成分的研究

比较32味中药对血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)的抑制作用,并对枸杞的活性成分进行鉴别.高效液相色谱法(HPLC)评价药物对ACE活力的抑制作用,柱层析法对具有最强抑制作用的中药进行分离,确定活性最高的部位.32味中药提取物对ACE有不同程度的抑制作用,其中抑制作用最强的是枸杞,抑制率高达92.30％.枸杞提取物用D-101大孔树脂粗分,50％乙醇洗脱部位对ACE的抑制活性最强,此部位通过硅胶柱进一步纯化得到纯度更高的ACE抑制部位及活性成分.枸杞提取物对ACE酶有很强的抑制效果,大孔树脂和硅胶能很好的分离枸杞中对ACE有抑制作用的化合物.     

利用米糠蛋白制备类阿片拮抗肽和降血压肽的研究

采用离体豚鼠回肠(GPI)检定法测定不同米糠蛋白胰蛋白酶水解物的类阿片拮抗活性,结果发现跟新鲜米糠一样,低温脱脂米糠蛋白的酶解物具有较高的类阿片拮抗活性,高温脱脂米糠蛋白的酶解物无类阿片拮抗活性。采用低温脱脂米糠蛋白为原料,研究其制备类阿片拮抗肽后的残留蛋白酶解物的ACE抑制活性,结果发现在6种酶解物中,水解度(DH)为15.4%的碱性蛋白酶水解物的ACE抑制活性最高。     

佛手提取物及活性部位抑制血管紧张素转化酶活性的研究

目的：筛选不同溶剂佛手提取物对血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）的抑制作用及活性部位。方法：用HPLC法比较不同溶剂佛手提取物对ACE的抑制作用,并提取纯化抑制ACE作用最大的佛手提取物的活性部位。结果：不同溶剂佛手提取物中甲醇提取物对ACE的抑制活性最高,抑制率达到77%。佛手提取物40%甲醇洗脱部位对ACE抑制活性较高。结论：采用甲醇提取,大孔吸附树脂吸附,40%甲醇洗脱,获得对ACE酶具有较强抑制作用的佛手活性部位是可行的。     

核桃蛋白肽脱苦及其对ACE抑制活性的影响

以核桃蛋白粕为原料采用碱溶酸沉法从中提取蛋白,用中性蛋白酶对其进行酶解,制备核桃蛋白肽,采用活性炭和β-环状糊精对核桃肽进行脱苦,比较两者脱苦效果以及脱苦对核桃蛋白肽ACE抑制率的影响。研究结果表明,活性炭脱苦时其影响因素排序为:活性炭用量>处理时间>pH,当活性炭用量为50%,处理时间为100min,pH=8时,核桃蛋白肽苦味值最低,但其氮损失率较大;当活性炭用量为40%,处理时间为80min,pH=7时氮损失量最低,苦味值为2,对ACE抑制活性影响较大,损失15.81%。β-环状糊精脱苦最佳条件为β-环状糊精添加量为22%,处理时间为30min,苦味值为2,对ACE抑制活性影响最小,仅降低了0.12%。β-环状糊精处理是既能保存核桃蛋白肽ACE抑制活性,又能起到较好脱苦效果的脱苦处理方法。     

复合蛋白酶水解核桃粕制备血管紧张素转化酶抑制肽工艺优化

以低温榨油后的核桃饼粕为原料提取核桃蛋白,采用复合酶水解法制备得到具有降血压活性的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。在优选复合蛋白酶种类的基础上,以ACE抑制活性为评价指标,通过单因素试验和正交试验进行复合酶酶解参数的优化。结果表明,核桃粕制备ACE抑制肽的最优条件为:复合酶添加质量比1∶2(碱性蛋白酶:中性蛋白酶)、底物浓度4%、酶解温度45℃、pH 8.0、酶添加量8 000 U/g、酶解时间60 min。该条件下制备获得的降血压肽的ACE抑制活性为(63.42±0.70)%,IC50值为(0.838±0.015)mg/mL,多肽相对分子质量主要为0～2 k Da,具有良好的常温贮藏性和消化率。     

发酵乳中ACE抑制肽生成的外部因素条件的研究

探讨了促进发酵乳中ACE抑制肽生成的外部因素条件。研究结果表明,菌株发酵凝乳(pH4.7～5.0)后,产生肽量迅速积累,ACE抑制活性大幅度增强,产生的肽量与ACE抑制活性具有正相关性。添加乳清蛋白和酪蛋白可提高发酵乳中的肽含量,添加酪蛋白组更为突出;添加乳清蛋白组肽粉ACE抑制活性减弱,而添加酪蛋白组肽粉ACE抑制活性增强。与发酵温度42℃相比,37℃发酵条件下有利于发酵乳ACE抑制肽生成;与4℃冷藏处理相比,37℃条件下保温培养对提高ACE抑制活性和肽含量更为显著(P<0.01),实验结果为发酵法生产ACE抑制肽提供了可靠的技术依据。     

瑞士乳杆菌TUST005发酵乳ACE抑制活性的研究

通过正交试验确定瑞士乳杆菌TUST005制备具有抑制血管紧张素转换酶(ACE)发酵乳的最佳工艺条件.脱脂复原乳浓度为13%,经灭菌后,接种3%(体积百分数)的发酵剂,在不同的温度和时间组合下培养,超滤发酵乳的乳清,测定滤液的ACE抑制活性.42℃,6h发酵乳样品ACE抑制活性最高,为35.71%.4℃下后发酵3d的抑制活性最佳,为45.91%.     

酶解魔芋飞粉蛋白制备ACE抑制肽

目的：用魔芋飞粉制备血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽,以开发魔芋飞粉资源。方法：以体外ACE抑制率为指标筛选最佳用酶并确定酶解条件。结果：碱性蛋白酶为酶解魔芋飞粉用酶,其最佳酶解条件为：底物浓度2.25%(净蛋白),酶用量3500U/g 底物蛋白,温度50℃,pH8.0,酶解时间270min,此时酶解液的ACE 抑制率为95.69%,多肽得率为12.70%;制得的魔芋多肽为淡黄色粉末,蛋白质含量为62.30%,多肽含量为52.67%,其抑制ACE 活性的IC50 为0.80mg/mL。结论：魔芋飞粉经蛋白酶酶解可制备高活性的ACE 抑制肽。     

HPCE法测定ACE抑制活性及其应用研究

目的:建立HPCE法测定ACE抑制活性的方法,并将其用于紫菜蛋白肽的ACE抑制反应动力学.方法:进样(压力3.5 kPa、时间5s),温度30℃,分离电压20 kV,检测波长228 nm,硼酸盐缓冲液(0.1 mol/L,pH 8.3,0.3 mol/L NaCl).结果:基于卡托普利的标准曲线方程为Y=4327C+23.7764(0.097-0.485 mmol/L,r=0.9991),线性关系良好.马尿酸回收率在96％～104％之间,标准相对偏差为3.65％.紫菜蛋白肤对ACE的抑制反应为非竞争性抑制反应.结论:该方法准确可靠,可用于紫菜蛋白肽ACE抑制活性研究.     

沙葱总酚含量及体外抗氧化活性与ACE酶抑制活性的研究

以沙葱脱脂干粉为原料制备水提物,测定其总酚含量和ACE酶的抑制活性,并且评价其体外抗氧化活性。采用Folin-Ciocalteu法测定沙葱水提物中总酚含量,利用清除2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS]自由基抗氧化法,以及铁离子还原能力(Ferric-reducing antioxidant power,FRAP)法对其进行抗氧化活性评价,并且采用紫外法对ACE酶抑制活性进行测定。结果表明,沙葱水提物中总酚含量为10.20 mg GAE/g DW,ABTS法测定得到的Trolox等价抗氧化能力为9.55 mg Trolox/g DW,半抑制浓度为4.94 mg/mL,FRAP值为107.26μmol Fe~(2+)/g,沙葱水提物对ACE酶活性抑制作用的IC_(50)值为18.57 mg/mL。综上所述,沙葱是具有抗氧化活性与ACE酶抑制活性的天然植物酚类的潜在来源,可能在高血压防治方面发挥功效,可用于降压类功能性产品的开发。     

核桃综合深加工的思路与技术评价

为了充分发挥核桃资源的价值,必须对其进行综合深加工.核桃综合深加工的基本思路是:将核桃壳加工成核桃壳超细粉,将核桃仁加工成核桃油、核桃粉和核桃乳等产品.核桃壳超细粉的用途比较广泛,具有广阔的市场前景.核桃油的制取方法比较多,通过快速液压法制取的核桃油既保留了核桃油的天然品质,又避免了核桃蛋白的变性.采用含有部分油脂的核桃蛋白既可以加工成半脱脂核桃粉,也可以加工成品质稳定的半脱脂核桃乳,还可以添加在肉类食品或焙烤食品中.核桃综合深加工将会带来巨大的经济效益.