水溶性新显色剂5-Br-PADCAP直接光度法测定血清铁试剂盒的研制与评价

目的 :研制 5 Br PADCAP直接光度法测定血清铁试剂盒 ,并评价其应用价值 ,以用于血清中微量铁的测定。方法 :在表面活性剂存在下 ,以 2 (5 溴 2 吡啶偶氮 ) 5 [(N ,N 二羧基甲基 )氨基 ]苯酚 (5 Br PAD CAP)作显色剂用手工分析法和自动分析法测定血清铁。结果 :该法线性范围为 0～ 140 μmol/L ,手工分析法和自动分析法平均回收率为 10 0 .0 %和 10 0 .2 % ,批内变异系数 (CV)和批间变异系数分别为 0 .0 19～ 0 .0 2 1、0 .0 10～ 0 .0 14和 0 .0 2 2～ 0 .0 2 9、0 .0 15～ 0 .0 2 1,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性 ,线性回归方程和相关系数分别为Y =0 .992 8X +0 .2 3 3 9,r=0 .992 7和Y =0 .993 3X +0 .2 5 62 ,r=0 .9819,5 8例健康男性和 47例健康女性血清铁含量分别为 8.19～ 2 7.71μmol/L、10 .10～ 3 1.0 2 μmol/L和 8.0 4～ 2 7.68μmol/L、10 .2 2～ 3 0 .82μmol/L( x± 2s)。 结论 :用 5 Br PADCAP直接光度法试剂盒测定血清铁方法简便、灵敏可靠 ,适合临床应用     

血清肌酐的电极法测定及其评价

用电极法测定血清肌酐含量。该法具有测定速度快 ,受内源性物质及药物的影响较小的优点。批内 :CV为 1.83% ,批间 :CV为 2 .72 % ,平均回收率为 10 0 .6 % ,线性范围可达 2 5 6 0 μmol/L。本法与碱性苦味酸法比较 ( n =5 0 ) ,P >0 .0 5 ,相关系数r =0 .99。     

微量荧光法在苯丙酮尿症诊治中的应用

目的 :探讨微量荧光法定量苯丙氨酸在苯丙酮尿症 (PKU)诊治中的应用。方法 :对芬兰 L absystem s公司生产的新生儿苯丙氨酸定量试剂盒及设备进行方法学鉴定 ,并测定 194 7例新生儿和 2 8例经典苯丙酮尿症患儿及 8例持续性高苯丙氨酸血症患儿末梢血中苯丙氨酸 (Phe)水平观察其实用性。结果 :经实验方法学鉴定 ,本法高、中、低各浓度批内平均变异系数 (CV)为0 .0 36 ,0 .0 6 9,0 .0 6 8,批间平均变异系数 (CV)为 0 .12 4 ;最低检测极限为 31μmol/ L ;平均重现率为 98.4 %。新生儿血苯丙氨酸水平正常参考范围 :31～ 12 0 μmol/ L。 2 8例经典苯丙酮尿症和 8例持续性高苯丙氨酸血症患儿血苯丙氨酸平均含量分别为 186 7μmol/ L(s=4 0 9.8)和 76 9μmol/ L(s=2 2 6 .2 ) ,三者间有显著性差异 P<0 .0 0 1。患儿治疗前后苯丙氨酸平均含量有明显差异 P<0 .0 0 1。结论 :微量荧光法定量准确操作简便适于 PKU诊治观察     

静态微分电位溶出法测定尿铅含量初探

目的　探讨静态微分电位溶出法 (静态DPSA)测定尿铅含量的可行性。方法　对 46例健康成人尿铅含量进行初评性实验。结果　标准品的铅含量在 0 .0 1～ 0 .2 5 μg范围内 ,溶出峰高与含量呈良好线性 ,回归方程为 y =5 90 .3 0x +0 .0 2 ,r =0 .9997;精密度 :S =0 .2 4～ 3 .67,CV =1.3 1%～ 4.94% ;检测下限为 0 .0 0 48μmol/L ;准确度 :回收率为 88.0 0 %～ 10 4.10 % ,平均回收率 95 .5 7%。 46例健康成人尿铅含量范围为 0 .0 0 0～ 0 .14 9μmol/L(0 .0 0～ 3 0 .87μg/L)。 结论　该法测定尿铅操作简便、快速、准确     

血浆弹性蛋白酶的微量测定和临床应用

目的　拟建立一种血浆弹性蛋白酶的快捷、微量测定方法。方法　以琥珀酰甘氨酰对硝基苯胺 (succinyl-L -trianalinyl-p -nitroanilide ,SLAPN)作为弹性蛋白酶的作用底物 ,根据单位时间内 4-硝基苯胺释放量 (A450nm)的变化 ,反应弹性蛋白酶的活性。结果　线性范围为 0～ 5 0 0 μg/L,批内和批间误差分别为 5 .0 2 %和 8.3 2 % ,血浆用量仅为 2 0～ 40 μl。正常健康人 (n =12 )血浆弹性蛋白酶含量 (3 7.5 0± 15 .5 6)μg/L。肠瘘合并感染患者 (n =6)为 (4 8.40± 2 7.82 )μg/L,明显高于正常人 (P <0 .0 1)。猪急性出血坏死性胰腺炎 (5 %牛磺胆酸钠 + 80 0 0～ 10 0 0 0u/ml胰蛋白酶 )诱导12h后为 (2 3 9.0 6± 180 .2 4) μg/L明显高于诱导前水平〔(3 6.15± 9.40 ) μg/L,P <0 .0 1〕。结论　该方法操作简便、快捷、灵敏度高、特异性好 ,易推广普及     

血清中过氧化氢的荧光测定法

目的　介绍一种血清过氧化氢的荧光测定法。方法　仪器为日立 6 5 0 - 6 0型荧光分光光度仪 ,激发波长为 36 0mm ,发射波长为 4 6 0mm。精密度批内n =8,OV =2 .82 % ,回收率平均为97.85 % ,设立空白管消除干扰。曲线线性范围 :0～ 10 .16 8μmol/L。正常参考范围 :2 0～ 4 5岁青壮年 (n=5 0 ) :(3.0 0 9± 0 .2 39) μmol/L ,4 5岁以上老年 (n =5 0 ) :(3.4 33± 0 .2 5 6 ) μnmol/L。 结果　临床初步应用提示尿毒症 ,多发性骨髓瘤H2 O2 下降 ,老慢支老年痴呆H2 O2 升高。     

TBARS比色测定血浆低密度脂蛋白的研究

目的 :建立和改良血浆低密度脂蛋白 (LDL)直接测定法。方法 :TBARS比色法。结果 :该方法线性范围 0～ 10mmol/L ,与酶法相关 r=0 .985 3 ,批内CV =1.5 1% ,批内CV =2 .84% ,平均回收率 10 0 .4%。结论 :该法结果准确可靠 ,灵敏度高 ,测定范围大 ,适于临床应用。LDL C正常参考值 18～ 42岁为 2 .5 3± 0 .82mmol/L ;43～ 63岁为 3 .0 1± 1.2mmol/L。     

高效液相色谱法快速直接测定血清苯丙氨酸和酪氨酸

目的 :建立快速、直接、同时测定血清苯丙氨酸和酪氨酸的方法。方法 :血清标本加高氯酸去蛋白后取上清 ,采用固定流量洗脱高效液相色谱紫外检测法测定。结果 :苯丙氨酸的线性范围为 6～ 1 51 2 μmol·L- 1 ,最低检测浓度为 0 75μmol·L- 1 ;平均回收率为 98 6 % ,批内CV为 3 68% ,批间CV为 4 0 1 %。酪氨酸的线性范围为 5 4～ 1 380μmol·L- 1 ,最低检测浓度为 0 7μmol·L- 1 ,平均回收率 98 9% ,批内CV为 1 87% ,批间CV为 2 59%。健康儿童血清苯丙氨酸浓度为 (61 4± 1 0 8) μmol·L- 1 ,血清酪氨酸浓度为 (1 31 8± 2 8 0 ) μmol·L- 1 。健康成人血清苯丙氨酸浓度为(69 3± 8 6) μmol·L- 1 ,血清酪氨酸浓度为 (83 6± 9 4) μmol·L- 1 。 4例苯丙酮尿症患儿的血清苯丙氨酸浓度为 1 2 96～1 759μmol·L- 1 ,血清酪氨酸为 2 9 5～ 53 5μmol·L- 1 。结论 :本方法灵敏度高 ,特异性好 ,方法简便快速 ,适合临床使用     

免疫抑制法直接测定血清高密度脂蛋白胆固醇试剂盒的评价

目的 :评价免疫抑制法直接测定血清高密度脂蛋白胆固醇 (HDL -C)试剂盒是否符合临床应用要求。方法 :将免疫抑制法与磷钨酸———镁法 (PTA)和选择性抑制法进行比较 ,并分析其线性范围、精密度、准确度和干扰因素。结果 :免疫抑制法 (Y)与PTA法 (X1)的回归方程为Y =0 .993X1 0 .2 1 3,r =0 .981 ;与选择性抑制法 (X2 )的回归方程为Y =1 .0 1X2 0 .1 77) ,r =0 .971 ;Y与X1、X2 所测得的均值无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;HDL -C浓度在 0 5 1～ 2 .5 5mmol/L范围内线性良好。对高、中、低血清标本进行精密度测定 ,批内CV值分别为 1 35 %、1 6 7%和 2 0 1 % ,日间CV值分别为 2 78%、3 1 4%和 3 43%。回收率为 97 8%～ 1 0 0 .9% ,平均回收率为 99 2 %。胆红素 ( <2 5 0 μmol/L)、血红蛋白 ( <5 g/L) ,抗坏血酸 ( <2 0 0 μmol/L)、TG( <1 0mmol/L)不干扰测定。 结论 :日本和光公司生产的免疫抑制法直接测定血清HDL -C试剂盒符合临床应用要求 ,可用于自动化分析     

高铁氰化钾法快速消除胆红素干扰血清肌酐测定的实验研究

目的　探讨一种快速消除胆红素干扰测定血清肌酐的方法。方法　利用高铁氰化钾的强氧化性 ,将胆红素氧化成为胆绿素 ,以Jaffe氏反应测定血清肌酐。结果　本法具有较高的抗干扰能力 ,在胆红浓度 30～ 60 μmol/L范围内 ,其干扰值仅为 1～ 7μmol/L ,该法批内变异系数为 1 .6 % ,批间为 3 .8% ,平均回收率为 95 .7% ,与碱性苦味酸法比较 ,直线回归方程为^y =1 .0 3x - 1 .33 ,r=0 .998,结果在 0～ 30 0 0 μmol/L范围内线性良好。结论　高铁氰化钾法能快速消除胆红素对血清肌酐测定的负向干扰     

雌激素与内皮细胞凋亡的关系

目的 :观察雌激素 (17β 雌二醇 )对氧化型低密度脂蛋白 (oxLDL)诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)凋亡的影响。方法 :以HUVEC为对象 ,观察不同浓度的 17β 雌二醇 (1μmol/L、10 μmol/L和 10 0 μmol/L)对oxLDL(4 μg/L)诱导的凋亡的影响。结果 :不同剂量的 17β 雌二醇对使用oxLDL诱导的HUVEC凋亡减少 70 %～ 93% ,其抑制呈明显的正向量效关系 ,17β 雌二醇 1μmol/L组细胞凋亡占 6 .98%～ 8.6 3 % ,10 0 μmol/L组细胞凋亡占 2 .94%～ 4.85 %。结论 :17β 雌二醇对oxLDL诱导的HUVEC凋亡有明显的抑制作用 ,且在一定浓度范围内呈正向量效关系 ,有利于减少细胞凋亡的发生。     

脑梗死与脑出血患者血浆溶血磷脂酸含量的比较

目的 :探讨脑梗死与脑出血患者血浆溶血磷脂酸 (lysophosphatidicacid ,LPA)含量的变化规律 ,为临床诊断和治疗脑梗死提供依据。方法 :选择确诊的脑血栓形成、脑出血患者于发病 3天内、发病 2周时、发病 4周时取静脉血测定LPA含量 ,动态观察其变化过程。LPA检测采用有机溶剂提取 ,分离LPA ,用定磷法测定。结果 :脑血栓形成患者发病 3天内血浆LPA含量显著高于脑出血组及健康对照组 ,分别为 1 0 .6 3μmol/L± 3.6 7μmol/L ,2 .6 7μmol/L± 1 .4 0 μmol/L ,2 .0 4 μmol/L± 1 .0 1 μmol/L ;脑血栓形成组LPA的增高可持续 2周 (发病 2周时含量为5 .31 μmol/L± 1 .94 μmol/L) ,发病第 4周时降至正常水平 (2 .0 9μmol/L± 1 .0 1 μmol/L) ,总体规律为发病时明显增高 ,而后呈逐渐下降趋势。脑出血组发病 2周时含量 2 .5 4 μmol/L± .91 μmol/L、发病四周时含量 2 .2 8μmol/L±1 .0 4 μmol/L,与出血发病 3天内含量及对照组比较无显著性差异。结论 :LPA可以作为鉴别脑梗死与脑出血的一个指标 ,用来指导脑梗死的治疗     

胆红素/白蛋白比值在新生儿黄疸中的意义

目的 :探讨血清总胆红素 (TSB) /白蛋白 (AL B)比值在新生儿黄疸临床诊断中的应用价值。方法 :用全自动生化分析仪测定 TSB和 AL B,分析 1当 TSB<2 0 5 .2 ,=2 0 5 .2～ 2 5 6 .6 ,>2 5 6 .6 μm ol/ L 时 TSB/ AL B的比值 ;2生后 2 4,48,72 h及 >72 h的 TSB/ AL B比值 ;3比较在生后不同时间与不同 TSB时 TSB/ AL B比值的变化。结果 :1随 TSB值升高 ,TSB/AL B比值增高 ,当 TSB<2 0 5 .2 μm ol/ L,TSB=2 0 5 .2～ 2 5 6 .6 μmol/ L 及 TSB>2 5 6 .6 μmol/ L 时 ,3组间 TSB/ AL B比值比较 ,有显著性差异 (P <0 .0 1) ;2生后 49～ 72 h,>72 h,TSB/ AL B比值与 <2 4h的 TSB/ AL B比值比较 ,有显著性差异(P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ;3生后 >72 h,TSB<2 0 5 .2 μmol/ L 及 TSB>2 5 6 .6 μm ol/ L 时 ,TSB/ AL B比值与 TSB=2 0 5 .2～2 5 6 .6 μmol/ L 时比值比较亦有显著性差异 (P <0 .0 5或 P <0 .0 1)。结论 :对 TSB/ AL B比值的分析不支持“生后 2 5～ 48h,TSB为 10 2 .6～ 15 3.9μmol/ L 与 49～ 72 h,TSB>2 0 5 .2 μmol/ L”作为早期高胆红素血症的诊断标准。 TSB/ AL B比值支持在临床诊疗时 ,当 TSB在 2 0 5 .2～ 2 5 6 .6 μmol/ L 时要引起重视 ,而 TSB>2 5 6 .6 μm ol/ L 时 ,应采取及时和综     

淫羊藿苷对家兔阴茎海绵体的舒张作用及机制

目的　观察淫羊藿苷 (ICA)对家兔阴茎海绵体平滑肌的舒张效应及机制。方法　采用离体平滑肌张力记录法。结果　①淫羊藿苷、西地那非 (sildenafil,Sil)、罂粟碱 (Pap)及氨力农 (amrinone ,Amr)均可浓度依赖性地引起舒张效应 ,EC50 分别为 0 2 ,11 2 ,31 6和 5 0 1μmol/L。②NO合酶抑制剂N 硝基左旋精氨酸甲酯 (L NAME ) 5μmol/L可将ICA引起的最大舒张效应由 6 0 %降低到 9% ,而NO前体左旋精氨酸 (L Arginine) 2 0 μmol/L ,可部分恢复ICA的最大舒张效应到 4 0 % (P <0 0 5 )。③ICA (1,10 μmol/L)增强Ach引起的舒张效应 ,最大效应由 6 0 %分别升高到 6 7%和 80 % (P <0 0 5 )。④ICA (3,10 μmol/L)能使高K (2 0～ 12 0mmol/L)去极化引起的最大收缩反应分别降低到 88%和 81% (P <0 0 5 )。⑤在经 1μmol/L阿托品和 5 μmol/L胍乙啶预先处理的标本上 ,电场刺激可以引起海绵体平滑肌频率依赖性的舒张效应。ICA (1、 10 μmol/L)能增强电场刺激引起的舒张效应 ,最大效应由对照水平的4 1%分别升高到 5 9%和 6 3% (P <0 0 5 )。结论　ICA可以直接舒张阴茎海绵体平滑肌 ,其壮阳作用机制与影响NO cGMP信号通路有关。     

急性心肌梗死后溶血磷脂酸水平与心肌重塑的关系

目的　研究急性心肌梗死 (AMI)后溶血磷脂酸 (LPA)水平的变化及其与左室重塑的相关关系 ,及LPA在AMI后心肌重塑中的作用。方法　选择AMI患者 86例 ,分别于入院即刻及第 4天测定患者血浆溶血磷脂酸和Ⅲ型前胶原蛋白的水平 ,并于入院即刻和发病第 8～ 10天对患者进行心脏彩色超声的检查 ,测定左室舒张末期直径 (LVDEd)和左室射血分数 (EF) ,并计算心肌梗死占左室面积的百分比。正常对照 4 0例 ,测定其血浆溶血磷脂酸和Ⅲ型前胶原蛋白的水平。根据入院第 4天所测得的LPA水平把患者分为两组 :LPA水平较低组 (LPA <6 0 μmol/L)为A组 ,4 5例 ;LPA水平较高组(LPA≥ 6 0 μmol/L)为B组 ,4 1例 ,比较各组参数的差异性 ,分析它们的相关关系。 结果 (1)AMI后患者血溶血磷脂酸水平较正常对照明显升高 (5 1μmol/L± 1 1μmol/L和 6 4 μmol/L± 1 3μmol/Lvs 2 5μmol/L± 1 1μmol/L ,P =0 0 0 0 1) ;(2 )溶血磷脂酸水平较高组患者与溶血磷脂酸水平较低组患者相比其左室舒张末期直径较大 (5 4 0mm± 3 3mmvs 5 1 1mm± 2 7mm ,P <0 0 5 ) ,心肌梗死面积占左室总面积的百分比较高 (114 %± 6 %vs2 6 %± 12 % ,P <0 0 5 ) ,PCⅢ水平高 (136 μg/L± 10 μg/Lvs113μg/L± 12 μg/L ,P <0     

冠状动脉粥样硬化患者血浆同型半胱氨酸测定的临床意义

目的 :探讨血浆同型半胱氨酸水平测定在冠状动脉粥样硬化患者中的临床意义。方法 :应用荧光偏振免疫分析技术 ,测定 6 8例健康人和 85例冠状动脉粥样硬化患者血浆同型半胱氨酸 (Hcy)水平。结果 :血浆 Hcy水平正常对照组为 (9.31± 3.80 )μmol/L ,其中男性 (10 .5 0± 4 .0 7)μmol/L ,女性 (7.80± 2 .85 )μmol/L,男性明显高于女性 (P<0 .0 0 1) ;冠状动脉粥样硬化患者 (13.39± 6 .0 6 ) μmol/L,其中男性 (13.77± 6 .6 8) μmol/L,显著高于健康男性 (P<0 .0 0 1) ;女性 (11.5 0± 3.5 8) μmol/L,显著高于健康女性 (P<0 .0 0 1)。血浆 Hcy水平随冠脉病变严重程度呈上升趋势 ,冠脉不典型狭窄组 (11.36± 3.86 ) μmol/L,1支病变组 (13.32± 6 .0 9) μmol/L,2支病变组 (13.39±4 .92 ) μmol/L,3支病变组 (18.2 3± 8.98) μmol/L。结论 :冠状动脉粥样硬化患者存在高同型半胱氨酸血症 ,对于冠心病的诊断和治疗有重要价值。     

电极法与酶法CO_2测定的相关性

目的 :探讨电极法与酶法 CO2 测定的相关性。方法 :采用 CO2 电极法与酶法对一般标本和溶血、黄疸、乳糜标本进行测定及统计。结果 :批内 CV为 :电极法 1.91%～ 2 .87% ,酶法 3.2 3%～ 4 .2 8% ;批间 CV为 :电极法 2 .13%～ 3.0 2 % ,酶法 4 .0 1%～ 5 .6 3%。二种方法线性范围均最少可达 4 8.3mmol/ L。平均回收率 :电极法 10 0 .5 7% ,酶法 10 0 .78%。相关性 :r=0 .998,且两者差异无显著意义 (P>0 .0 5 )。结论 :电极法与酶法测定 CO2 结果准确 ,相关性好 ,干扰因素少     

性激素对人脐静脉内皮细胞释放一氧化氮的影响

目的 :探讨性激素单独应用或联合应用对人脐静脉内皮细胞释放一氧化氮 (NitricOxide ,NO)的影响。方法 :取健康产妇分娩后 6h内的脐带内皮细胞进行培养 ,以Griess测定培养液中NO2 含量间接反映NO生成量 ,分别测定加入 0 .0 0 1μmol/L ,0 .1μmol/L和 10 μmol/L的 17β E2 ,P、T刺激细胞 10min、30min、6 0min时NO2 含量 ,以 1ml无钙镁盐液作对照。结果 :与对照组相比 ,17β 雌二醇浓度为 0 .0 0 1μmol/L、0 .1μmol/L、10 μmol /L单独作用于内皮细胞 10min和 30min时 ,培养液中NO含量明显增加 (P <0 .0 5 ) ,但刺激 6 0min时无明显作用 (P >0 .0 5 ) ;与孕激素 (0 .0 0 1μmol/L、0 .10 μmol/L、10 μmol /L)分别联合应用 ,作用于内皮细胞 10min、30min和 6 0min ,都能显著抑制雌激素刺激内皮细胞释放NO(P <0 .0 5 )。不同浓度和作用时间下 ,孕激素和雄激素对内皮细胞释放NO的作用不同。结论 :雌激素能够通过NO途径产生血管舒张作用 ,孕激素可能通过抑制NO的释放而抑制雌激素舒张血管的作用。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中游离脂肪酸浓度

目的建立大鼠血浆中游离脂肪酸 (FFAs)浓度的测定方法。方法以十七烷酸为内标 ,用 ψ(异丙醇∶正庚烷∶2mol/L磷酸 ) =(4 0∶10∶1)提取 ,溴苯乙酮衍生化 ,流动相为 ψ(乙腈∶水 ) =(81∶19) ,流速 1.0mL/min ,柱温 5 5℃ ,分析柱Nova pakC18(2 5 0mm× 4 .6mm ,4 μm) ,紫外检测波长 2 4 2nm。 结果各FFAs最低检测限为 0 .6 μmol/L ,平均回收率为 (10 0 .1± 2 0 ) % ,批内、批外RSD <6 .5 %。结论本法稳定、灵敏、可靠 ,适用于大鼠血浆中FFAs浓度测定     

促红细胞生成素放射免疫分析及临床应用

目的 :建立促红细胞生成素 ( EPO)的放免分析方法 ,并探讨血清 EPO浓度测定的临床意义。　方法 :用rh EPO免疫动物制备了高质量的抗血清 ,建立了 EPO放免分析方法 ,并测定了正常人和贫血、肾衰患者血清 EPO值。　结果 :灵敏度为 0 .2 2 μg/L,批内 CV为 6.9%～ 8.4% ,批间 CV为 8.0 %～ 9.6% ,回收率为 93 .8%～110 .4%。正常血清 EPO值为 ( 1.5 9± 0 .69) μg/L,贫血患者为 ( 3 .64± 1.2 8) μg/L,肾衰患者为 ( 0 .85± 0 .2 5 ) μg/L,与正常人之间有显著性差异 ( P<0 .0 0 1)。　结论 :EPO的放免分析方法是一种简单、灵敏、特异的分析方法 ,可满足临床的需要 ,测定血清 EPO浓度对许多疾病的诊断和治疗有重要的意义