支气管哮喘大鼠心肌细胞p53表达研究

目的:探讨支气管哮喘心肌损害的机制及法医病理学实践中支气管哮喘猝死者的检测指标。方法:建立大鼠支气管哮喘动物模型,运用免疫组化染色方法观察不同实验条件下大鼠心肌p53表达变化。结果:正常对照组及实验对照组心肌p53呈阴性或弱阳性表达,随着时间的延长无明显的改变;各实验组第2周时心肌p53蛋白阳性面积和积分光密度比正常对照组及实验对照组明显升高(P<0·01),随着时间的延长,阳性表达面积和积分光密度呈增加的趋势,第8周达每实验组的阳性表达最高峰。使用肾上腺素组比使用氨茶碱组各时间段阳性信号面积及积分光密度都明显增加;使用肾上腺素组和使用氨茶碱组各时间段阳性信号面积及积分光密度比不使用药物组明显增加;联合使用肾上腺素氨茶碱组的阳信信号面积及积分光密度比不使用药物组低。结论:支气管哮喘本身对心肌有一定的损害;肾上腺素可加重心肌损害,肾上腺素氨茶碱联合使用对心肌损害较轻;p53免疫组化染色可以作为支气管哮喘猝死的辅助诊断指标。     

caspase-8在支气管哮喘大鼠心肌细胞中的表达

目的 研究支气管哮喘心肌损害的机制及法医病理学实践中支气管哮喘猝死者的诊断指标.方法 建立大鼠支气管哮喘动物模型,运用免疫组化SP法染色,观察在不同实验条件下大鼠心肌细胞caspase-8表达的变化规律.结果 caspase-8在正常对照组及实验对照组心肌细胞中呈阴性或弱阳性表达,随着时间的延长免疫组化染色无明显的改变.各实验组第2周时caspase-8蛋白阳性面积和积分光密度比正常对照组及实验对照组明显升高(P＜0.01),随着时间的延长,阳性表达面积和积分光密度呈增加的趋势,第8周各实验组的阳性表达达到最高峰.肾上腺素氨茶碱联合给药组caspase-8表达阳性信号面积及积分光密度比不给药组低.组间比较,肾上腺素给药组caspase-8表达阳性信号面积及积分光密度比氨茶碱给药组在各时间段都明显增加.结论 支气管哮喘本身对心肌有一定的损害;肾上腺素药物可加重心肌损害;氨茶碱与肾上腺素联合使用可以减轻心肌损害;caspase-8可以作为支气管哮喘猝死的诊断辅助指标.     

急性心肌梗死猝死患者心肌热休克蛋白70和血红素氧合酶1的改变及其意义

目的 探讨急性心肌梗死(AMI)猝死者梗死区心肌热休克蛋白70(HSP70)、血红素氧合酶1(HO-1)的mRNA和蛋白表达改变与临床意义.方法 收集18例AMI猝死者的尸体解剖梗死区心肌为研究组,17例因交通事故快速死亡者的尸体解剖正常心肌为对照组.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法检测两组心肌组织HSP70、HO-1的mRNA和蛋白表达,并观察心肌组织病理变化.结果 研究组梗死区心肌HSP70 mRNA(0.841±0.058)、HO-1 mRNA(0.918±0.161)和HSP70蛋白(3 556.68±574.19)、HO-1蛋白(4 336.68±865.30)表达均显著高于对照组(0.105±0.034、0.086±0.053、289.21±68.51、1 556.78±506.26,均P＜0.01).研究组梗死区心肌细胞内HSP70、HO-1蛋白呈阳性或弱阳性表达;对照组心肌细胞内HSP70表达阴性,而HO-1蛋白有弱阳性表达.研究组梗死区心肌HSP70与HO-1的mRNA及蛋白表达均呈显著正相关(r1=0.865,r2=0.816,均P＜0.01).结论 HSP70、HO-1可能共同参与了AMI的病理生理过程;HO-1在心肌细胞内表达可能具有普遍性,但在梗死区心肌表达更明显.     

托吡酯促进高血压鼠脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70表达的研究

目的观察托吡酯对高血压大鼠急性脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,探讨其神经保护作用机制。方法Wistar大鼠行双肾动脉狭窄术制成高血压模型,喂养2个月后随机分为3组:托吡酯干预组、缺血再灌注组和假手术对照组。线栓法制做大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2h,再灌注1d。取脑组织切片经免疫组化染色后,用病理图象分析仪计数HSP70阳性和阴性细胞数并计算阳性细胞比。结果托吡酯干预组大鼠HSP70的表达高于缺血再灌注组(P<0.05),假手术对照组未见HSP70表达。结论托吡酯能促进HSP70的表达,对缺血再灌注损伤的脑组织有保护作用。     

热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜氧自由基的作用

目的:观察热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜氧自由基及热休克蛋白(HSP)70表达的影响,探讨氧自由基在大鼠烫伤后急性胃黏膜损伤中的作用及热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜的保护作用机制。方法:将96只Wistar大鼠随机分为烫伤组(B组,n=48,其中8只大鼠作为正常对照)及热休克预处理后烫伤组(HB组,n=48,其中8只大鼠作为实验对照),观察各时相点两组大鼠胃黏膜损伤指数(UI)、胃黏膜丙二醛(MDA)及胃黏膜细胞SOD活性变化。应用免疫组化染色分析胃黏膜细胞中HSP 70表达变化。结果:大鼠严重烫伤后胃黏膜细胞SOD大量消耗,MDA显著增加,胃黏膜损害明显;热休克预处理能显著减轻大鼠严重烫伤后急性胃黏膜损害。HB组较B组大鼠胃黏膜HSP 70表达水平显著升高(P<0.05),热休克预处理能显著降低胃黏膜细胞SOD的消耗,减少MDA的产生。胃黏膜损伤指数(UI)与MDA呈显著正相关(r=0.695,P<0.01),与HSP 70呈显著负相关(r=-0.794,P<0.01);胃黏膜SOD与MDA呈显著负相关(r=-0.823,P<0.01),而与HSP 70呈显著正相关(r=0.527,P<0.05)。结论:严重烫伤大鼠胃黏膜存在氧自由基损伤;热休克预处理可显著减轻烫伤大鼠胃黏膜氧自由基损伤,保护机制与HSP 70保护抗氧化酶SOD活性密切相关。     

川芎嗪对烧伤大鼠心肌损伤保护作用的实验研究

目的 探讨川芎嗪对烧伤大鼠心肌损伤的保护作用及可能机制。方法 采用30％体表面积Ⅲ度烫伤大鼠模型，64只Wistar大鼠随机分为烧伤组和川芎嗪组。另取8只大鼠作为伤前对照。于致伤前及伤后3、6、12和24h检测血清心肌钙蛋白T（cTnT）、心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）含量变化；Westernblot检测心肌组织热休克蛋白70（HSP70）的表达。结果 大鼠严重烧伤后3h和12h心肌组织中HSP70蛋白的表达显著升高，血清cTnT含量显著升高，心肌组织中SOD活性显著降低（P〈0．01）。与烧伤组相比，川芎嗪组心肌组织中HSP70蛋白的表达明显升高，血清cTnT含量显著降低，而心肌组织中SOD活性显著升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论川芎嗪对大鼠严重烧伤后早期心肌损伤具有一定的保护作用，其保护机制可能与HSP70诱导表达增强有关。     

高压氧、阿斯匹林及其联合作用对大鼠脑热休克蛋白70表达的影响

目的：探讨阿斯匹林,高压氧及其联合作用对大鼠脑组织热休克蛋白（HSPs)70表达的影响及对神经元的保护作用。方法：用HE染色方法观察大鼠在急性全脑缺血后的神经元形态学变化,用免疫组化9检测经阿斯匹林和／或高压氧处理的大鼠CA1区和齿状回HSP70的表达。结果：阿斯匹林联合高压氧组CA1区和齿状回境存细胞数、境存率高于高压氧组（P＜0．01）;细胞表达HSP70数、表达率高于高压氧组（P＜0．01）。阿斯匹林组脑缺血后幸存细胞数与对照组比较差别无显著性意义（P＞0．05）;CA1区和齿状回几乎无HSP70表达,结论：阿斯匹林不能直接诱导CA1和齿状回HSP70的表达,但能促进高压氧的HSP70表达,能增强脑细胞抗缺血能力。     

心肌1号对大鼠异丙肾上腺素心肌损伤的骨髓干细胞修复作用研究

目的 探讨临床治疗扩张型心肌病的中药经验复方心肌1号对大鼠异丙肾上腺素心肌损伤的骨髓干细胞修复作用.方法 采用Wister大鼠30只,随机分为3组,健康对照组10只,每天同一时间皮下注射生理盐水6 ml,连续18 d;异丙肾上腺素模型组10只,连续3 d腹部皮下注射异丙肾上腺素15 mg/kg,后每天同一时间皮下注射生理盐水6 ml,连续15 d;心肌1号干预组10只,连续3 d腹部皮下注射异丙肾上腺素15 mg/kg,后予心肌1号20.4 g·kg-1·d-1灌胃,连续15 d.3组大鼠在第4天尾静脉取血1 ml,心肌1号干预组在心肌1号灌胃第12天再次尾静脉取血1 ml,分别加入CD34和CD44单克隆抗体,用流式细胞仪检测外周血CD34和CD44细胞占单个核细胞的比例.同时3组大鼠均在取血完成后腹腔注射Brdu(50 mg/kg)2次,间隔2 h.第18天之后再观察2周,在第32天用戊巴比妥麻醉处死3组大鼠,取出大鼠心脏,分别行HE染色与Brdu免疫组化染色,在Brdu染色阳性的基础上再行Brdu、TNI免疫组化双标染色,Brdu染色阴性的不再行双标染色.结果 心肌1号干预组外周血CD34和CD44细胞占单个核细胞的比例显著高于健康对照组和异丙模型组及用药前,同时心肌组织免疫组化显示心肌1号干预组有新生细胞生成,并且新生细胞表达心肌特异性蛋白肌钙蛋白I(TnI).结论 (1)心肌1号能提高实验大鼠外周血CD34、CD44细胞占单个核细胞的比例;(2)心肌1号有促进实验大鼠新生细胞生成的作用;(3)新生细胞有心肌特异性蛋白TnI表达.心肌1号可能有动员骨髓干细胞的增殖并释放入外周血中的作用,且动员的骨髓干细胞有归巢至受损心肌并定向分化为心肌细胞可能.     

大鼠烧伤感染模型肺组织热应激蛋白70的表达及意义

目的:了解实验大鼠热应激蛋白70(Heatstressproteins,HSP70)的表达与烧伤脓毒症的关系,探讨其作用机制。方法:将36只雄性Wistar大鼠随机数字表法分成6组,每组6只。其中4组以92℃水,18s烫伤(烫伤面积20%),腹腔注射乳酸林格氏液休克复苏,48h后尾静脉注射绿脓杆菌PA103悬液0.5mL(菌量1.5×109CFU/mL)制成大鼠烧伤感染模型,分别对成模后0,4,24,48h时相点进行检测;另以正常组及烧伤48h组作为对照。以免疫组化法及WesternBlot检测各组肺组织HSP70的表达,同时以偶氮显色法检测各组血浆内毒素水平,并对大鼠肺组织进行大体及镜下观察。结果:Wistar大鼠在尾静脉注射绿脓杆菌PA103悬液后,其血浆内毒素水平迅速上升。与正常对照组相比,烧伤感染组大鼠的血浆内毒素水平明显升高(t=2.2281,P<0.05)。正常大鼠肺组织HSP70表达较弱,表达部位在肺泡上皮及支气管上皮黏膜细胞的胞质。在烧伤感染条件下,大鼠肺组织HSP70表达逐渐增强,至成模后24h,HSP70表达累积量达到最高峰,并呈现较明显的核表达。成模后48h,HSP70表达逐渐减弱,核表达逐渐消失,主要在肺泡上皮及支气管上皮黏膜细胞的胞质表达。结论:HSP70与烧伤感染后的应激反应有密切关系,其表达规律与热应激反应相似。在烧伤感染的早期(24h内),热应激蛋白表达水平与血浆内     

姜黄素对血栓模型大鼠细胞内外热休克蛋白70的影响

目的以姜黄提取物为参照研究姜黄素对大鼠血栓模型的影响及其与损伤相关模式分子(DAMP)热休克蛋白70(HSP70)的关系。方法分别对大鼠进行姜黄素及姜黄提取物灌胃14d后用物理方法建立大鼠血栓模型,以假手术组、蒸馏水灌胃血栓模型组(血栓模型组)大鼠为对照,获取各组大鼠血液标本和血管组织,采用ELISA法检测各组大鼠血浆HSP70水平,采用免疫组化法检测各组大鼠血管组织中HSP70的表达。结果血栓模型组大鼠血浆HSP70水平显著高于假手术组大鼠(P=0.003),姜黄素低、高剂量灌胃血栓模型组大鼠血浆HSP70均显著降低(P=0.005、0.002),而姜黄提取物灌胃血栓模型组大鼠血浆HSP70水平无明显变化;与假手术组大鼠相比,血栓模型组大鼠血管组织中HSP70表达增强,姜黄素灌胃使血栓模型大鼠血管组织中HSP70表达增强,而姜黄提取物没有此作用。结论姜黄素抗炎作用与增加细胞内HSP70表达,降低细胞外HSP70有关,姜黄提取物的抗炎作用可能是通过其他机制。     

Exercise echocardiography and thallium-201 single-photon emission computed tomography stress test for 5- and 10-year prognosis of mortality and specific cardiac events.

Limited data suggest that stress myocardial perfusion imaging and stress echocardiography have similar prognostic value for composite cardiac events. However, it is not known whether exercise echocardiography and stress thallium are similar in their prediction of specific cardiac events, eg, death, sudden death, myocardial infarction, unstable angina, and congestive heart failure. A total of 206 patients undergoing stress echocardiography and thallium-201 single-photon emission computed tomography imaging during the same exercise test were followed-up for 5 and 10 years. Multivariate Cox regression analyses incorporating clinical, exercise stress test, echocardiographic, and nuclear imaging parameters were used to predict mortality and specific cardiac events. A moderate to large amount of ischemia (> or =4 segments on the basis of a 16-segment model) by exercise stress echocardiography was the strongest predictor of overall mortality (relative risk [RR] 6.2; P <.0001), cardiac death (RR 17.6; P =.01), congestive heart failure (RR 17.4; P =.0005) or sudden death (RR 26.8; P =.003), whereas a moderate to large fixed defect (> or =2 segments on the basis of a 6-segment model) by nuclear imaging was the strongest predictor of myocardial infarction (RR 8.1; P =.0002) or unstable angina (RR 3.0; P =.005) at 5 years. The heterogeneity in the prediction of these specific cardiac events by these 2 modalities was similarly observed at 10 years. The extent of ischemia by stress echocardiography is a better predictor of overall mortality, cardiac death, congestive heart failure, or sudden death, whereas the extent of a fixed defect by nuclear imaging is a better predictor of myocardial infarction or unstable angina.     

Protection against myocardial dysfunction after a brief ischemic period in transgenic mice expressing inducible heat shock protein 70.

Brief ischemic periods lead to myocardial dysfunction without myocardial infarction. It has been shown that expression of inducible HSP70 in hearts of transgenic mice leads to decreased infarct size, but it remains unclear if HSP70 can also protect against myocardial dysfunction after brief ischemia. To investigate this question, we developed a mouse model in which regional myocardial function can be measured before and after a temporary ischemic event in vivo. In addition, myocardial function was determined after brief episodes of global ischemia in an isolated Langendorff heart. HSP70-positive mice and transgene negative littermates underwent 8 min of regional myocardial ischemia created by occlusion of the left descending coronary artery, followed by 60 min of reperfusion. This procedure did not result in a myocardial infarction. Regional epicardial strain was used as a sensitive indicator for changes in myocardial function after cardiac ischemia. Maximum principal strain was significantly greater in HSP70-positive mice with 88+/-6% of preischemic values vs. 58+/-6% in transgene-negative mice (P < 0.05). Similarly, in isolated Langendorff perfused hearts of HSP70-positive and transgene-negative littermates exposed to 10 min of global ischemia and 90 min of reperfusion, HSP70 transgenic hearts showed a better-preserved ventricular peak systolic pressure. Thus, we conclude that expression of HSP70 protects against postischemic myocardial dysfunction as shown by better preserved myocardial function.     

探讨心内科老年患者治疗期间心源性猝死的临床危险因素江西省安福县人民医院内一科 曾林飞

目的 分析心内科老年心血管疾病患者发生心源性猝死的高危因素。方法 搜集自2016年2月- 2019年8月在本院心内科住院期间发生心源性猝死的患者共68例,作为研究组;搜集同期未发生心源性猝死的心血管疾病患者共145例,作为对照组。收集并比较两组患者的饮酒史、吸烟史、合并症、BMI、年龄、疾病类型等临床资料,展开回顾性分析,采用Logistic分析影响患者发生心源性猝死的高危因素。结果 研究组患者中心率失常、伴高血压、伴高血脂、伴心肌梗塞病史、伴外伤、便秘、瓣膜心脏病和慢性肺病比例、BMI值明显高于对照组,差异具有统计学的意义(P<0.05);经Logistic分析显示,瓣膜心脏病、高血脂、心肌梗塞病史、慢性肺病、便秘、心率失常、BMI≥28kg/m²均为患者发生心源性猝死的高危因素(P<0.05)。结论 高血脂、心肌梗塞病史、慢性肺病、便秘以及肥胖均会增加老年心血管疾病患者发生心源性猝死的风险性,在治疗时需早期评估心内科老年患者的心源性猝死风险,指导患者调整生活习惯,控制合并症,预防猝死的发生。     

长期运动预适应模型大鼠心脏蛋白激酶C和热休克蛋白70的表达

背景：研究表明蛋白激酶C和热休克蛋白70可能参与运动预适应的心脏保护作用。目的：观察长期运动预适应对大鼠心脏蛋白激酶C和热休克蛋白70的影响及其对心脏保护的作用机制。方法：将SD大鼠随机分为对照组,力竭运动组和运动预适应组。对照组和力竭运动组大鼠常规饲养3周,运动预适应组大鼠进行3周的间歇性游泳运动建立长期运动预适应动物模型。3周后,力竭运动组和运动预适应组大鼠进行一次性力竭游泳运动。结果与结论：大鼠力竭运动后,力竭运动组心脏热休克蛋白70表达高于对照组（P〈0.05）;先经3周运动预适应再进行力竭运动后,运动预适应组心脏蛋白激酶C和热休克蛋白70的表达高于力竭运动组（P〈0.05）。结果证实,长期运动预适应能激活心脏蛋白激酶C,诱导热休克蛋白70的合成增多,从而发挥其心脏保护作用。     

戊四氮致癫痫大鼠脑组织形态结构及热休克蛋白70表达的初步研究

目的：探讨癫痫的不同发作级别所造成的神经元损伤及热休克蛋白70（HSP70）的表达情况及其意义。方法：采用戊四氮致癫痫模型,随机分为生理盐水对照组和模型组,模型组按癫痫发作级别又分为Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ级组。采用常规病理学染色观察各组海马区神经元的受损情况;免疫组织化学方法观察不同级别癫痫发作海马内HSP70表达的变化。结果：Ⅲ、Ⅴ级组与对照组和Ⅰ级组相比,海马结构内存在受损异常神经元,Ⅴ级组更明显（P〈0．05）。同时Ⅲ级组、Ⅴ级组海马各区的HSP70阳性细胞数亦逐渐增多（P〈0．05）。结论：戊四氮致癫痫模型中,随着发作级别的增加,海马结构内神经元损伤逐渐加重,HSP70的表达亦逐渐增加,提示海马结构HSP70的表达与癫痫发作严重程度有关。     

低强度运动对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的保护作用

目的：探讨不同强度的运动对2型糖尿病大鼠热休克蛋白72（HSP72）基因的表达和心肌凋亡的影响。方法：雄性SD大鼠36只,分成糖尿病组（DFM）和对照组（CFM）。糖尿病造模成功后随机分成糖尿病非运动组（DRN）,糖尿病高强度运动组（DRH）,糖尿病低强度运动组（DRL）;对照组分成正常大鼠非运动组（CRN）,正常大鼠高强度运动组（CRH）,正常大鼠低强度运动组（CRL）。采用活动平板耐力运动8周,检测大鼠心肌HSP72基因表达以及TUNEL染色观察。结果：糖尿病大鼠心肌HSP72基因表达均显著低于正常大鼠,其中CRL组和DRL组显著高于CRN组和DRN组,而CRH组和DRH组显著低于CRN组和DRN组。DRN组和DRH组心肌凋亡指数（AI）显著高于CRN组和CRL组,DRL组心肌AI显著高于CRL组。Pearson相关分析显示,在DRN组与DRL组HSP72 mRNA与心肌AI呈显著负相关（P<0.05）,而在DRN组与DRH组HSP72 mRNA与心肌AI无相关性。结论：低强度运动可以增加HSP72基因的表达,抑制糖尿病大鼠的心肌凋亡率,对糖尿病心肌病变具有保护作用。