壳聚糖相对分子量对壳聚糖膜与角膜基质细胞相容性的影响

以脱乙酰度为95％，相对分子量分别为130KDa、220KDa、300KDa和500KDa的壳聚糖制备不同的壳聚糖膜。以各种壳聚糖膜作为基质，体外培养兔角膜基质细胞，通过观察角膜基质细胞在不同壳聚糖膜上的生长状态、贴附情况、生长曲线以及乳酸脱氢酶的活性，研究壳聚糖相对分子量对壳聚糖膜与角膜基质细胞生物相容性的影响。实验结果表明壳聚糖相对分子量对壳聚糖膜与角膜基质细胞的相容性具有重要的影响，相对分子量过高或过低的情况下，壳聚糖膜与角膜基质细胞相容性较差，对细胞损伤程度较大，细胞在膜上的贴附、生长能力较差；以相对分子量在200KDa～300KDa之间的壳聚糖制备出的膜与角膜细胞具有较好的相容性，细胞可在膜上长成密集单层，适合作为角膜培养的支架材料。     

壳聚糖-透明质酸共混膜对兔角膜基质细胞生长的影响

观察各种壳聚糖-透明质酸共混膜对角膜基质细胞生长的影响作用,研究透明质酸混入比例对共混膜与细胞相容性的影响.以共混膜为载体培养兔角膜基质细胞,通过光学和电子显微镜,观察细胞在膜上的生长情况;通过MTT法,检测细胞在共混膜上的贴附率和生长活性;通过检测培养基中乳酸脱氢酶的活性,预示壳聚糖-透明质酸共混膜与角膜基质细胞的相容性.以低于1:0.1的比例混入透明质酸.可以提高细胞在共混膜上的贴附率、生长速度,细胞在共混膜上的生长状态好于在壳聚糖膜上的生长状态.结果提示,以低于1:0.1的比例混入透明质酸,可以提高壳聚糖膜与角膜基质细胞的相容性,促进细胞生长;而以高于1:0.1的比例混入透明质酸,则不利于细胞在共混膜上的生长,降低了壳聚糖膜与角膜基质细胞的相容性.     

生物工程活性角膜基质的研制及相容性研究

研究生物工程活性角膜的生物相容性，为进一步临床应用提供理论基础。猪角膜基质脱细胞并去除免疫源性物质形成网状半透明生物材料，将培养的角膜基质细胞与生物材料复合构建生物工程活性角膜基质。对复合物进行倒置显微镜和扫描电镜检测细胞附着情况及材料的细胞相容性；将活性角膜基质移植入新西兰兔角膜囊袋内．细胞用BrdU标记检测在体内移植过程中的存活及转归，不同时间观察角膜的生物相容性及改建情况。结果显示脱细胞基质材料的细胞相容性较好，细胞种植后可存活、黏附并增殖；移植区细胞可有BrdU阳性着色，4周后角膜开始透明，8周后角膜改建基本完成。     

脱细胞胶原基质双层材料与骨髓间充质干细胞的生物相容性研究

目的 对脱细胞胶原基质双层材料和骨髓间充质干细胞（BMSCs）间的生物相容性进行研究.方法 将BMSCs与脱细胞胶原基质双层材料共培养作为实验组,单独培养的BMSCs为对照组,对BMSCs的生长和增殖情况进行研究,扫描电镜下观察细胞在材料上的贴附生长情况,并采用CCK-8法测定细胞活性.结果 扫描电镜结果显示BMSCs在脱细胞胶原基质双层材料上生长良好.CCK-8法测得的BMSCs与脱细胞胶原基质双层材料共培养的生长曲线显示,实验组与对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 脱细胞胶原基质双层材料具有较好的生物相容性,这为脱细胞胶原基质组织工程支架双层材料下阶段在体内动物中的应用提供了科学依据.     

兔角膜内皮细胞载体的体外培养及移植的研究

以特定曲率的壳聚糖-硫酸软骨素共混膜为载体，构建兔角膜内皮。研究了共混膜的透光性、体外酶降解性以及兔角膜内皮细胞在载体上的细胞贴附性、细胞形态及膜强度等性质。结果表明，共混膜的透光率达90％以上，生物降解性良好。该共混膜有良好的细胞贴附性及机械强度；兔角膜内皮细胞可在共混膜上长成良好的单层，细胞形态较好，并贴附牢固，振荡后细胞无脱落，膜片保持完整。将培养好的载体植入到去除内皮层的兔角膜中，术眼在56天内基本保持透明，说明体外构建的内皮可执行角膜内皮层的部分功能。     

壳聚糖与硫酸软骨素共混膜性质的研究

以壳聚糖和硫酸软骨素按一定比例制备出共混膜，研究了膜片的透光性、含水量、渗透性、力学性质、表面结构、生物降解性、生物相容性等性质。结果表明该共混膜具有较好的透光性、通透性、生物降解性和生物相容性，膜表面较粗糙。以此共混膜为载体培养兔角膜基质细胞，发现细胞在此共混膜上生长良好。制备膜片随着加入CaSO4量的增加，膜的通透性也随之增加。     

三种角膜内皮细胞载体膜片的性质研究

以壳聚糖分别与硫酸软骨素、羧甲基壳聚糖、透明质酸按一定比例制备出共混膜，研究了膜片的透光性、吸水率、渗透性、力学性质、表面结构、红外图谱等物理性质。以共混膜为载体培养兔角膜内皮细胞，从而筛选出了透明度高，亲水性好，机械性能优异，最适合内皮细胞贴附生长的壳聚糖．硫酸软骨素共混膜片，并对其生物降解性、生物相容性等性质进行了研究。为了提高壳聚糖．硫酸软骨素共混膜片的通透性，在膜片制备过程中加入不同剂量的醋酸盐作为扩孔剂，结果表明当加入一定量的醋酸盐为扩孔剂时，膜片的通透性提高。     

壳聚糖膜的降解性研究

用不同性能地壳聚糖为膜材料制备壳聚糖膜，通过体外酸解，酶解试验及动物体内植入试验研究其降解。试验结果表明，壳聚糖是一种可生物降解性膜材料，壳聚糖膜的降解性与其脱乙酰度，介质酸性强弱及溶菌酶等因素有关。壳聚糖膜在动物体内降解比较缓慢，２０天约降解８．２％。     

壳聚糖-胶原角膜修复材料的制备及生物相容性

背景：将胶原和壳聚糖按一定比例制成复合膜后,能够降低壳聚糖的正电荷,改善壳聚糖的吸附力,促进细胞的黏附生长、迁移和增殖,增强壳聚糖的生物学性能,成为十分优良的生物材料。 目的：制备壳聚糖-胶原复合膜,观察其与角膜基质层的组织相容性。 方法：制作壳聚糖-胶原复合膜材料。将16只新西兰兔随机分为两组,实验组于右眼角膜基质袋内植入壳聚糖-胶原复合膜,对照组右眼角膜基质袋内植入壳聚糖膜。移植后进行裂隙灯显微镜、前节-光学相干断层成像及组织学观察。 结果与结论：①裂隙灯显微镜：移植后第8周,实验组膜片中央出现降解浸润,皱褶屈曲不明显;对照组膜片全部浸润,皱褶屈曲明显。②前节-光学相干断层成像：移植后第6周,实验组的复合膜边界模糊,密度与正常角膜组织很接近,角膜形态恢复正常。③组织学观察：移植后第8周,实验组膜片表层少量降解,降解材料与角膜基质融合,膜片周围角膜基质有少量炎性细胞浸润;对照组膜片表层降解程度大于实验组,降解物质与角膜基质交织融合,膜片周围角膜基质有较多炎性细胞浸润。表明壳聚糖-胶原复合膜具有可降解性和良好的组织相容性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

脱细胞猪角膜表面基底膜成分的检测

背景：前期实验显示脱细胞猪角膜具有良好的组织相容性,可以支持角膜细胞和皮肤上皮细胞的生长。 目的：检测脱细胞猪角膜是否保存了利于角膜上皮细胞生长的重要组织结构—基底膜。 方法：利用荧光抗体对脱细胞猪角膜表面的基底膜成分(层粘蛋白和Ⅳ型胶原)进行免疫组织化学检测,荧光显微镜下观察脱细胞猪角膜表面是否保存了基底膜成分。 结果与结论：免疫荧光染色显示脱细胞猪角膜前基质表面层粘蛋白和Ⅳ型胶原呈阳性表达,与新鲜猪角膜表面基底膜的荧光表达相同,表明脱细胞猪角膜保存了利于角膜上皮细胞生长的基底膜。     

基质胶对植入式葡萄糖传感器外膜材料壳聚糖生物相容性的影响

异物反应的存在导致植入式葡萄糖传感器难以持续正常工作,壳聚糖具有无毒可降解、生物相容性良好等特性,可作为传感器外层的保护膜以提高设备的生物相容性,但尚不能满足实际需求,希望进一步提高膜材料的生物相容性,为此探究不同浓度的基质胶对多孔壳聚糖膜生物相容性的影响。利用模板浸取法,以硅胶作为致孔剂制作多孔壳聚糖膜(PCSM),在此膜的表面滴涂不同浓度的基质胶(matrigel),蛋白质浓度分别为10、15、20 mg/mL。将单独的PCSM(对照组)与滴涂基质胶的PCSM组(实验组)一同植入到SD大鼠背部的皮下组织。植入7、14、28、42、56、70 d后,取材制备常规石蜡切片并进行苏木精-伊红染色,利用组织形态学和统计学方法(主要运用单因素方差分析和Bonferroni法比较两组数据间的差异),对膜外炎性细胞比、纤维包膜厚度和血管密度等数据进行统计分析,评价材料的生物相容性。形态学观察,植入第7、14 d时,膜材料周围细胞核染色均较深。统计膜外炎性细胞比,滴涂不同浓度基质胶的PCSM组在第7 d时炎性细胞比整体上少于PCSM组,第14 d时这一数值略高于多孔壳聚糖膜组。方差分析结果显示,各组间无明显差异(P>0.05)。第28 d时,纤维包膜开始形成,膜材料周围的炎性细胞减少,一些胶原堆积在膜的表面,并随着时间的延长纤维包膜变得致密;第56和70 d时,纤维包膜厚度降低得较明显,各滴涂基质胶的PCSM组纤维包膜厚度均小于PCSM组。方差分析结果表明,各实验组与对照组间差异显著(P <0.05),运用Bonferroni法进行两两比较后,第42、56、70 d时,对照组与实验组中滴涂基质胶浓度为20 mg/mL的PCSM组差异明显,膜材料靠近皮肤端数据两两组比较的P值分别为0.01、0.035、0.024,靠近肌肉端数据P值分别为0.036、0.047、0.210,其他各组之间两两比较后的差异不显著(P>0.05)。膜外血管密度各浓度组大体随着时间的延长呈现增加的趋势,各实验组与对照组间比较差异不大,但个别数据差异明显,滴涂基质胶的PCSM周围血管密度有的值低于PCSM。整体来看,基质胶能提高多孔壳聚糖膜的生物相容性,进一步提高膜材料的性能。     

Chitosan scaffolds for in vitro buffalo embryonic stem-like cell culture: an approach to tissue engineering

Three-dimensional (3D) porous chitosan scaffolds are attractive candidates for tissue engineering applications. Chitosan scaffolds of 70, 88, and 95% degree of deacetylation (% DD) with the same molecular weight were developed and their properties with buffalo embryonic stem-like (ES-like) cells were investigated in vitro. Scaffolds were fabricated by freezing and lyophilization. They showed open pore structure with interconnecting pores under scanning electron microscopy (SEM). Higher % DD chitosan scaffolds had greater mechanical strength, slower degradation rate, lower water uptake ability, but similar water retention ability, when compared to lower % DD chitosan. As a strategy to tissue engineering, buffalo ES-like cells were cultured on scaffolds for 28 days. It appeared that chitosan was cytocompatible and cells proliferated well on 88 and 95% DD scaffolds. In addition, the buffalo ES-like cells maintained their pluripotency during the culture period. Furthermore, the SEM and histological study showed that the polygonal buffalo ES-like cells proliferated well and attached to the pores. This study proved that 3D biodegradable highly deacetylated chitosan scaffolds are promising candidates for ES-like cell based tissue engineering and this chitosan scaffold and ES cell based system can be used as in vitro model for subsequent clinical applications.     

壳聚糖及相关材料用于神经修复的前景

壳聚糖（Chitosan）是一种具有优良的生物相容性的生物可降解材料,我们从壳聚糖的带正电性、吸附蛋白的能力、对神经细胞的特异性及表面的粗糙程度、孔径和表面形貌等方面叙述了壳聚糖的神经亲和性及壳聚糖与相关材料用于神经修复的进展和前景。     

Fabrication and characterization of chitosan–collagen crosslinked membranes for corneal tissue engineering

This article describes a chitosan–collagen composite membrane as corneal tissue-engineering biomaterials. The membrane was prepared by dissolving the chitosan into collagen with the weight ratio of 0, 15, 30, 45, 60, and 100%, followed by crosslinked with 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide. Mechanical properties, contact angles, and optical transmittance were determined and compared between chitosan membrane and crosslinking composite membrane. As a result, the optical transparency and mechanical strength of the chitosan–collagen membranes were significantly better than that of the sample of chitosan. In addition, in vitro cell culture studies revealed that the collagen has no negative effect on the cell morphology, viability, and proliferation and possess good biocompatibility. Overall, the dendrimer crosslinked chitosan–collagen composite membranes showed promising properties that suggest that these might be suitable biomaterials for corneal tissue-engineering applications.     

壳聚糖大鼠颅内组织相容性的初步观察

本实验探讨了生物可降解的天然高分子缓释材料壳聚糖在脑组织中的生物相容性.以期为临床提供可用于颅内植入化疗的药物缓释高分子载体.我们以32只SD大鼠为研究对象,随机分为实验组和对照组,分别植入壳聚糖和明胶海绵.观察术后的行为改变和3,7,14,30天时的局部组织反应(HE染色).观察发现所有动物无明显行为改变,术后3,7,14,30天的组织学观察表明壳聚糖与明胶海绵有类似的异物反应.因此壳聚糖具有良好的脑组织生物相容性,并可安全的降解.可作为颅内植入缓释化疗药物的载体.     

Chitosan membrane as a wound-healing dressing: characterization and clinical application

Chitosan prepared from natural biopolymer chitin and cast into membranes has been tested as wound dressing at the skin-graft donor site in patients. Bactigras, a commonly used impregnated tulle gras bandage, served as a control. Chitosan membrane, prepared with a 75% degree of deacetylation and a thickness of 10 microm, was used in nonmesh or mesh form. The progress in wound healing was compared by clinical and histological examination. Itching and pain sensitivity of the wound dressed area was scored with the use of a visual analogue scale. Mesh chitosan membrane in contrast to the nonmesh membrane allowed blood to ooze into the surrounding gauze. After 10 days, the chitosan-dressed area had been healed more promptly as compared with the Bactigras dressed area. Moreover, the chitosan mesh membrane showed a positive effect on the re-epithelialization and the regeneration of the granular layer. The data confirm that chitosan mesh membrane is a potential substitute for human wound dressing.     

壳聚糖膜的降解与生物相容性研究

用小鼠作实验动物，研究了壳聚膜的生物降解与生物相容性，结果表明，壳聚糖膜易于生物降解，在植入初期有轻度炎症反应，至１６周后炎症反应基本消失。作为一种新型天然可吸收性生物材料，壳聚糖具有很好的发展应用前景。