液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。     

碱性蛋白酶水解蚕豆蛋白的条件优化

采用碱性蛋白酶酶解蚕豆分离蛋白,通过正交试验确定最佳酶解反应条件:反应温度为50℃,pH值为8.5,酶与底物比为16000 U/g,底物浓度为60g/L.在此条件下,水解度可以达到15.55%.     

双酶水解虾粉的研究

为了提高虾加工下脚料的利用价值,用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶同步水解虾粉,分析了水解温度、水解时间、起始pH值、酶用量（E/S）和底物浓度等对水解度的影响,确定的最佳酶解条件为：底物浓度为9.0%、Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶的添加量均为1.0%、水解温度为55℃、起始pH值为6.5和酶水解时间为8h,水解度为22.1%。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

荞麦蛋白的碱性蛋白酶酶解动力学研究

为掌握碱性蛋白酶对荞麦蛋白的酶解特性,实现对荞麦蛋白的深加工利用及生物活性肽的开发.采用pH-stat法,系统分析了底物浓度、酶浓度、pH及温度对荞麦蛋白水解度的影响,并运用对数函数对水解动力学过程进行描述和拟合.结果表明:在碱性蛋白酶水解荞麦蛋白的过程中,水解度随水解时间的变化呈现对数函数关系,可用公式h=(1/b)ln(1+abt)对其水解动力学过程进行描述;底物具有促进水解反应速度和抑制酶活性的双重作用,在低底物浓度条件下,荞麦蛋白的水解度较高;当底物浓度增加到6%时,蛋白水解度与底物浓度的关系曲线出现转折,水解度较低且趋于平缓;在酶浓度为0.002 g/mL时,水解反应的临界底物浓度为12.27%;在pH9.8、水解温度为50℃、水解时间30 min的条件下,碱性蛋白酶催化水解荞麦蛋白的动力学方程为h=1.218 2 ln(1+12.6([E]/[S]+0.58)t)     

Alcalase 2.4L催化牛骨胶原蛋白水解反应及其动力学研究

对碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解牛骨胶原蛋白的工艺以及动力学特征进行了研究.探讨底物浓度、酶量、温度、pH、时间等因素对胶原蛋白水解度的影响,研究确定了碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解牛骨胶原蛋白的最佳水解条件为:在pH8.5,60℃,底物浓度为80g/L,加酶量为40μL/g条件下水解3h,水解度可达13.5%,优于其他蛋白酶.根据所建立的pH-stal酶解体系确定了Km为1.6362mol/L,Vmax为0.3444mol/L·h,为更有效地利用胶原蛋白资源奠定了理论基础.     

枯草芽孢杆菌脱苦氨肽酶在水解大豆分离蛋白中的应用研究

研究了氨肽酶与碱性蛋白酶对大豆分离蛋白的有限水解作用,在单酶单因素水解条件的基础上,用正交实验优化两酶协同水解大豆分离蛋白的酶解条件,得出最佳水解条件为:温度50℃、pH8.5、两酶与底物浓度比均为10000U/g、底物浓度60g/L,水解时间4h,水解度达25.0%,水解液几乎不呈现苦味,且分子量低于1000的部分约占45%.     

谷氨酰胺(Gln)活性肽营养液的制备研究

50L的反应体积,采用复合酶A和碱性蛋白酶两次酶解玉米蛋白制备Gln活性肽,复合酶A的选用条件为pH8.5、底物浓度[S]2%、酶用量[E]9万U/100g玉米蛋白、温度40℃,水解度DH10;碱性蛋白酶的条件为pH8.5、[E]3万U/100g玉米蛋白、温度45℃,水解1h。酶解液通过超滤(COMW5000)、反渗浓缩(10kg/cm2,常温2h),最后产品中的有效Gln组成(有效Gln占总氨基酸的百分率)为17.9%,总氮得率33.3%。     

鹰嘴豆蛋白酶解动力学研究

从酶解反应机理出发,应用数学推导的方法,以鹰嘴豆蛋白为原料,考察底物浓度、酶浓度对鹰嘴豆蛋白水解度（DH）的影 响,将水解试验结果用推导的动力学模型方程进行拟合,建立酶解动力学模型。 结果表明：鹰嘴豆蛋白水解度随着初始底物浓度（S0） 的上升而下降,随着初始蛋白酶浓度（E0）的增加而上升,碱性蛋白酶水解鹰嘴豆蛋白的速率动力学模型：R=(39.522E0-0.080 4S0)exp [-0.148(DH)],水解度-水解时间的动力学模型：DH=6.76ln[1+(5.85E0/S0-0.011 9)t],酶解反应速率常数k2为39.522 min-1,酶失活常数为 6.371 min-1,该动力学模型对试验结果有很好的拟合度,对实际酶解过程具有一定的指导作用。     

响应面法优化松仁蛋白酶解工艺条件

在pH、酶与底物比、温度和酶解时间4个单因素实验的基础上,利用响应面分析法对松仁蛋白最佳酶解条件进行了研究.结果表明,Alealase2.4L碱性蛋白酶水解松仁蛋白的最佳水解条件为pH8.0,水解温度53%,酶与底物比8800U/g蛋白,底物浓度1.2%,水解时间50min.     

基于超声预处理的脱脂玉米胚芽ACE抑制肽的制备

为了研究超声辅助酶解制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的较优工艺,通过三种超声设备对脱脂玉米胚芽预处理,碱性蛋白酶酶解,酶解液体外模拟胃肠消化,以消化液ACE抑制率和酶解过程中玉米胚芽水解度(DH)为指标对超声预处理和酶解的参数进行单因素逐级优化。实验结果表明,最佳超声工作模式为20~40 kHz聚能式逆流双频交替超声模式;超声工作参数为功率密度120 W/L,超声预处理时间15 min,初始温度30℃,物料浓度5%;酶解条件为加酶量3000 U/g,酶解时间30 min,pH9.0,酶解温度50℃。在此条件下,酶解液的IC₅₀为4.166 mg/mL,比对照组降低了5.08%;胃肠消化液的IC₅₀为3.986 mg/mL,比对照降低了4.44%。制备的酶解产物,经模拟胃肠消化后具有较强的ACE抑制活性。优化获得的制备脱脂玉米胚芽ACE抑制肽的工艺是可行的。     

α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质研究

利用大肠杆菌（Escherichia coli）表达系统,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导,成功异源表达了一株链球菌（Streptococcus）S1的α-半乳糖苷酶基因,重组α-半乳糖苷酶经镍柱纯化后,测定其酶学性质。重组α-半乳糖苷酶最适pH值为6.5,最适温度为50 ℃,在碱性环境中（pH 7.5～10.0）及在40 ℃以下温度条件下该酶较为稳定;酶催化动力学结果显示,该酶在最适条件下水解硝基苯-α-D-半乳糖苷（pNPG）的最大水解速率（Vmax）为508.38 μmol/（min·mg）,米氏常数（Km）值为1.2 mmol/L;通过薄层层析（TLC）法检测到该重组α-半乳糖苷酶可以高效地水解天然底物蜜二糖、棉籽糖和水苏糖中的α-半乳糖苷键。     

Protex-6L碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白的工艺研究

选用Protex-6L蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解生成肽和氨基酸。以水解度为考察指标,对其酶解工艺进行优化。基于单因素实验,考察了酶解参数:pH、酶解温度、底物浓度、加酶量、酶解时间等对酶解的影响,利用designexpert软件设计响应面对酶解条件进行优化分析,并在最优条件下通过SephadexG-75分析水解产物的分子量分布。结果表明:pH8.85、酶解温度57.34℃、底物质量分数7.00%、加酶量6884.36U/g、酶解时间4.19h,此条件下的绿豆分离蛋白的水解度(DH)为36.60%。水解得到的小肽分子量大部分都小于4000u。     

罗非鱼头中硫酸软骨素提取的工艺优化

目的：为罗非鱼头生产硫酸软骨素提供技术参考。方法：以罗非鱼头为原料,采用稀碱-酶解工艺,以产率和纯度为考察指标,研究了碱提取和蛋白酶水解的最佳工艺条件。结果：碱提取时碱浓度1%、时间7h、温度50℃、料液比1:5(m/V);酶解时pH7.0、加酶量1.5%、温度50℃、时间3h时有最高的产率、纯度及总得率。结论：在该条件下,产率为3.583%,纯度为81.28%,总得率为2.913%。     

[鱼回]鱼骨胶原多肽的制备工艺研究

鱼骨中胶原蛋白含量丰富,本研究采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶对鲴鱼骨进行分步酶解制备骨胶原多肽。通过单因素和正交优化实验,确定碱性蛋白酶水解鲴鱼骨胶原蛋白的最佳工艺条件为：料液比（w／v）4：50,酶解温度45％,加酶量4％,pH值8,酶解时间3h,在此条件下,水解度达到39．49％。风味蛋白酶分步酶解的最佳工艺条件为酶解温度50％,加酶量4％,pH值7．5,酶解时间3h,在此条件下,水解度达到47．2％,水解产物的风味在一定程度上也得到了改善。     

响应面法优化超声协同复合酶分步提取恰玛古多糖工艺

以恰玛古多糖得率为指标,在超声提取及复合酶酶解单因素实验基础上,采用响应面法探究超声协同复合酶分步提取恰玛古多糖的最佳工艺条件。结果表明,超声协同复合酶分步提取恰玛古多糖的最佳提取工艺为:液料比33:1 mL/g,超声温度62℃,超声功率250 W,超声提取43 min后加入2.5%的复合酶(纤维素酶:木瓜蛋白酶:果胶酶=1:1:1,质量比),酶解pH5.4,酶解温度50℃,酶解时间52 min,在此条件下,恰玛古多糖得率为12.62%±0.18%。超声协同复合酶提取恰玛古多糖的得率较高,且工艺简便易行,适用于恰玛古多糖的提取。     

柑橘生物酶法脱囊衣技术研究

本实验进行了生物酶法脱除柑橘囊衣的优化工艺条件研究。同时利用扫描电镜观察了酶解过程中囊衣结构变化。结果表明,复合酶制剂脱囊衣的优化酶解工艺为酶浓度0.35%(g/L)、变电频率40Hz、pH4.5、在40℃下酶解50min。柑橘生物酶法脱囊衣桔瓣呈现优良的外观,组织紧密和光泽好。     

响应面法优化微波辅助酶解合浦珠母贝蛋白工艺

研究微波对酶解合浦珠母贝蛋白的影响,以水游离氨态氮含量和抗氧化活性为指标,选择较好的作用酶,通过单因素试验确定料液比、加酶量（E/S）、微波温度、微波功率及时间和后续水浴时间等因素水平,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,响应面法优化酶解合浦珠母贝蛋白工艺条件。结果表明,微波辅助蛋白酶酶解合浦珠母贝蛋白工艺条件为微波温度58 ℃、微波功率300 W、微波时间17 min、加酶量5 000 U/g,后续在58 ℃条件下再水浴1.5 h。预测响应值为0.224 4,水解度达到26.15%,验证实验证明与响应优化模型预测值误差不大,二次多元拟合度较好。     

黄粉虫幼虫粉酶解及体外抗氧化性研究

主要研究了Alcalase蛋白酶水解脱脂黄粉虫幼虫粉的工艺,并对水解产物的体外抗氧化能力进行测定.在单因素基础上以还原力为指标设计正交试验得到水解最佳条件为:温度60℃,pH值8.5,加酶量150μL,反应时间100 min.抗氧化试验结果表明,脱脂黄粉虫幼虫粉水解液清除1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基的半抑制率(IC_(50))分别为0.45 mg/mL和4.1 mg/mL,分别是VC的IC_(50)值的112.5倍和19.5倍,还原能力是VC的1/100.将水解前后的脱脂黄粉虫幼虫粉溶液进行高效毛细管电泳(HPCE)测定,测定结果表明,经Alcalase蛋白酶水解后,溶液中可溶性组分增多.