产纤维素酶荷叶内生真菌的筛选与鉴定

利用次氯酸钠和乙醇消毒法对荷叶内生真菌进行分离。采用羧甲基纤维素钠培养基筛选产纤维素酶的菌株。结果得到2株产纤维素酶的荷叶内生真菌,分别命名为HY3和HY4。菌株HY3和HY4的内切葡聚糖酶酶活力分别为44.46 U/m L和28.23 U/m L、外切葡聚糖酶酶活力分别为5.80 U/m L和7.82 U/m L、滤纸酶活力分别为12.04 U/m L和13.52 U/m L。依据菌落形态和ITS序列分析鉴定HY3为Rhodosporidiobolus sp.,HY4为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。     

果胶酶生产及其在苹果汁澄清中的应用

对黑曲霉(Aspergillus niger)LLW-1菌株固态发酵生产酸性果胶酶的发酵培养基组成和发酵条件以及利用果胶酶澄清苹果汁的工艺条件进行了研究。固态发酵产酶条件为:250 mL三角瓶装10 g基料(豆饼∶麸皮=2.0 g∶8.0 g),(NH4)2SO420 g/kg,Tween-80 1.5 g/kg,玉米浆50 mL/kg,KH2PO43.0 g/kg,CaCl21.0 g/kg,MgSO4.7H2O 1.0 g/kg(均相对于基料),料水比1∶1.2,自然pH;31℃静置培养72 h,期间在为24 h翻曲1次,果胶酶活力达2 418 IU/g(干曲)。酸性果胶酶澄清苹果汁的工艺条件为:果汁自然pH值,果胶酶用量500IU/L(果汁),明胶添加量0.05 g/L(果汁),酶解温度和时间分别为45℃和1 h。     

棉织物的常压等离子体预处理/果胶酶精练

采用常压低温等离子体射流(APPJ)预处理结合碱性果胶酶对棉针织物进行精练,通过测试润湿时间、白度和强力,分析等离子体处理时间、喷嘴与织物距离(JTSD)、果胶酶处理时间、酶浓度等因素对果胶酶精练效果的影响,优化了APPJ预处理工艺(He/O2 20/0.2 L/min,40W,60 s,喷嘴与织物距离为2 mm)和无助剂果胶酶处理工艺(Bioprep 3000L 300 APSU/g织物,50℃,60 min,pH值8.0).经此工艺处理后,织物的润湿时间小于2s,强力保留率大于90％,达到传统碱精练处理效果.     

双水相萃取分离苹果皮中果胶酶的研究

以苹果皮作为提取果胶酶的原材料,采用PEG/Na2HPO4双水相系统对果胶酶进行萃取分离,研究了PEG1000浓度、Na2HPO4浓度、pH、NaCl浓度等因素对果胶酶分配系数的影响。结果表明:双水相体系质量组成为PEG1000 26%、Na2HPO417%、NaCl 0.004%,pH为4.0时,果胶酶的萃取效率较好,实验中分配系数最高可达为13.8954。     

海洋来源低温果胶酶产生菌筛选、鉴定与酶学性质研究

目的：从海洋底泥样品中筛选能低温降解果胶的新颖菌株,发掘具有潜在产业化价值的果胶酶。方法：以果胶为唯一碳源,利用透明圈法和3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)从大连渤海湾海泥中筛出一株高产果胶酶菌株。对其进行形态学、生理生化特征分析以及16S rDNA序列测定,BLAST同源基因比对后构建系统发育树,并进一步研究其酶学特性。结果：筛选高产果胶酶菌株命名为LY-1,通过16S rDNA序列分析并结合生理生化鉴定确定该菌株为橄榄灰链霉菌(Streptomyces olivogriseus)。菌株LY-1在25℃、180 r/min的条件下培养至24 h时,果胶酶的酶活力为30.56 U/mL。最适酶p H为8.0,最适酶温度为20℃。此外,该酶在60℃孵育2 h仍保持70%以上的酶活性,在pH7.0～9.0范围内稳定性良好,酶活性稳定维持在90%以上。金属离子Cu²⁺、Ba²⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、K⁺、Co²⁺促进该酶活性,Mn²⁺、Zn...     

果胶酶的固定化及其在造纸白水应用的研究

本文以壳聚糖为载体,以戊二醛为交联剂,将果胶酶溶液固定化在壳聚糖上,用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)检测固定化后果胶酶的酶活。实验结果表明2g壳聚糖固定化16m L果胶酶(浓度为0.1g/L)固定时间为3h时,固定化果胶酶的酶活达到最大。将固定化的果胶酶投入造纸白水上清液(DCS水样)中,在5h内,p H升高了11%,电导率升高了2.2%,化学耗氧量(COD)降低了36%,阳离子需求量(CD)降低了24%。通过前后的GC-MS图对比,发现胶体物质含量减少,胶体物质分解的产物含量增加。     

白地霉红枣果胶酶的分离纯化及酶学性质的研究

为了得到专用于红枣浓缩汁的果胶酶制剂,通过硫酸铵盐析、Sephadex G-75凝胶过滤层析、DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析技术对白地霉发酵产得果胶酶粗酶液分离纯化,得到电泳纯的果胶酶,并研究了其相关的酶学性质。结果表明:发酵上清液经三步分离纯化后比活力达到8036.34 U/mg,纯化倍数为3.12,回收率37.22%,SDS-PAGE电泳检测分子质量为59.62 ku。最适的作用温度为50℃,p H为6。在低于50℃保温2 h酶活剩余80%以上,60℃保温1 h酶活损失60%;p H稳定范围较窄,在p H(5~7)范围内稳定性较好。Ca~(2+)、Mg~(2+)、K~+对果胶酶有激活效应,尤以Ca~(2+)(180.29%)最为突出,Mn~(2+)、Ag~+、Fe~(3+)对果胶酶有抑制作用,其中Ag~+(44.52%)抑制效果显著。通过Lineweave-Burk作图法得到K_m=8.75 mg/m L,V_(max)=60.24μg/min·m L,表明果胶酶对底物具有较强的亲和力。     

响应面法优化黑曲霉SH312-26-19产果胶酶发酵条件

在单因素试验的基础上,运用响应面法优化黑曲霉SH312-26-19产果胶酶的发酵条件,并与市售果胶酶进行产甲醇含量的对比试验。结果表明,黑曲霉最适发酵条件为培养基中麸皮添加量11 g,发酵时间4 d,发酵温度30 ℃。在此优化条件下,该黑曲霉产果胶酶活力达到（2 518.69±19.34） U/mL。该果胶酶在酶促反应体系中甲醇的生成量分别比市售果胶酶1和市售果胶酶2低17.9%和12.8%,显著低于市售果胶酶（P＜0.05）。     

响应面法优化囊酵母XHV25产果胶酶发酵培养基的研究

试验采用响应面法对囊酵母(Zygoascus sp.)XHV25液体发酵产果胶酶的培养基组分进行优化。在前期运用单因素试验优化的基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出培养基组分中影响果胶酶活力的2个显著性因素:橙子皮粉和K_2HPO_4·3H_2O。运用单因素试验研究PB试验设计筛选出的不显著因素的最低添加量来降低生产成本;运用最陡爬坡试验研究PB试验设计筛选出的显著因素以找到中心复合试验的中心点。利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。最终得到的预测最佳培养基组分为:橙子皮粉31.2 g/L、蛋白胨1 g/L、牛肉膏3 g/L、K_2HPO_4·3H_2O 0.094 g/L、KH_2PO_4 0.5 g/L、CaCl_2 0.5 g/L,在此预测最佳培养基组分下得到的果胶酶活力为28.97 U/mL。在预测最优培养基组合下进行发酵验证性试验,得到果胶酶活力的平均值为29.02 U/mL。实测值与预测值吻合良好,由此可见该模型可较好地预测发酵后的果胶酶活力。     

果胶酶在苹果酒生产中的应用

将果胶酶应用于苹果酒生产的榨汁工艺 ,通过正交实验优化了果胶酶处理果汁的工艺条件 ,其最佳工艺条件为 :pH4 2 ,温度 5 0℃ ,果胶酶用量 2 5 0mg/L果汁 ,作用时间 1h。结果表明 :应用果胶酶可提高出汁率 2 0 % ,澄清度可达到 90 %以上。     

一株马克斯克鲁维酵母菌的生长及酒精发酵特性分析

该文对一株耐高温的马克斯克鲁维酵母菌株HY32的生长及酒精发酵特性进行了研究.与耐高温酿酒活性干酵母TRADY相比,菌株HY32表现出了极好的耐热能力和较好的耐酒精能力.在37℃、42℃、45℃摇瓶培养10h后,菌株HY32的活菌数分别为2.45× 108个/mL、1.76× 108个/mL和0.92× 108个/mL.将菌株TRADY和HY32按相同的接种量转接到添加了4％vol乙醇的液体培养基中,37℃摇瓶培养6h后,菌株HY32的OD600值是菌株TRADY的1.6倍.随着温度的升高和培养基中乙醇浓度的增加,菌株HY32较TRADY的相对耐酒精能力更好.菌株HY32在高温下仍具有一定的产酒能力.采用葡萄糖酒精发酵培养基进行酒精发酵,菌株HY32在42℃和45℃时发酵72h,酒精产率分别为5.25％vol和4.02％vol.木薯酒精发酵实验结果分析表明,菌株HY32的乙酸乙酯产量是酿酒酵母TRADY的10倍左右,而正丙醇和乳酸乙酯等含量较低.     

Effects of Lactobacillus fermentum HY01 on the quality characteristics and storage stability of yak yogurt

Lactobacillus fermentum HY01 is a probiotic strain screened from traditional yak yogurt, which can effectively relieve enteritis and constipation. This study aimed to evaluate the effects of HY01 as an adjunct starter on the quality and storage of yak yogurt. A total of 36 main volatile flavor substances were detected in all samples. In particular, more aldehydes, esters, and alcohols were detected in yak yogurt prepared by mixed fermentation of L. fermentum HY01 and starter MY105 (including Streptococcus thermophilus and Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus). The rheological results showed that the yak yogurt prepared by mixed fermentation of L. fermentum HY01 and starter MY105 had higher apparent viscosity and lower tan δ value compared with compared with traditional yak yogurt, yak yogurt with only L. fermentum HY01, and cow yogurt with L. fermentum HY01 and starter MY105. Meanwhile, the conjugated linoleic acid in the yak yogurt prepared by mixed fermentation of L. fermentum HY01 and starter was significantly higher than those in the HY01 group or the yogurt starter group alone. After 28 d of storage at 4°C, the number of HY01 in the yak yogurt prepared by mixed fermentation of L. fermentum HY01 and starter was still higher than 10⁷ cfu/mL, its acidity was lower than 110°T, and its syneresis was the lowest. The results indicated that L. fermentum HY01 could improve the flavor, texture, and storage properties of yak yogurt.     

高产核酸的热带假丝酵母诱变选育及其发酵条件优化

以热带假丝酵母（Candida tropicalis）HY4-17为出发菌株,采用电子束辐射技术诱变,经过初筛、复筛及遗传稳定性试验选育核酸高产菌株,通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及响应面法优化培养基,并优化接种量和发酵时间以提高核酸产量。结果表明,获得一株生长快速,遗传稳定的突变菌株EBI-21,其核酸含量较出发菌株HY4-17提高了25%。最佳培养基组成为：糖蜜185 g/L,硫酸铵3 g/L,硫酸锌0.05 g/L,硫酸镁0.5 g/L,硫酸亚铁0.05 g/L,磷酸1 mL/L,pH值为4.5。在优化培养基及接种量8%,发酵时间12 h条件下,核酸产量达到1.73 g/L,较未优化前提高了80.21%,培养时间缩短了10 h。     

含发酵乳杆菌HY01牦牛酸奶工艺优化及主体风味成分动态解析

利用具有益生性能的发酵乳杆菌HY01生产牦牛酸奶,首先通过单因素试验、响应面试验优化益生菌发酵条件,观察贮藏期间产品的品质变化,并且利用电子鼻解析不同后熟时间牦牛酸奶的香气成分变化。结果表明：发酵乳杆菌HY01生产牦牛酸奶的优化工艺条件为接种量4%、40 ℃发酵6 h时感官评分89.72 分,益生菌数8.90×108 CFU/mL。在28 d贮藏期内牦牛酸奶益生菌数高于107 CFU/mL,酸度低于118 °T。贮藏0～14 d时4 项质构指标（黏性、硬度、稠度、黏聚性）、双乙酰和乙醛含量、感官评分基本保持不变,14 d后下降。此外,电子鼻传感器对香气响应值的主成分分析表明,牦牛酸奶特征香气由氮氧化物、甲基类、硫化物和醇类组成,与市售鲜牛乳制备酸奶的香气含量区别显著。可见,含发酵乳杆菌HY01的牦牛酸奶不仅具有良好的性能及风味,而且有望对肠道健康起到有益作用。     

产β-环糊精葡萄糖基转移酶高温菌株HY15发酵条件优化

以一株产β-环糊精葡萄糖基转移酶（β-CGTase）的嗜热菌株HY15为研究对象,采用单因素试验研究碳源、氮源、初始pH值、培养温度、MgSO4·7H2O等对酶活力影响。并设计正交试验优化其发酵条件。结果表明最优的发酵条件为：碳源为玉米淀粉+糖蜜,氮源为玉米浆,初始pH7.0,培养温度60℃、摇床转速220r/min,MgSO4浓度10mmol/L,在此条件下,β-CGTase酶活力可达1794.3U/mL。     

一株海洋拮抗菌的筛选与鉴定

通过平板分离、摇瓶发酵,从样品中分离到1株对枯草芽孢杆菌、藤黄八叠球菌、大肠杆菌等指示菌具有较强拮抗作用的菌株HY4,通过菌落形态、镜检、生理生化试验和对菌株16S rRNA基因序列遗传分析对菌株进行鉴定,发现该菌株跟芽孢杆菌属（Bacillus）的多数菌株序列有99%的相似性,将该菌株命名为芽孢杆菌HY4。当培养时间为48 h时,菌株的生物量达到最大值,OD600nm为2.49,此时菌株对枯草芽孢杆菌和藤黄八叠球菌的抑菌活性也达到最高,透明圈直径分别为1.38 cm和1.13 cm,当培养至60 h时,菌株对大肠杆菌的抑菌活性也达到最大,透明圈直径为1.13 cm,之后随着培养时间的延长,抑菌活性反而逐渐降低。     

活性污泥中1株产PHB丝状细菌的分离与鉴定

从污水处理厂等活性污泥样品中分离到了19株丝状细菌,通过苏丹黑染色法和紫外吸收光谱扫描技术证明这些丝状细菌能够在菌体内积累聚β-羟基丁酸(PHB)。采用氯仿乙醇法提取PHB,并采用紫外吸收法进行定量测定,筛选出1株高产PHB丝状细菌HY10,细胞PHB含量为(37.24±0.74)%,PHB产量为1.15±0.06 g/L。综合该菌株的菌落形态和16S rDNA序列(GenBank No.JQ353768)分析结果将HY10菌株鉴定为假蕈状芽孢杆菌(Bacillus pseudomycoides)。     

Identification of active compounds from Aurantii Immatri Pericarpium attenuating brain injury in a rat model of ischemia–reperfusion

Ischemic stroke is caused by brain injury due to prolonged ischemia by occlusion of cerebral arteries. In this study, we isolated active compounds from an ethanol extract of Aurantii Immatri Pericarpium (HY5356). We first showed by DNA fragmentation assay that HY5356 improved human hepatocellular carcinoma cells (HepG2) under hypoxic conditions by inhibiting apoptosis. When HY5356 was fractionated with dichloromethane (MC), ethyl acetate (EA) and n-butanol (BU), the MC fraction improved cell viability at the lowest concentration (100 μg/ml). Intraperitoneal injection of HY5356 (200 mg/kg) or the MC fraction (200 mg/kg) to rats prior to occlusion attenuated brain injury significantly in a rat model of ischemia–reperfusion. Adopting cell viability under hypoxic conditions as an activity screening system, we isolated nobiletin and tangeretin as active compounds. The results suggest that intake of Aurantii Immatri Pericarpium containing nobiletin and tangeretin as active compounds might be beneficial for preventing ischemic stroke.     

Pichia kudriavzevii is the major yeast involved in film-formation,off-odor production,and texture-softening in over-ripened Kimchi

Yeasts were isolated from over-ripened kimchi and identified. Isolates were identified as Pichia kudriavzevii, Kazachstania servazii, Kazachstania exigua, Kazachstania bulderi, and Rhodotorula mucilaginosa. Among the isolates, P. kudriavzevii GY1 and K. bulderi HY2 were separately inoculated into kimchi and incubated at 10°C for 21 days. After incubation, HY2 kimchi showed less offodors, whereas GY1 kimchi showed strong off- and moldyodors in the sensory evaluation. P. kudriavzevii GY1 showed significantly higher polygalacturonase activity than K. bulderi HY2. Volatile compounds in kimchi samples were analyzed by HSPM-GC. Peak areas of obnoxiousodor compounds, including methanethiol, were 6.61, 9.46, and 20.87% for control kimchi, HY2 kimchi, and GY1 kimchi, respectively. Therefore, P. kudriavzevii was mainly responsible for kimchi spoilage, including off-odors and texture softening. Moreover, K. bulderi was associated with kimchi deterioration at cell counts up to 8.0–9.0 log CFU/mL, even though its effects were not as strong as those of P. kudriavzevii.     

基于454方法分析曲霉型豆豉发酵中细菌群落多样性

采用454高通量焦磷酸测序技术测定了曲霉型豆豉发酵周期8个不同阶段样品细菌多样性变化,研究不同阶段细菌群落变化及多样性。结果表明:细菌在门、纲两个水平各个不同样品主要微生物类别相似度很高,总共厚壁薄门、变形菌门、放线菌门三者占90%以上,但目、科、属水平差别较大,样品均一性最好的样品为HY04,有31个主要属,魏斯氏菌属、芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳球菌属、肠球菌属、假单胞菌在发酵不同阶段出现,丰度差异较大。证明曲霉型豆豉发酵过程中微生物群落结构复杂,主要菌群相对稳定。