慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞计数变化及其临床意义

目的观察慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞数量的变化。方法在56例乙型肝炎肝衰竭、49例HBeAg阳性慢性乙型肝炎和41例乙型肝炎病毒携带者使用流式细胞仪检测外周血CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞和NK(CD3-CD16+CD56+)细胞占淋巴细胞的比率(%)。结果肝衰竭患者CD3+T细胞和CD3-CD16+CD56+NK细胞计数比慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎病毒携带者显著性降低(P0.05);慢性乙型肝炎患者CD3-CD16+CD56+NK细胞计数比乙型肝炎病毒携带者显著性升高(P0.05)。结论乙型肝炎肝衰竭患者外周血T细胞和NK细胞数量减少,而HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血T细胞数量增多。     

HBV相关原发性肝癌患者外周血T、NK、B细胞及胸腺功能特征

目的:观察乙型肝炎相关原发性肝癌患者(hepatitis B virus-related primary liver cancer,H B V-P L C)发生和进展过程中外周血T、N K、B细胞数量的变化,并初步探讨T淋巴细胞减少与胸腺功能的联系.方法:收集在首都医科大学附属北京地坛医院住院的73例HBV-PLC患者,50例乙型肝炎肝硬化患者(liver cirrhosis,LC),37例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者.收集3组患者一般资料和临床生化指标.采用流式方法检测3组患者外周血中CD3~+T淋巴细胞、CD4~+T、CD8~+T、CD3-CD16~+CD56~+NK、CD3-CD19~+B的分布情况,并检测了T淋巴细胞表面CD31、CD45RA分子的表达水平.结果:与CHB和LC患者相比,HBV-PLC患者外周血中性粒细胞升高,淋巴细胞减少(P0.001);与CHB患者相比,HBV-PLC患者外周血NK细胞计数减少(P=0.011),T淋巴细胞、CD4~+T、C D8~+T、B细胞计数减少,纯真CD4~+和CD8~+T细胞表面CD31表达降低(P0.001).在肝癌Child、Okuda、BCLC分期中晚期比早期淋巴细胞计数、T、CD4~+T、CD8~+T计数均降低(P0.05).结论:随着肝癌的发生和进展,HBV-PLC患者外周血抗肿瘤免疫细胞减少,这种减少与胸腺迁出功能降低有关.     

急性和慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的动态变化

目的：观察急性和慢性乙型肝炎患者急性期和恢复期外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化。方法在40例急性乙型肝炎和40例慢性乙型肝炎患者,分别在急性期和恢复期检测CD3＋CD4＋T细胞、CD3＋CD8＋T细胞和NK（CD3-CD16＋CD56＋）细胞占淋巴细胞的比率（%）。结果在急性乙型肝炎急性期NK细胞计数为（15.7±7.5）%,而在恢复期则上升至（21.9±8.2）%,（P＜0.05）;急性乙型肝炎患者在急性期CD3＋CD4＋T细胞为（35.5±6.8）%,到恢复期则显著下降（33.6±7.0）%,（P＜0.05）;急性乙型肝炎在急性期CD3＋CD8＋T细胞为（35.6±7.6）%,而在恢复期则显著下降（30.0±7.5）%,（P＜0.05）,后者仍比慢性乙型肝炎患者在病情恢复期高（19.1±7.1）%,（P＜0.05）。结论在急性乙型肝炎病程中,NK细胞呈上升趋势,CD3＋CD8＋T细胞呈下降趋势,而在慢性乙型肝炎患者NK细胞及T淋巴细胞数量下降,致病情迁延不愈。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群与病程相关性的研究

目的对慢性乙型肝炎轻中度、重度和肝硬化患者外周血淋巴细胞亚群的百分比和绝对细胞数进行观察,探讨慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的变化与病程的关系.方法采集88例慢性乙型肝炎患者柠檬酸钠新鲜抗凝血,经流式细胞仪进行免疫分型检测.结果慢性乙型肝炎重度患者的CD3+CD4+细胞百分比显著低于轻中度患者(P＜0.05),肝硬化患者的CD3+和CD3+CD8+细胞百分比显著低于轻中度患者(P＜0.01).肝硬化患者CD3CD19+细胞百分比显著高于重度和轻中度患者(P＜0.01).CD4/CD8比例在慢性乙型肝炎轻中度、重度和肝硬化患者间无显著差异.肝硬化和重度患者淋巴细胞、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞的绝对细胞数均显著低于轻中度患者(P＜0.01),且肝硬化患者CD3-CD16+56+细胞的绝对细胞数显著低于轻中度患者(P＜0.05).肝硬化患者与轻中度患者的DNA载量分布差异有显著性(P＜0.01),其高水平病毒载量的患者比例高于轻中度患者.结论慢性乙型肝炎轻中度发展为重度和肝硬化的过程中,外周血淋巴细胞亚群绝对细胞数随病情的进展显著减少,主要表现为CD3+CD4+和CD3+CD8+的T淋巴细胞亚群的百分比进行性降低.     

老年原发性高血压患者外周血淋巴细胞亚群及活化状态的研究

目的：探讨老年原发性高血压患者外周血淋巴细胞亚群活化状态变化。方法采用流式细胞术检测65岁以上老年原发性高血压患者（观察组）170例和体检健康者（对照组）50例外周血淋巴细胞亚群以及活化状态。结果观察组B淋巴细胞表达的 CD3-CD19＋高于对照组,T 淋巴细胞活化表达的 CD3＋CD8＋CD38＋高于对照组,CD3＋HLA- DR＋, CD3＋CD8＋HLA- DR＋以及NK细胞表达的CD16＋CD56＋高于对照组（均P＜0.05）。T淋巴细胞表达的CD3＋低于对照组（均P＜0.05）。T细胞亚群表达的CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋比例下降,调节性T细胞CD3＋CD4＋CD25＋比例上升,但与对照组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论老年原发性高血压患者B淋巴细胞、NK淋巴细胞和CD8＋T细胞的活化能力显著增加。     

T细胞、NKT和NK细胞在结核病诊断中的意义探讨

目的探讨CD3+T细胞、CD3+CD16+CD56+N KT细胞及CD3-CD16+CD56+N K细胞在肺结核患者外周血的表达状态及其临床意义。方法采用流式细胞仪分析123例肺结核患者(73例初治肺结核和50例复治肺结核)及83例健康者(43例结核菌素皮试阳性和40例结核菌素皮试阴性)外周血中T细胞、NKT和NK细胞的表达率。结果初、复治肺结核患者的NKT细胞表达率明显高于健康者(P0.01),但初治肺结核患者的NK细胞、T细胞的表达率与健康者相比差异无统计学意义(P0.05)。T细胞表达率在不同程度的初治肺结核患者中差异有统计学意义(P0.01),疾病越重,表达越高。NKT、NK细胞差异无统计学意义(P0.05)。复治肺结核患者的T细胞表达率显著高于初治肺结核患者(P0.01),但NK细胞、NKT细胞的表达率在2组间差异无统计学意义(P0.05)。结论T细胞、NKT细胞是结核病细胞免疫的重要组成部分。对NKT细胞只在活动性肺结核患者才会呈现高表达,测定外周血NKT细胞可能成为辅助诊断活动性肺结核的手段之一。     

外周血淋巴细胞亚群在慢性HBV感染过程中表达的变化分析

目的探讨HBV感染患者外周血淋巴细胞亚群在疾病进展过程中的表达变化。方法选取2018年1月-2019年4月在天津市第二人民医院住院的慢性HBV感染患者共132例,其中慢性乙型肝炎患者47例,乙型肝炎肝硬化患者44例,乙型肝炎肝硬化相关原发性肝癌患者41例。另选取同期健康体检者42例作为对照组。采用流式细胞术检测4组外周血淋巴细胞亚群精准计数,比较4组外周血淋巴细胞亚群的表达水平。正态分布的计量资料,组间方差不齐采用Welch方差分析,两两比较采用GamesHowell检验。非正态分布的计量资料多组间及进一步两两比较采用Kruskal-Wallis H检验。计数资料组间比较采用χ2检验。相关性分析采用Spearman检验。结果与对照组和慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组相比,肝癌组CD8^+T淋巴细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);与慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD8^+T淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组和慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD19^+B淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组相比,肝硬化组和肝癌组CD16^+CD56^+NK细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05);与慢性乙型肝炎组比较,肝癌组CD16^+CD56^+NK细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。4组疾病进展与外周血CD3^+T淋巴细胞、CD4^+T淋巴细胞、CD8^+T淋巴细胞、CD19^+B淋巴细胞、CD16^+CD56^+NK细胞呈明显负相关(r值分别为-0.414、-0.503、-0.269、-0.435、-0.402,P值均<0.01)。结论随着疾病的进展,慢性HBV感染患者免疫状态发生变化。外周血淋巴细胞亚群精准计数能够反应机体的免疫状态,可作为慢性HBV感染临床病情演变、治疗效果及疾病预后的参考依据。     

不同病程的慢性乙型肝炎病毒感染者外周血中调节性T细胞和自然杀伤细胞的表达及相关性

目的:观察乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)慢性感染者外周血中调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)和自然杀伤(natural killer,NK)细胞的表达及相关性.方法:选取HBV慢性感染患者共96例,其中慢性乙型肝炎患者42例,乙型肝炎肝硬化患者30例,HBV携带者24例,抽取外周血用流式细胞分析技术检测其Tregs和NK细胞的表达情况.同时选取健康者21例作为对照组.结果:HBV慢性感染者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs占CD4+T细胞的比例整体高于健康对照组,其中乙型肝炎肝硬化患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs占CD4+T细胞的比例最高,其次为慢性乙型肝炎患者,最后为HBV携带者和健康对照组.相反,NK细胞占淋巴细胞的比例在HBV慢性感染者外周血中整体较健康对照组低,其中乙型肝炎肝硬化组表达最低,其次为慢性乙型肝炎组,最后为HBV携带者,但都低于健康对照组.进一步分析显示NK细胞的表达与Tregs呈负相关性(r=-0.3280,P0.05).结论:不同阶段的HBV慢性感染患者外周血中Tregs和NK细胞表达不同,且两者呈明显的负相关性.     

食管癌患者NK细胞和T淋巴细胞免疫功能的检测及临床意义

目的分析食管癌患者NK细胞和T淋巴细胞免疫功能的检测及临床意义。方法以87例食管癌患者为观察组,以80例健康者为对照组。分别对两组对象的外周血NK细胞(CD56)和T淋巴细胞(CD3、CD4、CD8)的水平进行检测。结果观察组患者外周血CD56、CD8水平均高于对照组(P0.05);CD3、CD4水平均低于对照组(P0.05)。观察组患者不同肿瘤分期中,CD56、CD8水平呈递增趋势,即Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期(P0.05);在CD3、CD4水平呈递减趋势,即Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期(P0.05);有淋巴结转移组和无淋巴结转移组患者的NK细胞和T淋巴细胞指标值比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论食管癌患者存在细胞免疫功能下降,且下降趋势与肿瘤病情进程密切相关。     

乙型肝炎肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的变化及临床意义

目的：探讨乙肝肝硬化患者外周血中T淋巴细胞亚群及NK细胞含量的变化,了解乙肝肝硬化患者的免疫功能状况。方法乙肝肝硬化患者81例,并按Child-Pugh分为A、B、C三级,26例健康者作为健康对照,采用流式细胞仪检测血清中CD3＋ T淋巴细胞、CD4^＋ T淋巴细胞、CD8^＋ T淋巴细胞和NK细胞的含量。结果 Child-Pugh B级和C级的乙肝肝硬化患者外周血中CD3^＋ T淋巴细胞、CD4^＋ T淋巴细胞和NK 细胞的含量明显降低,而CD8^＋ T淋巴细胞含量升高,与健康对照组比较,差异有统计学意义（P＜0．05）,而Child-Pugh A级的乙肝肝硬化患者T淋巴细胞亚群变化不明显（P＞0．05）。结论乙肝肝硬化患者的机体免疫功能低下,并且随着其肝功能下降及Child-Pugh 分级的增加而显著,对判断乙肝肝硬化患者的病情及预后具有重要的临床价值。     

中国乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群频率参考值范围

目的 调查中国乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群频率参考值范围.方法 利用流式细胞术检测2846例乙型肝炎患者和117例健康人群外周血淋巴细胞亚群数值,调查我国健康人群和乙型肝炎人群的参考值范围.结果 调查了16～60岁健康人群和HBV感染相关的急性肝炎、慢性肝炎、重型肝炎和肝硬化人群外周血CD3+T淋巴细胞、CD3+CD...     

The Correlation between NK Cell and Liver Function in Patients with Primary Hepatocellular Carcinoma

Background/Aims

This study aimed to detect the expression of natural killer (NK) cell receptor natural killer group 2D (NKG2D) in the peripheral blood of patients with primary hepatocellular carcinoma and to discuss the correlation between NK cell cytotoxicity and liver function.

Methods

The number of NK cells and the expression of NK cell receptor NKG2D in peripheral blood were determined by flow cytometry in patients with primary hepatocellular carcinoma, hepatitis B cirrhosis, chronic hepatitis B, and healthy controls.

Results

When compared with patients in the healthy and the chronic hepatitis B groups, the primary hepatocellular carcinoma group showed significant decreases in all parameters, including the cytotoxicity of NK cells on K562 cells, expression rate of NKG2D in NK cells, number of NKG2D⁺ NK cells, expression level of NKG2D, and number of NK cells (p<0.05). The activity of NK cells showed a positive correlation, whereas the Child-Pugh scores in the primary hepatocellular carcinoma and the hepatitis B cirrhosis groups showed a negative correlation with all parameters detected above.

Conclusions

The decrease of NK cell activity in patients with primary hepatocellular carcinoma is closely related to their lower expression of NKG2D. Liver function affects the expression of NKG2D and the activity of NK cells.     

不同阶段慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中NF-κB/iNOS的表达及免疫状态

目的研究核因子-κB(NF-κB)/诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在不同阶段慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,比较各阶段自然杀伤细胞及T、B淋巴细胞的变化情况。方法纳入福建医科大学附属南平第一医院2017年10月-2019年1月慢性乙型肝炎相关疾病患者,按照疾病不同阶段分4组:肝炎组、肝衰竭组、肝硬化组、肝癌组,每组各20例;另选取10例健康志愿者作为对照组。采用流式细胞仪检测5组外周血总淋巴细胞计数和淋巴细胞亚群计数;采用Western Blot检测PBMC中NF-κB、iNOS蛋白的表达水平;硝酸还原酶法和ELISA法检测血清中NO、IL-6水平。多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组比较,肝炎组、肝衰竭组、肝癌组、肝硬化组总淋巴细胞计数水平均明显下降(P值均<0.05);与肝炎组比较,肝衰竭组、肝癌组、肝硬化组总淋巴细胞计数水平均明显下降(P值均<0.05)。肝衰竭组、肝癌组、肝硬化组CD3+明显下降,分别与对照组、肝炎组比较差异均有统计学意义(P值均<0.05);肝衰竭组、肝癌组、肝硬化组与肝炎组CD4+比较明显下降(P<0.05);肝衰竭组与肝癌组、肝硬化组、对照组CD8+比较明显升高(P值均<0.05);肝衰竭组较对照组、肝炎组、肝硬化组、肝癌组CD4+/CD8+明显降低(P值均<0.05);肝衰竭组、肝硬化组CD3-CD19+明显升高,分别与肝炎组、对照组比较差异均有统计学意义(P值均<0.05);肝衰竭组、肝癌组CD16+CD56+明显下降,分别与肝炎组、对照组比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。肝硬化组、肝衰竭组、肝癌组NF-κB、iNOS蛋白表达水平均明显增高,分别与肝炎组、对照组比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组比较,肝衰竭组、肝癌组、肝硬化组和肝炎组的NO和IL-6水平均明显升高(P值均<0.05)。结论不同阶段HBV感染者免疫状态存在一定差异性,NF-κB-iNOS-NO可能参与HBV相关疾病的免疫反应。     

丙型肝炎病毒感染者外周血淋巴细胞亚群的变化及意义

目的调查丙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群变化及影响因素。方法利用流式细胞术检测241例丙型肝炎患者和117例健康人群外周血淋巴细胞亚群数值,通过回顾性分析,调查我国丙型肝炎人群淋巴细胞亚群变化及其相关的影响因素。结果在健康人群中,CD3＋CD4＋T细胞、CD3＋CD16＋CD56＋NKT细胞频率以及CD4/CD8比值与年龄呈显著正相关;而在慢性丙型肝炎人群中,CD3＋CD4＋T细胞与年龄呈显著正相关,CD3-CD19＋B细胞则与年龄呈显著负相关;在肝硬化人群中,只有CD3-CD16＋CD56＋NK细胞频率与年龄呈显著正相关;在15～49岁的健康人及慢性肝炎人群中,女性CD3＋CD4＋T细胞亚群频率高于男性,而在肝硬化患者中女性CD3-CD19＋B细胞频率低于男性;同时,在HCV感染的不同阶段,CD3-CD16＋CD56＋NK细胞亚群频率均较正常人显著降低,而CD3＋CD8＋T细胞频率则显著升高,在15岁以上人群,CD3-CD19＋B细胞在健康人、慢性肝炎、肝硬化人群中呈持续升高的现象。结论通过回顾性分析健康人群和HCV感染不同阶段人群淋巴细胞亚群的分布特点及其与HCV疾病进展、年龄、性别的关系,为临床科学评价丙型肝炎人群免疫状态提供重要的免疫指标。     

Peripheral blood T,B, and NK cells in relation to histological hepatitis activity and fibrosis stage in chronic hepatitis C

BACKGROUND/AIMS: Many data on the pathogenesis of chronic hepatitis C have pointed to host's immune system disorders and a high variety of virus. However, there are no known criteria that could prognose the course of chronic hepatitis C infection. The analysis of T and B lymphocyte subpopulations in the peripheral blood was undertaken in patients with chronic hepatitis C of more than 6 months of duration. METHODOLOGY: Fluorescein isothiocyanate or phycoerythryne conjugated monoclonal antibodies for CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, CD3++ HLA DR+, CD16++ CD56+ were used. The correlation between histological hepatitis activity and fibrosis (according Scheuer's scale) and the distribution of lymphocytes in the peripheral blood was sought. RESULTS: All patients with chronic hepatitis showed statistically significant increase in active lymphocytes CD3++ HLA DR+ and CD16++ CD56+ NK cells in peripheral blood. We observed the correlation between these cells and histological hepatitis activity and fibrosis. There was no correlation between the value of CD3+ and CD8+ cells and the stage of liver failure. In the early stage of chronic hepatitis C we noted decrease CD4+ cells with increase B cells CD19+. CD4+/CD8+ ratio was maintained as slightly decreased in chronic hepatitis C in favor of lymphocytes CD8+. CONCLUSIONS: The results show the correlation between peripheral blood value of activated T cell (HLA DR+) and NK cells with histological activity and fibrosis in chronic hepatitis C. Lymphocyte T (CD4+, CD8+) and B (CD19+) did not correlate with grade and stage of hepatitis C.     

Lymphocyte subpopulations in peripheral blood in primary sclerosing cholangitis

BACKGROUND/AIMS: Primary sclerosing cholangitis (PSC) is a chronic disease of autoimmunological etiology, leading to inflammation, destruction and atrophy of the bile ducts. The aim of the study was to determine peripheral lymphocyte B, T, and NK cells in PSC. METHODOLOGY: The estimation of peripheral blood lymphocytes in 17 patients (54+/-12 years old) with PSC was carried out; the control group consisted of 27 subjects (38+/-11 years). The following T lymphocyte subpopulations were determined using duo color flow cytometry: CD3+, CD4+, CD8+, CD3++HLA DR+, B cells CD19+, and NK cells CD16+ +CD56+. RESULTS: In PSC we observed doubled increase in activated T lymphocytes of CD3+ +HLA DR+ phenotype as compared to healthy subjects (7.9% vs. 2.7%, p<0.01) and NK cells (12.6% vs. 10.3%, respectively, p<0.05). There were no significant differences in the composition of CD3+, CD4+, and CD8+. In peripheral blood we noted, in patients with PSC, a decrease in B lymphocytes (11.2% vs. 12.3%, p<0.19). CONCLUSIONS: The examinations showed that activated T (HLA DR+) lymphocytes and NK cells played an important role in development of PSC.     

慢性丙型肝炎患者淋巴细胞亚群及其凋亡研究

目的 探讨ＨＣＶ感染诱导自身免疫反应的机理。方法 应用ＥＬＩＳＡ和流式细胞术检测了１８例慢性丙型肝炎患者及１６例正常人血清丙型肝炎病毒感染相关自身抗体（抗ＧＯＲ）及抗核抗体（ＡＮＡ）、外周血淋巴细胞（ＰＢＭＣ）亚群及其凋亡百分率。结果 慢性丙型肝炎患者血清抗ＧＯＲ抗体及ＡＮＡ阳性率分别为６６．７％和４４．４％,与正常对照组比较差异均有显著意义（Ｘ＾２＝２６．８６、Ｘ＾２＝９．３０,Ｐ〈０．００５）