黄芪甲苷通过SDF-1/CXCR4信号通路诱导人肾腺癌细胞的凋亡

目的:观察黄芪甲苷对人肾腺癌细胞ACHN增殖、凋亡的作用及其对SDF-1/CXCR4信号通路活化的影响。方法:采用20、60、120 μmol/L黄芪甲苷干预ACHN细胞后,CCK-8分析黄芪甲苷对细胞增殖抑制率的影响,流式细胞仪检测黄芪甲苷对细胞凋亡率的影响,Western Blot方法分析黄芪甲苷对细胞中凋亡相关蛋白Csapase-8、Bax、Bcl-2及SDF-1/CXCR4信号通路相关蛋白表达的影响。结果:黄芪甲苷干预ACHN细胞后,细胞增殖抑制率明显升高,表现出时间和剂量依赖性（P<0.05）;黄芪甲苷干预组ACHN细胞凋亡率也显著升高（P<0.05）;药物处理组中促凋亡蛋白Csapase-8、Bax表达显著升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2及SDF-1、CXCR4蛋白表达水平显著降低,表现出剂量依赖性（P<0.05）。结论:黄芪甲苷抑制人肾腺癌细胞株ACHN增殖、诱导其凋亡的作用机制可能与降低SDF-1/CXCR4信号通路活化相关。     

补阳还五汤联合依达拉奉对脑缺血后细胞凋亡及survivin和caspase-3表达的影响

目的: 探讨补阳还五汤和依达拉奉联用对脑缺血再灌注损伤的作用及缺血后细胞凋亡和凋亡相关因子survivin、caspase-3的影响,明确其可能的神经保护机制。方法: 改良线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。90只小鼠随机分5组：假手术组;模型组;补阳还五汤（BYHWD）组（10 mL/kg,ig）;依达拉奉（ED）组（3 mg/kg,iv）;补阳还五汤+依达拉奉（BYHWD+ED）组（BYHWD 10 mL/kg,ig + ED 3 mg/kg,iv）。1、3、7 d分别观察各组小鼠神经功能缺损评分。7 d后,用TUNEL法检测缺血周围神经细胞的凋亡情况;用Western blot检测小鼠大脑皮质缺血区存活素(survivin)蛋白、半胱氨酸蛋白酶(caspase 3)的定量表达。结果: 缺血再灌注后1、3、7 d,神经功能评分随着时间延长有减少趋势;同一时间点,模型组评分最高,联合用药组评分最低（P<0.01）。脑缺血再灌注7 d后,各组小鼠脑凋亡细胞指数增多（P<0.01）,survivin和caspase 3蛋白表达均有上调（P<0.01）。用药后,各药物组凋亡细胞指数减少,survivin蛋白表达有上调,而caspase 3蛋白表达有下调(P<0.01),以BYHWD+ED联合用药组较单药组改变更明显（P<0.05）。结论: 补阳还五汤与依达拉奉联用比单药使用可更有效地促进凋亡抑制基因survivin的表达和抑制凋亡诱导基因caspase 3的表达,从而抑制神经细胞凋亡,协同发挥脑保护作用。     

沉默YAP基因提高伊马替尼耐药的人髓性白血病细胞K562药物敏感性的研究

目的: 探究沉默YAP基因后,提高伊马替尼耐药的K562细胞（K562/IMA）对于伊马替尼敏感性的作用及相关机制,为伊马替尼耐药的人髓性白血病治疗提供参考。方法: 采用小干扰RNA技术（siRNA）转染YAP的siRNA-YAP沉默K562/IMA的YAP基因。设置对照组（Control）、siRNA阴性对照组（siRNA-NC）和YAP siRNA组（siRNA-YAP）。采用RT-qPCR和Western blot法鉴定沉默后各组细胞YAP蛋白和mRNA的表达水平。CCK-8法检测各组细胞对于伊马替尼的敏感性,并计算半数抑制浓度IC50。流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。Western blot法检测YAP、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3、caspase-3、细胞色素C（Cyto-C）的表达水平,Transwell小室检测细胞转移侵袭能力。结果: YAP基因沉默后,siRNA-YAP组细胞中YAP的蛋白和mRNA表达水平显著低于Control组和siRNA-NC组,沉默效果较好。siRNA-YAP的IC50值显著低于Control组和siRNA-NC组,具有统计学意义（P<0.05）,而流式细胞术结果显示,siRNA-YAP组细胞在相同药物剂量下,凋亡率显著高于Control组和siRNA-NC组,具有统计学意义（P<0.05）。YAP沉默的K562/IMA细胞迁移侵袭能力显著下降。伊马替尼干预后,siRNA-YAP细胞中Bcl-2/Bax的水平下调,cleaved-caspase-3、caspase-3和Cyto-C的水平上调,相比Control组和siRNA-NC组,具有统计学意义（P<0.05）。结论: 沉默伊马替尼耐药的K562/IMA细胞中YAP基因,可以恢复肿瘤细胞对于伊马替尼的敏感性,可以促进线粒体凋亡途径的激活,导致耐药肿瘤细胞的凋亡。     

右美托咪定对A549细胞缺氧/复氧损伤时JNK的影响

目的: 观察右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对缺氧/复氧所致的A549细胞损伤的干预作用以及对c-Jun氨基末端激酶(JNK)的影响。方法:培养A549细胞株,将细胞随机分为4组（n=10）：正常对照组（N组）,DEX组（D组）,缺氧/复氧损伤组（H组）,缺氧/复氧损伤+DEX干预组（HD组）。造模结束后,在倒置显微镜下观察细胞形态学的变化。CCK-8法检测A549细胞活力。原位末端标记（TUNEL）法检测A549细胞的凋亡指数（AI）。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞内葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、p-JNK、caspase-3蛋白的表达水平,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测GRP78、JNK mRNA的表达水平。结果:与N组比较,H组贴壁细胞数量明显减少,细胞形态发生改变。A549细胞的吸光度（OD）值明显下降（P<0.01）,AI值升高（P<0.01）,凋亡细胞数明显增加（P<0.01）。HD组与H组相比,细胞损伤减轻,OD值上调（P<0.01）,凋亡细胞数相对减少,AI值下调（P<0.01）。p-JNK、caspase-3蛋白和JNK mRNA表达下降（P<0.01）。结论:DEX可有效减轻A549细胞缺氧/复氧损伤,机制可能与其抑制JNK通路激活所致的细胞凋亡有关。     

内质网相关降解蛋白Derlin-1通过抑制ERK信号通路抗人结肠癌细胞增殖

目的: 探讨内质网相关降解蛋白Derlin-1对人结肠癌SW480细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法: 采用sh-Derlin-1-pGPU6/Neo质粒转染构建瞬时敲除Derlin-1基因的SW480细胞株，应用实时定量PCR和免疫印迹验证Derlin-1基因和蛋白的低表达，采用CCK8法检测SW480细胞增殖情况，流式细胞仪检测SW480细胞凋亡情况，Western blot检测SW480细胞中凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达量和ERK磷酸化水平。结果: 使用pGPU6/Neo载体能够稳定地抑制SW480细胞中Derlin-1的表达，sh-Derlin-1组细胞增殖率相对于对照组显著降低、凋亡率显著升高（P<0.05），Western blot实验结果发现sh-Derlin-1组细胞中Bcl-2表达量显著降低、Bax表达量显著升高及ERK磷酸化水平显著降低，与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论: Derlin-1表达的降低能抑制ERK信号通路活化，进而诱导人结肠癌SW480细胞凋亡、抑制增殖。     

脂氧素A4抑制缺氧诱导的滋养细胞氧化应激和凋亡

目的: 探讨脂氧素A₄（LXA₄）对缺氧条件下人早孕细胞滋养细胞氧化应激及凋亡的影响。方法: 选取正常早孕(6～8周)绒毛,分离、纯化、鉴定得到细胞滋养细胞,分为常氧组、缺氧组、缺氧+1 nmol/L LXA₄组、缺氧+10 nmol/L LXA₄组、缺氧+100 nmol/L LXA₄组。各组细胞培养72 h后,采用 DCFH-DA探针检测活性氧（ROS）含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性,分光光度计法检测过氧化氢酶（CAT）活性,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性,流式细胞仪检测凋亡率,免疫印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果: 与常氧组比较,缺氧组ROS水平升高（P<0.05）,SOD、CAT、GPx活性降低（P<0.05）,凋亡率升高（P<0.05）。与缺氧组比较,缺氧+1、10、100 nmol/L LXA4组ROS水平均降低（P<0.05）,SOD、CAT、GPx活性均升高（P<0.05）,凋亡率均降低（P<0.05）。与常氧组相比,缺氧组的Bcl-2蛋白量减少,Bax蛋白量增加（P<0.05）;缺氧+1、10、100 nmol/L LXA₄组Bcl-2蛋白量较缺氧组均升高,Bax蛋白量较缺氧组均降低（P<0.05）。结论: LXA₄可抑制缺氧诱导的人早孕细胞滋养细胞的氧化应激和凋亡,Bcl-2/Bax表达调控可能是LXA₄抗滋养细胞凋亡的一个重要机制。     

鸢尾素通过NF-κB和JNK信号通路减轻屋尘螨诱导的气道上皮细胞炎症及凋亡的实验研究

目的：探索鸢尾素（irisin）对屋尘螨（HDM）诱导的人支气管上皮细胞（16HBE）的炎症和细胞凋亡的影响。方法：用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基培养人支气管上皮细胞（16HBE），待细胞长至85%时血清饥饿处理12 h，随后用不同浓度的HDM（0、400、800、1 200 U/mL）刺激细胞24 h。用活性氧（reactive oxygen species, ROS）试剂盒检测各组细胞ROS水平，qPCR法检测各组细胞白介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平。用20 nmol/L irisin预处理16HBE细胞2 h后接着用800 U/mL HDM处理24 h。活性氧试剂盒检测irisin对HDM诱导的细胞ROS产生的影响；qPCR法检测irisin对HDM诱导的炎症因子TNF-α及IL-6表达的影响；Western blot检测细胞内P65 NF-κB及JNK MAPK蛋白磷酸化水平，同时检测细胞内促凋亡蛋白cleaved-caspase3、BAX及抗凋亡蛋白BCL-XL的水平。结果：与对照组相比，不同浓度HDM（400、800、1 200 U/mL）刺激16HBE细胞24 h后，细胞内ROS水平升高（P<0.05），TNF-α及IL-6表达水平也升高（P<0.05）。与单用HDM处理组相比，irisin预处理的16HBE细胞内ROS水平下降（P<0.05），同时细胞内炎症因子TNF-α及IL-6表达减少（P<0.05）；irisin预处理组抗凋亡蛋白BCL-XL表达增加（P<0.05），同时促凋亡蛋白cleaved-caspase3、BAX的表达减少（P<0.05）；与对照组相比，HDM干预后细胞P65 NF-κB及JNK蛋白磷酸化水平增加（P<0.05），而irisin下调了P65 NF-κB及JNK蛋白磷酸化水平（P<0.05）。 结论：鸢尾素可有效改善HDM诱导的16HBE细胞的炎症和细胞凋亡，该保护作用可能与其抑制NF-κB和JNK MAPK信号通路有关，鸢尾素可能是治疗肺部炎症的潜在药物。     

miR-34a通过调控雄激素受体基因抑制前列腺癌细胞系LNCaP增殖

目的：探究miR-34a对雄激素受体（AR）基因的调控作用及对前列腺癌（PCa）LNCaP细胞增殖、凋亡的影响。方法：收集2016年10月至2019年9月本院泌尿外科行前列腺穿刺活检确诊为PCa患者组织标本36例,另取同期行手术治疗切除的良性前列腺增生（BPH）组织标本41例。体外培养LNCaP细胞,分别转染miR-34a mimics（mimics组）,miR-34a mimic NC（NC组）,设正常生长细胞为空白对照组（BC组）,另在mimics组基础上转染AR过表达（AR过表达组）载体及其对照（AR对照组）,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,实时定量PCR（RT-qPCR）检测miR-34a及AR mRNA表达水平,免疫印迹法检测AR蛋白、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）及原癌基因产物（c-Mcy）、细胞凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、capase-3）的表达水平。结果：与BPH组织比较,PCa组织中miR-34a表达水平显著降低（P<0.05）,AR mRNA及蛋白表达水平均显著增加（P<0.05）;与BC、NC组比较,mimics组LNCap细胞miR-34a表达水平、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著增加（P<0.05）,AR、Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,同一时间LNCap细胞活力均显著降低（P<0.05）;双荧光素酶实验结果显示,miR-34a与AR可能存在一定的调控关系,过表达AR基因可逆转miR-34a mimics对LNCaP细胞增殖抑制,促进凋亡作用。 结论：miR-34a可能通过调控AR抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,促进其凋亡。     

沉默NOTCHI基因对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞生物学的影响

目的: 探讨沉默NOTCH1基因对多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226增殖和凋亡的影响。方法: 针对人NOTCH1基因序列构建NOTCH1 shRNA真核表达载体,用Lipofectamine^TM2000脂质体转染RPMI 8226细胞,筛选出最佳干扰表达载体。观察NOTCH1 shRNA表达载体对RPMI 8226细胞增殖的影响;使用流式细胞仪分析细胞的周期分布;Western blot 法检测NOTCH1 shRNA转染RPMI 8226细胞后NOTCH1蛋白及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P27、P21的表达含量变化,ELISA法检测NOTCH1 shRNA转染RPMI 8226细胞后对IL-6分泌量的影响。结果: 沉默NOTCH1基因抑制细胞增殖,阻滞RPMI 8226细胞于G0/G1期,转染组、阴性对照组及空白组增殖率分别为（49.09±2.31）%、（91.73±2.67）%、（98.10±0.41）%,差异具有统计学意义（P<0.05）;三组的G0/G1期细胞分别为（66.23±3.71）%、（42.27±3.65）%、（40.70±0.92）%（P<0.05）;三组S期细胞分别为（31.03±1.49）%、（56.53±1.76）%、（51.83±1.45）%（P<0.05）。NOTCH1 shRNA诱导细胞凋亡,三组凋亡率分别为（46.67±1.31）%、（1.37±0.63）%、（0.85±0.43）%（P<0.05）;转染组NOTCH1蛋白表达下调,P21、P27表达上调。NOTCH1 shRNA可下调与疾病相关的IL-6分泌能力。三组IL-6分泌的吸光度值分别为28.18±3.50、167.08±7.97及185.86±5.61（P<0.05）。结论: NOTCH1 shRNA能抑制RPMI 8226细胞增殖并诱导凋亡,下调与多发性骨髓瘤发病有关的IL-6,有望成为多发性骨髓瘤治疗的一个新靶点。     

UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中的表达及对紫杉醇化疗耐药的影响

目的: 探讨UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中的表达及对紫杉醇化疗耐药的影响。方法: 采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）法检测上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中UTP23、P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药基因（MDR1）的mRNA表达水平,使用特异性UTP23-siRNA转染上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞,使用RT-PCR和 Western blot法检测转染后UTP23、P-gp、MDR1基因的表达,使用MTT法检测UTP23-siRNA对上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞生长的影响及耐药性。结果: 耐药组UTP23基因mRNA表达水平明显低于敏感组（P<0.05）,耐药组P-gp、MDR1基因mRNA表达水平明显高于敏感组（P<0.05）;转染组与未转染组、阴性对照组相比较,UTP23 mRNA水平明显升高（P<0.05）, 未转染组与阴性对照组相比较,UTP23 mRNA水平和蛋白水平差异无统计学意义（P>0.05）;转染组与未转染组、阴性对照组相比较,P-gp、MDR1 mRNA表达水平明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）,未转染组与阴性对照组相比较,P-gp、MDR1 mRNA表达水平无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）; 紫杉醇对UTP23-siRNA转染后上皮性卵巢癌耐药细胞的IC50浓度明显高于未转染组和阴性对照组（P<0.05）。结论: UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中低表达,其可能通过间接调控MDR1及P-gp的表达而参与上皮性卵巢癌紫杉醇细胞对紫杉醇的耐药。     

复方白花前胡液对大脑中动脉缺血再灌注大鼠Caspase-3 蛋白表达的影响

目的: 探索复方白花前胡液对大脑中动脉缺血再灌注大鼠Caspase-3 蛋白表达的影响。方法: 线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注大鼠模型, 术后24、48、72 h 分别检测大鼠的神经功能缺损;并采用免疫组织化学法检测凋亡相关基因Caspase-3 蛋白表达。结果: MCAO/R 24、48、72 h 后, 所有动物都出现程度不同的运动障碍, 且大鼠脑组织中Caspase-3蛋白表达显著升高, 复方白花前胡液可明显改善大脑中动脉缺血再灌注大鼠的神经功能缺损症状, 抑制大鼠Caspase-3 蛋白表达水平。结论: 复方白花前胡液能有效抑制凋亡相关基因Caspase-3 蛋白的表达, 减轻或消除缺血级联反应中迟发性神经元死亡,复方白花前胡液是其治疗缺血性中风病的机理之一。     

七氟烷、异氟烷对幼鼠脑细胞凋亡和远期学习记忆功能的影响

目的: 观察幼鼠暴露于七氟烷、异氟烷不同时间对脑细胞凋亡及远期学习记忆能力的影响。方法: 出生后 7 d Wistar幼鼠90只随机分为5组:模拟麻醉(A组),3.6%七氟烷麻醉 2 h(B组),3.6%七氟烷麻醉 6 h(C组),2.3%异氟烷麻醉 2 h(D组),2.3%异氟烷麻醉 6 h(E组),每组幼鼠麻醉中均无缺氧及CO₂蓄积发生。麻醉结束 6 h 后采用4%多聚甲醛灌注取脑,免疫组化检测caspase-3蛋白表达;余幼鼠分别在成长至5、14周时,行Morris水迷宫实验后检测脑caspase-3蛋白表达(n=6)。结果: 与A组相比,B、C、D及E组海马齿状回及CA3区caspase-3阳性细胞数明显增加,且C组多于B组,E组多于D组(P<0.05)。各组大鼠5、14周定位航行实验每日到达平台所需游泳距离无统计学差异,游泳速度、第一次穿越原平台位置时间、原平台所在象限游泳时间无统计学差异(P>0.05),但B、C、D及E组大鼠穿越原平台所在位置次数明显高于A组(P<0.05)。结论: 发育期幼鼠暴露于 3.6%七氟烷和 2.3%异氟烷均能诱发海马神经元细胞凋亡,等效浓度异氟烷影响超过七氟烷;两药均一过性影响大鼠对不良刺激的记忆能力,但未造成大鼠远期空间记忆能力下降。     

信号蛋白HMGB1和RAGE在Aβ 25-35损伤神经元中的表达变化

目的: 探讨高迁移率族蛋白1（high mobility group box 1 protein,HMGB1）、晚期糖基化终末产物受体（receptor of advanced glycation,RAGE）在β淀粉样蛋白（amyloid-β,Aβ）25-35损伤海马神经元中的变化。方法: 培养至第7天的原代海马神经元加入不同浓度Aβ25-35作用不同时间后,行细胞计数试剂（cell counting kit,CCK-8）检测细胞活力,确定Aβ25-35浓度及作用时间。将原代海马神经元分为两组：正常细胞组、损伤组。行两组神经元形态学观察,应用免疫印迹技术检测神经元胞浆、胞核HMGB1及胞浆RAGE、NF-κB的表达,采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α的表达。结果: 神经元CCK-8的活力检测确定给予25 μmol/L Aβ25-35、作用24 h造神经元损伤模型。形态学观察损伤组神经元明显减少,呈聚集状态。损伤组神经元胞浆HMGB1明显低于正常细胞组（1.596±0.189 vs. 0.146±0.043,P<0.05）,损伤组神经元胞核HMGB1高于正常细胞组（0.934±0.145 vs. 1.370±0.354,P<0.05）,损伤组神经元胞浆RAGE、NF-κB均高于正常细胞组（0.962±0.180 vs. 1.253±0.254,0.825±0.116 vs. 1.023±0.150,P<0.05）。ELISA检测发现损伤组上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α均高于正常细胞组（P<0.05）。结论:信号蛋白HMGB1与RAGE、炎症因子IL-1β与TNF-α在Aβ25-35损伤神经元中表达均升高,HMGB1可能通过RAGE-NF-κB炎症通路参与Aβ25-35损伤神经元的炎症反应。     

法舒地尔联合瑞舒伐他汀治疗血管性痴呆对认知功能、C-反应蛋白及氧化应激的影响

目的: 研究血管性痴呆（VD）给予法舒地尔联合瑞舒伐他汀治疗对其认知功能、C-反应蛋白及氧化应激的影响。方法: 选取184例VD患者为研究对象，按随机数表法分为瑞舒伐他汀组与联合用药组（法舒地尔+瑞舒伐他汀），各92例。比较两组治疗前后简易精神状态量表（MMSE）、蒙特利尔认知功能量表（MoCA）与日常生活能力量表（ADL）评分、C-反应蛋白（CRP）水平、丙二醛（MDA）、血清同型半胱氨酸（Hcy）与超氧化物歧化酶（SOD）水平、血脂指标（TC、TG、LDL-C、HDL-C）水平、临床疗效及不良反应发生率。结果: 联合用药组治疗总有效率（93.48%）显著高于瑞舒伐他汀组（82.61%），差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后，联合用药组MMSE、MoCA与ADL量表积分明显高于瑞舒伐他汀组，CRP、MDA、Hcy、TC、TG、LDL-C水平显著低于瑞舒伐他汀组，SOD水平明显高于瑞舒伐他汀组，差异均有统计学意义（P<0.05）。不良反应发生率无统计学意义（P>0.05）。结论: 法舒地尔联合瑞舒伐他汀治疗VD更有利于改善患者认知功能与日常生活能力，降低C-反应蛋白水平与氧化应激反应，改善血脂指标，临床疗效显著，且安全性高。     

茶黄素调节CaMKK2/AMPK信号通路对脑出血大鼠神经元凋亡和血脑屏障的影响

目的：探讨茶黄素（TFs）通过调节钙调蛋白激酶激酶2（CaMKK2）/单磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）信号通路对脑出血大鼠神经元凋亡和血脑屏障（BBB）的影响。方法：选取90只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFs低剂量组（20 mg/kg TFs）、TFs高剂量组（40 mg/kg TFs）、TFs高剂量+STO-609组（40 mg/kg TFs+10 μL CaMKK2抑制剂-STO-609）、阳性对照组（2 mg/kg尼莫地平注射液），每组15只。采用VII型胶原酶诱导脑出血大鼠模型。对大鼠行为学以及脑组织含水量进行检测；分离大鼠血清，检验炎症因子-血管黏附因子-1（VCAM-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附因子-1（ICAM-1）水平；取血肿周围脑组织，检测神经元凋亡、BBB通透性参数-伊文思蓝（EB）水平以及p-CaMKK2/CaMKK2、p-AMPK/AMPK和凋亡相关蛋白Bax表达情况。结果：模型组大鼠神经行为学评分（mNSS评分）、ICAM-1、TNF-α、VCAM-1、脑组织含水量、凋亡率、EB水平以及Bax蛋白表达较假手术组均增加，p-CaMKK2/CaMKK2、p-AMPK/AMPK均降低（P<0.05）；TFs低、高剂量组、阳性对照组大鼠mNSS评分、ICAM-1、TNF-α、VCAM-1、脑组织含水量、凋亡率、EB水平以及Bax表达较模型组均降低，p-CaMKK2/CaMKK2、p-AMPK/AMPK均增加（P<0.05）；与TFs高剂量相比，TFs高剂量+STO-609组大鼠mNSS评分、ICAM-1、TNF-α、VCAM-1、脑组织含水量、凋亡率、EB水平以及Bax表达均增加，p-CaMKK2/CaMKK2、p-AMPK/AMPK降低（P<0.05）。 结论：TFs可降低神经元凋亡、炎症反应、BBB通透性，对脑出血损伤大鼠发挥保护作用，其作用机制可能与激活CaMKK2/AMPK信号通路有关。     

胡椒碱脂质体的制备及对于胃癌细胞体外抗肿瘤活性的作用研究

目的: 研究胡椒碱脂质体的制备方法及胡椒碱脂质体体外抗胃癌细胞活性及作用机制。方法: 利用旋转薄膜冻融法制备胡椒碱脂质体,采用透射电镜（TEM）观察脂质体的形态,粒径分析仪和Zeta电位测定仪分析胡椒碱脂质体的粒径和Zeta电位,进行脂质体的稳定性实验、体外释药特性考察。体外培养人胃肿瘤MKN45细胞,分为正常组、对照组、实验组,对照组使用50 μmol/L的胡椒碱干预,实验组使用等剂量的胡椒碱脂质体干预。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达水平,Hoechst 33342染色观察细胞染色。结果: 胡椒碱脂质体形态为类球状,平均粒径为(92.32±2.10) nm,Zeta电位为(-49.8±3.5) mV,体外释药实验显示胡椒碱脂质体释药速率显著高于胡椒碱原料药;细胞实验结果显示,对照组和实验组细胞活力相比正常组显著降低,具有时间依赖性（P<0.05）,而实验组相比对照组具有统计学意义（P<0.05）;流式细胞术检测,对照组和实验组细胞凋亡率高于正常组,而实验组显著高于对照组（P<0.05）;对照组和实验组中Bcl-2水平显著下调,而Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达显著上调,与正常组比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论: 胡椒碱脂质体释药速率高于原料药,说明脂质体对于胡椒碱起到了增溶作用,而胡椒碱脂质体体外诱导MKN45凋亡能力高于原料药。     

下调lncRNA LINC00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响

目的：研究下调lncRNA LINC00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响及机制。方法：qRT-PCR方法测定正常支气管上皮16HBE细胞和肺癌A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中LINC00176的表达。将A549/DDP细胞分成对照组、si-NC组、si-LINC00176组、si-LINC00176+Anti-miR-NC组、si-LINC00176+Anti-miR-138-5p组。MTT实验检测顺铂对A549/DDP的半数抑制浓度（IC50）。流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot测定LC3-I、LC3-II、Beclin 1、C-Caspase-3蛋白表达。利用荧光素酶报告系统鉴定LINC00176和miR-138-5p的靶向关系。结果：与16HBE细胞比较，A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中LINC00176表达水平显著升高（P<0.01）。与A549细胞比较，A549/DDP细胞中LINC00176表达水平显著升高（P<0.01）。与对照组、si-NC组比较，si-LINC00176组A549/DDP细胞IC50显著降低（P<0.01），LC3-II/LC3-I、Beclin 1蛋白表达显著降低（P<0.01），凋亡率、C-Caspase-3蛋白表达、miR-138-5p表达水平显著升高（P<0.01）。LINC00176与miR-138-5p直接结合。与si-LINC00176+Anti-miR-NC组比较，si-LINC00176+Anti-miR-138-5p组A549/DDP细胞IC50显著升高（P<0.01），LC3-II/LC3-I、Beclin 1蛋白表达显著升高（P<0.01），凋亡率、C-Caspase-3蛋白表达显著降低（P<0.01）。 结论：下调lncRNA LINC00176通过靶向上调miR-138-5p能够抑制肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药，抑制细胞自噬，诱导细胞凋亡。     

参苓白术散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎的疗效及对NLRP3炎症小体的影响

目的:探讨参苓白术散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）的临床疗效及对NOD样受体-3(Nod-like receptor pyrin domain 3,NLRP3)炎症小体的影响。方法:入选UC患者100例，随机分为对照组和观察组，各50例。对照组给予美沙拉嗪1.0 g qid，观察组给予美沙拉嗪1.0 g qid+参苓白术散6.0 g tid。疗程8周。比较两组患者的临床疗效；检测肠黏膜中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase）-1 mRNA表达水平；检测外周血血清中C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的情况。 结果:治疗后，观察组的临床症状改善总有效率（86.00%）显著优于对照组（73.00%），差异有统计学意义（P<0.05）。观察组肠黏膜NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达(4.08±0.85、3.75±0.91、3.86±0.93)较对照组(5.26±0.96、4.66±0.95、4.97±0.99)明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。观察组血清中CRP、ESR、IL-1β、IL-18［（6.74±2.45） mg/L、（11.63±4.58） mm/h、（44.27±8.58） pg/mL、（263.37±60.34） pg/mL］较对照组［（15.32±5.68） mg/L、（18.45±5.12） mm/h、（51.11±9.26） pg/mL、（371.18±61.25） pg/mL］明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论:参苓白术散联合美沙拉嗪治疗UC具有良好的临床疗效，其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体的形成，进而抑制炎症反应有关。