一种具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白的纯化与N端氨基酸序列分析

目的分离纯化具有胰蛋白酶抑制活性的半夏蛋白,分析其对胰蛋白酶的抑制活性、抑制机制与N端氨基酸序列。方法采用以胰蛋白酶为配体的亲和色谱和Sephadex G-50凝胶过滤法,从半夏蛋白粗提液的40%(NH_4)_2SO_4沉淀中分离纯化活性半夏蛋白;采用12%SDS-PAGE鉴定其纯度,并估算其相对分子质量;采用Ed-man降解法分析其N-端氨基酸序列。结果纯化的活性半夏蛋白经SDS-PAGE检测呈现单一条带,相对分子质量为1.4×10～4;比活力为1059.012U/mg,活力回收率为24.40%;对胰蛋白酶的质量抑制比为1:4.72,抑制常数(Ki)为7.17×10～(-6)mol/L;其N端前6个氨基酸残基顺序为DPVVDG。结论该活性半夏蛋白是一种丝氨酸蛋白酶抑制刺,为胰蛋白酶的竞争性抑制剂。     

半夏蛋白抗肿瘤活性组分的提取分离

目的分离半夏蛋白的抗肿瘤活性组分,研究该半夏蛋白组分的抗肿瘤作用。方法用凝胶柱分离纯化半夏粗总蛋白,采用四氮唑蓝比色法(MTT法)观察半夏蛋白对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制,应用流式细胞术(FCM)检测其对细胞凋亡的影响。结果半夏粗总蛋白中30%硫酸铵沉淀部分、60%硫酸铵沉淀部分对肿瘤抑制的量效关系不明显,30%硫酸铵沉淀部分经分离后0.05mol/L和0.1mol/LNaCl的洗脱峰呈现较好的量效关系,且对Bel-7402细胞的抑制作用与空白对照组有显著性差异。30%硫酸铵沉淀蛋白有促进Bel-7402细胞凋亡的作用。结论半夏蛋白中30%硫酸铵沉淀部分对Bel-7402细胞生长具有明显抑制作用及促进Bel-7402细胞凋亡的作用。     

半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用

目的观察并比较半夏蛋白对体外培养的人肝癌细胞Bel-7402的生长抑制作用。方法应用流式细胞技术,检测半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用,并观察了其诱导凋亡作用的量-效关系。结果60%硫酸铵沉淀蛋白没有明显诱导Bel-7402细胞凋亡的作用,而30%硫酸铵沉淀蛋白有诱导Bel-7402细胞凋亡的作用。30%沉淀进一步分离结果显示,只有0.1 mol/L NaCl洗脱峰有一定诱导Bel-7402细胞凋亡的作用。结论半夏蛋白有一定的诱导Bel-7402细胞凋亡作用,其主要成分可能存在于总有机酸部位。     

半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402生长抑制作用的研究

目的:观察并比较半夏蛋白对体外培养人肝癌细胞Bel-7402生长的抑制作用.方法:应用MTT技术检测半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的抑制作用,并观察其量效关系.结果:30%沉淀、60%沉淀及Tris-HCl洗脱峰的量效关系不明显,0.05M和0.1M NaCl的洗脱峰呈现较好的量效关系,且对Bel-7402细胞的抑制作用与空白对照组有显著性差异(P＜0.05).结论:层析后的半夏蛋白对体外培养肝癌细胞增殖有较好的抑制作用,呈现显著的量效关系.     

半夏及其混淆品掌叶半夏的蛋白高效毛细管电泳法鉴别

目的:目前中药半夏以假充真现象较多,探求更便捷、精准的半夏及其伪品掌叶半夏的鉴定方法。方法:采用高效毛细管电泳法(HPCE)对半夏及其伪品掌叶半夏蛋白多肽进行分析。结果:半夏及其伪品掌叶半夏蛋白多肽高效毛细管电泳图谱有明显的差异,重复性良好。结论:高效毛细管电泳可作为半夏及其伪品掌叶半夏的鉴定方法。     

半夏的组织培养和植株再生

半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit.为天南星科植物,以块茎入药,具润燥化痰、降逆止呕,消痞散结之功,近年来发现,半夏蛋白的抗早孕效果,倍受国内外的注意。目前国内外对半夏的化学成分分析、品种资源、药理、毒理、炮制、栽培技术等方面都有深人的研究。随着连年采挖和农业生产精耕细作,半夏野生资源日益减少,外贸和内销均感不足,人工栽     

法半夏中氨基酸的测定

半夏是天南星科植物半夏(Pinellia ternate Thunb Breit)的干燥块茎,具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结的功效。现代中药研究表明[1],半夏具有镇咳、催吐和镇吐、抗癌、调节胃肠功能、利胆、抗肿瘤及抗早孕等作用;含有生物碱、β-谷甾醇、多糖、氨基酸、挥发油、半夏蛋白及无机     

半夏种内各变异类型总生物碱含量的变异规律

半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit系天南星科半夏属多年生草本植物,以块茎入药,主要含有半夏蛋白、生物碱、多糖、β-谷甾醇、亚油酸、琥珀酸等有效成分[1,2]。近年来,栽培半夏在驯化过程中,种内出现了许多性状变异。虽然已有不少关于半夏性状变异的研究,但主要集中于居群间     

半夏化学成分抗肿瘤研究进展

目的:介绍中药半夏的化学成分抗肿瘤作用研究概况。方法:查阅国内外20年来相关文献资料并进行分析和综述。结果:半夏提取物以及半夏化学成分中的半夏蛋白、半夏总生物碱、谷甾醇、半夏多糖等都具有抗肿瘤的作用。结论:半夏化学成分具有一定的抗肿瘤作用,为研究中药半夏抗肿瘤的作用机理提供方法和途径。     

刺五加的研究进展

刺五加是一昧应用广泛的传统北药,本文对刺五加的化学成分、现代药理学研究进展及提取分离方法的研究现状进行了概述.     

栽培、野生及不同产地半夏总生物碱测定

半夏为天南星科植物半夏Pinalliaternata (Thunb .)Breit.的干燥块茎[1] 。其主要成分含有淀粉,辣性物,半夏蛋白,苷类,酚类,甾醇类,脂肪酸类,无机元素,生物碱类等多种化学成分[2 ] 。其药理作用有镇咳,止吐,防矽肺,解毒等功效[3 ] ,生物碱是半夏药理作用的主要有效成分。药材中生物碱含量的多少是评价药材质量好坏的重要指标之一。为此,作者对不同产地的野生半夏和栽培品种的总生物碱成分,以盐酸麻黄碱为对照品进行测定,比较含     

脱病毒半夏中半夏蛋白的含量测定

目的测定脱病毒半夏块茎及种植半夏中总蛋白的含量。方法采用Folin-酚法测定半夏块茎中总蛋白含量。结果于波长750 nm处比色,标准曲线线性良好,线性方程为Y=0.001 47 X+0.011 08r,=0.999 4,脱病毒半夏蛋白含量为2.86%。结论 Folin-酚法简便、快速、灵敏度高,可以用于半夏块茎中总蛋白含量的测定。     

虎杖的提取分离和纯化技术研究新进展

虎杖中富含大量的药用有效成分,是当今医学界和医药工业研究和开发的重点中药材之一.本文对虎杖有效成分的提取和分离方法以及相关新技术的应用进行了综述,结合虎杖的研究进展及工业生产现状,分析和预测虎杖的应用和开发前景,旨在提高虎杖的研发深度、增加其工业开发价值.     

大孔树脂分离纯化中草药中皂苷类成分的研究进展

介绍了国内外大孔吸附树脂分离纯化药材和方剂中皂苷类成分的研究现状,总结了大孔树脂精制皂苷类成分的主要影响要素和数学建模方法,归纳出适合皂苷分离的大孔树脂特点.大孔树脂吸附皂苷类成分具有分离效率高,产品纯度高等特点,通过加强吸附和解吸等过程机制的研究,优化工艺参数,并开发色谱工艺控制策略可以进一步提高树脂精制效率,稳定皂苷产品质量.     

发酵在中药研究中的应用

中药经发酵后,其有效成分能被充分分离提取、具有更强的生物活性和较低的副作用.该文回顾了中药发酵的意义、历史和现状和具体应用,对发酵须解决的关键问题,如发酵药材、发酵菌种、发酵条件、有效成分的筛选和药理模型进行综述.     

泡沫分离技术在皂苷分离中应用的探讨

本文分析了泡沫分离技术的应用现状及其分离原理,着重探讨了该技术应用于分离皂苷类成分的可行性、优越性,并分析了该技术的应用前景。     

半夏的应用及毒性认识

<正>夏为天南星科植物半夏(Pinellia ternatat(Thunb.)Breit.)的干燥块茎,具有燥湿化痰,降逆止呕,消痞散结等功效,用于治疗湿痰寒痰,咳喘痰多,痰饮眩悸,风痰眩晕,痰厥头痛,呕吐反胃,胸脘痞闷,梅核气等疾病,含有生物碱、氨基酸、黄酮、挥发油、半夏蛋白及无机元素等多种化学成分,在我国半夏的临床应用已经有近千年的历史,     

半夏中生物碱的研究

半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternate（Thunb．）Breit的干燥块茎，是一种常用中药，具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结之功效。现代药理学研究表明，半夏还具有抗肿瘤、抗生育、降血脂、护肝、对抗心率失常和治疗冠心病等作用。半夏中含有生物碱、有机酸、多糖、甾醇、半夏蛋白、氨基酸、挥发油及无机元素等多种化学成分。究竟半夏中的何种成分或哪类成分为半夏的主要有效成分仍没有定论，汤氏早在1934年就从半夏乙醚提取液中检出生物碱，     

中药组分选择性分离材料研究

针对中药组分的特点和分离的难点,以及目前分离材料的研究和发展现状,提出了中药组分选择性分离材料的总体研究方案。以高效、高选择性为目标,研究硅胶、聚合物、膜基质表面化学修饰方法,引入功能基团,开发新的选择性分离材料,逐步实现分离材料的自主创新、高品质和国产化,并应用于中药组分、成分或有害物质的高效、高选择性分离。     

医院管理中应处理好学术权力和行政权力的关系

学术权力和行政权力是共存于医院的两种基本权力,两者均为医疗质量服务,又在某些方面冲突,必然导致医院权力结构的复杂性和多样性.通过分析我国医院经营管理中结构现状,提倡学术权力、行政权力分离和相互服务,学术权力是基础,行政权力为学术权力服务,统一于医院服务质量.