小型猪颈动脉粥样硬化性狭窄模型的初步建立

目的探索建立适合于神经介入研究的动脉粥样硬化性颈动脉狭窄动物模型的方法。方法以12头广西巴马小型猪为实验对象,以高脂饲养和动脉球囊损伤为模型建立的主要手段。应用体外超声、数字减影血管造影(DSA)和血管内超声(IVUS)评价颈动脉狭窄的形成情况,并对颈动脉的病理改变特点进行评价,最后分析总结出创建动脉粥样硬化性颈动脉狭窄动物模型的理想方案。结果16周时的DSA发现：高脂饲养和动脉球囊损伤组平均狭窄率达33．32%±12．84%；病理检查证实有明显的粥样硬化斑块形成。结论高脂饲养加动脉球囊损伤,16周可以初步建立广西巴马小型猪颈动脉粥样硬化性狭窄模型。     

小檗碱对颈动脉粥样硬化家兔血管紧张素的影响

目的探讨小檗碱预防颈动脉粥样硬化形成的作用机制。方法将32只雄性新西兰大白兔随机分成4组：正常组、颈动脉粥样硬化组（模型组）、生理盐水组（对照组）、小檗碱预防组（小檗碱组）；除了正常组给予正常饮食外，其余各组行高脂饲料喂养加颈动脉内膜空气干燥术建立颈动脉粥样硬化模型，在此基础上对照组和小檗碱组分别肌注生理盐水和小檗碱，术后4周麻醉处死；取动脉血及颈动脉组织分别测定循环型和组织型血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）活性和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量，挑选部分颈动脉行HE染色作为模型阳性筛选。结果模型组血管病变以泡沫细胞为主，形成动脉粥样斑块；对照组血管病变是以泡沫细胞为主的动脉粥样硬化灶；小檗碱组血管主要显示内膜明显增厚；模型组组织型ACE活性和AngⅡ含量明显高于小檗碱组和正常组（P〈0．05）。结论小檗碱可抑制ACE活性，特别是颈动脉ACE活性，降低组织中AngⅡ含量，预防颈动脉粥样硬化形成。     

小檗碱对家兔颈动脉粥样硬化干预的实验研究

目的　探讨小檗碱对家兔颈动脉粥样硬化形成的干预作用。方法　2 4只日本大耳白家兔随机分成正常组、对照组和小檗碱干预组,正常组8只,普通饲料喂养5周;对照组8只,高脂喂养一周后行颈总动脉内膜空气干燥术,术后继续喂养4周;小檗碱干预组8只,高脂喂养一周后行颈总动脉内膜空气干燥术,术后继续高脂喂养并每日肌肉注射小檗碱,剂量为5 mg/ kg,时间为4周。实验满5周后,行右侧脑血管造影(DSA)术并观察正常组、对照组和小檗碱干预组的颈动脉的病理变化和计算内膜中膜比(I/ M)。结果　正常组的颈动脉的内膜围一层单皮细胞,中膜为规则的平滑肌肌层;对照组内膜明显增厚,中膜变薄,HE染色可见大量泡沫细胞堆积和坏死的物质;小檗碱干预组内膜也有增厚的现象,增厚程度明显小于对照组,HE染色见有泡沫细胞形成,堆积程度小于对照组。DSA发现对照组的颈动脉有不同程度的狭窄,而小檗碱预防组的家兔没有发现明显的颈动脉狭窄。结论　小檗碱可以干预家兔颈动脉粥样硬化的形成过程,延缓粥样硬化的发生。     

颈动脉粥样硬化性狭窄动物模型的建立

目的 探讨建立经济实用、稳定可靠的适于颈动脉粥样硬化性狭窄(CASS)外科治疗研究的CASS动物模型的条件。方法 新西兰白兔25只，采用血管内膜气体干燥损伤法在动物的颈总动脉上造成特定条件的损伤，然后以特定高脂饲料喂养动物不同时间。评价各组动物血管狭窄程度和病理改变特点。结果 1月组、2月组和3月组各组中重度狭窄均达到80％。病理检查证实高脂喂养2个月时，动脉的粥样硬化病理改变已属于较成熟的纤维斑块期。结论 按本实验方法，损伤后喂养2个月的动物颈动脉狭窄程度和病理改变程度皆符合CASS外科治疗之实验研究需要。     

高脂饲料喂养与动脉内膜球囊损伤结合建立兔腹主动脉粥样硬化模型

背景：以往研究多采用单纯饲喂高脂饲料、正常或高脂血症动物动脉内膜损伤致动脉粥样硬化狭窄模型。 目的：拟采用喂养高脂饲料与动脉内膜球囊损伤相结合的方法建立腹主动脉粥样硬化的模型。 设计、时间及地点：对比观察实验,于2007-01/03在解放军总医院动物实验中心完成。 材料：新西兰白兔20只,随机分为单纯饲喂高脂饲料组、高脂饲料与动脉内膜损伤结合组,每组10只。高脂饲料由普通颗粒饲料+4%胆固醇+10%猪油组成+10%蛋黄粉组成。 方法：单纯饲喂高脂饲料组单纯喂养高脂饲料,高脂饲料与动脉内膜损伤结合组喂养高脂饲料4周后,行腹主动脉内膜球囊损伤术。 主要观察指标：12周后取主动脉行病理检查,计算机计算脂纹脂斑厚度,内、中膜厚度,内膜厚度比值,并进行血清总胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的测定。 结果：12周后,两组兔血脂血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇均升高,高脂饲料与动脉内膜损伤结合组升高更明显(P < 0.05)。喂养高脂饲料的两组动物均出现动脉粥样硬化斑块,横段面纤维斑块切片出现钙化。与单纯饲喂高脂饲料组比较,高脂饲料与动脉内膜损伤术结合组内膜明显增厚, 形成了明显的斑块及纤维帽结构,斑块厚度与内中膜厚度比值增加明显(P < 0.01)。 结论：所诱导产生的斑块与人类斑块成分具有一定相似性,包括斑块的纤维帽、钙化、脂核等,提示采用动脉内膜损伤与高脂饮食结合方式来制作动脉粥样硬化斑块的模型是可行的、实用的。     

溶血磷脂酸对大鼠颈动脉损伤后血管炎性反应的影响

目的探讨溶血磷脂酸(LPA)对大鼠颈动脉内膜损伤后血管炎性反应的影响。方法将24只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和LPA组,每组8只。采用球囊导管法建立大鼠颈动脉内膜损伤模型。LPA组造模后经导管注射LPA(100μl)干预,模型组注射磷酸盐缓冲液。造模后14 d处死大鼠,取出损伤部位颈总动脉,行HE染色观察内膜的增生情况,Toll样受体4(TLR4)免疫组化染色和免疫印迹法检测TLR4蛋白表达,采用PCR方法检测TLR4 mRNA表达。结果 HE染色分析,假手术组颈动脉平滑肌细胞排列整齐,中膜内膜无增厚,无明显狭窄;模型组可见颈动脉轻度损伤,部分区域细胞排列紊乱,内膜和中膜亦可见增厚,血管轻度狭窄;LPA组可见颈动脉损伤区域平滑肌细胞排列紊乱,内膜和中膜有明显的增厚,内膜中膜界限不清,血管狭窄较重。模型组TLR4蛋白和mRNA表达水平明显高于假手术组(P0.05),而LPA组均明显高于模型组(P0.05)。结论 LPA促进大鼠颈动脉内膜损伤后炎性反应,其机制可能与促进TLR4表达密切相关。     

青中年脑梗死与颈动脉粥样硬化的关系

目的 研究中青年脑梗死与颈动脉粥样硬化的关系.方法 应用彩色多普勒超声仪对中青年脑梗死患者 66 例、36例非脑血管病患者和正常体检者(对照组)行颈部血管超声检查.检测血管壁的厚度和斑块的大小及厚度,观察颈动脉粥样硬化斑块的数目及部位,计算斑块积分及血管狭窄程度.结果 中青年脑梗死患者颈动脉内膜增厚,动脉粥样硬化斑块的发生率明显高于对照组,斑块积分为轻中度的颈动脉粥样硬化,颈动脉血管多为轻中度狭窄.结论 颈动脉粥样硬化与青中年脑梗死关系密切,颈动脉超声检查对脑梗死的发生有极好的预测价值.     

小檗碱对颈动脉粥样硬化家兔NF-κB、MCP-1表达的影响

目的 探讨小檗碱预防颈动脉粥样硬化形成的作用机制.方法 将24只雄性新西兰大白兔随机分为3组:正常组、颈动脉粥样硬化组(模型组)、小檗碱预防组(小檗碱组),每组各8只;正常组给予普通饮食5周;模型组和小檗碱组给予高脂饲料喂养1周后行右侧颈动脉内膜空气干燥术,术后继续高脂饲料喂养4周以制成颈动脉粥样硬化模型;小檗碱组在给予高脂饲料喂养的同时每日灌服小檗碱;第5周取右侧颈动脉组织行HE染色,并观察颈动脉病理改变;行核因子-κB(Nuclear factor kappa B,NF-κB)免疫组织化学染色半定量检测NF-κB的活性,用RT-PCR法检测NF-κBp65 mRNA、MCP-1 mRNA表达水平.结果 模型组颈动脉血管内膜明显增生,内膜下和中膜可见大量泡沫细胞堆积,有明显的动脉粥样硬化斑块形成;小檗碱组的内膜轻度增厚,内膜下有少量泡沫细胞形成;小檗碱组NF-κBp65阳性细胞数密度高于正常组(P<0.01),明显低于模型组(P<0.01);小檗碱组NF-κBp65/β-actin、MCP-1/β-actin扩增带吸光度值比值高于正常组(0.42±0.05 vs 0.18±0.04,0.57±0.18 vs 0.33±0.49,P<0.01),而明显低于模型组(0.42±0.05 vs 0.66±0.10,0.61±0.11 vs 0.76±0.03,P<0.01);NF-κB活性与MCP-1呈显著正相关(r=0.958 P<0.01).结论 小檗碱预防家兔颈动脉粥样硬化可能通过抑制NF-κB活性,降低MCP-1表达而起作用.     

改良硅橡胶圈加高胆固醇喂养诱导颈动脉狭窄兔模型的建立

目的探讨粥样硬化性颈动脉狭窄兔模型的建立。方法40只雄性新西兰大白兔随机分为4组:空白对照组4只(A组)、高胆固醇喂养组4只(无硅橡胶圈干预,B组)、硅橡胶圈干预组16只(C组,分C1,C2、C3、C4亚组),高胆固醇 硅橡胶圈干预组(D组,分D1、D2、D3、D4亚组)。硅橡胶圈置于右颈动脉外膜,对侧颈动脉行伪手术,术后次日给予1%胆固醇饲料喂养2周,过量麻醉处死动物前,动物模型行DSA证实颈动脉狭窄程度,切除硅橡胶圈下方狭窄的动脉及对侧相应位置的颈动脉标本,光学显微镜观察病理变化。结果置入改良的硅橡胶圈加高胆固醇喂养2周后,病理证实D组的硅橡胶圈诱导的颈动脉内膜面增厚、管腔狭窄;中膜平滑肌细胞排列紊乱。病理和DSA证实模型颈动脉管腔狭窄程度为12%～88%之间,其中以D4组的颈动脉粥样硬化斑块和狭窄程度较为显著。结论应用改良硅橡胶圈加高胆固醇喂养的方法成功地建立了与人有相似病理表现的粥样硬化性颈动脉狭窄模型兔,颈动脉狭窄程度与硅橡胶圈的形状、内壁直径及弹性回缩力相关,模型制作方法简便易行,便于重复。     

小檗碱对兔颈动脉粥样硬化中内膜增生和巨噬细胞趋化作用的影响

目的观察小檗碱对家兔颈动脉粥样硬化的内膜中膜比和巨噬细胞变化的影响。方法24只雄性日本大耳白兔随机分为3个试验组,正常组每天肌肉注射生理盐水,普通饲料喂养,对照组高脂喂养,1周后行颈动脉内膜空气干燥术并每日肌肉注射生理盐水,小檗碱干预组高脂喂养,1周后行颈动脉内膜空气干燥术并肌肉注射小檗碱,5周时取手术侧的颈动脉做弹力纤维染色,计算内膜中膜比;巨噬细胞免疫组化检测巨噬细胞在颈动脉粥样硬化病变中的变化,计算巨噬细胞的阳性率。结果对照组内膜厚度明显增加,中膜萎缩变薄,经计算I/M为1.20±0.007,小檗碱组的I/M为0.65±0.008。两组间有显著差异(P<0.01);巨噬细胞免疫组化染色对照组内膜下和中膜有大量巨噬细胞,小檗碱干预组内膜和中膜下也可以见有巨噬细胞沉积,通过计算巨噬细胞阳性率,小檗碱干预组的巨噬细胞阳性率明显小于对照组(P<0.01)。结论小檗碱可以降低家兔颈动脉粥样硬化中的血管内膜厚度、减少粥样斑块中的巨噬细胞数目,从而干预颈动脉粥样硬化的形成。     

A modified rabbit model of carotid atherosclerotic plaque suitable for the stroke study and MRI evaluation

In order to induce a modified rabbit model of carotid atherosclerotic plaque suitable for the stroke study and to evaluate the lesion with magnetic resonance imaging (MRI). Eight rabbits of group A were fed with high-fat diet only. Atherosclerosis at the right common carotid artery was induced in rabbits of group B (n = 12) by high-fat diet and balloon catheter injury to the endothelium 4 weeks later. The rabbits were examined in vivo with a 1.5-T MRI. After 4 weeks on the high-fat diet, the serum lipid levels were markedly increased, which became significantly higher than the baseline levels. The lesions on both MRI and histology were remarkable. One week after balloon injury, the signal of injured right common carotid was higher on all the contrast-weighted images than the left side. The extent of abnormal signal was reduced 9 weeks after balloon injury. Hemorrhage was detected on all the contrast-weighted images. In conclusion, the rabbit model established by the authors is such a feasible one to the study of stroke caused by carotid atherosclerosis.     

经股动脉入路建立球囊损伤兔颈动脉狭窄模型

目的经股动脉入路制作一种实用、可靠且稳定的颈动脉狭窄模型,用于探讨颈动脉再狭窄的防治。方法新西兰大白兔20只,随机分为对照组、实验1周组、实验2周组和实验4周组,每组5只,常规喂养。所有动物采用经右侧股动脉入路置入HyperForm球囊,实验组行右颈总动脉定比扩张,对照组行单纯右颈动脉路图显示,术后以普通饮食喂养。实验1、2、4周组实验兔分别于手术后1周、2周和4周处死,并在第4周同时处死对照组兔。右颈动脉分叉近心端1～2cm节段取材送光镜和电镜检查,分别观察血管壁增生情况并计算血管内膜和中膜厚度。结果与对照组比,实验组新生内膜厚度呈持续性显著增加(P<0.01),实验2周组与实验1周组比较及实验4周组与实验2周组相比,内膜厚度均显著增加(P<0.01)。各组中膜厚度未见明显统计学差异(P>0.05)。结论经股动脉入路用Hyper Form球囊行颈动脉定比扩张能成功地制作一种稳定、简便可靠的颈动脉狭窄动物实验模型。血管平滑肌细胞的过度增生是造成PTA术后管腔再狭窄的主要因素。     

内皮型一氧化氮合酶基因转染对血管损伤后新生内膜增生的影响*

背景：一氧化氮能够抑制血管平滑肌细胞的迁移和增殖,而一氧化氮合酶是其合成的关键酶,有关一氧化氮合酶基因体内转染对平滑肌细胞及动脉粥样硬化血管损伤后内膜增生影响少有报道。 目的：观察内皮型一氧化氮合酶 (endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因体内局部转染对动脉粥样硬化大鼠血管损伤后新生内膜增生的抑制作用。 方法：建立动脉粥样硬化Wistar大鼠颈动脉球囊损伤模型,建模后随机分成空白对照组、AdCMV-lacz对照组和AdCMV-eNOS组,分别将PBS,AdCMV-lacz和AdCMV-eNOS体内转染至以上3组大鼠的损伤血管壁。转染2周后培养并鉴定损伤局部平滑肌细胞,并用RT-PCR法检测各组损伤及转染后血管平滑肌细胞eNOS mRNA的表达,同时观察转染后不同时期新生内膜增生的影响。 结果与结论：AdCMV-eNOS组的颈总动脉血管平滑肌细胞可表达eNOS mRNA。3组大鼠转染后1和3个月,AdCMV-eNOS组内膜/中膜面积比值低于空白对照组和AdCMV-lacz对照组(P < 0.01)。结果显示,eNOS基因体内转染损伤后血管可以抑制血管新生内膜增生,减少再狭窄发生率。     

大鼠动脉硬化闭塞模型两种构建方法的比较

背景：由于动脉硬化闭塞症的发病机制还不明确，所以建立动脉硬化闭塞症的病理动物模型，对于探明动脉硬化闭塞症的病因、病理生理、发病机制及防治药物的研究与开发均具有重要的意义。 目的：比较单纯高脂饲料喂养及给予内膜损伤加高脂饲料喂养大鼠动脉硬化闭塞模型复制建立的方法。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，2007-08/2008-03于中国医科大学实验动物中心完成。 材料：清洁级3.0~4.0月龄健康纯种Wistar雄性大白鼠60只，体质量200 g。高脂饲料:62.8%基础饲料+20%猪油+150 g/L胆固醇+20 g/L胆酸钠+2 g/L丙基硫氧嘧啶。 方法：将60只大鼠随机分成3组，每组20只。普通饲养组给予普通饲料喂养；高脂饲养组给予高脂饲料喂养；高脂饲养加内膜损伤组给予内膜损伤加高脂饲料喂养。后两组同时给予维生素D3，30万u/kg体质量，右后肢肌肉注射,1次/月。 主要观察指标：①于内膜损伤后术后30 d，各组大鼠取血检测血浆总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇浓度变化。②于内膜损伤后术后7，30，90 d时，取大鼠左后肢股-腘动脉，行苏木精-伊红等染色，光镜下观察股-腘动脉的病理变化。 结果：高脂饮食组大鼠与正常饮食组大鼠相比，高脂饮食组大鼠血清胆固醇 ，三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇均明显升高。病理显示：7 d高脂饲养组内皮细胞少量脱落，高脂饲养加内膜损伤组内皮细胞完全脱落、弹力板松弛，平滑肌细胞排列紊乱。90 d高脂饲养组内皮细胞完全脱落、平滑肌和胶原纤维增多、增厚，为早期硬化改变。高脂饲养加内膜损伤组内膜增厚、大量吞噬脂质、类脂质细胞、管腔闭塞。 结论：单纯给予大鼠高脂、高胆固醇饲料喂养不易形成动脉硬化闭塞症病变，大鼠股-腘动脉内注入蒸馏水损伤内皮加高脂饲料喂养可较快形成与人动脉硬化闭塞症相似的、较成熟的大鼠动脉硬化闭塞模型。     

银杏黄酮苷元干预兔颈总动脉损伤后内膜增生及血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1的表达

背景：银杏叶提取物中的黄酮苷元具有较强的抗氧化活性,课题组前期实验证实可抑制氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1。 目的：进一步探讨银杏黄酮苷元对兔颈总动脉内皮损伤后内膜增生和血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1表达的影响。 方法：将雄性新西兰大白兔随机分为对照组、假手术组、模型组和治疗组。对照组予普通饲料,其余各组予高脂饮食,假手术组仅作颈外动脉结扎,模型组和治疗组均球囊损伤右颈总动脉,治疗组损伤后用银杏黄酮苷元灌胃。4周后检测各组血脂水平,观察各组右颈总动脉形态,用免疫组织化学法和RT-PCR检测血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1蛋白和mRNA表达。 结果与结论：模型组术后4周内膜增生明显,有粥样斑块形成,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1表达明显增加(P < 0.05)。治疗组银杏黄酮苷元灌胃4周后内膜增生较轻,内膜面积,血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1阳性细胞数和其基因表达水平均低于模型组(P < 0.05),但血脂与模型组比较无差异。提示银杏黄酮苷元可减轻新生内膜增生及动脉粥样硬化病粥样斑块的形成,这种作用可能与抑制兔颈总动脉内皮损伤后血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1的表达有关。     

雷帕霉素对球囊损伤大鼠颈总动脉VSMC迁移抑制及β_3整合素、MMP9表达的影响

目的探讨雷帕霉素(Rapa)对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞迁移的抑制作用及对β3整合素、基质金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响。方法 40只大鼠随机分为球囊损伤组和雷帕霉素组。球囊导管损伤大鼠颈总动脉做成球囊损伤模型。雷帕霉素组术前3 d及术后28d连续肌注雷帕霉素0.5 mg·kg-1·d-1。28d后取目标血管段行HE染色行组织学观察和形态学分析,免疫组化分析雷帕霉素对VSMC的迁移及β3整合素、MMP9表达的影响。结果雷帕霉素组损伤段血管内膜厚度(I)、中膜厚度(M)及内膜增生程度(I/M)均较球囊损伤组小(P<0.05),同时雷帕霉素组新生内膜中β3整合素、MMP9阳性细胞数较球囊损伤组少(P<0.05)。结论雷帕霉素能抑制大鼠颈总动脉球囊损伤后VSMC迁移和内膜增生,其作用机制可能与其抑制MMP9、β3整合素的表达有关。     

脑动脉粥样硬化模型大鼠大脑中动脉的蠕变

背景：蠕变是生物材料黏弹性固体的表现形式之一,脑动脉硬化和脑出血的防治有必要了解脑动脉硬化大脑中动脉的蠕变力学特性。 目的：比较正常和动脉粥样硬化动物模型大脑中动脉的蠕变力学特性,确定动脉粥样硬化对大脑中动脉蠕变特性的影响。 方法：SD雄性大鼠随机分为两组,模型组肌注维生素D3+尼古丁灌胃+高脂饮食制备动脉粥样硬化模型,对照组正常饮食,4周后处死大鼠取大脑中动脉为标本试件。在日本岛津电子万能试验机上对正常和动脉粥样硬化动脉标本试样进行蠕变实验。蠕变实验的应力增加速度为0.01 MPa/s。设定实验时间为7 200 s,采集100个数,以一元线性回归分析的方法处理实验数据,记录蠕变曲线和数据,以及应变与时间的变化规律。 结果与结论：正常和动脉粥样硬化大鼠大脑中动脉蠕变最初600 s变化较快,之后应变缓慢下降,正常动脉标本7 200 s蠕变量高于动脉粥样硬化动脉标本(50.38%,48.26%,P < 0.05)。说明正常和动脉粥样硬化大鼠大脑中动脉具有不同的蠕变力学特性,提示蠕变曲线是以指数关系变化的,动脉粥样硬化对大脑中动脉蠕变特性具有一定影响。     

慢病毒载体介导血管生长素1基因修饰骨髓间充质干细胞对颈动脉粥样硬化的影响

背景：骨髓间充质干细胞易于被外源基因转染,且具有向损伤组织趋化聚集的特性,便于将目的基因导入其中并发挥治疗性作用,可以通过分化为血管内皮细胞修复损伤的血管内膜。 目的：探讨慢病毒载体介导的血管生长素1基因修饰骨髓间充质干细胞移植后,对大鼠颈动脉粥样硬化的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-02/2008-05在福建省高血压研究所及福建医大附属第一医院中心实验室完成。 材料：4周龄雄性SD大鼠32只,8只用于制备骨髓间充质干细胞,剩余24只随机分为3组：模型对照组、空载体组、血管生长素1转染组,8只/组。 方法：以重组慢病毒为载体构建血管生长素1基因工程干细胞,以绿色荧光蛋白为报告基因,调整细胞密度为(1.0~2.0)× 1010 L-1。3组大鼠均采用球囊损伤法+高脂饮食构建颈动脉粥样硬化模型,造模后即刻,空载体组将未感染的0.1 mL骨髓间充质干细胞悬液注入颈总动脉外膜,分3点注射;血管生长素1转染组同法注入等量重组慢病毒感染的骨髓间充质干细胞悬液,饲养2个月后处死大鼠,取颈动脉组织。 主要观察指标：Western blot法检测转基因干细胞中血管生长素1的表达,荧光免疫组织化学及苏木精-伊红染色检测动脉内膜/中膜面积比。 结果：24只大鼠均进入结果分析。血管生长素1转染组表达血管生长素1蛋白,另2组无血管生长素1蛋白表达。移植后2个月,荧光显微镜下空载体组、血管生长素1转染组动脉壁内均可见绿色荧光蛋白阳性细胞;各组均可见动脉内膜增生,斑块形成;与模型对照组比较,空载体组内膜面积/中膜面积值无明显变化(P > 0.05),血管生长素1转染组内膜面积/中膜面积值明显减小(P < 0.05)。 结论：经血管生长素1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植可明显减轻动脉粥样硬化程度。     

Prevention of neointimal formation by a serine protease inhibitor, FUT-175, after carotid balloon injury in rats

BACKGROUND AND PURPOSE: In vivo and vitro studies revealed the activation of thrombin and the complement system in vascular lesion formation during the process of atherosclerosis, along with pathological proliferation of smooth muscle cells. We examined the effect of the synthetic serine protease inhibitor FUT-175 (developed as a potent inhibitor of thrombin and the complement system) on vascular lesions using balloon dilatation-induced neointimal formation in the carotid artery of rats. METHODS: Sprague-Dawley (SD) rats underwent balloon dilatation injury of the left carotid artery to induce neointimal formation. Three groups of these rats (n=8, each) were treated with daily intraperitoneal injections of 1 of the following doses of FUT-175: 0.5, 1.0, or 2.0 mg/d in 1 mL of saline for 7 consecutive days. The control group (n=8) was similarly treated with 1 mL of saline for 7 days. The injections were started immediately after balloon injury. Two weeks after the injury, the left carotid arteries were perfusion-fixed, and the areas of the neointimal and medial layer were analyzed under a microscope. RESULTS: A morphometric analysis revealed that there were significant differences in the intima-media ratio between the 4 groups treated with vehicle (saline) or a low, medium, or high dose of FUT-175 (1.45+/-0.11, 1.08+/-0.06, 0.71+/-0.04, or 0.32+/-0.04, respectively). This suppression was achieved in a dose-dependent manner by the administration of FUT-175 after balloon injury. In the histological study, it was demonstrated that FUT-175 suppresses the production of platelet-derived growth factor (PDGF)-BB in the neointima and the medial smooth muscle cell layer. CONCLUSIONS: After balloon injury activated proteases that were inhibited by FUT-175 were demonstrated to have an essential role in the development of the pathological thickening of the arterial wall.