第4批蛋白含量测定国家标准品的制备和标定

目的:建立蛋白含量测定用国家标准品。方法:按2005年版中国药典三部、WHO 和 ICH 标准品有关要求,对标准品进行制备、分装、冻干、质量检测并开展协作标定。结果:批号为2002/04的蛋白含量测定标准品经检测,外观、无菌实验合格。pH 为7.5,水分含量为0.7%。蛋白含量经过6家单位共计39次的凯氏定氮法协作标定后,确定其含量为21.24 mg·支~(-1),标准差为0.694 mg·支~(-1),总体 RSD 为1.06%。采用 Lowry 法对第3批蛋白含量测定国家标准品与该批蛋白标准品进行比较后,结果表明两者无显著差异。结论:该批蛋白含量测定标准品各项指标均符合要求,可作为国家标准用于 Lowry 法蛋白含量测定,特定为第4批蛋白含量测定国家标准品。     

乙酰螺旋霉素标准品溶解方法及溶液使用期限初探

目的:探索乙酰螺旋霉素标准品的溶解方法及溶液使用期限。方法:采用供试品溶解的方法溶解标准品;采用紫外-可见分光光度法,对一定浓度的标准品溶液于5℃以下放置不同时间后,测定吸光度值;用抗生素微生物检定法对同一批供试品在5℃以下放置不同时间后的同一浓度的标准品溶液,测定其含量。结果:标准品溶解完全。5℃以下放置不同时间的标准品溶液在一定期限内吸光度值稳定,对含量测定无影响。结论:确定了溶解乙酰螺旋霉素标准品的方法,一定浓度的标准品溶液在5℃以下保存,可使用7d。     

半自动生化分析仪测定总蛋白试剂盒(双缩脲法)通用性研究

目的验证半自动生化分析仪测定总蛋白试剂盒结果的一致性,为制订总蛋白试剂盒的国家标准提供可行性依据。方法采用紫外分光光度法,以质控血清(或血清)测定4个厂家总蛋白试剂盒的准确性、线性范围、精密度以及不同厂家总蛋白标准品的准确度。结果 4个厂家总蛋白试剂盒的准确性均满足要求,r≥0.99,批内精密度不超过0.30%,标准品准确度的偏差不超过2.43%。结论采用半自动生化分析仪测定不同厂家的总蛋白试剂盒是通用可行的。     

不同方法测定基因工程药物中中国仓鼠卵巢细胞蛋白残留量的比较与分析

目的对不同中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞蛋白检测试剂盒进行比较分析以确定最佳检测方法。方法用4种不同的CHO细胞蛋白检测试剂对 32批用CHO细胞表达的基因工程产品原液进行检测 ;用标准品替换方法分析 3批红细胞生成素供试品 ;并对 2种CHO细胞蛋白标准品和 4种供试品进行SDS PAGE分析。结果不同的检测方法之间的结果存在较大的偏差 ;同一检测试剂盒替换标准品后测得结果有较大差异 ;标准品的组成成分和比例存在较大差异。结论应根据制品的不同纯化工艺建立不同的CHO细胞测定方法     

浅谈药品生产企业标准品/对照品的管理与使用

目的为了保证量值传递的准确可靠,对药品生产企业开展的各类检测工作所需标准品/对照品进行控制,加强药品生产企业标准品/对照品管理与使用。方法明确标准品/对照品的购买、验收、贮存,建立科学合理规范化的标准品/对照品的管理与使用制度。结果保证量值传递的准确可靠,使药品生产企业获得最可靠的检测数据,为人类健康事业保驾护航。结论标准品/对照品管理、使用的好与坏,是实验室工作质量和水平高低的标识之一。     

重组人粒细胞集落刺激因子生物学活性标准品的免疫学活性测定

目的测定重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)生物学活性标准品的免疫学活性。方法用深圳晶美公司及美国R&D公司的G CSFELISA试剂盒分别对WHOrhG CSF生物学活性国际标准品、惠尔血针剂 75 (GRAN 75 )及用WHOrhG CSF生物学活性国际标准品标定过生物学活性的工作标准品T1、T2、T3进行免疫学活性测定。结果不同公司的rhG CSFELISA试剂盒对所测定样品的测定结果不同 ,且用不同稀释液稀释样品测定结果亦不同。结论用免疫学方法定量测定rhG CSF的含量是有条件的 ,且免疫反应能识别聚体但不能识别蛋白分子的降解。     

四环素国家标准品的标定

四环素是临床上广泛使用的抗生素类药品,为测定其效价需要用标准品,而标准品的单位是否准确直接关系到产品的质量。四环素生产初期因未获得国际标准品,我所于1958年建立了第一批国家标准品,并以此为标准建立了五批国家标准品。直至1962年由世界卫生组织提供了四环素国际标准品,随后以该标准品为标准标定了第六批国家标准品,至今已先后制备了十五批四环素标准品,它们的单位和国际单位是一致的。为保持标准品的延续性,1989年以第十五批四环素国家标准品(860615批)为标准完成了第十六批国家标准品的制备工作。经五个实验室协作标定,本批四环素国家标准品每毫克含971个单位。     

关于细菌内毒素检查中几个问题的探讨

中国药典九五年版已将《细菌内毒素检查》正式列入，为更好，准确地掌握该法的操作，本人提出以下几个问题和建议与大家共同探讨。1关于细菌内毒素检查用水药典规定，细菌内毒素检查用水系指使用批号鲨试剂4h不产生凝集反应的注射用水；而尝试剂标准中规定每ml注射用水含内毒素不得超过0．03EU。市售的注射用水合格品虽对使用批号的鲨试剂4h内不产生凝集反应，但测其内毒素含量常有超过0．03Eu／ml的。2关于细菌内毒素标准品按药典规定进行检查，要得到准确、可靠的结果，除注意用水问题外，更重要的是细菌内毒素的国家标准品和工作标准品…     

首批重组人组织纤溶酶原激活剂国家标准品的研制

目的：建立ｒｈｔ－ＰＡ效价测定用国家标准品。方法：用ＵＶ法测定蛋白含量;ＨＰＳＥＣ法分析浓度;体外凝块裂解气泡上升法测定效价;用ｔ－ＰＡ国际标准品（８６／６７０）对国家标准品的效价进行标定。结果：标准品的效价为每支３００００ＩＵ,ＲＳＤ＝３．３４％（ｎ＝１０）。结论：建立的ｒｈｔ－ＰＡ国家标准品可用于国内同类药物的研究开发和进口药品的质控。     

结核抗体检测试剂盒用血清标准品的制备及应用

目的 结核抗体检测试剂盒质量控制用血清标准品的制备及应用。方法 采集结核病患者和健康人血清，用ELISA法进行检测，制备血清标准品：包括10份检测结果为阳性的结核病患者血清、10份检测结果为阴性的健康人血清、1份检测结果为强阳性的结核病患者血清用健康人血清进行倍比稀释而成的5个稀释浓度；并对血清标准品进行稳定性试验；同时用本套血清标准品对不同厂家生产的结核抗体检测试剂盒以及同一厂家生产的不同批号的结核抗体检测试剂盒进行测定。结果 本血清标准品具有良好的稳定性;不同厂家生产的结核抗体检测试剂盒质量不均一，同一厂家生产的试剂盒质量也不均一。结论 本血清标准品可以用于结核抗体检测试剂盒的质量控制；各生产厂家要严格按照生产工艺的SOP进行生产，把好质量关。     

信息广场

SFDA:规范蛋白同化制剂和肽类激素进出口为规范蛋白同化制剂和肽类激素的进出口管理工作,日前,国家食品药品监督管理局根据《反兴奋剂条例》的有关规定,就蛋白同化制剂和肽类激素进出口管理的有关事宜发出通知。通知要求,进、出口蛋白同化制剂和肽类激素(包括标准品、对照品)的单位应向国家食品药品监督管理局提出申请,报送有关资料。国家食品药品监管局应当自收到申请之日起5日内做出是否受理的决定。对决定受理的,应当自受理之日起10日内做出是否同意进、出口的决定。进口供临床使用的蛋白同化制剂和肽类激素,取得特殊药品《进口准许证…     

生物制品蛋白质含量Lowry测定法应注意的几个问题

日常工作中测定生物制品中总蛋白的含量常采用Lowry法，由于蛋白质的特异性以及干扰物质存在，常给测定结果带来较大误差，本文从测定时参照标准品选择，干扰物存在的排除方面总结了提高Lowry法测结果准确性的经验。     

首次DNA重组人生长激素（rhGH）国家标准品的研制

协作标定了首批重组人生长激素国家标准品，以第一次国际标准品为对照，按药典方法：生物测定及理化测定。首次ｒｈＧＨ和Ｍｅｔ－ｒｈＧＨ国家标准品批号为：０６２７－９７０１Ａ和Ｂ；其蛋白含量分别为１．８和２．１ｍｇ／ａｍｐ，生物效价分别为５．０和５．５ＩＵ／ａｍｐ。     

抗-HBs国家标准品的研制

目的：协作标定首批冻干抗-HBs国家标准品。方法：以首批抗-HBs国际标准品（17—2—77批号）为标准，采用放射免疫法标定我国抗-HBs国家标准品。结果：国家标准品（人免疫球蛋白）的效价为2．5IU·支^-1，抗-HBs国家标准品（人血浆）的效价为1．3IU·支^-1。将以上标准品按标示量加水溶解后于4℃放置9d和将冻于标准品分别置于4，23，45℃保存6个月，进行稳定性考察。研制的首批冻干抗-HBs国家标准品稳定性良好，其他项目符合国家标准品要求。结论：已制备首批抗-HBs国家标准品，并获得国家标准品批准文号。     

利用弓形虫病人血清筛选弓形虫速殖子特异性抗原

目的筛选能引起人体免疫反应的弓形虫抗原标记。方法利用实验室保存的9份弓形虫病人血清标准品、6份阴性血清标准品,以及2份弓形虫病人血清国际标准品作为一抗,分别与刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）RH株的可溶性速殖子抗原（soluble tachyzoite antigen,STAg）和排泄-分泌抗原（excreted/secreted antigens,ESA）进行免疫印迹反应。结果发现STAg中有10条蛋白带与所用阳性血清均发生免疫反应;ESA中有4条蛋白带能与所有阳性血清发生免疫反应,这些蛋白与阴性血清均不发生免疫反应。其中分子量为30、35、49、50、54kDa的STAg抗原以及分子量为23、24、28kDa的ESA抗原能与所用阳性血清发生较强免疫反应。结论本实验结果将有助于寻找在弓形虫病人体内能够引起免疫反应的弓形虫诊断抗原和免疫保护性抗原,为弓形虫诊断试剂以及疫苗开发奠定初步基础。     

《中国药典》2000年版中抗生素标准品/对照品介绍

药典中收载的标准品 /对照品是药典执行过程中的重要工具。《中国药典》 2 0 0 0年版问世已经近两年 ,但我们发现许多使用者仍对药典中收载的抗生素标准品 /对照品及其使用情况不十分了解。本文系统介绍《中国药典》中收载的抗生素标准品 /对照品的命名、标定和表示方法等 ,以期读者对2 0 0 0年版《中国药典》收载的标准品 /对照品有更深入的理解。1　命名原则1 1　对照品与标准品《中国药典》中的抗生素基准参比物质有两类 :化学对照品和生物标准品。凡是在生物测定 (抗生素微生物检定法 )中应用的基准参比物质被称为标准品 ,而用于各类化…     

细菌内毒素工作标准品效价的稳定性考察

自部颁《细菌内毒素检查法》取代免法用于四大输液的内毒素检测以来，因其方便、省时，所需实验条件简单，在基层得到广泛应用，但笔者在多年来的检查实践中发现内毒素检查经常出现阳性管（内毒素工作标准品稀释液）不凝集，致使检验失败的现象。放将检查中所需董试剂、无热原注射用水和内毒素工作标准品分别按部颁标准进行质量考核，发现内毒素工作标准品实际效价与标示效价不符，疑为贮存时间的延长致使内毒素工作标准品效价下降造成阳性管最终稀释浓度不准，现对福州东方尝试剂厂生产的内毒素工作标准品进行效价测定，示做如下实验：1．…     

使用酶联免疫反应加速仪与传统方法对乙肝表面抗原检测的比较

采用酶联免疫反应加速仪与传统水浴箱两种仪器在使用相同诊断试剂条件下，分别对标准品血清、阴性血清、阳性对照血清、502份随即抽样血清，使用酶联免疫吸附分析法进行乙肝HBsAg检测，并进行对比试验，判断两种仪器检测结果的线性、特异性和重现性。     

人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)基质残余蛋白标准品的建立

目的：研制用于人用狂犬病疫苗（地鼠肾细胞）中地鼠肾细胞蛋白质残留量检测（ELISA法）的国家标准品。方法：分两步进行协作标定和量值溯源,第一步采用Lowry法对原代地鼠肾细胞蛋白质标准品原液进行赋值,第二步采用ELISA法对原代地鼠肾细胞蛋白质标准品进行赋值。结果：数据经统计学处理结果,最终原代地鼠肾细胞蛋白质标准品量值为4.0μg·ml-1,95%可信限为：（4.0±0.5）μg·ml-1。结论：建立了国家原代地鼠肾细胞蛋白质标准品,赋值准确可靠、科学严谨,可用于人用狂犬病疫苗（地鼠肾细胞）基质残余蛋白的质量控制。     

乌索酸标准品的质量标准研究

目的研究并制定乌索酸标准品的质量标准。方法采用定性、定量分析方法，依照《中华人民共和国药典》2000年版二部附录有关规定对乌索酸标准品各项指标进行检测。结果5批乌索酸标准品的比旋度为＋63～67°（［α］D20，C 0.095，EtOH），熔点为285～287℃，灰分＜0.5%，高效液相色谱法测定乌索酸含量＞99.5%。结论各项指标均符合标准物质的相关规定，可用于乌索酸标准品的质量标准。