FAK及EphA2在人脑胶质瘤中的表达及其相关性研究

目的探讨FAK及EphA2在人脑胶质瘤不同病理级别中的表达,并阐述FAK及EphA2与胶质瘤发生、进展的关系。方法收集广州医学院第二医院65例人脑胶质瘤标本其中I-II级(低级恶性组)38例,Ⅲ-Ⅳ级(高度恶性组)27例,男性34例,女性31例,年龄4～72岁;肿瘤直径>5cm 30例,肿瘤直径≤5cm 35例,所有胶质瘤标本均为第一次手术切除,术前均未行放、化疗;另取14例正常新鲜脑组织做对照组。应用免疫组化sp(链霉印白素-过氧化物酶法)测定FAK和EphA2蛋白表达水平并分析其相关性。结果在人正常脑组织中未见EphA2蛋白表达,其在人脑胶质瘤高度恶性组中的表达显著高于低度恶性组(P<0.05);FAK蛋白在人正常脑组织中和脑胶质瘤中均可表达;且在人脑胶质瘤高、低度恶性组中的表达均显著高于正常脑组织(P<0.05);FAK蛋白在人脑胶质瘤高度恶性组表达显著高于低度恶性组(P<0.05)。结论 FAK及EphA2与人脑胶质瘤恶性度有关,随着恶性度增高,FAK及EphA2的表达也增加。笔者认为FAK及EphA2的高表达与胶质瘤的发生及其侵袭性生物学有关,因此FAK及EphA2可以作为胶质瘤侵袭性的生物学指标。同时以FAK及EphA2为中心的靶向治疗,可能成为抑制胶质瘤的有潜力的途径之一。     

HOXD10在胶质瘤中的表达及临床意义

目的 研究HOXD10基因在人腩胶质瘤组织中的表达及其意义.方法 收集具有明确病理分级的48例脑胶质瘤和8例正常脑组织标本,应用RT PCR和Western blot方法检测HOXD10在不同级别人脑胶质瘤和正常脑组织中HOXD10基因mRNA和蛋白水平的表达,并进一步研究了HOXD10与胶质瘤病理分级的相关性.结果 HOXD10在正常脑组织中呈高表达.Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中的HOXD10基因mRNA和蛋白表达明显低于Ⅰ～Ⅱ级.结论 HOXD10在正常脑组织中呈高表达,并与脑胶质瘤恶性程度呈负相关.     

人脑胶质瘤的表皮生长因子基因及蛋白表达

国内首次报道采用Northern、斑点杂交和免疫组化的方法检测了50例胶质瘤、4个恶性胶质瘤体外细胞系和7例正常脑组织表皮生长因子(EGF)的表达水平。结果显示,上述组织或细胞都可表达5.0 kb的EGF mRNA片断,高恶度胶质瘤较低恶度胶质瘤和正常脑组织EGFmRNA表达水平增高,低恶度胶质瘤与正常脑组织的表达无显著差异。在50例胶质瘤中29例(58％)EGFmRNA过表达,其中多见于恶性胶质瘤。采用免疫组化检测胶质瘤ihEGF表达发现,随胶质瘤恶性程度增加,EGF阳性细胞数及着色强度亦随之增加,EGFmRNA表达与ih EGF表达及肿瘤的分级呈正相关。提示胶质瘤可以合成EGF,在胶质瘤的发生发展过程中,EGF参与或促进了其恶性进展。     

PHLPP2在人胶质瘤中的表达及意义

目的研究PHLPP2在人正常脑组织以及脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法选取青岛大学附属医院与安丘人民医院神经外科自2014年12月至2016年10月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤标本56例,其中I级7例,Ⅱ级19例,Ⅲ级21例,胶质母细胞瘤9例。另取20例因脑创伤行内减压术患者的正常脑组织标本作为对照。应用RT-PCR、Western-blotting分别检测各标本中PHLPP2m RNA和PHLPP2蛋白的表达。结果 RT-PCR和Western-blotting检测结果显示正常脑组织中PHLPP2 mRNA和PHLPP2蛋白表达最高,不同级别胶质瘤组织PHLPP2 mRNA和PHLPP2蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),且随着肿瘤病理级别的增高,胶质瘤组织中PHLPP2 mRNA和PHLPP2蛋白表达值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PHLPP2在正常脑组织和不同级别的脑胶质瘤组织中都有表达,其表达值与肿瘤的病理分级呈负相关,PHLPP2可能作为一个肿瘤抑制基因在胶质瘤的发生、发展中起到关键性的作用。     

P14~(ARF)蛋白与脑胶质瘤发生发展的相关性研究

目的 :探讨脑胶质瘤中 P14 ARF蛋白表达与不同病理级别脑胶质瘤的相关性。方法 :应用免疫组织化学技术检测 31例不同病理分级脑胶质瘤中 P14 ARF蛋白表达 ,5例正常脑组织为正常对照。结果 :P14 ARF蛋白表达阳性率在低级别 ( 级、 级 )和高级别 ( 级、 级 )脑胶质瘤中分别为 87.5 %、30 .4 3%。该蛋白在低级别和高级别中的表达均具有显著性差异 (P<0 .0 5 )。P14 ARF表达水平与脑胶质瘤病理分级之间呈显著负相关性 (r=- 0 .5 71,P<0 .0 1) ,即随着肿瘤恶性度的升高而降低。结论 :P14 ARF蛋白表达异常可导致细胞周期调控失常和细胞异常增殖 ,加速脑胶质瘤恶性演进。     

Survivin、Livin在脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的:探讨Survivin、Livin在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法:收集52例人脑胶质瘤组织标本,另取30例正常脑组织为对照组。应用免疫组织化学方法分别检测52例脑胶质瘤组织和30例正常脑组织中的Survivin、Livin蛋白的表达,并测定52例不同病理分级的脑胶质瘤组织中Survivin、Livin蛋白表达。利用HPIAS-2000图像分析系统测定Survivin、Livin在各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:Survivin、Livin在30例正常脑组织中均不表达,而在52例脑胶质瘤组织中呈高阳性表达,两者之间差异均具有显著性(P<0.01)。图像分析结果显示,脑胶质瘤组织Survivin、Livin蛋白表达的平均光密度和平均阳性面积率均明显高于正常脑组织,脑胶质瘤组织与正常脑组织之间平均光密度和平均阳性面积率的差异有显著性(P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤中Survivin、Livin蛋白表达的平均光密度和平均阳性面积率均显著高于Ⅰ~Ⅱ级脑胶质瘤,Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤与Ⅰ~Ⅱ级脑胶质瘤之间平均光密度和平均阳性面积率的差异亦具有显著性(P<0.05)。结论:Survivin、Livin的表达上调在人脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用,并且其表达强度与脑胶质瘤的恶性程度呈明显正相关。Survivin、Livin基因可能成为脑胶质瘤基因治疗的有效靶点。     

生存素和磷酸化信号传导与转录激活因子3在脑胶质瘤组织中表达与相互关系的研究

目的探讨脑胶质瘤组织中生存素和磷酸化信号传导与转录激活因子3（p-STAT3）表达与相互关系及其在脑胶质瘤发生发展过程中的作用。方法应用免疫组织化学即用型二步法检测62例脑胶质瘤和10例正常脑组织中生存素和p-STAT3的表达情况。结果生存素和p-STAT3在正常脑组织中不表达;在脑胶质瘤中,生存素和p-STAT3高表达,阳性率分别为56．45％、61．29％,Kemohan分级Ⅲ＋Ⅳ级与Ⅰ＋Ⅱ级生存素和p-STAT3阳性表达差异有统计学意义（P〈0．05）;在35例生存素阳性表达病例中,p-STAT3表达阳性25例（71．43％）,生存素蛋白与p-STAT3蛋白的表达呈正相关（r00．38,P=0．003）。结论生存素基因可能是通过p-STAT3蛋白的激活在脑胶质瘤组织中发挥抗凋亡作用,促进脑胶质瘤发生及发展。     

人脑胶质的表皮生长因子基因及蛋白表达

国内首次报道采用Ｎｏｒｔｈｅｍ、斑点杂交和免疫组化的方法检测了５０例胶质瘤，４个恶性胶质瘤体外细胞系和７例正常脑组织表皮生长因子（ＥＧＦ）的表达水平。结果显示，上述中细胞都可表达５．０ｋｂ的ＥＧＦｍＲＮＡ片断，高恶度胶质瘤较低恶度胶质瘤和正常脑组织ＥＧＦ ｍＲＮＡ表达水平增高，低恶度胶质瘤与正常脑组织的表达无显著差异。在５０例胶质瘤中２９例（５８％）ＥＧＦ ｍＲＮＡ过表达，其中多见于恶性胶质瘤。采     

TKTL1在星形胶质细胞瘤中的表达及其意义

目的:探讨转酮醇酶样基因1(Transketolase-like gene1,TKTL1)在胶质瘤中的表达及意义.方法:收集54例手术切除的胶质瘤标本,6例正常脑组织,通过Realtime-PCR、Western blot及免疫组化方法,从mRNA和蛋白水平检测TKTL1在54例胶质瘤、6例正常垂体组织的表达.结果:Realtime-PCR、Western blot及免疫组化发现TKTL1在胶质瘤组织其表达显著高于正常脑组织(P＜0.01),在高级别胶质瘤中和低级别胶质瘤中的蛋白及mRNA表达量两者之间差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:TKTL1的表达与肿瘤恶性程度密切相关,表明TKTL1的表达与肿瘤的发生、发展密切相关,提示TKTL1有可能是预测胶质瘤预后的重要指标.     

脑胶质瘤中单酰甘油脂肪酶的表达及意义

目的 研究内源性大麻素代谢酶单酰甘油脂肪酶（monoacylglycerol lipase,MAGL）在脑胶质瘤组织中的表达情况及其与胶质瘤病理级别的关系,探讨其临床意义。方法 选取脑胶质瘤标本23例,其中WHO Ⅰ级1例,WHO Ⅱ级7例,WHO Ⅲ级5例,WHO Ⅳ级10例。对照组8例,均为脑挫裂伤后行内减压术切除的正常脑组织。应用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、LC-MS分别检测各组织标本中MAGL mRNA、MAGL活性的表达。结果 MAGL mRNA、MAGL活性在低级别（WHOⅠ~Ⅱ级）和高级别（WHOⅢ~Ⅳ级）脑胶质瘤组织中的表达水平较正常脑组织明显降低（P<0.01）,且随着肿瘤病理级别的增高而降低,与肿瘤的病理分级呈负相关（均P<0.01）。MAGL mRNA的表达水平与MAGL活性呈正相关。结论 MAGL可能参与了脑胶质瘤的发生、发展过程,检测MAGL的表达可评价脑胶质瘤的恶性程度。     

人脑胶质瘤中Cx43mRNA及其蛋白的表达意义

目的 探讨Cx43基因表达与胶质瘤恶性程度的关系。方法采用免疫组化及原位杂交技术检测Cx43基因的表达。结果Cx43mRNA及其蛋白表达随着胶质瘤组织学分级的提高呈下降趋势，Cx43蛋白表达结果与Cx43mRNA的表达结果之间呈显著正相关（P〈0．05）。人脑胶质瘤中Cx43mRNA及蛋白表达与肿瘤分级呈负相关。结论Cx43基因表达与胶质瘤恶性进展密切相关。     

p53和Ki67在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨p53和Ki67在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法采用S-P免疫组织化学法检测10例正常脑组织及208例人脑胶质瘤组织中p53和Ki67的表达。结果p53和Ki67在正常脑组织中均无表达。p53在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率分别为52．8％和74．1％,Ki67在Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率分别为17．8％和67．1％。p53在Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达（x^2=22．004,P=0．000;x^2=9．610,P=0．002）。p53在Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织中的表达（x^2=10．336,P=0．001）。Ki67在Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达（x^2=16．765,P=0．000;x^2=51．596,P=0．000）。而Ki67在正常脑组织中及Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤组织中的表达差异无统计学意义（x^2=2．143,P=0．143）。结论p53和Ki67在脑胶质瘤的发生中可能起重要作用,二者与胶质瘤的恶性程度相关。     

血管内皮生长因子受体在胶质瘤中的表达

目的 研究人脑胶质瘤组织中血管内皮生长因子受体(KDR、Flt-1)mRNA的表达，同时分析肿瘤间质血管增生的情况，并探讨两之间的关系。方法 采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法，对49例人脑胶质瘤手术切除标本，U251等3株胶质瘤细胞、人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)以及12例脑外伤内减压术中得到的正常脑组织检测了KDR、Flt-1 mRNA表达水平。另外，用免疫组化SP法对胶质瘤及正常脑组织的微血管密度(MVD)进行了分析。结果 胶质瘤组织中的KDR、Flt-1 mRNA表达水平明显增高，分别达59．2％、63．2％，随着病理分级的提高其表达水平有升高趋势，HUVEC及3株胶质瘤细胞亦表达水平较高。胶质瘤中的微血管密度(MVD)与胶质瘤级别有关，KDR、Flt-1 mRNA的表达同MVD呈正相关。结论 KDR、Flt-1、MVD对胶质瘤的恶性生物学行为评估有重要意义，血管内皮生长因子受体的高表达与肿瘤组织血管增生有关，在胶质瘤侵袭过程中发挥重要作用。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在正常人脑和脑星形细胞瘤组织中的表达

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）γ在正常人脑组织和人脑星形细胞瘤组织中表达的差异。方法应用半定量RT-PCR法和免疫组织化学检测正常脑组织、不同分化级别人脑星形细胞瘤组织标本中PPARγ表达。结果PPARγmRNA和PPARγ蛋白在正常人脑组织、人脑星形细胞瘤中均可表达,且人脑星形细胞瘤中的表达显著高于正常脑组织（P〈0．05）,其中,Ⅰ～Ⅱ级组和Ⅲ～Ⅳ级组的表达均显著高于正常脑组织（P〈0．05）;Ⅲ～Ⅳ级组的表达显著高于Ⅰ～Ⅱ级组（P〈0．05）。结论PPARγ在人脑星形细胞瘤和正常脑组织中均表达,与人脑星形细胞瘤的病理分级有关,可能参与人脑星形细胞瘤的发生、发展过程。     

MIC-1、PCNA在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的研究巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)与增殖细胞核抗原(PCNA)在人脑星形细胞瘤中的表达,分析其表达水平与肿瘤恶性程度及病理级别的关系。方法采用免疫组化法,检测60例不同病理级别人脑星形细胞瘤标本及5例正常人脑组织中的MIC-1和PCNA的表达。结果 MIC-1和PCNA在正常脑组织中不表达,而在人脑星形细胞瘤中的表达程度随着肿瘤的病理级别的增高明显增高,二者表达的阳性率在正常脑组织、低级别和高级别星形细胞瘤各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),且二者在星形细胞瘤中的表达呈正相关(P<0.05)。结论 MIC-1与PCNA在人脑星形瘤细胞中的表达呈正相关,提示MIC-1的过度表达对肿瘤细胞增殖具有促进作用,MIC-1有可能成为新的候选肿瘤标志物,为判断肿瘤恶性程度及病理级别提供有价值的理论和依据。     

PTEN在脑胶质瘤表达的定性研究

目的 探讨抑癌基因PTEN在脑胶质瘤的表达情况及其临床意义。方法 应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法,检测45例胶质瘤组织与23例正常脑组织PTEN基因外显子1-9、1-8、5-9、5-8 mRNA失表达情况。结果 在45例肿瘤组织中,PTENmRNA平均失表达率为55.6％（25／45）。正常脑组织无1例失表达。胶质瘤组织和正常脑组织中PTENmRNA失表达水平存在明显差别（P〈0.05）。胶质瘤中PTENmRNA失表达水平与患者年龄、性别无关,但随着恶性程度分级增高其失表达水平明显升高（P＜0.05）。结论 PTENmRNA表达水平的异常在胶质瘤的发生和发展过程中起着重要作用。     

RhoC在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的研究RhoC在人脑胶质瘤组织中的表达情况及其与病理分级的相关性,初步探讨RhoC在胶质瘤的诊断、恶性程度及预后判断中的临床意义。方法采用抗亲和素-生物素复合物法(SABC)免疫组织化学法、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对62例不同病理级别的星形细胞瘤及11份正常脑组织标本进行RhoC蛋白和RhoCmRNA的检测。结果①免疫组织化学结果显示62例胶质瘤组织中RhoC蛋白表达全部呈阳性,对照组正常脑组织存在弱表达或不表达。②不同病理级别星形细胞瘤标本的RhoC阳性细胞率、RhoCmRNA与甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)mRNA灰度比值均存在差异;Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ级RhoCmRNA表达均高于Ⅰ级、Ⅱ级。③相关性分析:RhoC阳性细胞率和RhoCmRNA表达量与胶质瘤病理分级均呈正相关性(r=0.814,r=0.863,P均<0.01)。结论 RhoC可以作为星形细胞瘤Ⅰ~Ⅳ级新的有效的诊断标记物,同时作为常规组织病理学的分级标准的补充。     

Chk1/2蛋白在胶质瘤和正常脑组织中的分布及意义

目的探讨Chk1、Chk2蛋白在胶质瘤和正常对照组织中的分布特点,以评价Chk1、Chk2作为胶质瘤治疗靶点的可行性。方法应用免疫组织化学SABC法检测Chk1、Chk2蛋白在80例胶质瘤和18例正常脑组织中的表达,并结合病理特点进行分析。结果 Chk1、Chk2蛋白在各类型胶质瘤和正常脑组织中均表达,Chk1蛋白在胶质瘤中的阳性表达水平明显高于正常脑组织(P=0.027);Chk2蛋白在胶质瘤和正常脑组织中的阳性表达水平无显著性差异(P=0.173)。Chk1、Chk2蛋白表达水平在高级别胶质瘤(WHOⅢ～Ⅳ级)和低级别胶质瘤(WHOⅠ～Ⅱ级)中无明显差异(P=0.301、0.135)。Chk1和Chk2蛋白在胶质瘤中的表达呈正相关(r=0.795,P<0.001)。结论 Chk1在胶质瘤中高表达,是胶质瘤的特异性表达分子,可以作为胶质瘤治疗的靶点,Chk2与Chk1在胶质瘤中的表达呈正相关,联合灭活Chk1、Chk2来增强胶质瘤治疗敏感性非常重要。