重组人肝再生增强因子对肝纤维化大鼠基质分解素—1基因表达的影响

为了解重组人肝再生增强因子（hALR）对肝纤维化大鼠基质分解素－1（MMP3）基因表达的影响,建立CCl4中毒性及人血白蛋白免疫损伤性两种大鼠肝纤维化模型,模型完成后予不同剂量hALR治疗,在不同的时间点留取大鼠肝组织标本,提取总RNA,用逆转录定量聚合酶链反应（RT－PCR）测定MMP3的基因表达。结果在两种模型中hALR治疗组大鼠肝组织MMP3的基因表达水平在治疗过程中的不同阶段均明显高于模型组;高剂量hALR组大鼠肝组织基质分解素－1的基因表达水平均明显高于低剂量组,提示hALR可增强肝纤维化大鼠MMP3的基因表达。     

重组人肝再生增强因子可抑制肝星状细胞I、Ⅲ型胶原的基因表达

在培养在肝星状细胞系中加入不同浓度的重组人肝再生增强因子（hALR）,于不同的时间点收集细胞,提取总RNA,用逆转录定量PCR方法测定I、Ⅲ型胶原的基因表达水平。结果表明,高（0.2ng/L）、中（0.02ng/L）、低(0.002ng/L）浓度的hALR3组肝星状细胞I型胶原基因表达水平在3、24、48、72h4个时间点均明显低于对照组;大剂量组较中、低剂量组I型胶原基因表达水平亦明显为低。中、低剂量hALR组肝星状细胞Ⅲ型胶原基因表达水平在24、48、72h3个时间点明显低于对照组;大剂量hALR组肝星状细胞Ⅲ型胶原基因表达水平在8、24、48、72h4个时间点均明显低于对照组,,较中、小剂量组亦显著降低。提示重组人肝再生增强因子对肝星状细胞I、Ⅲ型胶原基因表达有明显的抑制作用。     

重组人肝再生增强因子可抑制肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的基因表达

在培养的肝星状细胞系中加入不同浓度的重组人肝再生增强因子(hALR),于不同的时间点收集细胞,提取总RNA,用逆转录定量PCR方法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原的基因表达水平.结果表明,高(0.2ng/L)、中(0.02 ng/L)、低(0.002ng/L)浓度的hALR 3组肝星状细胞Ⅰ型胶原基因表达水平在8、24、48、72h 4个时间点均明显低于对照组;大剂量组较中、低剂量组Ⅰ型胶原基因表达水平亦明显为低.中、低剂量hALR组肝星状细胞Ⅲ型胶原基因表达水平在24、48、72h 3个时间点明显低于对照组;大剂量hALR组肝星状细胞Ⅲ型胶原基因表达水平在8、24、48、72h 4个时间点均明显低于对照组,较中、小剂量组亦显著降低. 提示重组人肝再生增强因子对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达有明显的抑制作用.     

重组人肝再生增强因子可预防免疫损伤性肝纤维化的形成

观察重组人肝再生增强因子（ｒｈＡＬＲ）对免疫 务性肝纤维化的预防作用。建立人血白蛋白免疫损伤性大鼠肝纤维化模型。在造模的同时子ｒｈＡＬＲ腹腔注射。观察大鼠存活率,观察大鼠存活率,血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ水平,肝组织胶原蛋白含量及肝脏病理学改变。结果：ｒｈＡＬＲ可提高人血白蛋白损伤生肝纤维化大鼠存活率氏肝纤维化大 ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ水平,病理检查显示ｒｈＡＬＲ有明显减轻大鼠肝纤维化形成的作用;     

重组人肝再生增强因子对肝星状细胞基质分解素-1及其抑制因子基因表达的调节

肝再生增强因子(ALR)是Hagiya等[1]1994年从新生大鼠肝组织中克隆的一种理化性质与肝刺激物( HSS)相似的促肝细胞增殖因子.新近,我国学者克隆了大鼠ALR的人类同源分子[2],并通过构建原核表达载体,获高效表达菌株,进而获得重组hALR.初步研究表明hALR对四氯化碳中毒性及①免疫损伤性大鼠肝纤维化均有明显的防治作用[3、4].本文拟通过观察hALR对肝星状细胞基质分解素-1( MMP3 )及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP1) 基因表达的影响,从细胞外基质降解代谢的角度探讨hALR抗肝纤维化的机制.     

汉防己甲素对实验性大鼠肝纤维化防治作用的研究

用ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化模型，以肝功能、体内透明质酸（ＨＡ）含量变化、肝脏病理损害及胶原增生程度为指标，研究汉防己甲素（Ｔｅｘ）对实验性肝纤维化的防治作用。结果显示各期治疗组大鼠体内ＨＡ含量、血清谷丙氨酸转氨酶活性均低于模型组。３周治疗组大鼠肝脏细胞变性、坏死及炎细胞浸润程度均显著低于模型组。１２周模型组成纤维细胞增生达２．８级，肝脏用ＨＥ及ＶＧ染色显示假小叶已形成，治疗组有成纤维细胞及胶原增生     

复方硫磺软肝丸抗慢性肝纤维化作用研究

目的探讨复方硫磺软肝丸对改良方法所致大鼠慢性肝纤维化模型的保肝及抗纤维化作用。方法采用配方饲料加腹腔注射CCl4橄榄油溶液的改良方法复制大鼠慢性肝纤维化模型。造模结束后,灌胃给药,每天2次,连续给药1 个月。末次给药后禁食12 h,留取大鼠血清及肝组织,检测血清中转氨酶（ALT、AST）指标、血清肝纤维化（HA、LN、Col-Ⅳ）指 标的变化,观察肝组织病理切片的变化。结果模型组大鼠有明显的肝损伤及肝纤维化病变;各给药组肝功能和肝纤维化程 度均有不同程度的改善,病理组织学检查结果表明其肝脏病变程度较模型组明显减轻（P〈0.05）。结论复方硫磺软肝丸 对慢性肝纤维化大鼠有明显的保肝及抗肝纤维化作用。     

肝脏原位注射新生大鼠肝细胞构建的工程化肝组织对大鼠肝纤维化的影响

目的观察原位注射新生大鼠肝细胞构建的工程化肝组织对实验性肝纤维化大鼠血清和肝组织学的影响,探讨其抗肝纤维化的作用。方法用四氯化碳制成实验性肝纤维化造模大鼠,肝脏原位多点注射工程化肝组织,3周后测定血清肝功能并行肝组织学检查。结果原位注射组大鼠肝功能较单纯假手术组大鼠有改善,且具有显著差异（P〈0．05）,HE染色提示纤维化明显改善。结论肝脏原位多点注射新生大鼠肝细胞的工程化肝组织能改善大鼠肝纤维化进程,有一定抗肝纤维化作用。     

愈肝胶囊抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨愈肝胶囊对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用。方法 以四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型，观察愈肝胶囊对肝纤维化大鼠肝脏病理变化，对肝功能指标ALT、TBIL、ALB、GLO、PT；肝纤维化指标HA、LN、PCⅢ、CⅣ、Hyp及免疫学指标CIM、CD8、CIM／CD8的作用来说明愈肝胶囊对肝纤维化大鼠的影响。结果 愈肝胶囊明显减轻肝纤维化大鼠肝脏的病理改变，改善其肝功能；调节T淋巴细胞；下调肝纤维化4项指标及羟脯氨酸；使肝纤维化程度显著下降，与乙肝宁颗粒组相比有显著性差异（P〈0．05-0．01）。结论 愈肝胶囊有显著降低大鼠实验性肝纤维化反应，增强机体抗肝纤维化损伤能力的作用。     

中药八味抗纤方抗大鼠肝纤维化的实验研究

 目的 观察中药八味抗纤方对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠的治疗作用.方法 采用四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,同时予不同剂量中药八味抗纤方灌胃,观察八味抗纤方对慢性肝损伤大鼠肝功能的影响, 采用Ishak肝病组织病变计分修正方案,结合HE染色、Masson染色和免疫组化染色研究八味抗纤方对大鼠肝组织病理改变的影响,以活化HSC特异性标记α-SMA标记显示活化肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),探讨八味抗纤方抗肝纤维化的可能的作用机制.结果 低剂量组和高剂量组大鼠血清AST均显著低于模型组;肝纤维化程度轻于模型组;α-SMA阳性细胞数少于模型组.结论 八味抗纤方能够抑制四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化,减轻纤维结缔组织增生,抑制HSC的活化.     

二咖啡酰奎宁酸抗肝纤维化及脂质过氧化作用的实验研究

目的 :观察二咖啡酰奎宁酸抗复合因素致大鼠肝纤维化及脂质过氧化作用。方法 :采用复合因素复制大鼠肝纤维化模型 ,以血清层连蛋白 (LN)、透明质酸 (HA)、丙二醛 (MDA)、一氧化氮 (NO)含量、肝组织光镜、电镜下形态学改变为观察内容 ,探讨二咖啡酰奎宁酸的治疗作用。结果 :二咖啡酰奎宁酸能够显著降低血清LN ,HA ,MDA ,NO含量 ,明显改善肝组织炎症及纤维化状态。结论 :二咖啡酰奎宁酸具有一定的抗肝纤维化及脂质过氧化作用     

脂质过氧化对实验性肝纤维化的影响

目的:了解脂质过氧化对实验性肝纤维化的影响。方法:将36只雄性Wistar大鼠分为正常组(N组)、3、6、9周组(A、B、C组),用CCL_4及5％酒精诱导肝纤维化模型,分别在3、6、9周宰杀动物,观察三组肝组织病理改变及检测肝组织中丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)含量变化。结果:A组肝组织中MDA和HYP含量明显高于正常大鼠组(P<0.01)。随染毒时间延长,肝组织中MDA和HYP含量不断增加,三组间有显著性差异(P<0.01)。光镜下,A、B、C组肝组织呈现不同程度的肝纤维化,染毒时间越长纤维化程度越重。肝组织中HYP含量变化与MDA含量变化呈正相关,γ为0.80(P<0.01)。结论:CCL_4及低浓度酒精诱导的肝纤维化与肝脂质过氧化有关。     

丹红注射液联合甘利欣治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的探讨丹红注射液联合甘利欣注射液治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效。方法选取192例慢性乙型肝炎肝纤维化患者,随机分为治疗组110例,对照组82例,治疗组用丹红注射液联合甘利欣注射液治疗,对照组单用甘利欣注射液。观察疗程结束前后患者血清透明质酸（HA）、血清Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）、层粘蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、肝功能指标变化及临床疗效。结果治疗组血清肝纤维化指标、肝功能指标下降明显,而白蛋白有明显升高,与对照组相比有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论丹红注射液联合甘利欣注射液治疗慢性乙型肝炎,可有效减轻和延缓肝纤维化的发生与发展,对肝纤维化指标和肝功能有明显改善作用。     

软肝胶囊对四氯化碳所致慢性肝纤维化大鼠的肝保护作用

目的验证软肝胶囊对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝纤维化模型的肝保护作用及抗纤维化作用。方法模型组及各给药组首次皮下注射40%CC145ml/kg,以后每3d注射1次40%CCl43ml/kg,正常对照组给予等容积橄榄油,持续9周,给药自造模之日开始。结果四氯化碳所致慢性肝纤维化大鼠有明显肝损伤及慢性纤维化的表现,软肝胶囊三个剂量组肝功能指标均有不同程度的改善;1.4,2.8g/kg组肝组织胶原蛋白含量较模型组均明显降低;0.7g/kg组HA的值较模型组显著降低;病理组织学检查结果表明其肝脏病变程度均较模型组明显减轻。结论软肝胶囊对慢性肝纤维化大鼠具有肝保护作用及抗肝纤维化作用。     

茵陈总黄酮对四氯化碳所致大鼠慢性肝损伤的保护作用

 目的 探讨茵陈总黄酮对四氯化碳(CCl₄)致肝损伤模型大鼠的肝脏保护作用。方法 选择雄性清洁级SD大鼠112只, 实验分为6组, 即正常对照组、模型对照组、茵陈总黄酮低、中、高剂量组、阳性对照组(茵栀黄口服液组)。正常对照组12只, 其余每组20只。测定大鼠的体重和存活率, 测定大鼠血清的丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)活性、蛋白浓度及肝组织羟脯氨酸的含量, 并取肝脏组织作病理检查。结果 茵陈总黄酮高剂量组大鼠血清ALT为(2659.8±923.8) nmol/(s·L), 与模型对照组(6274.3±2018.3)nmol/(s·L)相比显著性降低, 且茵陈总黄酮各组大鼠血清ALT活性随剂量增加而降低。大鼠血清AST变化趋势与ALT相同。与模型对照组相比, 茵陈总黄酮组的总蛋白和白蛋白浓度有所增加, 而茵陈总黄酮各组肝组织病理学评分均有不同程度的降低(P<0.01), 其中高剂量组病理组织学评分为(1.92±0.79), 与模型对照组(3.86±0.43)相比降低得最明显, 此外茵陈总黄酮还能降低肝组织羟脯氨酸含量及抑制肝纤维化作用。结论 茵陈总黄酮对CCl₄所致大鼠慢性肝损伤具有保护作用。
     

人肝再生增强因子的cDNA克隆与序列分析

利用大鼠肝再生增强因子核苷酸序列，从人胎肝ｃＤＮＡ文库中筛选到人肝再生增强因子ｃＤＮＡ克隆，该克隆含有１．５ｋｂ的外源插入片段，核苷酸序列测定表明含３７５ｂｐ的读码框架，能编码１２５个氨基酸的蛋白质；与大鼠肝再生增强因子相比，核苷酸序列测定表明含３７５ｂｐ的读码框架，能编码１２５个氨基酸的蛋白质；与大鼠肝再生增强因子相比，核到序列同源性达８７％，氨基酸序列同源性达８４．８％。