七株侵袭性大肠杆菌O143的鉴定

本文报告了从痢疾样病人分离的7株O抗原与鲍氏志贺氏菌8型相同的侵袭性大肠杆菌O143的鉴定结果,并对无动力、不产气和赖氨酸阴性的大肠杆菌与志贺氏嚣的生化鉴别试验进行了讨论。     

反向间接胶乳凝集试验法检测粪便A型产气荚膜梭菌肠毒素的结果及评价

本文以１０种５２株供试菌分别与７个不同年龄组的健康人粪便混合,共配成３６４份模拟标本,采用反向间接胶乳凝集（ＲＰＬＡ）试验法与生物学试验法（小鼠致死试验、豚鼠皮肤血管透性因子试验,Ｖｅｒｏ细胞毒性试验）检测各标本中的Ａ型产气荚膜梭菌肠毒素（简称Ｃｐ－Ｅｎｔ）。除产气荚膜梭菌之外的其他菌种培养液２３８份标本（３４株）,ＲＰＬＡ与生物学试验结果完全一致,均为阴性。产气荚膜梭菌１２６份标本（１８株）中有７０份标本的ＲＰＬＡ同生物学诸法完全一致地检出了Ｃｐ－Ｅｎｔ．有１株７份标本（ＣｐＮＣＴＣ８７９７）的ＲＰＬＡ为阳性,而各生物学试验却均为阴性,该菌株经ＰＣＲ检查证明确为肠毒素原性产气荚膜梭菌,表明ＲＰＬＡ比生物学试验法更灵敏。有５株（ＣｐＮＣＴｃ８２３８,ＣｐＮＣＴＣ１０６１１,ＣｐＮＣＴＣ１０６１４,ＣｐＮＣＴＣ１０６１２,ＣｐＬ－５２）３５份标本ＲＰＬＡ与各生物学试验结果均为阴性,但经ＰＣＲ检吉证明该５株菌均为肠毒素原性产气荚膜梭菌,后经超声波破碎菌体提取物对其中部分菌株进行试验的结果仍然显示了ＲＰＬＡ与生物学法的一致性。有２株（ＣｐＮＣＴＣ８６８６,ＣｐＮＣＴＣ８４４９）１４份标本的所有结果均为阴性,ＰＣＲ     

冷鲜牛肉中蜂房哈夫尼亚菌(Hafnia alvei)的分离与鉴定

在出口冷鲜牛肉的沙门氏菌检验过程中,从HE琼脂平板上分离到1株蜂房哈夫尼亚菌,该菌三糖铁斜面产碱,底层产酸,不产生H2S,不产气,革兰阴性。经BBL Crystal微生物半自动检测仪检测,同时结合伯杰细菌鉴定手册的生化试验结果鉴定为蜂房哈夫尼亚菌(Hafnia alvei)。     

养殖牡蛎体内检出坎氏弧菌的鉴定

2 0 0 3年 9月从福建近海养殖太平洋牡蛎 (Crassostreagigas)体内分离出 4株细菌 ,对它们形态、生理生化特征、盐度、温度和pH生长条件以及 16SrRNA基因序列进行了研究。结果表明 ,4株细菌均为革兰氏阴性杆菌 ,具极生单鞭毛 ,发酵葡萄糖产酸不产气 ,氧化酶阳性 ,生长需NaCl,无色素 ,不发光 ,在TCBS平板上形成中等大小圆形绿色菌落 ,对弧菌抑制剂O 12 9敏感 ,具有弧菌属的典型特征。结合 16SrRNA基因序列分析结果 ,该菌 (编号SXS1)与坎氏弧菌的亲缘关系最为接近 ,其同源性达 99 .0 % ,因此将该菌鉴定为坎氏弧菌。对该菌在环境中的分布与水产养殖动物疾病的关系进行了讨论。     

头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌AmpC基因和ESBLs检测及耐药性分析

目的了解深圳地区头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌头孢菌素酶(AmpC酶)基因型分布、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点。方法收集深圳地区三家大型综合医院临床标本分离对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌73株。用碱裂解法提取菌株的质粒,采用多重PCR扩增AmpC基因,应用DNA测序确定其基因型。并对所有菌株进行ESBLs表型确证试验;用K-B法对其进行药物敏感试验。结果 48株(65.8%)AmpC基因扩增阳性,经DNA测序显示,其中46株为DHA-1型,1株为CMY-2型,1株同时产DHA-1和CMY-2型;73株肺炎克雷伯菌中49株ESBLs阳性,其中36株AmpC基因和ESBLs均为阳性。AmpC和(或)ESBLs阳性菌株对多数药物的耐药率高于AmpC和ESBLs均阴性者。结论本地区头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶检出率高,基因型主要为DHA-1,同时产AmpC酶和ESBLs菌株较常见。     

血液细菌感染对血清(1,3)-β-D-葡聚糖检测结果的影响

目的探讨血液细菌感染对血清(1,3)-β-D-葡聚糖检测结果的影响。方法排除影响G试验结果的干扰因素后,选取符合入组条件的血培养细菌阳性及血培养阴性患者各40例,采集血清进行G试验检测。结果 40例血培养细菌阳性标本中革兰阳性菌22例,革兰阴性菌18例,其中只有1例大肠埃希菌的G试验结果为阳性,4例在灰区,其余为阴性。40例血培养阴性标本3例G试验结果在灰区,其余为阴性。血培养细菌阳性组与血培养阴性组G试验结果差异无统计学意义(P0.05)。结论血液细菌感染对G试验检测干扰较小。     

鲍氏志贺氏菌的一个新血清型

本文报告在1986年从二例急性菌痢患者的脓血便中分离的二株同一血清型的志贺氏菌。用目前所有志贺氏菌型别的诊断血清鉴定这二株菌以及用志贺氏菌各血清型的代表株检查该二株菌制备的抗血清,其结果一致。仅与痢疾志贺氏菌8型和鲍氏4型有低效价的凝集,与大肠杆菌O6、O7和O150也无交叉,因此是一个新的志贺氏菌血清型,此二株菌能引起豚鼠角膜炎,侵入上皮细胞,琼脂糖电泳显示大质粒存在,是有侵袭力的毒株。鉴于该型菌株发酵甘露醇,而与福氏志贺氏菌无抗原关系,因此为鲍氏志贺氏菌。 由于现在已有鲍氏1—18型,建议该新血清型为鲍氏志贺氏菌19型(Shigella boydii serotype 19)。     

mCIM试验检测临床产碳青霉烯酶革兰阴性杆菌的应用价值

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)在检测临床产碳青霉烯酶革兰阴性杆菌中的应用价值。方法采用mCIM、改良Hodge(MHT)及Carba NP试验分别检测106株碳青霉烯酶基因阳性的革兰阴性杆菌(36株肠杆菌科细菌、26株铜绿假单胞菌及44株鲍曼不动杆菌),并比较差异。同时,收集湘雅医院2016年1月-12月临床分离的非重复性耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌106株,同期随机选取100株分离的碳青霉烯类敏感菌株作为对照组,mCIM试验检测碳青霉烯酶,PCR检测碳青霉烯酶基因,分析其敏感性及特异性。结果 (1)106株碳青霉烯酶基因阳性菌株,mCIM试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为88.9%(32/36),铜绿假单胞菌均为阴性。MHT试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为77.8%(28/36),铜绿假单胞菌的敏感性、特异性为69.2%(18/26)。Carba NP试验:肠杆菌科细菌的敏感性、特异性为97.2%(35/36),铜绿假单胞菌的敏感性、特异性为57.7%(15/26)。鲍曼不动杆菌3种方法均为阴性。肠杆菌科细菌中,MHT与Carba NP试验差异有统计学意义(χ~2=6.222,P=0.028),MHT与mCIM试验差异无统计学意义(χ~2=1.600,P=0.343),Carba NP与mCIM试验差异无统计学意义(χ~2=1.934,P=0.357);铜绿假单胞菌中,MHT与Carba NP试验阳性,二者差异无统计学意义(χ~2=0.746,P=0.565)。(2)144株临床分离肺炎克雷伯菌(碳青霉烯类耐药及敏感菌株分别为44株、100株),采用美罗培南和亚胺培南分别做mCIM试验,其敏感性和特异性均为100%,且与PCR的结果一致。结论 mCIM试验在肠杆菌科细菌中敏感性高、特异性强,操作简单,结果易于判断,具有良好的临床应用价值。     

新疆维、哈两民族粪样中奇异菌簇和产气柯林斯菌属水平与2型糖尿病的相关性研究

目的检测新疆维吾尔族、哈萨克族糖耐量正常人群及2型糖尿病患者粪便中奇异菌簇和产气柯林斯菌属的水平,分析奇异菌簇和产气柯林斯菌属与2型糖尿病的相关性。方法收集新疆维吾尔族、哈萨克族糖耐量正常人群及2型糖尿病患者血样和粪便样本,采用16S r DNA实时荧光定量PCR技术检测粪便样本中奇异菌簇和产气柯林斯菌属的水平;运用Pearson分析目标菌属水平与4组人群的空腹血糖(FBG)、年龄、身高、体重、体重指数(BMI)、腰围、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的相关性。结果 (1)与哈萨克族糖耐量正常组比较,该民族T2DM组中奇异菌簇、产气柯林斯菌属水平均降低(P=0.012,P=0.024),两民族糖耐量正常组之间奇异菌簇、产气柯林斯菌属水平差异有统计学意义(P=0.025,P=0.007);(2)奇异菌簇水平与HDL-C(r=0.281,P=0.031)呈正相关,与体重(r=-0.514,P=0.000)、BMI(r=-0.400,P=0.002)、TC(r=-0.503,P=0.000)、LDL-C(r=-0.581,P=0.000)水平呈负相关;产气柯林斯菌属水平与HDL-C(r=0.550,P=0.000)水平呈正相关,与体重(r=-0.449,P=0.000)、BMI(r=-0.432,P=0.001)水平呈负相关。结论肠道中奇异菌簇和产气柯林斯菌属,可能与与新疆维吾尔族、哈萨克族2型糖尿病患者的脂代谢紊乱密切相关。     

血流感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因分型

目的 了解深圳市人民医院致血流感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率及基因型特点.方法 收集来自临床血液培养标本中的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌115株,采用ESBLs表型确证试验检测菌株的ESBLs,应用PCR扩增产ESBLs菌株TEM、SHV和CTX-M基因,并对阳性扩增产物进行DNA测序分型.结果 115株菌中共检出ESBLs阳性38株,检出率为33.0％;其中大肠埃希菌阳性25株,肺炎克雷伯菌阳性13株.25株产酶肠埃希菌中18株检出CTX-M-14基因,3株检出CTX-M-9基因.13株产酶肺炎克雷伯菌均检出SHV型基因,其中SHV-12阳性10株,SHV-2阳性2株,SHV-59阳性1株;该13株产酶菌中10株同时被检出含CTX-M-14或CTX-M-13基因.结论 该院致血流感染大肠埃希菌产ES-BLs以CTX-M-14为最主要基因型,肺炎克雷伯产ESBLs最常见为SHV-12和CTX-M-14型.     

血清(1,3)-β-D葡聚糖试验与血清半乳甘露聚糖试验对马尔尼菲篮状菌病的诊断价值CSCD

目的探讨血清(1,3)-β-D-葡聚糖检测(G试验)、血清半乳甘露聚糖试验(GM试验)及联合检测对艾滋病(AIDS)患者中合并马尔尼菲篮状菌病(TSM)的诊断价值。方法回顾性研究住院艾滋病患者中有明确病原学检查确诊马尔尼菲篮状菌(TM)感染且有完善G试验及GM试验的患者45例,及同期住院AIDS患者中有完善G试验、GM试验及病原学检查,明确排除TM感染的219例患者,比较各组G试验、GM试验结果、检测时间,通过对比G试验、GM试验及联合检测方法(联合检测一:G试验和GM试验检测均为阳性为联合检测阳性,一种阳性或均阴性视为阴性结果;联合检测二:单独G试验或GM试验检测为阳性或二者均阳性,即为联合检测阳性,均阴性视为阴性结果)的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、误诊率、漏诊率,并绘制ROC曲线。结果G试验及GM试验的敏感度及特异度差异有统计学意义(P<0.05),G试验敏感度为36.36%,特异度为78.14%,ROC曲线下面积AUC为0.602,95%的置信区间为0.539~0.662。GM试验敏感度为55.56%,特异度为96.80%,ROC曲线下面积AUC为0.819,95%CI为0.767~0.864。联合检测一敏感度27.27%,特异度99.53%,ROC曲线下面积AUC为0.634,95%CI为0.572~0.693。联合检测二敏感度65.91%,特异度76.74%,ROC曲线下面积AUC为0.713,95%CI为0.654~0.768,约登指数为0.4265。结论G试验、GM试验是AIDS合并TSM早期辅助性诊断指标,其中GM试验敏感度、特异度均高于G试验,相比病原学检查,有缩短诊断时间的优点,但不是诊断金标准。在G试验、GM试验及联合检测中,联合检测一可以提高特异度,联合检测二可以提高敏感度。     

鳗鲡病原性维氏气单胞菌的分离与鉴定

从养殖患病的日本鳗鲡(Anguilla japonica)肾脏分离得到1株优势菌株,形态特征和生理生化测试结果显示,分离菌在4%羊血平板培养基上呈α型溶血,革兰氏阴性,有运动性,氧化酶阳性,在pH6.0和1%NaCl中生长等。结合Biolog自动微生物鉴定系统和16S rRNA、gyrB基因序列分析结果,确定该分离菌为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。人工腹腔注射感染鳗鲡的试验结果表明,分离菌对鳗鲡的半数致死量LD50为2.15×107CFU/mL。药敏试验结果显示,在13种抗菌类药物中,分离菌对左氧氟沙星、氟哌酸、阿奇霉素和萘啶酸等8种药物敏感,而对利福平和新生霉素等5种药物敏感度低。     

生化快速检测技术诊断需氧菌阴道炎的临床评价

目的 探讨生化快速检测法在诊断需氧菌阴道炎中的临床价值.方法 分别使用镜检法和生化快速检测法对320例疑似需氧菌阴道炎患者的阴道分泌物进行检查.结果 在320例就诊者中,生化快速检测法检出阳性患者286例,镜检法检出阳性患者283例.两种方法的符合率为96.56％[ (279+ 30)/320],二者呈高度一致性( Kappa=0.823,P＜0.05).以镜检法为诊断标准,生化快速检测法的敏感度为98.59％( 279/283)、特异度为81.08％(30/37)、阳性预测值为97.55％(279/286)、阴性预测值为88.24％(30/34).结论 生化快速检测法对需氧菌阴道炎的诊断具有较高的敏感度和特异度,值得临床推广使用.     

EDTA纸片法和三维试验检测阴沟肠杆菌AmpC酶的比较

目的比较EDTA纸片法及头孢西丁三维试验检测阴沟肠杆菌AmpC酶的符合程度。方法收集近几年阴沟肠杆菌株97株临床菌株,应用EDTA纸片法和三维试验分别检测97株阴沟肠杆菌的AmpC酶,并进行比较。结果 97株受检菌中,75株EDTA纸片法和三维试验均阴性,20株两种方法均阳性,2株菌EDTA纸片法阴性,而三维试验阳性。两种检测方法阳性符合率为90.9%,阴性符合率为100%,总符合率为97.9%。结论 ED-TA纸片法检测阴沟肠杆菌与三维试验的符合率高,且操作简便,较适合于临床实验室应用。     

重症监护病房呼吸机相关肺炎的病原菌分布及耐药性分析

目的:研究重症监护病房(ICU)呼吸机相关肺炎的病原菌分布及耐药性情况。方法:采集2016年4月-2017年8月于我院ICU住院治疗的58例呼吸机相关肺炎患者痰样本进行病原菌培养,观察病原菌分布情况。同时对主要病原菌进行药敏试验,分析病原菌对头孢他啶、头孢曲松、环丙沙星、奈替米星、妥布霉素、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星八种常见抗生素的耐药性情况。结果:58例呼吸机相关肺炎患者共培养204株病原菌,204株病原菌中根据占比分别为革兰氏阴性菌69.61%(142/204)、真菌15.20%(31/204)以及革兰氏阳性菌15.20%(31/204),且革兰氏阴性菌占比均明显高于真菌以及革兰氏阳性菌(P0.05),其中革兰氏阴性菌中肺炎克雷伯菌占比21.08%(43/204)、铜绿假单胞菌占比18.14%(37/204)、鲍氏不动杆菌占比10.78%(22/204)、产气肠杆菌占比9.31%(19/204)。呼吸机相关肺炎患者病原菌中肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、金黄色葡萄球菌对亚胺培南的耐药性均低于其他七种抗生素,差异有统计学意义(P0.05),铜绿假单胞菌对奈替米星的耐药性均低于其他七种抗生素,差异有统计学意义(P0.05),鲍氏不动杆菌耐药性均较高。结论:ICU中呼吸机相关肺炎主要是由革兰氏阴性菌引发,且耐药情况不容乐观,其中革兰氏阴性菌对亚胺培南最为敏感,值得临床重点关注。     

合成抗原在麻风检测中的评价

目的进一步评价ND-O-BSA-ELISA(ND-ELISA)在麻风血清检测中的敏感性和特异性,并探讨麻风血清检测吸光度(A)值与细菌指数(BI)之间的关系。方法用ND-ELISA检测血清中的抗ND-O-BSA的IgM和IgG类抗体,做图显示血清学活性与细菌指数的关系。结果 (1)ND-IgM-ELISA中,正常对照阴性率为97.5%,多菌型患者(MB)阳性率为100.0%,少菌型患者(PB)阳性率为90.0%,总患者阳性率为96.2%;妊娠个体、银屑病患者、结核病患者、结缔组织病患者及梅毒患者阳性率都为0.0%。(2)ND-IgG-ELISA中,正常人阴性率为83.8%,多菌型患者阳性率为94.0%,少菌型患者阳性率为63.3%,总患者阳性率为82.5%;妊娠个体、银屑病患者、结核病患者、结缔组织病患者及梅毒患者血清出现有阳性反应。(3)随着细菌指数的增高,血清学检测A值也增高。(4)ND-IgMELISA的阳性及阴性预测值均高于ND-IgG-ELISA。结论 ND-IgM-ELISA的敏感性和特异性均明显高于ND-IgG-ELISA,有筛查及取代查菌方法用于早期检测麻风菌感染以及评价麻风化疗,预测复发,检测麻风菌亚临床感染等的潜景,值得进一步扩大样本深入研究证实。     

复治肺结核患者结核分枝杆菌L型培养结果分析

目的:了解复治肺结核患者的结核分枝杆菌L型培养情况,探讨结核分枝杆菌L型阳性与耐多药的关系。方法:选择180例肺结核患者的痰标本进行结核分枝杆菌培养和结核分枝杆菌L型培养,同时对110例复治组中培养阳性的标本行耐药监测。结果:复治组的L型阳性率为43.6%,初治组的L型阳性率为15.7%,复治组显著高于初治组(P<0.01);菌阳复治组的L型阳性率50%,菌阴复治组的L型阳性率39.4%,菌阳组明显高于菌阴组(P<0.05);L型菌阳性患者的耐药率显著高于L型菌阴性组(P<0.05)。结论:结核分枝杆菌L型阳性是引起结核病复发、耐药的重要原因;MDR-TB与结核分枝杆菌L型感染有关。     

金黄色葡萄球菌生物膜形成能力与耐药性关系的研究

目的 调查本地区分离金黄色葡萄球菌生物膜形成能力与耐药性之间的关系,为临床金黄色葡萄球菌的治疗及耐药性分析提供合理的依据.方法 对所分离的金葡菌进行药敏试验,采用刚果红平板法,定性检测生物膜粘附能力,探讨金葡菌的耐药性与生物膜形成之间的关系.结果 对50株金葡菌进行生物膜检测发现,15株为生物膜阳性,均检测为ica A基因阳性,35株生物膜阴性.生物膜阳性菌株对环丙沙星、左氧氟沙星、利福平及庆大霉素的耐药性显著高于生物膜阴性菌株,生物膜阳性菌的MRSA阳性率高达66.7％,显著高于生物膜阴性菌株,但均未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的菌株.结论 本地区金葡菌生物膜阳性菌株比例较高,生物膜阳性株对抗菌药物的耐药性明显高于生物膜阴性株.     

腹泻便中克吕沃氏菌的分离鉴定及致病性研究

本文报告了自腹泻便分离到的１８株克吕沃尔氏菌的生化鉴定。分子遗传学检测,药物敏感试验及致病性研究结果。１８株菌中有１１株为抗坏血酸克吕沃尔氏菌,７株栖冷克吕沃尔氏菌。其中溶血试验阳性率３８．９％;乳鼠灌胃阳性率３３．３％;Ｈｅｌｏ－２细胞痍变２２．２％;兔肠袢结扎阳性５．６％。豚鼠角膜侵袭试验及Ｖｅｒｏ细胞病变均呈阴性。以此证明,克吕沃尔氏菌中有部分菌株可致生物模型病变,与人腹泻有密切关系。该组细     

斑点叉尾鮰一株致病菌的分离鉴定及系统发育分析

从发生急性流行性传染病的斑点叉尾肝、肾分离到一高致病性的菌株(CCF00024),经人工感染实验证实其为该病的病原菌。对该菌的形态、生理生化及16S rDNA序列分析结果表明,其为非发酵型,严格需氧,革兰氏阴性杆菌,极生多鞭毛,对除麦芽糖和甘露糖以外的多种糖类不能利用产酸,氧化酶阴性,DNA酶、蛋白酶、脲酶、赖氨酸脱羧酶阳性,MR阴性。在以该菌16S rDNA序列(GenBank登录号AY970826)和GenBank及RDP数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列构建的系统发育树中,分离菌CCF00024与嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonasmaltophilia)聚在一簇,特别是与S.maltophiliaM5-1的同源性最高,其序列相似性达99.6%,结合形态和生理生化特点将其鉴定为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)。