缺血性脑损伤诱导大鼠信号转导与转录激活子-1的变化

目的:探索局灶缺血性脑损伤诱导大鼠缺血中心区皮层和周围区纹状体组织信号转导与转录激活子-1(STAT-1)的激活变化.方法:采用SD雄性大鼠线栓法制作右大脑中动脉缺血(MCAO)局灶脑缺血模型.运用抗STAT-1和抗磷酸化STAT-1抗体做免疫印迹检测缺血6 h再灌注不同时间皮层和纹状体STAT-1的表达及激活变化.结果:缺血6 h再灌注不同时间,缺血中心区皮层及周围区纹状体STAT-1的磷酸化水平持续显著增加,再灌注24 h达到峰值,与假手术组相比分别增加约4.9和3.4倍(P<0.05),但在整个再灌注过程中其蛋白表达并没有明显的变化.结论:局灶脑缺血再灌注能引起缺血中心区和周围区STAT-1磷酸化水平的显著增加,提示缺血性脑损伤诱导STAT-1的激活可能参与皮层区和纹状体神经元细胞的病理生理过程.     

芍药苷通过IL-13信号通路抑制日本血吸虫病小鼠肝脏纤维化

目的 观察芍药苷(PAE)对日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化及白介素13(IL-13)信号转导通路中的IL-13、信号转导蛋白和转录激活子6(STAT6)、白介素-13受体α1(IL-13Rα1)和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ) mRNA表达的影响,探讨PAE预防血吸虫病肝纤维化的作用机制.方法 BALB/...     

IL-29促进肥大细胞Th2细胞因子释放的信号转导机制

目的:检测白细胞介素(IL)-29对肥大细胞Th2细胞因子分泌的影响和可能的信号转导通路.方法:肥大细胞P815培养、激发后收集不同时间点的细胞和上清液,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中IL-4和IL-13的水平,用细胞激发信号ELISA(CASE)方法检测丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、细胞外信号调节激酶(ERK)、信号转导子和转录激活子(STAT)3和p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路蛋白磷酸化情况.结果:IL-29能够促进肥大细胞P815分泌IL-4和IL-13.AG490和LY294002阻断IL-29引起的肥大细胞IL-4分泌并抑制IL-29引起的STAT3和Akt磷酸化.LY294002阻断IL-29引起的肥大细胞IL-13分泌并抑制IL-29引起的Akt磷酸化.结论:IL-29刺激肥大细胞P815分泌IL-4可能是通过激活Akt和STAT3信号转导通路实现的,而IL-29刺激肥大细胞P815分泌IL-13可能与Akt信号转导通路激活有关.     

IL-6跨信号转导作用与其相关疾病的研究进展

IL-6在机体内具有重要作用,其信号转导主要通过两种途径即经典信号转导和跨信号转导途径进行。经典信号转导主要与IL-6膜特异性受体结合激活下游信号,跨信号转导是IL-6与游离的sIL-6R结合激活下游信号。由于经典信号转导途径IL-6受体的局限性,其作用并不广泛,本文主要就IL-6跨信号转导途径在疾病中的作用做一简单综述。     

凝血酶受体在多发性骨髓瘤细胞XG-1增殖和抗凋亡作用中的机制

目的研究凝血酶及其受体在促进多发性骨髓瘤细胞增殖和抗凋亡作用中的机制。方法采用免疫荧光标记、流式细胞仪检测、细胞计数和免疫印迹等方法,对多发性骨髓瘤细胞株XG-1细胞表达的凝血酶受体、凝血酶对XG-1的增殖与抗凋亡作用及细胞内JAK2-STAT3分子磷酸化进行分析。结果凝血酶可以通过激活XG-1表面的凝血酶受体,继而激活JAK2-STAT3途径的磷酸化,促进骨髓瘤细胞的增殖与抗凋亡作用,且该作用与gp130介导的信号转导作用无关。结论凝血酶及其受体介导的信号转导通路是多发性骨髓瘤维持增殖和抗凋亡作用的因素之一。     

白细胞介素-21的基础与临床

白细胞介素（IL）-21主要来源于CD4⁺T细胞，与IL-2，IL-15有较高的同源性；其对应的受体由IL-21R和γc两个亚单位构成，前者在氨基酸序列上与IL-2Rβ或IL-4Rα具有很高的一致性，后者则为IL-2，IL-4，IL-15等细胞因子受体的共用γ（common γ,γc）链，是IL-21启动信号转导中不可缺少的亚单位。通常，γc介导的IL-21信号转导通过JAK1，JAK3，以及STAT1和STAT3途径而得到执行，影响B细胞、NK细胞和T细胞等免疫功能的发挥，表现出复杂的生物学效应。鉴于IL-21所具有的多种免疫活性，推测其在肿瘤的防御机制中扮演着重要角色。本文就IL-21及其受体结构、生物学作用、抗肿瘤作用及临床应用作一简介。     

IL-6在人胃癌细胞株AGS中生物学效应及其信号传导途径

目的探讨白细胞介素6(IL-6)在人胃腺癌细胞株AGS中产生生物学效应的信号传导途径.方法通过MTT法检测IL-6刺激AGS细胞后对其生长增殖的影响;采用电泳迁移变动试验(EMSA)和Western blot观察IL-6刺激前后AGS细胞中IL-6相关转录因子Stat3和参与IL-6信号传导功能的蛋白激酶Jak1的诱导活化状态,并确定该细胞中的IL-6信号传导通路;通过免疫细胞化学染色确定磷酸化Stat3在AGS细胞内的定位.结果IL-6可显著促进AGS细胞的增殖;转录因子Stat3和蛋白激酶Jak1都能在AGS细胞中被IL-6诱导激活,且Stat3的活性与IL-6的刺激呈一定的剂量和时间依赖性;磷酸化Stat3的染色定位于AGS细胞核.结论JAK/STAT信号传导途径的活化介导了IL-6对AGS细胞增殖的促进功能.     

IL-13受体在白血病Dami细胞中的表达及IL-13对其表达的影响

目的 研究巨核细胞白血病Dami细胞是否表达IL-13受体α1和IL-4受体α以及IL-13对其表达的影响.方法 无血清培养Dami细胞,提取Dami细胞总RNA,反转录,形成第1条cDNA链,PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,Quantity One软件分析电泳条带光密度,数据进行统计学处理.结果 Dami细胞表达IL一13 Rα1mRNA.4h IL-13组Dami细胞IL-13Rα.1mRNA的表达明显低于血清组、混合组和空白对照组(P<0.05).12h IL-13组IL-13Rα1mRNA表达与血清组、混合组和空白对照组IL-13Rα1mRNA表达无明显区别(P>0.05).Dami细胞表达IL-4RαmRNA,且不受IL-13的影响.结论 Dami细胞表达IL-13 Rα1 mRNA,IL-13短暂下调Dami细胞IL-13 Rα1 mRNA表达.     

IL-6通过调控JAK2/STAT3信号通路减轻急性肺损伤的机制研究

目的探讨IL-6通过调控酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）/信号传导与转录激活因子3（STAT3）信号通路减轻急性肺损伤（ALI）的机制。方法将人肺癌细胞A549细胞分为空白对照组、脂多糖（LPS）组、LPS+IL-6过表达组、LPS+IL-6干扰组、LPS+空载组。空白对照组细胞正常培养,LPS组LPS处理细胞,LPS+IL-6过表达组LPS处理细胞后转染IL-6过表达质粒,LPS+IL-6干扰组LPS处理细胞后转染IL-6干扰质粒,LPS+空载组LPS处理细胞后转染空载质粒。采用细胞计数试剂盒法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率和活性氧（ROS）水平,试剂盒检测丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平,ELISA法检测炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平,qRT-PCR法检测IL-6、JAK2、STAT3mRNA表达水平,Westernblot法检测磷酸化JAK2（p-JAK2）/JAK2、磷酸化STAT3（p-STAT3）/STAT3蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,过表达IL-6可增加LPS诱导的ALI细胞凋亡率、ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,JAK2、STAT3mRNA表达水平,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平,降低细胞增殖率和SOD水平;干扰IL-6则相反。结论IL-6可通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活,降低氧化应激和炎症反应,从而减轻ALI。     

重组人白细胞介素-13对造血细胞白细胞介素-13受体α1表达的调控

目的 探讨白细胞介素-13受体α1(interleukine-13 receptor α1,IL-13,Rα1)在造血细胞的表达及其在重组人白细胞介素-13(recombmant human ineterleukine-13,rhIL-13)作用下的表达变化.方法 细胞培养, 提取细胞总RNA, 用RT-PCR及图象分析法检测Dami细胞白细胞介素-13受体ɑ1mRNA表达的水平.结果 Dami细胞均表达白细胞介素-13受体α1;rhIL-13作用Dami细胞4h后,白细胞介素-13受体α1 mRNA表达降低12h后,IL-13Rα1 mRNA表达恢复.结论 ①Dami细胞表达IL-13Rα1.②rhIL-13短暂下调Dami细胞IL-13Rα1的表达.     

芳香烃受体对心脏结构与功能的影响

芳香经受体(aryl hydrocarbon receptor,Ah R)是存在于细胞胞质内的一种配体激活型转录因子,属于碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,b HLH)超家族中Per-Arnt-Sim同源域(PerArnt-Sim homology domain,PAS)蛋白亚型。芳香烃受体与相应配体结合并被激活,并移位到细胞核内,与芳香烃受体核转运蛋白形成异二聚体复合物,此异二聚体可结合于相应的DNA序列,引发下游目的基因的转录及表达,产生一系列生物学效应。本文将对芳香烃受体对心脏结构与功能的影响作一综述。     

吗啡依赖大鼠脑内环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的磷酸化

环磷酸腺苷反应元件结合蛋白 (CREB)有两种形式 :具有转录活性的二聚体和无转录活性的单体。CREB13 3位的丝氨酸残基 (Ser13 3 )可被PKA、PKC或Ca2 + /CaM等磷酸化 ,磷酸化后的CREB(pCREB)形成同源二聚体或与CREB/ATF1(激活转录因子 1)家族的其他成员形成异二聚体。CREB形成二聚体后便被激活 ,并与环磷酸腺苷反应元件结合 ,调控位于其下游的靶基因的转录[1] 。已有一些研究[2 ,3 ] 发现 ,吗啡依赖和戒断时大鼠脑内CREB的表达有改变。本实验对吗啡依赖和戒断大鼠脑内CREB的磷酸化水平进行了研究。材料和方法一、材料 :雄性…     

白介素22在血液肿瘤中的研究进展

白细胞介素-22(IL-22)是Th22亚型的主要效应细胞因子,属于IL-10细胞因子家族。IL-22与由IL-22受体(R)1和IL-10R2组成的异二聚体受体复合物结合,可以激活许多细胞内信号通路。目前很多研究证明IL-22及其信号转导通路在移植物抗宿主病(GVHD)、多发性骨髓瘤(MM)以及很多恶性肿瘤的发生发展中起重要作用,有望成为新的治疗靶点。     

大鼠急性肺损伤过程中STAT-3的活化对caspase-3表达的影响

目的 探讨大鼠急性肺损伤（ALI）过程中信号转导和转录活化因子-3（STAT-3）的活化对caspase-3表达的影响.方法 60只成年雄性SD大鼠随机分为4组：对照组（n=6）,脂多糖组（LPS组,n=24）,酪氨酸蛋白激酶（JAK）抑制剂 AG490组（n=6,AG490用0.4%二甲亚砜溶解）,AG490＋LPS组（n=24）;LPS、AG490＋LPS组在注射LPS后1、2、4、6 h又被分为4个亚组（每组n=6）.分别采用Western blotting检测各组大鼠肺组织中磷酸化STAT-3（pSTAT-3）的表达并采用免疫组织化学法测定caspase-3的表达情况.结果 注射LPS1、2、4、6 h后STAT-3被明显活化（P〈0.05）,而相对应的AG490＋LPS组中STAT-3活性较LPS组减弱（P〈0.05）.同时LPS组中caspase-3表达较相应的AG490＋LPS组明显减少（P〈0.01）.结论 大鼠ALI过程中STAT-3通路的激活可减低caspase-3的表达.     

骨肉瘤细胞外泌体调控JAK2/STAT3信号通路影响成纤维细胞向肿瘤相关成纤维细胞转化

目的 探讨骨肉瘤外泌体对肿瘤相关成纤维细胞转化的影响及机制。方法 提取并鉴定骨肉瘤细胞U2-OS、MG-63,人成骨细胞hFoB1.19外泌体,将PBS、hFoB1.19、U2-OS、MG-63外泌体与人肺成纤维细胞MRC-5共孵育,CCK8法检测MRC-5增殖能力,Transwell小室法检测MRC 5迁移和侵袭能力,qRT-PCR检测MRC-5细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8表达,Western blot 检测MRC-5细胞α-SMA、Vimentin、FAP表达,JAK2/STAT3信号通路的激活。结果 透射电镜和Western blot鉴定所提取的外泌体符合其结构特征;与U2-OS、MG-63外泌体共孵育后,MRC-5增殖、迁移和侵袭能力显著增加,MRC-5中IL-1β、IL-6、IL-8表达显著增加,α-SMA、Vimentin、FAP表达显著增加,JAK2和STAT3磷酸化水平显著增加（均P＜0.001）。结论 骨肉瘤细胞外泌体通过激活JAK2/STAT3信号通路而促进成纤维细胞向肿瘤相关成纤维细胞转化。     

IL-6在人胃癌细胞株AGS中生物学效应及其信号传导途径

目的 探讨白细胞介素6(IL-6)在人胃腺癌细胞株AGS中产生生物学效应的信号传导途径。方法 通过MTT法检测IL-6刺激AGS细胞后对其生长增殖的影响；采用电泳迁移变动试验(EMSA)和Western blot观察IL-6刺激前后AGS细胞中IL-6相关转录因子Stat3和参与IL-6信号传导功能的蛋白激酶Jakl的诱导活化状态，并确定该细胞中的IL-6信号传导通路；通过免疫细胞化学染色确定磷酸化Stat3在AGS细胞内的定位。结果 IL-6可显著促进AGS细胞的增殖；转录因子Stat3和蛋白激酶Jak1都能在AGS细胞中被IL-6诱导激活，且Stat3的活性与IL-6的刺激呈一定的剂量和时间依赖性；磷酸化Stat3的染色定位于AGS细胞核。结论 JAK／STAT信号传导途径的活化介导了IL-6对AGS细胞增殖的促进功能。     

免疫抑制剂姜黄素逆转胰岛素抵抗的研究

 【目的】为探讨姜黄素（curcumin）对胰岛素抵抗的治疗作用及其机制。【方法】利用胰岛素抵抗的小鼠模型,观察姜黄素对小鼠胰岛素抵抗的水平、转录因子I-κBα、循环细胞因子的变化。【结果】①姜黄素能抑制TNFα刺激Fao细胞NF-κB激活;②姜黄素治疗后小鼠的空腹血糖水平没有明显下降,但空腹胰岛素的水平下降约30%,葡萄糖耐量曲线的水平也明显下降;③循环中TNFα[（34.5±3.4）pg/mL vs（31.3±1.1）pg/mL]水平没有明显改变,而IL-1β[（33.9±3.2）pg/mL vs（15.6±1.1）pg/mL]和IL-6[（72.1±9.8）pg/mL vs（47.2±5.3）pg/mL]水平明显被抑制;④胰岛素刺激的IRS-1酪氨酸的磷酸化水平明显升高,而胰岛素受体的磷酸化水平没有明显改变。与IRS-1酪氨酸的磷酸化水平平行,P85的磷酸化水平也明显升高,AKT的磷酸化的水平也明显升高。【结论】姜黄素能提高小鼠胰岛素敏感性,有治疗改善肥胖诱导的胰岛素抵抗的作用。     

吗啡依赖大鼠脑内环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的磷酸化

环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)有两种形式:具有转录活性的二聚体和无转录活性的单体.CREB133位的丝氨酸残基(Ser133)可被PKA、PKC或Ca2+/CaM等磷酸化,磷酸化后的CREB(pCREB)形成同源二聚体或与CREB/ATF1(激活转录因子1)家族的其他成员形成异二聚体.     

TGR5 induces IL-1β, TNF-α and IL-6 mRNA transcription by p38 MAPK pathway in mouse macrophages

目的 观察胆汁酸G-蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor for bile acids,TGR5)被齐墩果酸(oleanolic acid,OA)激活后对RAW264.7细胞白细胞介素-1(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和白细胞介素-6( interleukin-6,IL-6)转录的影响及其机制的探讨.方法 通过实时荧光定量(Real-time)PCR法检测OA作用不同时间RAW264.7细胞和原代枯否细胞IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的表达;并进一步分析在RAW264.7细胞中加入3种不同信号通路的抑制剂对上述3种炎症因子mRNA表达的影响.OA作用RAW264.7细胞和原代枯否细胞不同时间后,Western blot分析p38 MAPK的磷酸化水平.结果 OA刺激RAW264.7细胞6、12、24h后,IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA表达明显升高.OA作用于分离的原代枯否细胞3h和6h后,也可观察到相同的结果.p38 MAPK特异性抑制剂SB203580可以明显地抑制OA诱导的RAW264.7细胞内IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的表达,但PKA和NF-KB的抑制剂无此作用.RAW264.7细胞和原代枯否细胞经OA刺激后,p38 MAPK磷酸化水平明显增强.结论 TGR5可能通过活化p38 MAPK磷酸化诱导炎症细胞IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的表达,提示TGR5在无其他刺激因素作用下,具有诱导炎症因子表达的作用.